精子形态在男性不育诊断中的临床应用

精子形态分析在男性不育诊断中的临床应用
闫小梅，王希平，叶丽燕
（江门市五邑中医院 检验科，广东 江门 529000）
摘要：目的 探讨精子形态染色技术在男性不育诊断中的临床应用。

方法 已生育健康男性精液标本对照组40例、不孕
组男性患者精液200例，精液经处理后涂片,用WHO 推荐的改良巴氏染色法对精子进行形态染色,计数正常及异常形态精子,并计算精子正常形态的百分率和多重精子缺陷指数。

结果 对照组精液标本中精子正常形态率为40.85%,不孕组精子正常形态率为10.53%,显著低于对照组,两组相比有极显著性差异（P<0.01）。

结论 精子形态染色在临床男性不育的诊断中占有重要地位。

精子形态学染色对男性不育患者的诊治有很大帮助,有助于临床为不孕患者选择助孕方式,为有不良孕产史夫妇查找病因,作为临床诊治的依据。

关键词：改良巴氏染色法；精子形态学；男性不孕 中图分类号：R 675.3 文献标识码：B 1677年VAN LEEUWENHOEK 首先描绘并报导了人类精子形态，1930年Gary 首次提出人精子形态在精子穿透宫颈粘液过程中起重要作用，这一报道揭开了精子形态学研究的序幕后，开展了精子形态学的研究。

1 材料和方法1.1观察对象
22-45岁男性精液。

生育组40例，不育组200例。

1.2试剂
染液：(1)市售染剂Diff-QlIik 精子快速染色试剂盒购自广州友宁公司；(2)实验室自配。

固定液:无水乙醇与乙醚按1:1比例混合。

乙醇，苏木精，酸性乙醇，Scott 溶液，橙黄G6，EA-50，存入棕黑色瓶中使用。

1.3方法
1.3.1染色方法 待精液液化后，将精液滴于洁净玻片上，推成薄片。

(1)参照试剂盒说明书进行；(2)自然干燥后，固定液固定5-15min。

依次浸入乙醇，苏木精染液，酸性乙醇，Scott 溶液，乙醇，橙黄G6，乙醇， EA-36染液，乙醇，最后油镜下观察。

计数200个精子，按下列标准对精子形态进行分类，并分别记录其结果。

以目镜测微尺测量精子大小。

1.3.2 观察标准 按照2001年WHO 对精子形态的分类标准观察。

（1）正常精子:头部为椭圆形，长4.0-5.0μm，宽
2.5-
3.5μm，长宽之比1.50-1.75之间；顶体界限清晰，占头部的40%-70%;中段细，宽度<1.0μm，长度为头部的1.5倍，并且在轴线上紧贴头部;尾部直、均一，比中段细，长约
4.5μm;胞浆小滴小于头部大小的1/2；（2）头部缺陷:非正常精子头部形态，包括大头、小头、锥形头、圆头、梨形头、无定型头，有空泡头及双头、多头、无头等；（3）颈部及中段缺陷:包括颈部弯曲、中段非对称性地接于头部、中段增粗或变细及不规则等；（4）尾部缺陷:包括短尾、多尾、发卡尾、断尾、尾部弯曲（>90°）、尾宽不规则及尾部卷曲等；（5）胞浆小滴:大于正常精子头部的1/２。

2 结果
按以上标准，对240例人精液的精子形态进行分析，结果见附表。

附表 240例人精液精子形态学分析结果
组别 例数 正常正常对照组 40 40.85
不孕组
200 10.53
注：两组比较Ｐ<0.01，有显著性差异。

对照组精子正常形态率为40.85％，不孕组精子正常形态率为 10.53％，明显低于对照组.
3 讨论
传统的精液常规分析是用于诊断男性生育最基本的临床指标，精液常规分析只对精液理化性状进行评估，以此来预测男性生育状况很不准确。

精子形态是受孕过程中起重要作用的参数之一，被认为是衡量男性生育中最好的指标。

形态正常的精子的百分率与受孕有直接关系，比精子密度、精液量、活动率更能在受孕中起预测作用。

研究显示精子形态与其功能密切相关。

任何精子形态上的缺陷将导致其功能下降，影响男性生育力。

精子畸形分为头部畸形、颈部及中段畸形、尾部畸形，在各种异常精子形态中，头部畸形比率最高占50%，证明大多数畸形精子是顶体异常，直接影响到精子功能而导致受精率低或受精失败。

体外受精研究表明，精子形态对预测体外受精-胚胎移植受精率极有意义，精子正常形态率与受精率呈正相关。

结合到卵子透明带上的精子大部分是正常形态，因此人卵的透明带是选择性的结合正常形态的精子。

据有关资料报道，精子卷尾畸形是由于鞭毛生成障碍或精子肿胀所致，从而影响了精子的运动力，造成不育[1-2]。

生育及不孕人群精液中均存在异常形态的精子。

其异常形态发生率极为重要。

一般而言，健康男性精液中正常形态精子在61%-81%，平均在70%左右。

其中有20%-40%为异常精子。

如异常精子数量过高，就会严重影响到精液的质量，造成不育。

精液实验手册要求精子形态评定遵循更严格的标准，并指出“来自辅助生殖资料表明，当正常形态的精子数小于15%时，体外受精率明显下降”。

已有研究认为，用严格精子形态测定正常形态率小于5%的患者精子与透明带很难结合，受精率低于30%，大部分受精失败。

本文生育组40例平均畸形率为40.85%，不育组200例平均畸形率为10.53%，经t 检验P<0.01，显示两组间精子畸形率的差异有非常显著性。

说明异常形态精子过高是导致不育的原因之一。

本组结果按WHO 标准对精子形态进行分类，将精子形态分为正常精子及头部缺陷、颈部与中段缺陷、尾部缺陷四类。

从结果看，生育组与不育组两组精子畸形率的差异主要在头部。

造成精子畸形率升高的原因很多，例如:感染、损伤、药物、高温、放射线、激光拍照、农药、吸烟及酒精中毒等都会影响睾丸的生精功能，导致精子形态异常。

感染可使小头及无定形畸形精子增多;精索静脉曲张时，常在精液中见到尖头、带状精子头、双头及中段畸形的精子。

在病毒感染
收稿日期：2012-05-28
（下转第111页）
临床研究· ·
第四代银杏叶提取物，并在此基础上加入双嘧达莫的复合制剂。

其主要成分为银杏黄酮甙，银杏法苦内脂，白果内酯，双嘧达莫。

银杏达莫具有多方面的生物效能可以清除氧自由基，防止自由基对神经的损伤；降低血黏度。

仰制血小板的聚集，改善微循环增强红细胞的变形能力，刺激前列环素和内皮舒张因子。

仰制细胞内钙超载；仰制血栓栓子形成。

因此银杏达莫具有多方面的治疗功效，可以对抗血管痉挛，扩张血管作用，降低毛细血管通透性。

降低血液黏度，防止缺血时氧自由基及血小板活化因子对组织细胞破坏，提高缺血组织对氧的利用，改善组织细胞活力[7]。

银杏达莫注射液与甲钴胺联合应用能够起到叠加和互补作用， 银杏达莫注射液能够更好地改善机体缺血缺氧状态，增加神经血管的营养血供；促进甲钴胺损伤神经纤维修复功能和轴浆转运速度的恢复。

本实验结果显示，治疗后两组患者的感觉神经传导速度均较治疗前明显改善，但以治疗组改善更为明显(Ｐ<0.01)，且治疗组的疗效明显优于对照组，说明银杏达莫注射液联合甲钴铵针剂治疗糖尿病周围神经病变与单纯采用甲钴铵针剂相比，具有更好的疗效和促进患者感觉神经功能的恢复，且值得临床应用。

参 考 文 献
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（高娟 编辑 ）
的2-3周内，畸形精子和未成熟精子的比例都会增加。

精子畸形率过高，必然导致不育症的发生。

我们的研究发现，精子正常形态率与不良孕史密切相关。

精子畸形率高会导致习惯性流产、胎儿停止发育、胎儿畸形等。

测定精子正常形态率可为不良孕产史夫妇查找病因，作为临床诊治的依据。

参 考 文 献
的病理也是一样道理。

顺时令则是中医治病的精要，糖尿病合并抑郁由于会涉及脑、神、肾、肺、肝、脾、心、胆、胃等多个脏腑以及全身气血的调节阴阳，与全身气机活动有密切联系，因此论治糖尿病合并抑郁症需要从多脏腑出发并非一方一药所能包治。

在气血运行到寅时(主要肺经主管)可以给患者服用调气降糖丸，此药具有补肺凋肝气，气平肝和，养心安神，可以帮助患者一日精神俱佳，在巳时(主要脾经主管)可以给患者服用益脾降糖丸，此药可以祛浊化湿，健脾和胃；在酉时(主要肾经主管)可以给患者服用糖肾康丸，此药活血化瘀、补肾益肝。

采用分时辨治是根据分调各脏，使药力可以借经气之旺运，帮助药力发挥，明显提高临床疗效，因此是具有一定的中医理论的[5]。

对于轻症患者可以应用心理疏导治疗，不过绝大多数情况下还需配合药物治疗，主要是中医治疗为主。

不过药物疗法一般适用于病情发展到一定的阶段，脏腑功能的损害比较严重时，正如朱丹溪《格致余论》所言：“移精变气乃小术耳，可治小病，若内有虚邪，外有实邪，当用正大之法”。

并且现代医学证明在早期及时诊断后及时选择药物治疗是可以降低抑郁症产生的社会经济负担有效手段，首次治疗患者后即达到临床治愈且可以减少抑郁症的复发情况。

综合上述，糖尿病并发抑郁症应该在以中医理论作为指导，结合望闻问切等综合评估病人的基础上，结合中医理论成果以及现代医学对糖尿病的研究，实现中西医互补，使得疾病治愈好转率明显增加。

参 考 文 献
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（高娟 编辑 ）
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（高娟 编辑 ）。