临床常见病原体检查优秀课件
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6
一、标本采集和运送 基本原则
1：正确的标本类型和采集部位以反映有效病程 2：采集和运送应无菌操作，避免污染 3：尽快送检 4：视所有标本为传染品，高度污染标本要有明显标 5：注意生物安全，标本用后要做消毒处理
7
（一）血液标本的采集
适应症：疑似菌血症、败血症或 脓毒血症的病人
酒精棉球消毒，防止污染。静脉 采血后，将血液注入培养瓶内 。
第九章 临床病原体检测
1
提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查方法
第二节：病原体耐药性检测 第三节：临床感染常见病原体检测
药敏检测
第四节：病毒性肝炎检测 第五节：性传播疾病病原体检测
病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
2
教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
23
抗酸染色
荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检出某些病原微生物， 用形态学和免疫学相结合的可特异地家侧某些病原微生物的存2在4 。
荧光染色
荧光显微镜用于标本经荧光染色
后直接检出某些病原微生物
25
直接显微镜检查——电镜检查
SARS（severe acute respiratory syndrome ） 病原体的确定。
电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感染却有确诊的价值26
电子显微镜发现为 某种冠状病毒
电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感染却有确诊的价27值
意义
1. 无菌体液的直接镜检对病原体诊断具有一定意 义。
2. 对正常菌群寄居腔道的分泌物图片镜检可提示 进一步检查的步骤、采取的方法和确定分离鉴 定病原体所需的培养基。
标本中如果存在多种正常寄居微生物，可因交叉抗原 存在而不能肯定诊断。
检测细菌不同的抗原构造，还可分析细菌的菌群和血 清型，如沙门菌属、志贺菌属和霍乱菌属等
30
细菌的血清分型： O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C三个抗原 成份组成
O1群霍乱弧菌的血清分型
型别
别名
O抗原成份
原型
稻叶型
A、C
异型
小川型
A、B
中间型
彦岛型
A、B、C
颗粒 凝集
利用抗原抗体之间的特异性反应，用 已知抗体检测患者血清及其他体液中 的待测抗原
17
三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
18
（一）直接显微镜检查——不染色标本
不染色标本：适用于检查 生活状态下病原体的动力 及运动状况。
方法：压滴法、悬滴法。 意义：在不染色状态下借
助暗视野显微镜或相差显 微镜观察病原菌的动力、 活动方式。部分病原体可 借此初步诊断，如梅毒螺 旋体。
采集时间：一般在抗生素使用前， 于发热初期或高峰期采血。
采集频率：24小时内采血2~3 次可提高阳性率，且在不同部位。
采血量：血液与培养基的比例为 1：5-10，一般成人血量 5~10ml，婴儿1-5ml。
8
（二）尿液标本的采集
首次晨尿，无菌采集中段尿 10-20ml。
排尿困难者考虑导尿采集标本。 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱
5
临床细菌学检验的特殊性
依赖于细菌生长 采集时间 （发烧？） 运送方式 （密闭与否，保温与否？） 感染的细菌种类及生长特征 （苛养菌） 病人是否使用抗生素 （抗生素的影响） 其他：消毒剂，白细胞吞噬等
容易受环境中的细菌污染 采集方法 （无菌操作，避免污染） 放置时间 （及时运送，避免细菌死亡）
3
重点与难点
标本采集的原则及各种检查方法的适用范围及其优缺点 药物敏感的常用试验方法及其特点 耐药菌检测试验 各种类型临床常见病原体的检查 甲、乙、丙型肝炎的检测方法 各种性传播疾病病原体的检测方法、筛选试验、确诊试
验及金标准 院内感染定义
4
提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查方法 第二节：病原体耐药性检测 第三节：临床感染常见病原体检测 第四节：病毒性肝炎检测 第五节：性传播疾病病原体检测 第六节：医院感染常见病原体检测
65．．标标明本本显量被是明污否显染不合的足标格的本，标不本以予，接保不收证予。接检收测。结果的准确性！
7．同一天申请做同一实验的重复送检标本(血培养除外)，不予 接收。 8．对于烈性传染病标本的采集和运送应严格执行相关规定，要 有完善的防护措施，按规定包裹及冷藏，附有详细的采样及送检 纪录，由专人护送。
穿刺法采集标本。
9
标本送检
标本要求尽快送检，否则影响阳性率。 烈性传染病标本需专人护送。
16
二、标本的实验室质量评估标准
1．标本必须注明姓名、年龄、性别、采集日期、临床诊断、检 验项目等基本信自。 2．仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本，一般情况 下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。而 病毒检测的标本可于4℃存放2～3天。 3．检查送检容器是否完整，有无破损或渗漏等情况，若有则不 予接收。 4．标本储存、运送方式不当，不予接收。
28
意义
3.由于临床标本中常含有一定的抗菌物质， 以致分离培养可为阴性，此时的镜检往 往可能在诊断是起作用。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
29
(二)病原体特异性抗原检查
利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检测患 者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫荧光技术、 酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集试验、对流 免疫电泳等技术检测标本中未知的病原体抗原，其诊 断价值常以标本不同而各异。
19
（一）直接显微镜检查——染色标本
染色标本目的：了解细菌的形态、染色性或观察宿主 细胞内包涵体。
方法：革兰染色、墨汁染色、抗酸染色、荧光染色
20
G-R
革兰染色 阴 性 杆 菌
阳性球菌（G＋S） 真菌孢子
细菌的形态、染色性的特征
பைடு நூலகம்
21
墨汁染色
宽厚荚膜
•荚膜抗吞噬 •30%-50%的患者伴有免疫功能低下等 疾病， 8%左右的AIDS患者伴有隐球菌 性脑膜炎，预后极差。 •中枢神经系统存活与脑脊液中缺乏抗体 和补体激活系统有关 •抗真菌治疗:两性霉素B,氟康唑
一、标本采集和运送 基本原则
1：正确的标本类型和采集部位以反映有效病程 2：采集和运送应无菌操作，避免污染 3：尽快送检 4：视所有标本为传染品，高度污染标本要有明显标 5：注意生物安全，标本用后要做消毒处理
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（一）血液标本的采集
适应症：疑似菌血症、败血症或 脓毒血症的病人
酒精棉球消毒，防止污染。静脉 采血后，将血液注入培养瓶内 。
第九章 临床病原体检测
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提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查方法
第二节：病原体耐药性检测 第三节：临床感染常见病原体检测
药敏检测
第四节：病毒性肝炎检测 第五节：性传播疾病病原体检测
病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
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教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
23
抗酸染色
荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检出某些病原微生物， 用形态学和免疫学相结合的可特异地家侧某些病原微生物的存2在4 。
荧光染色
荧光显微镜用于标本经荧光染色
后直接检出某些病原微生物
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直接显微镜检查——电镜检查
SARS（severe acute respiratory syndrome ） 病原体的确定。
电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感染却有确诊的价值26
电子显微镜发现为 某种冠状病毒
电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感染却有确诊的价27值
意义
1. 无菌体液的直接镜检对病原体诊断具有一定意 义。
2. 对正常菌群寄居腔道的分泌物图片镜检可提示 进一步检查的步骤、采取的方法和确定分离鉴 定病原体所需的培养基。
标本中如果存在多种正常寄居微生物，可因交叉抗原 存在而不能肯定诊断。
检测细菌不同的抗原构造，还可分析细菌的菌群和血 清型，如沙门菌属、志贺菌属和霍乱菌属等
30
细菌的血清分型： O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C三个抗原 成份组成
O1群霍乱弧菌的血清分型
型别
别名
O抗原成份
原型
稻叶型
A、C
异型
小川型
A、B
中间型
彦岛型
A、B、C
颗粒 凝集
利用抗原抗体之间的特异性反应，用 已知抗体检测患者血清及其他体液中 的待测抗原
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三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
18
（一）直接显微镜检查——不染色标本
不染色标本：适用于检查 生活状态下病原体的动力 及运动状况。
方法：压滴法、悬滴法。 意义：在不染色状态下借
助暗视野显微镜或相差显 微镜观察病原菌的动力、 活动方式。部分病原体可 借此初步诊断，如梅毒螺 旋体。
采集时间：一般在抗生素使用前， 于发热初期或高峰期采血。
采集频率：24小时内采血2~3 次可提高阳性率，且在不同部位。
采血量：血液与培养基的比例为 1：5-10，一般成人血量 5~10ml，婴儿1-5ml。
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（二）尿液标本的采集
首次晨尿，无菌采集中段尿 10-20ml。
排尿困难者考虑导尿采集标本。 如考虑厌氧菌感染，采取膀胱
5
临床细菌学检验的特殊性
依赖于细菌生长 采集时间 （发烧？） 运送方式 （密闭与否，保温与否？） 感染的细菌种类及生长特征 （苛养菌） 病人是否使用抗生素 （抗生素的影响） 其他：消毒剂，白细胞吞噬等
容易受环境中的细菌污染 采集方法 （无菌操作，避免污染） 放置时间 （及时运送，避免细菌死亡）
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重点与难点
标本采集的原则及各种检查方法的适用范围及其优缺点 药物敏感的常用试验方法及其特点 耐药菌检测试验 各种类型临床常见病原体的检查 甲、乙、丙型肝炎的检测方法 各种性传播疾病病原体的检测方法、筛选试验、确诊试
验及金标准 院内感染定义
4
提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查方法 第二节：病原体耐药性检测 第三节：临床感染常见病原体检测 第四节：病毒性肝炎检测 第五节：性传播疾病病原体检测 第六节：医院感染常见病原体检测
65．．标标明本本显量被是明污否显染不合的足标格的本，标不本以予，接保不收证予。接检收测。结果的准确性！
7．同一天申请做同一实验的重复送检标本(血培养除外)，不予 接收。 8．对于烈性传染病标本的采集和运送应严格执行相关规定，要 有完善的防护措施，按规定包裹及冷藏，附有详细的采样及送检 纪录，由专人护送。
穿刺法采集标本。
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标本送检
标本要求尽快送检，否则影响阳性率。 烈性传染病标本需专人护送。
16
二、标本的实验室质量评估标准
1．标本必须注明姓名、年龄、性别、采集日期、临床诊断、检 验项目等基本信自。 2．仔细核对标本采集日期和送检日期。延误的标本，一般情况 下不接收。通常用于细菌学检验的标本的存放不要超过24h。而 病毒检测的标本可于4℃存放2～3天。 3．检查送检容器是否完整，有无破损或渗漏等情况，若有则不 予接收。 4．标本储存、运送方式不当，不予接收。
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意义
3.由于临床标本中常含有一定的抗菌物质， 以致分离培养可为阴性，此时的镜检往 往可能在诊断是起作用。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
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(二)病原体特异性抗原检查
利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检测患 者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫荧光技术、 酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳凝集试验、对流 免疫电泳等技术检测标本中未知的病原体抗原，其诊 断价值常以标本不同而各异。
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（一）直接显微镜检查——染色标本
染色标本目的：了解细菌的形态、染色性或观察宿主 细胞内包涵体。
方法：革兰染色、墨汁染色、抗酸染色、荧光染色
20
G-R
革兰染色 阴 性 杆 菌
阳性球菌（G＋S） 真菌孢子
细菌的形态、染色性的特征
பைடு நூலகம்
21
墨汁染色
宽厚荚膜
•荚膜抗吞噬 •30%-50%的患者伴有免疫功能低下等 疾病， 8%左右的AIDS患者伴有隐球菌 性脑膜炎，预后极差。 •中枢神经系统存活与脑脊液中缺乏抗体 和补体激活系统有关 •抗真菌治疗:两性霉素B,氟康唑