宫颈癌的生物治疗

2020/4/10
免疫治疗方法
克隆化CTL
• 分离外周血单核细胞，加入IL-2培养，自体 肿瘤细胞刺激
•
•
建立肿瘤特异性CTL克隆，扩增回
输
• 难度大，难以推广
2020/4/10
免疫治疗方法
LAK细胞
• 分离患者外周血淋巴细胞，IL-2激活、扩增， 回输给患者
• 有广谱的抗瘤性，可杀伤同基因型、同种 异体肿瘤细胞
HPV载体疫苗
临床前试验
• Liu和Chiriva-Internati等
– 腺相关病毒（AAV）分别转染 HPV16 E6 和 E7 至 DC，结果显示.AAV 可以将载体染色体整合 入细胞，从而激活 DC，进一步触发显著的杀 伤反应。
– AAV可能可以进行临床试验
– 但是目前的研究显示，尽管 AAV可以提高抗原 呈递效果，其效率仍不能让人满意。
2020/4/10
单克隆抗体治疗
• “生物导弹”抗体 • 双特异性抗体 • 信号抗体 • 抗独特型抗体
2020/4/10
“生物导弹”抗体
• 抗体的一端连接核素、毒素、化疗药物， 利用抗原抗体特异性结合的特性，使药物 直接在肿瘤细胞中起作用。
• 意义：
– 效率大大提高 – 负反应降低
2020/4/10
• 2。Phase II Adjuvant Study of the Recombinant Vaccinia Virus Vaccine Expressing the Human Papilloma Virus 16, 18, E6 and E7 in Early Cervical Cancer
• 3。Phase II Study of Whole Body Hyperthermia Combined With Doxorubicin HCl Liposome and Fluorouracil in Patients With Metastatic Breast, Ovarian, Endometrial, or Cervical Cancer
2020/4/10
HPV多肽疫苗的临床试验（1）
• Van Drriel等 I期临床试验
– 应用 HPV E7 多肽和 pan-DR 辅助多肽的复合疫 苗免疫19例晚期子宫颈癌患者，未发生明显副 反应，其中 2例病变在 1年内维持静止状态，15 例进行性恶化，另 2例经随后的辅助化疗而肿 瘤消退
2020/4/10
• 成熟阶段 –非常强的抗原提呈能力
• 至今发现最强的专职抗原提呈细胞 –特别之处：唯一的能在体外激活初 始型T淋巴细胞
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DC过继治疗的方法
• 1.分离前体细胞、培养 • 2.抗原冲击致敏DC • 3.回输或免疫接种
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利用DC治疗肿瘤的研究
1.Zitvogel 治愈了1cm3接种肿瘤的小鼠 2. B淋巴瘤治疗 3. 前列腺癌治疗 4. 黑色素瘤治疗
• 而 预 防 性 疫 苗 对 抗HPV 感染的保护作 用，将会有效的降低子宫颈癌的患病几率。
2020/4/10
以 HPV为基础的疫苗
• 研究发现在90%左右子 宫 颈 癌 患 者 中 可 检 测 到 HPV， 尤 其 是 HPV16、18、 31、33、45、58 型为子宫颈癌的高危型。
• 现已明确，HPV 早期蛋白中的E6和 E7, 主 要与病毒细胞转化功能及致癌性有关；而 晚期蛋白 L1 和L2 分别为HPV的种特异性 抗原和型特异性抗原。
• 抗体的两个Fab段能同时与两个不同的抗原结合。 • 双特异性抗体一臂结合肿瘤抗原，一臂结合免疫
效应细胞。 • 抗体充当桥梁作用。 • 结合效应细胞的分子：
• 巨噬细胞FcγR1 • NK细胞的CD56和CD16 • 中性粒细胞FcγRII • T细胞CD3、CD28、CD2
2020/4/10
免疫治疗方法
2020/4/10
树突状细胞（Dendritic cells,DC ）
• DC是机体免疫反应的始动者，在免疫应答 的中具有独特的地位
2020/4/10
树突状细胞（DC）
• 1.形态特点
• 2.来源、生长发育和功能特点
3.在免疫学中的地位
2020/4/10
DC的功能特点
• 非成熟阶段 –非常强的抗原摄取和加工能力
信号抗体（signaling antibody）
• 单抗通过交联或封闭肿瘤细胞表面膜受体 产生跨膜信号，直接影响或控制肿瘤的生 长，导致肿瘤细胞凋亡。
• 抗体相当于受体结合配体的代替物，模拟 或调整信号活性。
• 这种抗体又称为信号抗体，并能致敏百度文库瘤 细胞，使其对传统的DNA损伤药物的敏感性 增强。
2020/4/10
• 在黑色素瘤、肾癌的治疗 有效率20％，尤 其在消除胸腹水及改善自觉症状效果明显
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免疫治疗方法
肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）
• 从肿瘤组织中分离出淋巴细胞，以IL-2激活、 扩增，回输给患者
• TIL的杀伤活性较LAK细胞强，抗瘤谱窄，临 床应用的效果比LAK稍好。
• 操作极为复杂，难以得到足够的可用于治 疗的细胞数量，对转移肿瘤不一定有效
治疗性疫苗：
• 主要有
– HPV 多肽疫苗 – HPV 载体疫苗 – 融合蛋白疫苗和嵌合疫苗
2020/4/10
HPV多肽疫苗
• 目前已经确认有 3个由 HPV16 E7 编码的多 肽具有免疫原性。
• 这些多肽在离体及体内条件下均能激发细 胞毒性T淋巴细胞(CTL) 反应，从而对肿瘤 细胞起杀伤作用。
宫颈癌的生物治疗
2020/4/10
肿瘤生物治疗
• 应用现代生物技术及其产品进行肿瘤防治 的新疗法，它通过调动宿主的天然防卫机 制或给予天然（或基因工程）产生的针对 性靶向性很强的物质来取得抗肿瘤的效应。
2020/4/10
包括
• 免疫治疗 • 基因治疗 • 其他生物治疗
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免疫治疗的方法
2020/4/10
• 由于目前已经鉴定的HPV有 100 多型，且 培养困难，并具有潜在的致癌性，因此 HPV 减毒活疫苗或死疫苗暂时不适合用于 临床。
• 当前研究的策略主要是针对高危型 HPV E6、 E7, 特异性靶位构建治疗性疫苗和利用L1、 L2 病毒结构蛋白研究预防性疫苗。
2020/4/10
2020/4/10
免疫治疗方法
细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）
• 应用多种细胞因子刺激，从外周血淋巴细胞中诱导、扩增 出以CD3+CD56+、CD3+CD8+为主的异质细胞群。
• 具有NK细胞的某些特点，非MHC依赖性
• 方法
– 以IL-2 、CD3单抗、TNF-α等刺激淋巴细胞增殖 – 致敏的DC与淋巴细胞混合，刺激抗肿瘤CTL增殖 – 淋巴细胞回输
2020/4/10
融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（2）
• Lin 等 I期临床试验
– 将 E7和溶酶体相关的膜蛋白基因融合，构形嵌 合基因 E7/LAMP-1 重组病毒疫苗
– 结果显示，可以增强 CD8+ T细胞的抗原呈递 ， 提高疫苗的抗肿瘤反应。
2020/4/10
融合蛋白疫苗合嵌合疫苗（3）
• Chen 等 I期临床试验
宫颈癌的免疫治疗
2020/4/10
子宫颈癌疫苗
• 人乳头瘤病毒 HPV 与子宫颈癌的关系早已 得到证实
• 超过20 种的预防性或治疗性抗 HPV 疫苗正 在进行临床或临床前试验。
2020/4/10
• 以 HPV疫苗为代表的特异性免疫治疗结合 细胞因子等非特异性免疫治疗可能对子宫 颈癌的预后产生重大 改 善 ；
– 用 E7/LAMP-1 重组病毒疫苗进行研究，也发现 该疫苗可以产生强烈的E7特异性 C8+ T细胞反 应。
2020/4/10
树突状细胞疫苗
• Santin等 发表于Lancet杂志 2002年
– 用HPV18 E7蛋白＋DC疫苗对 1例 27岁放、化 疗抵抗且广泛转移的子宫颈癌复发患者进行免 疫治疗，结果双肺病灶消退，病人生活质量明 显改善。
Van Drriel等 I期临床试验
• 这一结果提示 HPV16 E7 多肽疫苗治疗是有 效的，尤其对终末期患者仍有一定疗效 。
• HPV E7 多 肽 仅 对HLA-A2 具有高亲和性， 受此HLA组织型的 限制，该疫苗仅能对有 限的患者起作用。
• 免疫治疗和化疗应该有机的结合使用
2020/4/10
2020/4/10
独特型网络调节
• ① Ig分子上兼有抗原结合特性和抗原决 定簇功能的部位称为独特型，抗体的独 特型可被体内某些具有相应抗原决定簇 识别受体的细胞识别，从而产生抗独特 型抗体.进一步形成独特型网络
• ② 独特型网络的细胞：ARC；内影象组； 抗独特型组；非特异平行组
2020/4/10
HPV多肽疫苗的临床试验（2）
• Stelar 等研究
– 两次 HPV16 E7脂肽疫苗接种后7例患者中 5例 发生特异的 CTL反应。
2020/4/10
HPV 多肽疫苗的临床试验（3）
• 美国食品与药品管理局 （FDA.）已批准用 HPV 16 E7脂肽疫苗进行临床期试验，随访 情况良好，但其最佳免疫途径、免疫剂量 等问题尚需进一步研究。
2020/4/10
HPV 载体疫苗
• 将编码病毒蛋白的基因重组到机体细胞中， 由机体细胞合成病毒蛋白后表达在细胞表 面，再引发一系列的免疫应答反应。
• 根据这一原理，通过腺相关病毒 AAV 将 HPV E6 和E7 抗原基因转染到DC中，可以 有效提高抗原的呈递，以激活 CTL的杀伤 作用。
2020/4/10
生物导弹特点和局限性
• 生物导弹利用单克隆抗体导向，药物、毒 素、同位素则发挥高效的杀伤肿瘤的作用， 因而，疗效大大提高。
• 局限性
– 交叉反应对正常组织也有损害、 – 使用鼠源性单抗导致抗抗体影响继续使用效果，
甚至过敏反应、 – 肿瘤表面抗原的调变减少与抗体结合。
2020/4/10
双特异性抗体（BsMab）
针对酪氨酸激酶受体的单抗、小分子
• 单抗类分子靶向药物常用的有
• Herceptin(贺赛汀) • Rituximab(美罗华)
98年 FDA批准上市 用于HER2受体＋的乳腺 癌
• IMC-C225 (Erbitux)
• Avastin
• 小分子化合物常用的有：
• Glivec(STI571, 格列卫)
• 一。主动免疫
• 特异性免疫治疗 • 非特异性免疫治疗
• 二。被动免疫治疗 • 三。过继免疫治疗
2020/4/10
免疫治疗方法
非特异性免疫治疗
• 生物免疫刺激剂：BCG、短棒状杆菌、 OK432
• 化学免疫刺激剂：左旋咪唑、西咪替丁、 活化巨噬细胞的溶解物
• 化学治疗药物：环磷酰胺、长春新碱、顺 铂
2020/4/10
融合蛋白疫苗和嵌合疫苗（1）
• Adams 等 I期临床试验
– 将HPV 嵌合基因 – 治疗8 例晚期子宫颈癌患者 – 结果
• 所有患者体内均产生抗疫苗的IgG抗体，其中 3 例产 生特异性抗 HPV 抗体，免疫9周后可检测到 HPV特 异性的 CTL，但在 14和 20周消失；2例在注射疫苗 15和21 周临床随访时，状态良好。
2020/4/10
目前正在进行临床试验
• 1。Phase II Pilot Study of Clinical Activity and Proteomic Pathway Profiling of the EGFR Inhibitor, ZD1839 (Iressa; Gefitinib), In Patients With Epithelial Ovarian Cancer Or Cervical Cancer
• 免疫调节药物：灵芝多糖、自然饮等 • 细胞因子：干扰素、IL-2、TNF
2020/4/10
免疫治疗的方法
• 特异性免疫治疗
– 是一种调动宿主自身抗肿瘤免疫应答的方法。 – 包括各种疫苗的治疗
• 如肿瘤疫苗、多肽疫苗、病毒疫苗、蛋白疫苗、DC 疫苗等
2020/4/10
免疫治疗方法
被动免疫治疗
• 直接输入外源性活性物质抗肿瘤作用 • 方法
– 单克隆抗体治疗 – 细胞因子治疗
2020/4/10
免疫治疗方法
过继免疫治疗
• 过继性免疫治疗是指将有免疫活性的自体 或同种异体的免疫细胞或细胞因子输给患 者，以提高患者的免疫功能。
• 方法：
– 克隆化CTL – LAK细胞 – 肿瘤浸润淋巴细胞（TIL） – 树突状细胞（DC） – 细胞因子介导杀伤细胞（CIK）
• ZD1839(Iressa)
2003年 FDA 批准上市 用于 NSCLC 第三线单药治疗
• OSI774 (Tarceva)
2020/4/10
抗独特性抗体
根据免疫网络理论，机体产生的抗体的某些 空间结构可能成为另一抗体的识别、结合 位点。识别第一抗体的抗原抗体结合部位 的第二抗体则与最初的抗原具有空间结构 类似的特点。 第二抗体可以代替抗原诱发免疫反应。