洁净手术室微生物监测

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无菌物品检验(1) 无菌物品检验:是指检查经灭菌的敷料、缝线,一次性
使用的医疗用品,无菌器械以及适合于无菌间查的其他品牌是 否无菌的一种方法,应在洁净度为100级单向流空气区域内进 行,严格遵守无菌操作,避免微生物污染 ⑴ 将缝针、刀片、敷贴等小件医疗用物直接放入培养 管中,培养基用量15ml/管 ⑵ 手术钳\镊子等大件医疗器械取沾洗脱液的棉拭子反 复涂抹采样,将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中混匀,接种于培养 管中,培养基用量15ml/管
二、压力蒸汽灭菌：必须进行工艺监测、化学监测和生 物监测。工艺监测应每锅进行，并详细记录。化学监测 应每包进行，手术包尚需进行中心部位的化学监测。预 真空压力蒸汽灭菌器每灭菌前进行B－D试验。生物监测 应每周进行，新灭菌器使用前必须先进行生物监测，合 格后才能使用；对拟采用的新包装容器、摆放方式、排 气方式及特殊灭菌工艺，也必须先进行生物监测，合格 后才能采用。
Ⅰ Ⅱ
Ⅰ Ⅰ
Ⅲ
Ⅳ
Ⅱ
Ⅲ
布点要求
洁净度局部百级周围千级设置13个点 洁净度局部千级周围万级设置9个点
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布点要求
洁净度局部万级周围十万级设置7个点 洁净度局部十万级周围三十万级设置5 个点
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布点要求
洁净度十万级设置5个点
内镜消毒效果检测㈠

采样方法： 检测采样部位为内镜的内腔面，用无 菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液，从 待检内镜活检口注入，用15ml无菌试管从活检 出口收集，及时送检, 2小时内检测。 菌落计数： 将送检液用漩涡器充分震荡，取0.5ml, 加入2只直径90mm无菌平皿，每个平 皿分别加入已熔化的45℃-48℃营养琼 脂15-18ml，边倾注边摇匀，待琼脂 凝固 ,于35℃培养48小时后计数。
1000级
Ⅱ
标准洁净手 术室一般洁净手 术 准洁净手术 室0.75个/30min.直径90 皿(25个/立方米)
2个/30min.直径90皿 (75个/立方米)
1.5个/30min.直径90 皿(50个/立方米)
4个/30min.直径90皿 (150个/立方米)
5
1000级
10000级
Ⅲ
5
10000级
㎡,
Ⅳ类环境≤ 15Cfu/c㎡
手卫生和消毒效果的检测1
■采样时间:在消毒后立即采样 ■采样方法:被检测者五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗
脱液的棉拭子在双手指屈面从指跟到指端往返的涂擦2次,一 只手涂擦面积约30c㎡,并随之转动采样棉拭子,剪去操作者手 指接触部分,将棉拭子投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液 试管内,立即送检
和剂
环境表面消毒效果的监测
■ 采样时间 选择消毒处理后使用前进行采样 ■样面积 被采面积 ＞100 C㎡ ,取100C㎡. 被采面积﹤100C㎡,取全部表面. ＞ ■ 采用方法 用5 ×5的标准灭菌规格板放在被检物件表面 ,用 浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返 均匀涂抹各5次,并随之转动棉拭子,连续采样1-4个规格板面 积,剪去手接触部分,将棉拭子装入采样液试管中送检 ■ 结果判断 Ⅰ、Ⅱ类环境≤5Cfu/c㎡ , Ⅲ类环境≤ 10Cfu/c
表面染菌密度
用特定方法擦拭表面并 按 要求培养后得出的菌落数 (CFU)代表该表面沾染的细菌 数,个/C㎡ 在规定的换气次数条 件下，洁净手术室从 污染后（例如停机后 或一台手术后）的低 洁净级别，恢复到固 有静态高洁净度级别 （例如开机后或另外 一台手术开始前要求 的级别）的时间—— min
洁净手术室术语
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培养器皿放置注意事项
■ 测样手术间选择好后,进行彻底清洁,开启净化系 统30分钟后在机组运行正常下进行测试 ■ 操作者戴好帽子、口罩,洗手后,按无菌操作原则 放置培养皿 ■ 放置第一个培养皿后计时,确保30分钟后收取各 培养皿 ■ 用何种方法检测细菌浓度,都必须有两次空白对 照 ■可布置于地面或不高于地面0.8米的任意高度 采样后的培养基应立即置于37摄氏度条件下培养 24小时然后计数生长的菌落数

手术区
需要特别保护的 手术台及其周围区域。l 级手术 室的 手术区是指手术台两侧边至少各外推0.9米、 两端至少各外推0.4米后（包括手术台）的 区域。
空气监测的方法
静态测试：at-rest test 洁净室（区）净化空调调节系统已处于正常运行状态， 设备已安装， 洁净室（区）内没有人员的情况下进行的测试。 动态测试：operational test 洁净室（区）已处于正常工作状态下进行的测试。
内镜消毒效果监测㈡

致病菌检测： 将送检液用旋涡器充分震荡，取0.2ml分别接 种90mm血平皿。中国兰平皿和 SS平皿，均匀涂布，35℃ 培养48小时，观察有无致病菌生长。 结果判断： ⑴ 菌落数/镜=2个平皿菌落数平均值×20

⑵ 灭菌后的内镜应当每月进行生物学监测并
做好监测记录，
⑶消毒后的内镜合格标准为：细菌总数 ﹤20CFU/件，不能检出致病菌， ⑷ 灭菌后内镜 合格标准为:无菌检测合格.
手卫生和消毒效果的监测2
■结果判断 ⑴ⅠⅡ类区域工作人员:细菌总数≤5cfu/ c㎡, 并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单狍 菌为消毒合格 ⑵Ⅲ类区域工作人员: 细菌总数≤10cfu/ c㎡, 并未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格 ⑶Ⅳ区域工作人员: 细菌总数≤15cfu/ c㎡,并 未检出金黄色葡萄球菌、大肠杆菌为消毒合格 各区域工作的 医务人员的手，均不得检出致 病微生物
谢谢大家!
100000级
Ⅳ
5个/30min.直径90皿(175个/立方米)
5
300000级
洁净手术室分级
等级
手术室名称 特别洁净手 术室 标准洁净手 术室 一般洁净手 术室 准洁净手术 室
手术 切口 类别
适用手术提示 关节置换手术、器官移植手术及脑外科、心脏外 科和眼科等手术中的无菌手术 胸外科、整形外科、泌尿外科、肝胆胰外科、骨 外科和普通外科中的一类切口无菌手术 普通外科(除去一类切口手术) 、妇产科等手术 肛肠外科及污染类等手术
洁净手术室的等级标准
沉降法(浮游法)细菌最大平均浓度 等 级 手术室 名称 手术区 周边区 表面 最大 染菌 密度 (个 / c ㎡) 5 空气洁净度级别 手术区 周边区
Ⅰ
特别洁净手 术室
0.2个/30min.直径90 皿(5个/立方米)
0.4个/30min. 直径90 皿(10个/立方米)
100级
洁净手术室微生物监 测
浙医一院手术室 马贻芳
医院感染 凡住院病人、陪护者或医院工作人员 因医疗护理工作而被感染 所引起的任何有临床症状的微生物性疾病 无论受害对象在医院期间是否出现症状 均视为医院感染。


医院感染监测：是指长期、系统、连续地 观察、收集和分析医院感染在一定人群中的 发生、分布及其影响因素，并将监测结果报 送和反馈给有关部门和科室，为医院感染的 预防控制和管理提供科学依据。
重点部门的空气、物表、医护人员手 的卫生学监测应在清洁后或消毒后、 操作前进行，如遇有医院感染流行或 疑似环境污染时，则需要立即进行监 测。
消毒灭菌效果监测
一、使用中的消毒剂、灭菌剂：应进行生物和化学监测。 生物监测：消毒剂每季度一次，其细菌含量必须 <100cfu/ml，不得检出致病性微生物；灭菌剂每月监测 一次，不得检出任何微生物。 化学监测：应根据消毒、灭菌剂的性能定期监测，如含 氯消毒剂、过氧乙酸等应每日监测，对戊二醛的监测应 每周不少于一次。 应同时对消毒、灭菌物品进行消毒、 灭菌效果监测，消毒物品不得检出致病性微生物，灭菌 物品不得检出任何微生物。
三、 环氧乙烷气体灭菌： 必须每锅进行工艺监测， 每包进行化学监测，每月 进行生物监测。
四、各种灭菌后的内窥镜（如腹腔镜、关节 镜、胆道镜、膀胱镜、胸腔镜等）、活检钳 和灭菌物品：必须每月进行监测，不得检出 任何微生物。
洁净手术室术语


洁净度100级
洁净度1000级 洁净度10000级 洁净度10万级
无菌物品检验(2)
■ 结果判断: 无阳性对照在24h内应有菌生长,阴性对照在培养期间应无菌生 长,如证实有菌生长,应重新取样,同法复试两次
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24h
注意事项:
⑴ 送检时间不超过6h,若样品保存在0℃-4℃的不超过 ⑵ 被采样本表面积＜100c㎡取全部表面,被采样本体 表面积≥100C㎡取100c㎡ ⑶ 若消毒因子为化学消毒剂,采样液体中加入相应中
洁净手术室术语
浮游法细菌浓度 沉降法细菌浓度
在空气中随机采样，对 用直径90㎜培养器在空气 采样培养基经过培养得出菌落 ㎡ 中暴露30min,盖好培养皿后 数（CFU）代表空气中的浮游 经过培养得出菌落数(CFU)， 菌数,个/立方米 代表空气中可以沉降下来的细 菌数,个/皿
洁净手术室术语
自净时间