总糖的测定方法
总糖测定的方法
总糖测定的方法嘿，咱今儿个就来唠唠总糖测定的那些事儿！你说这总糖啊，就像是个神秘的小家伙，藏在各种食物和物质里。
要想抓住它，可得有几招厉害的法子。
先来说说最常见的一种方法，斐林试剂法。
这斐林试剂就像是个神奇的探测器，能和总糖发生奇妙的反应呢！想象一下，把样本放进去，就像在一个神秘的化学世界里开启了一场奇妙冒险。
斐林试剂会和总糖手牵手，产生一些明显的变化，通过这些变化，咱就能知道总糖的含量啦！这多有趣呀，就像在玩一个找宝藏的游戏。
还有一种方法叫高锰酸钾法。
这高锰酸钾就像是个厉害的卫士，能把总糖给“揪”出来。
它和总糖会发生一系列的反应，通过观察高锰酸钾颜色的变化，就能判断总糖的多少啦。
这就好像警察抓小偷，高锰酸钾就是那个英勇的警察，总糖就是那个调皮的小偷，最后总能把小偷给抓住。
再说说碘量法。
碘就像是个聪明的小精灵，能和总糖巧妙地互动。
通过碘的反应，咱也能算出总糖的量。
这是不是很神奇呢？当然啦，每种方法都有它的特点和适用范围。
就像不同的工具，各有各的用处。
在实际操作中，可得根据具体情况来选择合适的方法。
不然，那可就像拿着锤子去拧螺丝，不得劲儿呀！在进行总糖测定的时候，可得细心再细心。
就像绣花一样，一针一线都不能马虎。
稍微不注意，可能结果就不准确啦。
那可不行，咱得对自己的实验负责呀！而且，实验环境也很重要呢！温度啦、湿度啦，都可能影响结果。
这就好比种子发芽需要合适的环境，总糖测定也需要一个舒适的“家”。
总之，总糖测定可不是一件简单的事儿，但也别被它吓住。
只要咱掌握了方法，认真去做，就一定能揭开总糖的神秘面纱。
你说是不是呀？咱可不能小瞧了这小小的总糖测定，它里面的学问大着呢！所以呀，大家在做总糖测定的时候，一定要多用心，多尝试，相信你一定能成功的！。
总糖的测定
一、总糖得测定食品中得总糖主要指具有还原性得葡萄糖,果糖,戊糖,乳糖与在测定条件下能水解为还原性得单糖得蔗糖(水解后为１分子葡萄糖与1分子果糖),麦芽糖(水解后为2分子葡萄糖)以及可能部分水解得淀粉(水解后为2分子葡萄糖)。
还原糖类之所以具有还原性就是由于分子中含有游离得醛基(-CHO)或酮基(=Ｃ=O)、测定总糖得经典化学方法都就是以其能被各种试剂氧化为基础得、这些方法中,以各种根据斐林氏溶液得氧化作用得改进法得应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂,影响因素较多,所以不如铁氰化钾法准确,但其操作简单迅速,试剂稳定,故被广泛采用。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内,但要求检测液澄清,此外,在大多数情况下,测定要求不包括淀粉与糊精,这就要在测定前将淀粉,糊精去掉,这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用、(一)铁氰化钾法1、原理样品中原有得与水解后产生得转化糖都具有还原性质,在碱性溶液中能将铁氰化钾还原,根据铁氰化钾得浓度与检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下:C6H12O６+6K3［Fe(CN)６] + 6KＯH →(CＨOH)4·(ＣOOH)２＋6Ｋ4[Ｆe(ＣN)6］＋ 4H2O 滴定终了时,稍过量得转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色得隐色体。
2。
试剂1)1%得次甲基兰指示剂２)盐酸(水解作用)3)1０%与30％得NaＯH溶液4)１％铁氰化钾(贮存特色瓶,临用前标定)３、标定步骤称蔗糖１.０000g→定容５00ml→取此液5０mｌ→于1０0ml容量瓶→加ｈcl5ml→摇匀→65-7 0℃水裕1５分钟→取出冷却→用3０％NaOH中与→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ｍｌ1%铁氰化钾于锥形瓶中→加1０%ＮａOH２、5ｍｌ加１2.5ml得水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰１滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止,记录用量、正式滴定比较滴定时少0、5ｍl糖液,煮沸１分钟,加指示剂一滴,再用糖液滴定至兰色褪去,计算铁氰化钾溶液得浓度、A=(Ｗ·V)/(１00０×0、95)A:相当于1０ml铁氰化钾溶液得转化糖得量(克)V:滴定时消耗得糖液得体积Ｗ:称取纯蔗糖得量１000:稀释比0、95:换算等数4.操作方法稀释1０ｇ→用１００ｍl水作溶液→于250ml容量瓶→加2０％醋酸铅１０mｌ→至沉淀完为止→加１0ｍl10％NA２ＨPO4→至不在产生沉淀为止→加水至刻度→过滤－取滤液50ｍｌ→于100m l容量瓶中→按铁氰化钾标定法进行转化,中与及滴定,计算糖含量。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告总糖的测定实验报告引言：总糖是指食物中所有可溶性糖类的总和，包括单糖、双糖和多糖。
在食品工业中，准确测定食物中的总糖含量对于产品质量的控制和消费者的健康至关重要。
本实验旨在通过一系列实验步骤，测定某种食品中的总糖含量，并探讨不同测定方法的准确性和可行性。
实验原理：总糖的测定方法有很多种，常用的有显色法、酶解法和高效液相色谱法。
本实验采用显色法进行总糖的测定。
该方法是利用总糖与酚酞反应，生成红色络合物，通过比色测定络合物的吸光度来确定总糖的含量。
实验步骤：1. 样品制备：将待测样品加入适量的蒸馏水中，充分溶解。
2. 酚酞溶液制备：将适量的酚酞溶解于蒸馏水中，制备成0.5%的酚酞溶液。
3. 反应体系制备：取适量的样品溶液和酚酞溶液混合，加入适量的硫酸，使反应体系呈酸性。
4. 反应与显色：将反应体系加热至沸腾，保持沸腾2-3分钟，使反应充分进行。
然后冷却至室温，观察溶液颜色的变化。
5. 吸光度测定：使用分光光度计，在波长为520nm处测定反应体系的吸光度。
6. 标准曲线绘制：取一系列不同浓度的葡萄糖溶液，按照上述步骤进行显色反应，并测定吸光度。
根据吸光度与浓度的关系，绘制标准曲线。
7. 总糖含量计算：根据样品的吸光度值，利用标准曲线得出样品中总糖的含量。
结果与讨论：通过实验测定，得到了待测食品中总糖的含量为X g/100g。
这个结果表明该食品中含有较高的总糖含量，可能对于某些人群来说，摄入过多的该食品可能会导致健康问题。
总糖的测定方法中，显色法是一种简便、快速的方法。
然而，该方法对于一些特殊的食品样品可能会产生干扰，导致测定结果不准确。
因此，在实际应用中，需要根据不同的食品样品选择合适的测定方法。
此外，本实验中使用了葡萄糖作为标准物质，绘制了标准曲线。
标准曲线的制备对于准确测定样品中总糖的含量至关重要。
在实际应用中，可以根据需要选择其他合适的标准物质，并制备相应的标准曲线。
结论：通过本实验，我们成功测定了某种食品中的总糖含量，并探讨了不同测定方法的准确性和可行性。
食品总糖的测定方法
食品总糖的测定方法
食品总糖的测定方法有以下几种常用的方法：
1. 酶法：使用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶对食品中的糖进行氧化反应，生成过氧化氢，通过测定过氧化氢的浓度来间接测定总糖含量。
这种方法具有灵敏度高、准确性好的优点。
2. 光学法：使用氨基酸与糖结合后形成的褐色化合物的吸光度来测定总糖含量。
这种方法操作简单，但对于含有褐变反应的食品，可能会影响结果的准确性。
3. 高效液相色谱法：将食品中的糖提取出来，然后使用高效液相色谱仪进行分离和检测。
这种方法可以同时测定多种不同类型的糖，并具有高灵敏度和高分辨率的优点。
4. 还原糖法：将食品中的糖还原为相应的糖醇，在酸性条件下测定糖醇含量。
这种方法适用于测定还原性糖的含量，但对于不具有还原性的糖，如蔗糖等无法测定。
在实际应用中，根据具体情况选择合适的测定方法，并结合样品的特点和要求进行测定。
淀粉、总糖、还原糖的测定方法
淀粉、总糖、还原糖的测定方法淀粉的测定方法---蒽酮法一( 原理用乙醇将烟叶中可溶性糖浸出并分离出去，而后烟叶中淀粉用适量Hcl，因淀粉在稀酸作用下被水解成葡萄糖，再按葡萄糖测定进行。
根据葡萄糖的含量从而算出淀粉含量。
二( 仪器设备三角瓶50ml 容量瓶100ml 移液管10ml、1ml 漏斗圆底烧瓶1000ml 离心管和离心机水浴锅温度计烘箱滤纸天平分光光度计三( 试剂盐酸乙醇氢氧化钠蒽酮四、试剂的配制和标准曲线的绘制1. 葡萄糖标准液的配制称取无水葡萄糖(AR级)0.1g溶于蒸馏水中，定容至100毫升，用前取此液10毫升，再用水稀释至100毫升。
2. 标准曲线的绘制取6支干洁刻度试管，依次移入葡萄糖标准液(100μg/ml)0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.00ml后，再从1至6试管依次补加1.0，0.8，0.6，0.4，0.2，0ml蒸馏水后，再分别加入蒽酮试剂5毫升，于沸水中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色，记录OD值，以吸光值为纵坐标，糖含量为横坐标，绘出标准曲线 3. 80%乙醇的配制取400毫升乙醇加水定容至500ml4. 1当量的盐酸配制 43毫升浓盐酸加水定容至500ml5. 10%氢氧化钠配制 10g氢氧化钠溶于100ml水中6. 蒽酮试剂:1克蒽酮溶于72%的HSO1000ml(98%的HSO+240的蒸馏水)，棕色瓶冰箱2424保存2,3周。
五实验步骤1. 分离出水溶性糖0.1g样置于离心管中加入8毫升80%乙醇 80?水浴浸提30分钟冷却后离心(3600转)5分钟残渣再加入8ml80%乙醇。
重复三次2. 水解残渣用1当量的盐酸15ml洗入50ml三角瓶，摇匀后烘箱105度加热3.5小时，冷却后加10%氢氧化钠6ml中和，过滤，蒸馏水定容100ml。
3. 测定取滤液1ml(空白用1ml蒸馏水代替)，加入蒽酮试剂5ml，摇匀，于沸水浴中加热10分钟，冷却后在620nm波长处比色六结果的计算与表述C=AN*0.9/WC—样品淀粉含量(μg/g) W—样品重量(g)A—标准曲线查得的糖量(μg) N—样品提取液占样品反应液的倍数蒽酮比色法测总糖:实验步骤:1、可溶性糖的提取:准确称取烟叶样品0.100克，置于离心管中，加入8毫升80%乙醇，于80?水浴浸提30分钟，冷却后于4000转离心5分钟，收集上清液，残渣再加入8毫升80%乙醇，再次浸提，重复两次，将三次提取的上清液合并于100毫升容量瓶中并定容至100毫升。
总糖测定的原理
总糖测定的原理总糖测定是一种常用的食品分析方法，用于测定食品中的总糖含量。
总糖包括单糖、双糖、寡糖和多糖等各种不同类型的糖类物质。
总糖含量是评价食品甜度和质量的重要指标之一。
下面将详细介绍总糖测定的原理。
总糖测定的原理主要基于糖类被酶水解产生的还原糖与酒石酸和费林试剂的化学反应。
总糖测定可以分为直接法和间接法两种方法。
直接法是将食品样品与酒精和硫酸进行混合，加热水浴至溶解，再通过减压蒸发的方式将酒精蒸发掉，得到含有糖的残渣。
然后将残渣溶于少量水中，加入酒石酸和费林试剂，进行显色反应。
费林试剂中的铬酸钠和硫酸能与还原糖反应生成红色络合物，其吸光度与还原糖的浓度成正比。
通过光度计测定吸光度，就可以计算出总糖含量。
间接法是首先将食品样品进行酶解，将多糖水解为单糖，然后使用一定酶去除共存物质，如蛋白质和多肽。
接着进行酚-硫酸比色法。
在酚-硫酸条件下，糖类物质可以与酚发生缩合反应，生成吸收最大波长为490nm的吸收峰。
根据比色原理，通过测定样品的吸光度，可以计算出总糖的含量。
总糖测定方法在不同食品中应用广泛，如果汁、果酱、蜂蜜等食品中的总糖含量可以通过该方法测定。
总糖测定具有操作简单、结果准确和灵敏度高的特点，是食品分析领域广泛采用的方法之一。
总糖测定的原理包括物理方法和化学方法两个方面。
物理方法主要是通过光学和电化学等手段测定糖的含量，而化学方法则是通过化学反应进行糖类物质的定量分析。
总糖测定的物理方法包括光度法、滴定法和色谱法等。
光度法是利用糖与试剂发生化学反应后产生颜色的特性，通过测定样品溶液的吸光度来确定糖的浓度。
滴定法是借助于溶液的化学反应进行滴定的方法，通过滴加已知浓度的滴定剂到反应糖液中来确定糖的浓度。
色谱法则是利用柱技术和分离物质在固相载体上的吸附分离原理，通过糖分子的色谱波峰面积与浓度之间的关系来确定糖的浓度。
化学方法主要包括酶促反应法、还原法和氧化法等。
酶促反应法是通过一定的酶对待测样品进行催化反应，使其转化为产物，从而间接地测定糖的浓度。
食品中总糖的测定国标的方法
食品中总糖的测定国标的方法一、糕点、糖果中还原糖的测定1、直接滴定法1）原理：样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定经标定的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。
以亚甲基蓝为指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型亚甲基蓝还原为无色的还原型亚甲基蓝，根据试样所消耗的体积计算还原糖的含量。
直接滴定法已经过多次改进，只要严格遵守实验条件，分析结果的准确度和重现性是能够满足定量分析的要求。
2）试剂①费林氏剂甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g四甲基蓝，溶于水中并稀释至1000ml。
②费林氏剂乙液：称取50g酒石酸钾钠及75gNaOH，溶于水中，再加入4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000ml，贮存于橡胶塞玻璃瓶内。
③乙酸锌溶液：称取乙酸锌结晶21.9g，加3ml冰醋酸，加水溶解至100ml。
④106g/l亚铁氰化钾溶液。
⑤葡萄糖标准溶液：准确称取1.0000g经过96±2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加入5mlHCl,并以水稀释至1000ml。
此溶液每1ml相当于1.0mg葡萄糖。
3）操作方法①样品处理：准确称取样品（粉碎后的）2.5~5.0g置于250ml容量瓶中，加水50ml，摇匀后慢慢加入5ml乙酸锌溶液，混匀后再慢慢加入5ml亚铁氰化钾溶液，振摇，加水定容并摇匀后静置30min，用干滤纸过滤，弃去初始滤液，过滤液备用。
②标定碱性酒石酸铜溶液：吸取 5.00ml碱性酒石酸铜甲液及5.00ml碱性酒石酸铜乙液，置于250ml锥形瓶中，加水10ml，加入玻璃珠3粒，从滴定管加约9ml标准葡萄糖液，使其在2min内加热至沸。
趁热以0.5滴/s的速度继续滴加糖液，直至溶液颜色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖液的体积。
平行操作3次，得m平均消耗葡萄糖液的体积。
计算每10ml(甲、乙各5ml)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg），即m＝v×c式中m——10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量（mg）v——标定时消耗葡萄糖标准溶液的总体积c——葡萄糖标准溶液的浓度（mg/ml）③样品溶液的预测定：吸取费林氏甲、乙液各5ml，置于150ml 三角瓶中，加水10ml、玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中加样液，趁沸以0.5滴/s的速度继续滴定至蓝色刚好褪去为终点，记录消耗样液的体积。
总糖的测定蒽酮比色方法
总糖测定——蒽酮比色法一、原理：单糖类遇浓硫酸时，脱水生成糠醛衍生物，后者可与蒽酮缩合成蓝绿色的化合物，当含糖量在20～200mg/L范围内时，其呈色强度与溶液中糖的含量成正比，故可比色定量。
二、试剂：1、10～100ppm葡萄糖系列标准溶液：称取1.0000g葡萄糖，用水定容至1000ml，从中吸取1、2、4、6、8、10ml分别移入100ml容量瓶中，用水定容，即得浓度为10、20、40、60、80、100ppm（ug/ml）葡萄糖系列标准溶液。
2、0.1%蒽酮溶液：称取0.1g蒽酮，溶于100ml72%硫酸中，贮存于棕色瓶中，于0～4℃下存放。
3、72%硫酸溶液。
三、测定方法：（一）样品处理：称取适量样品，用100ml水转移至250ml容量瓶，慢慢加入5ml乙酸锌和5ml亚铁氰化钾，沸水浴5～10min，定容，静置至上清，过滤。
根据估计含糖量，去滤液进行稀释，使糖含量在20～80mg/L范围内。
（二）测定吸取系列标准溶液、样品溶液（含糖20～80ppm）、蒸馏水（空白）各2ml，分别加入具塞比色管中，沿管壁各加入蒽酮试剂10ml，立即摇匀，放入沸水浴中准确加热10min，取出，迅速冷却至室温，在暗处放置10min，用1cm比色杯，以零管调仪器零点，在620nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
根据样品溶液的吸光度查标准曲线，得糖含量。
四、结果计算：总糖（以葡萄糖计，%）=c×稀释倍数×10-4式中：c：从标准曲线查得的糖浓度，ppm（ug/ml）；10-4：将ppm换算为%的系数五、说明与讨论1、该法是微量法，适合于含微量碳水化合物的样品，具有灵敏度高，试剂用量少等优点。
2、该法按操作的不同可分为几种，主要差别于蒽酮试剂中硫酸的浓度（66～95%），取样量（1～5ml）、蒽酮试剂用量（5～20ml）、沸水浴中反应时间（6～15min）和显色时间（10～30min）。
这几个操作条件之间是有联系的，不能随意改变其中任何一个，否则将影响分析结果。
动物多糖--总糖的测定
1.硫酸蒽酮法（1）样品处理：称取0.1g样品（动物），以E/S比为1/25的比例，加入0.004g酸性蛋白酶定容至10mL容量瓶中，在pH=2,温度在37℃下，进行水解5h，水解后在100℃灭酶3min。
将经酶处理过的样品用5mL注射器经0.45um针孔滤膜过滤，收集滤液，并取1mL 滤液定容至50mL容量瓶中待用。
（2）紫外分光检测：准确称取0.1g葡萄糖（分析纯），溶解并用蒸馏水定容到100ml后，分别取出1ml、2ml、3ml、4ml、5ml分别加入到50的容量瓶中，并用蒸馏水定容到50ml,配成了浓度分别为20ug/ml、40ug/ml、60ug/ml 、80ug/ml、100 g/ml, 以蒸馏水做对照空白，各取1ml于试管中，再加入4ml蒽酮试剂，迅速浸入冰水中冷却，待几只试管均匀加完后，一起浸入100℃恒温水浴锅中，为防止水分蒸发，应在试管口上加塞。
自温度重新升至100℃起计时，准确保温10min后取出，用流动水冷却。
然后，于室温中平衡片刻（约10min左右），再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长620nm有最大吸收峰，选择620nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色。
其标准曲线制作如表1.1 所示：表1.1 葡萄糖标准曲线结果标样号浓度（ug/ml）吸光度(ABS)1 20.000 0.067282 40.000 0.257233 60.000 0.438604 80.000 0.589235 100.000 0.74802多糖含量（%）=（样品浓度×稀释倍数×样品体积）/式样称重量×100%。
2．苯酚-硫酸法（1）标准曲线的制备: 准确称量干燥至恒重的葡萄糖标准品0.020g,置于体积500mL的容量瓶中定容并摇匀,得到葡萄糖的标准溶液。
以2.0mL蒸馏水作为空白样,依次取0.4mL, 0.6mL, 0.8mL, l.0mL, 1.2mL,1.4mL, 1.6mL,1.8mL 葡萄糖标准溶液,用蒸馏水补足至2.0mL,在每个样品中按顺序加入浓度为6%的苯酚溶液l.0mL,98%的浓硫酸5.0mL,静置10min后摇匀,室温下放置20min,再在分光光度计上，进行光谱扫描，检测在波长490nm有最大吸收峰，选择490nm紫外检测波长，用0.5cm厚度的比色杯进行比色，测得吸光值。
小麦中总糖含量的测定
小麦中总糖含量的测定
小麦中总糖含量的测定可以通过以下步骤进行：
1.收集小麦样品：收集足够的小麦样品，确保样品的代表性。
2.样品预处理：将小麦样品干燥、粉碎，过筛后取适量粉末用于后续测定。
3.提取糖分：将预处理后的样品置于索氏提取器中，用乙醇溶液进行提取。
反复抽提
后，收集提取液。
4.去除杂质：将提取液中的乙醇挥发，用蒸馏水溶解残渣，过滤去除杂质。
5.糖分测定：采用适合的方法测定糖分含量，如滴定法、比色法等。
常用的滴定法是
采用硫酸和苯酚试剂进行滴定，根据滴定结果计算总糖含量。
6.结果计算：根据测定方法和实验数据，计算出小麦中总糖的含量。
需要注意的是，测定总糖含量时，应确保实验操作规范，避免误差的产生。
同时，应选择合适的测定方法，以保证结果的准确性和可靠性。
总糖的测定方法
总糖的测定方法
总糖的测定是食品分析中的重要内容，不同的食品中总糖的含量也会有所不同。
因此，正确、准确地测定总糖的含量对于食品质量的控制和评价具有重要意义。
下面将介绍几种常用的总糖测定方法。
首先，常用的总糖测定方法之一是菲林法。
这种方法是将待测样品与酚酞溶液
和硫酸混合，然后在沸水浴中加热，使其发生蓝色到粉红色的变化，再用标准葡萄糖溶液进行比色测定。
菲林法操作简便，结果准确，因此被广泛应用于食品分析领域。
其次，还有硫酸酚法。
这种方法是将待测样品与硫酸酚溶液混合，然后在沸水
浴中加热，使其发生褐色沉淀，再用标准葡萄糖溶液进行比色测定。
硫酸酚法操作简单，结果准确，适用于各种食品样品的总糖测定。
另外，还有氧化还原滴定法。
这种方法是将待测样品与氢氧化钠溶液和酚酞溶
液混合，然后滴加碘液进行滴定，直至出现蓝色终点，再用标准葡萄糖溶液进行滴定测定。
氧化还原滴定法操作简单，结果准确，适用于各种食品样品的总糖测定。
最后，还有高效液相色谱法。
这种方法是利用高效液相色谱仪对待测样品进行
分离和检测，通过测定色谱图谱中总糖峰的面积来计算总糖的含量。
高效液相色谱法操作复杂，但结果准确，适用于各种复杂食品样品的总糖测定。
总之，不同的总糖测定方法各有优缺点，具体选择应根据实际情况和要求进行。
在进行总糖测定时，需严格按照操作规程进行，以确保测定结果的准确性和可靠性。
希望本文介绍的总糖测定方法能够对您有所帮助。
总糖的测定实验报告
总糖的测定实验报告一、实验目的总糖是指样品中还原糖和非还原糖的总和。
本次实验的目的是掌握总糖测定的原理和方法，学会使用相关仪器和试剂进行准确的测定，并通过实验数据的处理和分析，得出样品中总糖的含量。
二、实验原理总糖的测定通常采用蒽酮比色法。
糖类在浓硫酸的作用下，可脱水生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色复合物。
在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，通过比色法可以测定出样品中总糖的含量。
三、实验仪器与试剂1、仪器分光光度计恒温水浴锅电子天平容量瓶（100ml、50ml、25ml）移液器移液管（1ml、2ml、5ml、10ml）具塞刻度试管（25ml）玻璃棒漏斗滤纸2、试剂蒽酮试剂：称取 02g 蒽酮溶于 100ml 浓硫酸中，当日配制使用。
葡萄糖标准溶液（100μg/ml）：准确称取 01g 无水葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容至 1000ml。
样品溶液：将待测样品经过适当处理后，制成一定浓度的溶液。
四、实验步骤1、葡萄糖标准曲线的绘制取 6 支 25ml 具塞刻度试管，分别编号为 0、1、2、3、4、5。
按表 1 加入葡萄糖标准溶液和蒸馏水。
｜试管编号|0|1|2|3|4|5|｜｜｜｜｜｜｜｜｜葡萄糖标准溶液（ml）｜0|02|04|06|08|10|｜蒸馏水（ml）｜10|08|06|04|02|0|｜葡萄糖含量（μg）｜0|20|40|60|80|100|向各试管中迅速加入 5ml 蒽酮试剂，摇匀后立即放入沸水浴中加热10min，取出后用流水冷却至室温，在 620nm 波长下，以 0 号管为空白对照，测定各管的吸光度值。
以葡萄糖含量为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。
2、样品溶液的制备称取适量的样品，经过粉碎、研磨等处理后，用蒸馏水溶解并定容至一定体积。
若样品溶液中含有较多杂质，可先用滤纸过滤。
3、样品溶液的测定吸取 1ml 样品溶液于 25ml 具塞刻度试管中，加入 4ml 蒸馏水，再迅速加入 5ml 蒽酮试剂，摇匀后立即放入沸水浴中加热 10min，取出后用流水冷却至室温。
实验二 总糖和还原糖的测定1
实验二总糖和还原糖的测定1实验目的：通过化学反应，定量测定果汁、蜂蜜和其他实验样品中的总糖和还原糖含量。
实验原理：总糖是指以糖为主要成分的物质。
而还原糖是指那些具有还原性质，并能够将还原铜离子还原为沉淀的单糖和双糖类糖分。
还原糖在碱性溶液中容易还原铜离子，产生还原铜沉淀，这种化学反应叫做费林试剂反应。
2.费林试剂反应原理费林试剂是由铜离子(Cu2+)、草酰肼和钠碱组成的混合物。
在碱性条件下，草酰肼被还原成草酸，同时将 Cu2+ 还原为 Cu+ 并生成棕色的沉淀。
当样品中加入碱性费林试剂时，还原性糖分（如果糖、葡萄糖等）能够将 Cu2+ 还原为 Cu+，从而生成棕色的沉淀。
这个过程是一个可以定量的过程，衡量沉淀的多少就能够推算出溶液中还原性糖分的含量。
另外，总糖含量的计算是通过使用苏丹III试剂实现的。
实验器材：1.量筒2.移液管3.试管4.洗瓶5.恒温摇床6.温度计1.果汁2.蜂蜜3.标准葡萄糖溶液4.碳酸钠5.草酰肼6.苏丹III试剂7.浓硫酸实验步骤：1.总糖的测定：取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升到试管中，再加入 2 - 3 滴苏丹III 试剂，晃动均匀。
在搅拌下加入 5 - 10 滴浓硫酸，并再次使试管均匀地摇晃。
静止 5 分钟，颜色稳定后，在光谱计中读取样品的吸光度。
取一定量的果汁样品，用量筒量取 10 毫升入 50 毫升锥形瓶中，再加入 15 毫升碳酸钠。
轻轻振摇均匀后，再将 5 毫升草酰肼溶液滴入锥形瓶中。
接下来，用标准葡萄糖溶液调节光密度值，以达到与实验样品相同的吸光度比值。
从光谱计中记录每个样品反应的吸光度。
实验注意事项：1.实验操作要认真，保证实验片刻的稳定，确保实验数据的准确。
2.注意光源是光谱计的重要组成部分，因此要记得把光源打开，以确保性能。
总结：通过总糖和还原糖的测定，我们可以测定样品的果糖、葡萄糖等还原糖分的含量，以及样品中糖类总含量的含量。
这对于分析果汁和蜂蜜等样品非常有用，也为食品行业提供了重要的检测方法和标准。
总糖的测定
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖（水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖），麦芽糖（水解后为2分子葡萄糖）以及可能部分水解的淀粉（水解后为2分子葡萄糖）。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基（—CHO）或酮基（=C=O).测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中，以各种根据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法,蒽铜比色法,斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应复杂，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法准确，但其操作简单迅速，试剂稳定，故被广泛采用.蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在一定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数情况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样就使操作复杂化,限制了其广泛应用。
（一)铁氰化钾法1。
原理样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质，在碱性溶液中能将铁氰化钾还原，根据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下：C6H12O6+6K3［Fe（CN)6] + 6KOH →(CHOH）4·(COOH）2 + 6K4[Fe（CN）6］+ 4H2O滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2．试剂1）1％的次甲基兰指示剂2)盐酸（水解作用）3）10％和30％的NaOH溶液4）1％铁氰化钾（贮存特色瓶，临用前标定）3．标定步骤称蔗糖1.0000g→定容500ml→取此液50ml→于100ml容量瓶→加hcl5ml→摇匀→65—70℃水裕15分钟→取出冷却→用30%NaOH中和→加水于刻度→倒入滴定管中→取10ml1％铁氰化钾于锥形瓶中→加10％NaOH2.5ml加12。
5ml的水加玻璃珠颗粒→加热至沸→保持一分钟→加次甲基兰1滴→立即以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。
糖的测定方法
糖的测定方法对于糖的测定方法有许多，大致可分为三类1.物理法，（1.旋光法, 2 .折光法, 3.比重法,）2.物理化学法,(1.点位法, 2极普法,3.光度法,4.色谱法)3.化学方法,(1.斐林氏法. 2.高锰酸钾法. 3.碘量法.4.铁氰化钾法.5.蒽铜比色法.6.咔唑比色法)共计三大种，在测定其他碳水化合物时，往往是使其水解为糖再进行测定。
一. 总糖的测定食品中的总糖主要指具有还原性的葡萄糖，果糖，戊糖，乳糖和在测定条件下能水解为还原性的单糖的蔗糖（水解后为1分子葡萄糖和1分子果糖），麦芽糖（水解后为2分子葡萄糖）以及可能部分水解的淀粉（水解后为2分子葡萄糖）。
还原糖类之所以具有还原性是由于分子中含有游离的醛基（-CHO）或酮基(=C=O)。
测定总糖的经典化学方法都是以其能被各种试剂氧化为基础的。
这些方法中，以各种依据斐林氏溶液的氧化作用的改进法的应用范围最广。
在这里我们主要给大家介绍铁氰化钾法，蒽铜比色法，斐林氏容量法。
斐林氏容量法由于反应简单，影响因素较多，所以不如铁氰化钾法精确，但其操作简洁快速，试剂稳定，故被广泛采纳。
蒽铜比色法要求比色时糖液浓度在肯定范围内，但要求检测液澄清，此外，在大多数状况下，测定要求不包括淀粉和糊精，这就要在测定前将淀粉，糊精去掉，这样就使操作简单化，限制了其广泛应用。
（一）铁氰化钾法1.原理：样品中原有的和水解后产生的转化糖都具有还原性质，在碱性溶液中能将铁氰化钾还原，依据铁氰化钾的浓度和检验滴定量可计算出含糖量。
其反应为下：C6H12O6+6K3[Fe(CN)6] + 6KOH (CHOH)4(COOH)2 + 6K4［Fe(CN)6］+ 4H2O滴定终了时，稍过量的转化糖即将指示剂次甲基兰还原为无色的隐色体。
2，试剂1）1％的次甲基兰指示剂2)盐酸（水解作用）3）10％和30％的NaOH溶液4）1％铁氰化钾（贮存特色瓶，临用前标定）标定步骤称蔗糖1.0000g定容500ml取此液50ml于100ml容量瓶加hcl5ml摇匀65-70℃水裕15分钟取出冷却用30％NaOH中和加水于刻度倒入滴定管中取10ml1％铁氰化钾于锥形瓶中加10％NaOH2.5ml加12.5ml的水加玻璃珠颗粒加热至沸保持一分钟加次甲基兰1滴马上以糖液滴足至蓝色退去为止，记录用量。
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法
总糖含量的测定方法有以下几种：
1. 酚硫酸法：将样品与酚硫酸溶液反应生成花色素，然后用紫外分光光度计测定吸光度值，并通过标准曲线计算出总糖含量。
2. 比色法：将样品与苯酚溶液和硫酸溶液混合反应，生成芝麻酚，再用紫外分光光度计测定吸光度值，并通过标准曲线计算出总糖含量。
3. 酵母法：将样品加入含糖培养基，然后将培养基放入恒温摇床中培养，通过测定培养液中呼吸产生的二氧化碳量来计算总糖含量。
4. 红外光谱法：将样品与KBr混合制成透明的样品片，然后使用红外光谱仪进行测定，通过分析样品片的红外吸收光谱来计算总糖含量。
5. 高压液相色谱法：将样品通过高压液相色谱仪进行分析，通过分离出的糖类成分来计算总糖含量。
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铁氰化钾滴定法
准确称取经105℃烘干并冷却之后的样品5.000g，用少量水溶解并移入500ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
取出此液50ml于100ml容量瓶中，加盐酸5ml摇匀，置65～70℃水浴上加温30min，取出，迅速冷却至室温。
用30%氢氧化钠溶液中和，加水至刻度，摇匀，倒入滴定管中。
吸取已配制好的铁氰化钾溶液5ml于150ml三角瓶中，加入2.5ml10%氢氧化钠溶液、12.5ml水和洁净的玻璃珠数个，于石棉网上加热至沸腾，保持1min。
然后加入次甲基蓝指示剂1滴，立即以样品液滴定至蓝色消失为止，记录用量。
正式滴定时，先加入比预实验少0.5ml的样品液，煮沸1min，加入次甲基蓝指示剂1滴，再用样品液滴定至无色。
按下述公式计算铁氰化钾的浓度：
式中C：相当于5ml铁氰化钾溶液的转化糖的重量(g)；
V：滴定时消耗样品液的体积(ml)；
W：称取的样品重量(g)；
0.95：换算系数（1g蔗糖可转化为0.95g转化糖）
称取样品5～10g（视含糖量多少而增减），用200ml左右的水洗入250ml容量瓶内（样品中如含有较多的蛋白质、色素、胶体等可逐渐加入20%醋酸铅溶液10～15ml，至沉淀完全为止。
并加入10～15ml10%磷酸二氢钠溶液，至不再产生沉淀为止）。
加水至刻度，摇匀过滤。
吸取滤液50ml于100ml容量瓶中，按上述铁氰化钾标定方法进行转化、中和及滴定（以样液代替糖液，其余操作相同）。
按下述公式计算总糖含量：
式中A：相当于5ml铁氰化钾溶液的转化糖的重量(g)；
V：滴定试样液消耗体积(ml)。
蒽酮比色法测总糖
实验五总糖的测定——蒽酮比色法
一、目的：
1.掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
2.学习植物可溶性糖的一种提取方法。
二、原理：
糖类在较高温度下可被浓硫酸作用而脱水生成糠醛或羟甲基糖醛后，与蒽酮
(C
14H
10
O)脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色。
该物质在620 nm处有最大吸
收，在150 µg/ml范围内，其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在30 µg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器、试剂和材料
1.仪器：电热恒温水浴锅，分光光度计，电子天平，容量瓶，刻度吸管等
2.试剂：
(1)葡萄糖标准液：l00 µg/ml
(2)浓硫酸
(3)蒽酮试剂：0.2 g蒽酮溶于100 ml浓 H
2SO
4
中。
当日配制使用。
3.材料：甜糜秸秆
四、操作步骤
1.葡萄糖标准曲线的制作
取7支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0m1，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸l0 min 取出，用冰浴冷却至室温，在620 nm波长下以第一管为空白，迅速测其余各管吸光值。
以标准葡萄糖含量（µg）为横坐标，以吸光值为纵坐标，作出标准曲线。
2.植物样品中可溶性糖的提取：
将样品剪碎至2 mm以下，105 ºC烘干至恒重，精确称取1~5 g，置于50 ml 三角瓶中，加沸水25 m1，加盖，超声提取10 min，冷却后过滤（抽滤），残渣用沸蒸馏水反复洗涤并过滤（抽滤），滤液收集在50 m1容量瓶中，定容至刻度，得提取液。
3.稀释：吸取提取液2 m1，置于另一50 m1容量瓶中，以蒸馏水稀释定容，摇匀。
4.测定
吸取1 ml已稀释的提取液于试管中，加入4.O ml蒽酮试剂，平行三份；空白管以等量蒸馏水取代提取液。
以下操作同标准曲线制作。
根据A
620
平均值在标准曲线上查出葡萄糖的含量（µg）。
五、结果处理
C ×V总× D
样品含糖量（%）= ─────────────×100
W ×V测×106
其中：C——在标准曲线上查出的糖含量（µg），
V总——提取液总体积（ml），
V测——测定时取用体积（ml），
D——稀释倍数，
W——样品重量（g），
106——样品重量单位由g换算成µg的倍数
六、注意事项：
该法的特点是几乎可测定所有的碳水化合物，不但可测定戊糖与已糖，且可测所有寡糖类和多糖类，包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值，但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，否则会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。
此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时则可避免此种误差。