果蔬中维生素含量的测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
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2，6一二氯靛酚(2,6一二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg溶解
在200ml热蒸馏水中，然后称取2,6一二氯靛酚50 mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250mL，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1 mL抗坏血酸标准溶液于50 mL锥形瓶中，加入l0mL浸提剂，摇匀。同时，另取10mL浸提剂做空白试验，用2,6一二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。
T—2, 6一二氯靛酚染料滴定度，mg/mL。
A—稀释倍数。
W—样品重量。
平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两位数字。
3,5平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/l00g时，不得超过2%，小于20mg /100g时，不得超过5%。
三、实验数据：
组别
体积（ml）
实验设计题目
果蔬中维生素含量的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）
学院
XXX
专 业
XXXX
年级
XXXX
组员
XXXX
一、实验背景及目的：
维生素C又称为抗坏血酸，常存在于新鲜的蔬菜和某些水果中,尤其是在
橙子、枣、辣椒、苦瓜中含量丰富。是维持机体正常生理功能的重要维生素
之一。维生素C抗坏血酸在食品工业中常用做抗氧化剂，维生素C可促进胶原
提取用水洗干净新鲜蔬菜或整个新鲜水果（橙子），放人组织捣碎机中，加20mL浸提剂，迅速捣成匀浆。称取10一40g浆状样品，加入10ml二甲苯进行萃取，用分液漏斗分离出下层溶液，吸取下层溶液10mL,移入100ml容量瓶中。并稀释至刻度，摇匀过滤。
标准液滴定吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中，用已标定过的2,6一
滴定度按下式计算:
T滴定度（mg/mL）=C×V/(V1-V2)
式中:T—每毫升2,6一二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数，
C—抗坏血酸的浓度，mg/mL;
V—吸取抗坏血酸的体积，mL;
V1—滴定抗坏血酸溶液所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL;
V2—滴定空白所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL
3.测定步骤
样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点地加入，并要不断地摇动三角瓶直至呈粉红色，于15s内不消退为终点。
（5）若样品绿叶颜色较深，影响滴定结果观察，可加入白陶土在过滤。白陶土使用前应测定回收率。
五、思考题
1．该法测定抗坏血酸有何不足
以免抗坏血酸被破坏。
(3) 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。
(4) )干扰滴定因素有：
Fe可还原二氯酚靛酚。对含有大量Fe的样品可用8%乙酸溶液代替草酸溶液提取，此时Fe不会很快与染料起作用。
二氧靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。取浸提液10mL作空白对照，结果计算。
维生素C按以下公式计算:
（V-V0）×T×A
维生素C ( mg/100 g)= ----------------------------×100%
W
式中:
V—滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL。
V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL。
定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
2、实验设备及试剂
仪器设备
高速组织捣碎机:8000一12000 r/min。分析天平。滴定管:25 mL、10mL。
容量瓶:100mL。锥形瓶:100 mL、50 mL。吸管:10mL、5mL、2mL、1mL。
第一组
第二组
第三组
V（ 滴定样液时消耗染料溶液的体积）ml
V0（滴定空白时消耗染料溶液的体积）ml
V-V0Байду номын сангаас
(体积改变量)ml
100g橙子中Vc含量mg
四、注意事项
（1) 某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物定容时泡沫太多，可加
数滴丁醇或辛醇消泡。
(2) 样品的提取液制备和滴定过程，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触，
2．用2%盐酸提取样品的目的是什么
3．为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤
为什么
精心搜集整理，只为你的需要
蛋白抗体，具有抗癌的作用；它能参与神经介质、激素的生物合成；能将胆
固醇转化为胆汁酸，使高胆固醇血症患者的胆固醇下降；能将Fe抖还原为Fe，使其易于吸收，有利于血红蛋白的形成；还具有解毒的作用。橙子中防治坏
血病的主要物质为维生素C ,本文以橙子为检测对象,对其营养成分——维生素C的含量进行测定,正确了解营养价值。
目前国内测定维生素c的常见方法有：DPPH法、碘滴定法、紫外分光光
度计法、高效液相色谱法、苯肼比色法等。这些方法各有特点，但操作过程
复杂，较慢，仪器昂贵。Vc易被热、碱、氧和光破坏，根据实验室的条件，
本次实验采用2，6一二氯靛酚滴定法进行实验研究及分析测定。
参考国标法GB6195-1986直接测定橙子中维生素c的含量，其方法简便、
烧杯:250 mL、50mL。漏斗。
试剂及材料
柑橘、圣女果、红枣、胡萝卜。
浸提剂
偏磷酸:2%溶液(W/V)草酸:2%溶液(W/V)
白陶土(或称高岭土):对维生素C无吸附性。
抗坏血酸标准溶液(1 mg/mL):称取100m g(准确至抗坏血酸，
溶于浸提剂中并稀至100 mL, 现配现用。
3、滴定度T测定
快速、结果准确。
二、实验部分
1、实验原理
染料2 ,6一二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原
状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无色，二是受其介质的酸度影响，在碱
性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液，
对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴
在200ml热蒸馏水中，然后称取2,6一二氯靛酚50 mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却定容至250mL，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1 mL抗坏血酸标准溶液于50 mL锥形瓶中，加入l0mL浸提剂，摇匀。同时，另取10mL浸提剂做空白试验，用2,6一二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。
T—2, 6一二氯靛酚染料滴定度，mg/mL。
A—稀释倍数。
W—样品重量。
平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两位数字。
3,5平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg/l00g时，不得超过2%，小于20mg /100g时，不得超过5%。
三、实验数据：
组别
体积（ml）
实验设计题目
果蔬中维生素含量的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）
学院
XXX
专 业
XXXX
年级
XXXX
组员
XXXX
一、实验背景及目的：
维生素C又称为抗坏血酸，常存在于新鲜的蔬菜和某些水果中,尤其是在
橙子、枣、辣椒、苦瓜中含量丰富。是维持机体正常生理功能的重要维生素
之一。维生素C抗坏血酸在食品工业中常用做抗氧化剂，维生素C可促进胶原
提取用水洗干净新鲜蔬菜或整个新鲜水果（橙子），放人组织捣碎机中，加20mL浸提剂，迅速捣成匀浆。称取10一40g浆状样品，加入10ml二甲苯进行萃取，用分液漏斗分离出下层溶液，吸取下层溶液10mL,移入100ml容量瓶中。并稀释至刻度，摇匀过滤。
标准液滴定吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中，用已标定过的2,6一
滴定度按下式计算:
T滴定度（mg/mL）=C×V/(V1-V2)
式中:T—每毫升2,6一二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数，
C—抗坏血酸的浓度，mg/mL;
V—吸取抗坏血酸的体积，mL;
V1—滴定抗坏血酸溶液所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL;
V2—滴定空白所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL
3.测定步骤
样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点地加入，并要不断地摇动三角瓶直至呈粉红色，于15s内不消退为终点。
（5）若样品绿叶颜色较深，影响滴定结果观察，可加入白陶土在过滤。白陶土使用前应测定回收率。
五、思考题
1．该法测定抗坏血酸有何不足
以免抗坏血酸被破坏。
(3) 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。
(4) )干扰滴定因素有：
Fe可还原二氯酚靛酚。对含有大量Fe的样品可用8%乙酸溶液代替草酸溶液提取，此时Fe不会很快与染料起作用。
二氧靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。取浸提液10mL作空白对照，结果计算。
维生素C按以下公式计算:
（V-V0）×T×A
维生素C ( mg/100 g)= ----------------------------×100%
W
式中:
V—滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL。
V0—滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL。
定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。
2、实验设备及试剂
仪器设备
高速组织捣碎机:8000一12000 r/min。分析天平。滴定管:25 mL、10mL。
容量瓶:100mL。锥形瓶:100 mL、50 mL。吸管:10mL、5mL、2mL、1mL。
第一组
第二组
第三组
V（ 滴定样液时消耗染料溶液的体积）ml
V0（滴定空白时消耗染料溶液的体积）ml
V-V0Байду номын сангаас
(体积改变量)ml
100g橙子中Vc含量mg
四、注意事项
（1) 某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物定容时泡沫太多，可加
数滴丁醇或辛醇消泡。
(2) 样品的提取液制备和滴定过程，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触，
2．用2%盐酸提取样品的目的是什么
3．为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步骤
为什么
精心搜集整理，只为你的需要
蛋白抗体，具有抗癌的作用；它能参与神经介质、激素的生物合成；能将胆
固醇转化为胆汁酸，使高胆固醇血症患者的胆固醇下降；能将Fe抖还原为Fe，使其易于吸收，有利于血红蛋白的形成；还具有解毒的作用。橙子中防治坏
血病的主要物质为维生素C ,本文以橙子为检测对象,对其营养成分——维生素C的含量进行测定,正确了解营养价值。
目前国内测定维生素c的常见方法有：DPPH法、碘滴定法、紫外分光光
度计法、高效液相色谱法、苯肼比色法等。这些方法各有特点，但操作过程
复杂，较慢，仪器昂贵。Vc易被热、碱、氧和光破坏，根据实验室的条件，
本次实验采用2，6一二氯靛酚滴定法进行实验研究及分析测定。
参考国标法GB6195-1986直接测定橙子中维生素c的含量，其方法简便、
烧杯:250 mL、50mL。漏斗。
试剂及材料
柑橘、圣女果、红枣、胡萝卜。
浸提剂
偏磷酸:2%溶液(W/V)草酸:2%溶液(W/V)
白陶土(或称高岭土):对维生素C无吸附性。
抗坏血酸标准溶液(1 mg/mL):称取100m g(准确至抗坏血酸，
溶于浸提剂中并稀至100 mL, 现配现用。
3、滴定度T测定
快速、结果准确。
二、实验部分
1、实验原理
染料2 ,6一二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原
状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无色，二是受其介质的酸度影响，在碱
性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红色。用蓝色的碱性染料标准溶液，
对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴