临床微生物:肠杆菌属和沙雷菌属
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++
蜜二糖 + + V V +
-+-++ ++-+
++
蔗糖
++ + V+
-++++ V++-
+-
精氨酸脱
氢酶
-- - --
++V+- -+VV
+-
鸟氨酸脱
羧酶
++ + -V
++++- V+++
++
核糖醇 + - - - -
---V- ----
--
鼠李糖
++ + V+
+++++ ++-+
++
α-甲基-D葡萄糖苷 + - - - V
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光滑型菌落
干燥样菌落
17
18
α-甲基-D葡萄糖苷酶(+)
19
阪崎肠杆菌显色培养基DFI(1000ml)
• 蛋白胨 11g 牛肉膏粉 5g
提供氮源、维生素、 氨基酸和碳源
• 氯化钠 5g 维持渗透压
• 柠檬酸铁铵 1g 硫代硫酸钠 1g 测硫化氢
• 胆盐 1.5g 抑制G+菌
• 5-溴-4-氯-3-吲哚-ɑ-D 葡萄糖苷 0.1g 底物
• 琼脂 15g
最终pH 7.3±0.2
黄绿色菌落
20
21
大肠埃希菌 阪崎肠杆菌
DFI培养基:大肠埃希菌无色菌落,金葡
菌一般不生长。
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通过生化反应鉴定到种
耐药性
肠杆菌科细菌常产生AmpC酶,尤以 阴沟肠杆菌最为突出。
产AmpC酶细菌的治疗,首选4代头孢 (头孢吡肟)和碳青霉烯类抗生素。
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I
M
Vi
C
氧化酶阴性
肠杆菌科 四大生化特;
检验程序
实验室检查
标 本(痰、尿、血液等)
直接涂片: 涂片 染色 镜检
分离培养: 鉴别培养基 (BA、MAC)
可疑菌落 先定科
增菌培养 肉汤
鉴定
药物敏感性试验
(生化、补充试验) 12
肠杆菌属种见鉴定表
生化反应
杰 产高 气维
4
临床意义
肠杆菌属是肠道正常菌群的成员之一 条件致病,医院感染的重要病原菌 可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染 以及败血症等。 在临床检出率最高的是阴沟肠杆菌 和产气肠杆菌。
5
某地临床标本分离的肠杆菌科细菌的分布
百分率%
60 51.8
50
40 30
24.3
20
11
10
0
5 3.5 1.2 0.8 0.2 2.2
阪崎肠杆菌
• 引起严重的新生儿脑膜炎、坏死性结肠炎 和菌血症(类肠毒素物质、LPS)
• 婴儿配方奶粉是主要感染渠道 • 不耐高温,耐干燥、渗透压
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培养特点
血平板形成黄色菌落,菌落形态有2种: 典型的光滑型菌落,极易被接种环移动; 干燥或粘液样菌落,周边呈放射状,不易 被接种环移动,似橡胶状有弹性。
系列1
弗氏肺枸粘大炎橼志沙变肠质肠克酸贺门形杆沙埃雷杆菌菌菌菌雷希伯菌属属属属菌菌菌 其它
临床意义
• 阪崎肠杆菌 • 易致新生儿脑膜炎、菌血症、坏死性肠炎等 • 婴幼儿感染后病死率高达50% • 婴儿配方奶粉中不得检出该菌
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基本特性
形态结构
➢ 形态:G-b,粗短杆菌 ➢ 特殊结构:有周身鞭毛
无芽胞 少数有荚膜
聚团肠杆菌(成团泛菌)
阴沟肠杆菌(E.cloacae) 阪崎肠杆菌(E.sakazakii) 生癌肠杆菌(E.cancerogenus) 阿氏肠杆菌(E.asburiac) 霍氏肠杆菌(E.hormaechei) 帕瑞勒肠杆菌(E.pyrinus) 河生肠杆菌(E.aminigenus)
河生肠杆菌生物群1 河生肠杆菌生物群2
AmpC酶的特征
• AmpC酶是在革兰阴性菌中发现的由染色体 或质粒介导的水解头孢菌素和头霉素的Ⅰ 型β内酰胺酶。
• 产AmpC酶细菌对三代头孢菌素和头霉素耐 药,对四代头孢菌素和碳青霉烯类敏感,且 不被酶抑制剂克拉维酸等所抑制,但其酶 活性可被氯唑西林和硼酸抑制。
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AmpC酶的检测方法
• 头孢西丁三维试验是检测AmpC酶的经典方法; • 除此之外,还有以硼酸化合物为抑制剂检测肺
• 该菌属细菌在使用三代头孢菌素等抗生素治疗时,
-+VV- ++++
++
黄色素 - - - V -
-+--V ----
--
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与其它肠杆菌科细菌主要生化区别
IMViC试验 大肠埃希菌为+ + - 肠杆菌属和肺克为- - + + 动力和鸟氨酸脱羧酶试验 肺炎克雷伯菌为阴性 肠杆菌属多数为阳性
阪崎肠杆菌:GB 4789.40-2010 食品安全国家标准 14
肠杆菌属和沙雷菌属
1
掌握:形态、培养、生化反应 熟悉:致病性
肠杆菌属
(Enterobacter)
3
分类:14个种
产气肠杆菌(E.aerogenes) 杰高维肠杆菌(E.gergoviac) 泰洛肠杆菌(E.taylorac) 中间肠杆菌(E.intermedius) 溶解肠杆菌(E.dissolvens) 神户肠杆菌(E.kobei) 超压肠杆菌(E.nimipressualis)
阴沟肠杆菌形态
8
基本特性
培养特性
➢ 兼性厌氧 ➢ 营养要求不高 ➢ 普通平板上形成大而
湿润的黏液性菌落。 ➢ Mac:乳糖发酵菌落
(红色) ➢ 血平板上不溶血。
阴沟肠杆菌
9
阴沟肠杆菌 血平板菌落
10
基本特性
生化特性
➢ 苯丙氨酸脱氨酶- ➢ 葡萄糖酸盐+
➢ IMVC:- - + +(大多数)
➢ KIA:AA+-或AA--
多为阴沟肠杆菌
不能 耐药 敏感 耐药 敏感
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沙雷菌属
Serratia
[sə′reiʃiə]
分布:
•自然环境中(水、空气、土壤等)常 见的细菌。 •临床最常见的是 黏质沙雷菌(S.marcescens)
临床意义
• 黏质沙雷菌、液化沙雷菌和深红沙雷菌都是已证实 的条件致病菌,其中黏质沙雷菌是医院感染(肺炎、尿 路感染、败血症等)的重要条件致病菌之一。
帕 瑞 勒
河生, 聚 生物群 团1
生 癌
阪 崎
霍 氏
阴 沟
克 沃 尼
河生, 中 神 阿 生物群 间户氏2
溶超 解压
赖氨酸脱
羧酶
++ + --
----- ----
--
山梨醇
+- - V-
---++ ++++
++
VP试验 + + V V +
+++++ +--+
++
七叶苷 + + + V +
++-V+ +V++
炎克雷伯菌和大肠埃希菌的AmpC酶、AmpC Disk、头孢西丁琼脂基础法等。
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头 孢 西 丁 三 维 试 验 检 测 酶
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AmpC
ESBLs与AmpC酶的比较
产酶的细菌
被酶抑制剂抑制 三代头孢菌素 四代头孢菌素 头霉素 碳青霉烯类
ESBLs
AmpC
大肠埃希氏菌、肺 炎雷伯菌克、变形 能 耐药 多敏感,少数耐药 敏感 敏感