不同免疫检验法在乙肝病毒感染血清标志物检验中的应用分析

不同免疫检验法在乙肝病毒感染血清标

志物检验中的应用分析

摘要：乙肝病毒具有极高的感染率，治疗不及时会发展为肝炎及其他疾病，同时是肝癌的危险因素，严重危及患者生命健康。由于乙肝病毒的特殊性，患者可能出现反复感染的情况，在早期的诊断较为困难，多数未有明显的临床表现，要想提高疗效，就要尽早治疗，而要想尽早治疗，就要尽早诊断。目前，针对乙肝病毒感染的检测指标为多项血清标志物，不仅可以用免疫荧光法进行检验，还可以使用化学发光法，或是酶联免疫法，本文便重点对不同免疫检验法效果做了分析。

关键词：不同免疫检验法；乙肝病毒感染；血清标志物检验

乙肝病毒侵入人体后，本身并不会直接导致患者肝细胞病变，但病毒不断的复制、长期的存在，导致肝细胞膜上呈现抗原表达，人体本身的免疫系统需要仔细辨认，进而出现一系列反应[1]。对于免疫功能健康的人群，当免疫系统被激活之后，可以有效识别乙肝病毒，通过攻击已经感染病毒的细胞，将病毒清除，患者表现为急性乙肝；对于免疫功能低下的人群，病毒可以被清除，但并不彻底，进而表现为肝细胞被反复攻击，形成了慢性乙肝；另有部分人群，其免疫功能正处于耐受状态，机体无法识别病毒，也不会攻击被病毒感染的细胞，仅表现为携带病毒[2]。但无论患者处于哪一种状态，都可以通过对血清标志物的免疫检验来确定。

一、常见乙肝病毒感染血清标志物

主要包括3对抗原抗体系统，但实际上有一种很难检测出来，即核心抗原HBcAg，为此其他的标志物也统称为“两对半”，这也是最为常用、普及最广的指标。以下五种中只要有一种检测结果为阳性，就可说明受检者乙肝病毒感染。

（一）HBsAg

HBsAg即乙型肝炎表面抗原，其抗原性非常复杂，若从血清中检测出HBsAg，可考虑早期乙肝，可能恢复正常，也可能持续存在，这是因为肝细胞仍然具备复

制HBsAg的能力。那些无明显临床表现但血中存在HBsAg的人群，便是病毒的携

带者，可能几年、几十年乃至终身都无临床表现，部分则在机体平衡环境被打破

的情况下发展为急性或慢性肝炎[3]。病毒感染后，患者可能测得外周血HBsAg含

量在5ng-600μg/ml，注射HBsAg疫苗之后，便会引起抗HBs应答，进而表现为

血液中两种物质同时存在，通常以酶联免疫吸附法进行测量，简单、方便、快速。

（二）抗HBs

一些急性乙肝患者进入恢复期之后其HBsAg会明显下降、甚至消失，取得代

之的是抗HBs这种中和抗体。抗HBs可以长期的存在人体内，尤其是在注射完HBsAg后产生的抗HBs，可以起到一定的免疫作用，通常以10miu/ml作为临界值，诊断之时以偏低作为免疫失败的判断标准。此外，接种了乙肝疫苗的人群，其血

循环中几乎不会出现其他的血清免疫标志物，一旦出现，则可认定为乙肝患者。

通常情况下，HBsAg以及抗HBs并不会同时存在于血清中，除非是抗体产生早期[4]。

（三）HBeAg

HBeAg即乙肝e抗原，具有可溶性，相较HBcAg而言在二级结构及抗原决定

簇等方面明显不同，但是约有3/4相同的氨基酸序列，出现的时间要晚于HBsAg。通常情况下，HBeAg检验呈阳性，HBsAg结果也为阳性，但在一些特殊情况下，HBeAg表达失败，测定的HBsAg结果变成了阴性，但实际上该受检者可能已经携

带乙肝病毒或表现出症状，为此HBeAg也可作为乙肝病毒复制活跃的判定指标。

（四）抗HBe

即指乙肝e抗体，当血清中HBeAg检测结果转阴时，便会出现抗HBe，二者

用时出现的可能性较低，阳性用以表明病毒的复制有所减少、传染性有所减弱。

（五）抗HBc

从机体免疫应答的角度来看，HBcAg即核心抗原的免疫原性最强，为此最早

出现对HBcAg的免疫应答，进而产生抗HBc，与IgM、IgA等免疫因子共同组成了

总抗HBc，通常用于急性乙肝的诊断，但在恢复期，这些血清标志物水平会明显

降低，甚至消失，若长久未有改善，则表明向慢性乙肝发展，对此，抗HBc常常

被视作既往乙肝病毒感染的标志，而不是一种保护性抗体，需要加以区分。

二、常用乙肝检验免疫检验法

检验医学在近些年迅速发展，免疫检验作为一种重要的方法才得到更多重视，而检验项目的发展对于临床而言不仅可以用于诊断，还可用于指导治疗，有利于

判定患者的预后，涉及到多种疾病的预防，不同中检验方法的原理有所不同，操

作亦有不同，得到的检验结果在效能等方面也有不同，需要具体问题具体分析。

（一）免疫荧光法

针对乙肝病毒感染的检验法为实时荧光定量PCR，即多聚酶链反应技术。该

技术发明于20年前，在近些年技术水平的发展背景下，已经从最早的定性变成

了定量，普遍认为特异性强、灵敏度高，由于可以全封闭、可重复等优点被广泛

应用，在一定程度上促进了分子生物学的发展，实现了免疫学方法以及荧光标记

法的结合，不仅可对抗原加以细胞定位，还可以有效显示其他多种半抗原物质。

从乙肝病毒来看，属于嗜肝DNA病毒科，是目前人类已知可感染的最小的DNA病毒，部分成双链环状。而荧光定量PCR在病毒感染的定量检测中，不仅可以定性，还因实验样本差异小而可以重复，灵敏的发现并迅速的确定病毒DNA序列，通过

动态研究[5]，观测到了潜在病毒复活或持续等情况，还能说明一些抗病毒治疗的

患者是否出现了耐药性，为此也被广泛用于乙肝病毒感染血清标志物的检测。

（二）化学发光法

化学发光就是指在没有光，没有电，没有磁、声、热源激发的前提下，靠化

学（或生物化学）反应而产生了光辐射，简称为CL法。这种分析法自发明、发

展至今已经有30年，非常成熟，其本质是一种微量及痕量分析法，具有高灵敏度，这与其未见外光源散射感染有直接的关系，所用的仪器及设备非常简单，成

本较低，但结果具有很宽的线性范围，为此也被广泛应用[6]。从原理来看，CL法