植物甾醇液相检测方法
植物甾醇标准
植物甾醇标准植物甾醇是一种天然产物，广泛存在于植物体内，包括种子、果实、蔬菜、坚果以及植物油中。
它是甾族化合物的一种，结构类似于胆固醇，具有多种生物活性，被广泛用于保健食品、药物、化妆品等领域。
为了保证植物甾醇产品的质量，在生产过程中必须对其进行标准化控制。
植物甾醇的标准主要包括以下几个方面：一、外观和性状植物甾醇为无色或淡黄色结晶，无臭的粉末，应当无杂质和可见异物。
在成分分析和质量检测中，植物甾醇的颜色和外观也是重要的检测指标之一。
二、含量检测植物甾醇的含量是衡量其质量的重要指标，应当保证其含量的准确性。
一般用气相色谱法（GC）进行测定，同时，也可以使用高效液相色谱法（HPLC）、紫外分光光度法（UV）等方法进行定量测定。
植物甾醇含量的标准应当在产品标签和包装上明确标注，以供消费者参考。
三、微生物和重金属含量植物甾醇产品中的微生物和重金属等有害物质含量也是标准化控制中的重要内容。
产品应当在生产过程中保证无菌环境，避免微生物污染。
同时，还要对产品中的铅、汞、镉等重金属含量进行检测，确保其不超出国家标准的相关要求。
四、加工工艺及存储条件植物甾醇的加工工艺和存储条件也需要标准化控制。
一般来说，植物甾醇在生产过程中需要经过多道工艺，包括溶剂提取、结晶等步骤，每一步都需要严格的质量控制和标准化操作，以保证产品的质量。
此外，还需要对产品的存储条件进行控制，以避免产品受潮、变质等问题，保证植物甾醇的质量和稳定性。
综上所述，如何建立植物甾醇的标准化控制体系是保障产品质量的关键。
建立科学的标准化控制体系，不但有助于保证植物甾醇产品质量的一致性和稳定性，还有利于提高企业的质量管理水平，树立企业的信誉度和市场竞争力。
植物甾醇的高效液相色谱测定研究
植物甾醇的高效液相色谱测定研究
佘家姮
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2012(24)12
【摘要】目的建立油脂中豆甾醇和β-谷甾醇的高效液相色谱-二级管阵列分析方法.方法基于C18反相分离,通过优化色谱分离条件,包括样品溶剂选择、流动相的优化、流速的优化,应用于豆甾醇和β-谷甾醇的色谱分析检测.结果在最优条件下,在20min内实现了豆甾醇和β-谷甾醇基线分离,分离度均达到2.9,应用于油脂中甾醇分析,测得豆甾醇含量为330mg·kg-1,β-谷甾醇含量为675mg·kg-1.结论高效液相色谱-二级阵列管检测器分析油脂中植物甾醇方法简单,效果良好.
【总页数】3页(P47-49)
【作者】佘家姮
【作者单位】福建中医药大学附属第二人民医院,福州,350003
【正文语种】中文
【中图分类】R927.11
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定植物甾醇的研究 [J], 牟德华;赵玉华;朱艳丽;康明丽
2.高效液相色谱法同时测定植物油中角鲨烯、生育酚和甾醇烯 [J], 徐向华;张欣;于瑞祥;方晓明;丁卓平
3.植物甾醇乙酰化过程中高效液相色谱法的测定 [J], 许文林;沙鸥;黄一波;钱俊红;鲁萍
4.高效液相色谱法同时测定植物油中4种甾醇烯 [J], 于瑞祥;杨瑞钰;张欣;方晓明;丁卓平
5.高效液相色谱串联质谱法快速测定烟草中5种甾醇的研究 [J], 曾婉俐; 李雪梅; 向海英; 米其利; 李晶; 刘欣; 蒋佳芮; 许力; 邓乐乐; 张建铎; 杨光宇
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合成植物醇检测方法
合成植物醇检测方法
合成植物醇的检测方法有多种，包括气相色谱法、液相色谱法、质谱法等。
这些方法可以根据不同的植物醇种类和浓度进行选择和应用。
1. 气相色谱法：气相色谱法是一种常用的检测方法，适用于检测低浓度的植物醇。
该方法将植物醇进行气化处理，然后通过色谱柱进行分离和检测。
由于植物醇的沸点较高，需要采用高温气相色谱法进行检测。
2. 液相色谱法：液相色谱法适用于检测高浓度的植物醇。
该方法将植物醇进行溶解，然后通过色谱柱进行分离和检测。
液相色谱法的优点是分离效果好、灵敏度高，可以用于高浓度植物醇的检测。
3. 质谱法：质谱法是一种高灵敏度、高分辨率的检测方法，适用于痕量植物醇的检测。
该方法将植物醇进行电离处理，然后通过质谱仪进行检测。
质谱法可以准确地测定植物醇的分子量和结构信息，适用于复杂样品的分析。
以上是合成植物醇的检测方法，具体选择哪种方法需要根据实际情况进行选择和应用。
甾醇分离研究
(1) 2 -（ 9 -咔唑）乙酰氯主要用于伯胺、氨基酸 的衍生化，具有较高的检测灵敏度，其用于伯醇、 仲醇的衍生化未见报导。 (2)进行柱前衍生化实验不仅灵敏度高，并克服了 谷甾烷醇无发色基团，紫外检测的不足。
谢敏浩 分析化学简报 2006.9
甾醇和甾烷醇衍生物的高效液相分离色谱图
谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇检测灵敏度分别是紫外检测 高效液相色谱的 31、40和 33倍 ,并克服了谷甾烷醇分子 中无发色基团 ,紫外无法检测的不足 ,谷甾烷醇检出限则 为 23.2 nmol/L。
一些研究者发现不用衍生化处理也可以很好的 分离植物甾醇和甾醇酯。例如： Yuji Shimada用DB-lht毛细管柱,程序升温，火 焰离子检测器390℃，直接进样，分离分析了包 含甾醇、甾醇酯、游离脂肪酸、脂肪酸甲酯的样 品。
由于操作温度高，对仪器的要求比较严格，普通 的色谱仪和柱子不能够满足要求，所以在一定程 度GC 直接分离甾醇受到限制。
衍生化气相色谱质谱联用法同时 测定烟叶中多种植物甾醇
实验过程
烟末提取液 皂化：KOH/EtOH
正己烷萃取
……
硅烷衍生化
GC-MS分离检测
向章敏
光谱实验室
2011.9
烟叶甾醇衍生物GC/MS分离色谱图
1-胆甾醇；IS-正三十二烷；2-菜油甾醇；3-豆甾醇；4-谷甾醇； 5-β-香树甾醇；6-豆甾-5，24（28）-双烯-3-β-醇；7-羊毛甾醇
高效液相色谱分离植物甾醇现状
分离主要针对组成简单的样品，对复杂样品和生物 样品的研究较少。 高效液相色谱法易受流动相和处理方法的影响，重 现性较低，同时常规检测器灵敏度低，限制了它在 分离方面的应用
欧洲药典植物甾醇检测方法
PHYTOSTEROLPhytosterolumDEFINITIONNatural mixture of sterols obtained from plants of the genuses Hypoxis. Pin us and Picea.Content: minimum 70.0 per cent of p-sitosterol (dried substance).CHARACTERSAppearance : white or almost white powder.Solubility: practically insoluble in water, soluble in tetrahydrofuran, sparingly soluble in ethyl acetate・IDENTIFICATIONA.Mix 1 ml of acetic anhydride R with 0.5 ml of solution S (seeTests). After the addition of 0.1 ml of sulphuric acid R ared colour is produced which changes rapidly to violet then to blue and finally to green.B.Examine the chromatograms obtained in the assay. Results: theprincipal peak in the chromatogram obtained with the testsolution is similar in retention time tothe peak in the chromatogram obtained with referencesolution (b)・TESTSSolution S. Dissolve 1.0 gin tetrahydrofuran R and dilute to 20 ml with the same solventAppearance of solution. Solution S is clear (227) and not more intensely coloured than reference solution Y6(222、Method II}. Acidity or alkalinity. Shake 0.20 g with a mixture of 4.0 ml of ethyl acetate R and 10.0 ml oi carbon dioxide-free water R for 3 min. Allow the layers to separate・ To the aqueous layer add 0」ml of bromothymol bluo solution RI. If the solution is yellow not more than 0.5 ml of 0.01 M sodium hydroxide is required to change the colour to blue・ If the solution is blue not more than 0.5 ml of 0.01 Mhydrochloric acid is required to change the colour to yellow.Specific optical rotation (227):■ 15 to -28 (dried substance).Dissolve 0.500 g in ethyl acetate R and dilute to 10.0 ml with the same solventAcid value (25・刀：maximum 1A determined on 2,0 gPeroxide value (25・5)： maximum 10 ASaponification value (25®: maximum 3.Other sterols. Examine the chromatogram obtained with the test solution in the assay (Figure 191L-1).Composition of ihe other sterols;一cholesterol: maximum 0.5 per cent,-brassicasterol: maximum 0.5 per cent,-campesterol: maximum 15.0 per cent,-campestanol: maximum 5,0 per cent,一stigmasterol\ maximum 5.0 per cent,一sitostanoh maximum 15.0 per cent,-L7-stigmastenoL maximum 5.0 per centLoss on drying (2.232): maximum 4.0 per cent, determined on 0.250 g by drying in an oven at 100-105 Q C for 2 h・Total ash (2476): maximum 0.5 per cent, determined on 1.0 g.ASSAYGas chromatography (2.2.28} \ use the normalisation procedure. Test solution. Dissolve 0.100 g in tetrahydro furan R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. Introduce 100 p) of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of 1-methylimidazole R and 1.0 ml of heptafluor(>N-methyl^lrimethi/ls[lyl)butanamide R, close the flask tightly and heat to 10() °C for 15 min. Allow to cook Reference solution (a 丿.Dissolve 25 mg of ^sitosterol R and 25 mg of sitostanoi R in tetrahydrofuran R and dilute to 10.0 ml with the same solvent. Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of l・m€thy【imidQ2olQ and L0 ml of h0ptdfluoFdN・m凶hyLNJtYimgthylsilyUbutaYiamidoR. Close the flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to cool. Reference solution ⑹.Dissolve 0.100 g of J^sitost^ol R in tetrahydrofuran R and dilute to 10>0 ml with the same solvent Introduce 100 pl of this solution into a 3 ml flask and evaporate to dryness under nitrogen R. Add 100 pl of a freshly prepared mixture of 50 pl of 1 -methylimidazote R and 1.0 ml of heDtafluoFO・N・7nethyl・N・(trimethykily【)bulcmanii(l€ R. Close the flask tightly and heat to 100 °C for 15 min. Allow to coolColumn:- material: quartz,-stze\ f= 25 m, 0 = 0.3 mm,-stationary phase: poli/(dimethyl}(dip虑砂)(小加・nyl)siloxane R (1 pm).Carrier gas\ hydrogen for chromatography幷.Flow rate: 2 ml/min.Split ratio: 1:20.Temperature;-column: 280 °C,一injection port and detector: 300 C C.Detection: flame ionisation・Injection: 1 pl.Relative retentions with reference to p-sitosterol (retention time 二about 16 min): cholesterol = about 0.7; brassicasterol = about 077; campe$terol = about 0.84； campestanol = about 0.86; stigmasterol = about 0.9; sitostanol = about 1.02; A7-stigmastenol about 1.1.System suitability\ reference solution (a):— resolution; minimum of 1.0 between the peaks due to ^sitosterol and sitostanol.STORAGEIn an airtight container, protected from light.2. brassicasterol 6. |3-sitos terol3.campes⑹ol4.campestanol 7.sitostanol8.A7-5ti^mastenolFigure 1911.-1.・-Assay of phytosterol (trtmethylsilane derivatives)1.cholesterol5. stigmasterol。
植物甾醇类的鉴别方法
植物甾醇类的鉴别方法
植物甾醇类的鉴别方法
一、分离分析
1、气相色谱
用此方法对植物甾醇进行分离分析，需要在气相色谱仪上，采用高波长紫外检测器，使用苯溴醚或乙腈等强碱溶剂在一氮或氩气中进行熔解。
根据得到的植物甾醇的峰面积、高度和形态，来鉴别植物甾醇的种类。
2、非气相色谱
非气相色谱是采用液相色谱（HPLC）的方法，使用抗污染流动相，结合植物甾醇溶剂分解过程，用氯仿-甲醇（4∶1）为流动相，分析植物甾醇的各种差异性。
3、折射率测定
使用体折射仪，用溶剂萃取植物甾醇，用折射率测定的方法，测量溶解液的折射率和植物甾醇溶解液的折射率，可以根据植物甾醇溶解液的折射率，来鉴别植物甾醇的种类。
二、化学鉴别
1、表观鉴别
确定植物甾醇的表观鉴别，可以通过几种植物甾醇的物理性质，如比重，折光度，溶解性，色谱，来鉴别植物甾醇的种类。
2、熔点测定
采用熔点测定的方法，将酸性、碱性植物甾醇加入到熔点仪的熔
池中，用不同的温度，可以测定出植物甾醇的熔点，从而鉴定植物甾醇的种类。
3、溶解度测定
由于不同的植物甾醇在不同溶剂中的溶解度是不同的，因此，可以根据植物甾醇在不同溶剂中的溶解度来鉴定植物甾醇的种类。
4、酸性测定
对植物甾醇进行酸性测定，使用盐酸等有机碱，将植物甾醇加入到含有有机酸的溶剂中，测定植物甾醇的酸性，根据植物甾醇的酸性可以鉴别植物甾醇的种类。
5、红外光谱
在红外光谱分析中，使用紫外分光光度计，以不同的波长分析植物甾醇，可以根据植物甾醇的吸收光谱特点，来鉴定植物甾醇的种类。
植物甾醇酯的高效液相色谱分析
植物甾醇酯的高效液相色谱分析作者：张秋丰来源：《学园》2013年第34期【摘要】本文研究了植物甾醇酯、植物甾醇和脂肪酸酯的定性、定量分析方法。
采用正相高效液相色谱法，紫外检测器，结果表明：三种物质10min内出峰，分离效果好，此方法快速、准确、简便。
【关键词】植物甾醇植物甾醇酯高效液相色谱【中图分类号】G642 【文献标识码】A 【文章编号】1674-4810（2013）34-0048-02游离植物甾醇在油脂中溶解性较差，在体内很难被吸收利用，造成使用上的困难。
与植物甾醇相比，植物甾醇酯具有更优的亲脂性和更佳的降胆固醇效果，是一种新型功能性食品添加剂。
目前，国内外的少数厂家已能使用植物甾醇等原料合成植物甾醇酯，对于合成过程中跟踪检测的分析方法却未见报道。
一仪器与试药Agilent 1100型液相色谱仪，Agilent 1100型紫外检测器；电子天平；梅特勒托利多。
植物甾醇酯对照品购于cognis生物制品有限公司，经HPLC测定纯度为95.31%，所用试剂均为色谱纯。
二实验方法1.对照品溶液的制备称取Cognis甾醇酯（95%）对照品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mg/mL 的对照品溶液，摇匀，经0.45µm微孔滤膜过滤，即得对照品储备液，备用。
2.样品溶液的制备向装有温度计的250mL四口烧瓶中加入一定量的植物甾醇和脂肪酸甲酯，油浴加热，机械搅拌，温度达到90℃后继续反应1h，再加入一定量的甲醇钠，而后恒温反应4h，最后将热的反应液转入漏斗中，经水洗、乙醇洗涤，脱溶剂后得到样品。
称取合成样品50mg溶于50mL流动相，配制成质量浓度为1mg/mL的样品溶液，摇匀，经0.45µm微孔滤膜过滤，即得样品储备液，备用。
3.色谱条件色谱柱：硅胶正相柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：正己烷∶异丙醇∶甲醇=98∶2∶1.5%；流速：1mL/min；检测波长：210nm；进样量：20μL。
甾醇含量测定方法
甾醇含量测定方法甾醇是一种很重要的物质呢，那怎么测定它的含量呀？一种常见的方法是比色法哦。
这就像是给甾醇找个特别的颜色伙伴来“暴露”它的量。
先把含有甾醇的样品进行一些处理，让甾醇能乖乖地和一些试剂发生反应，这些试剂就像小侦探一样，一碰到甾醇就会产生颜色变化。
然后用比色计去测量这个颜色的深浅，颜色越深呢，往往就意味着甾醇的含量越高。
就像我们看一杯果汁的颜色浓淡来猜里面果汁的多少一样，是不是很有趣呀？还有气相色谱法呢。
这个方法就像是给甾醇安排了一场赛跑。
把样品中的甾醇提取出来后，让它在气相色谱仪这个特殊的“跑道”里跑起来。
不同的物质在这个“跑道”里跑的速度不一样，甾醇也有它自己独特的速度。
通过检测它到达终点的时间和峰面积等信息，就能算出甾醇的含量啦。
这就好比在一群小动物跑步比赛里，我们通过观察某只小动物跑的速度和它在赛道上留下的痕迹大小，就能知道它有多少只一样。
高效液相色谱法也是测定甾醇含量的得力助手。
这个方法有点像让甾醇坐一趟特殊的列车。
把样品处理好，甾醇就被送上高效液相色谱仪这个“列车”啦。
在这个过程中，甾醇会根据自己的特性在柱子里被分开，然后被检测出来。
根据检测到的信号强度等数据，就能知道甾醇的含量是多少了。
就好像我们把一群小朋友按照不同的特征分到不同的车厢，然后通过数每个车厢里小朋友的数量来知道总的小朋友数量一样呢。
另外，还有重量法。
不过这个方法就比较“实在”啦。
就是把甾醇从样品里提取出来，然后直接称重。
就像我们从一堆东西里把我们想要的东西挑出来，然后放在秤上称一称，看看有多少。
不过这个方法可能会稍微麻烦一点，而且有时候准确性可能会受到一些因素的影响呢。
反相高效液相色谱法测定花生中的β-谷甾醇
摘要 ： 建立 了测定花生 中 １ ３一 谷 甾醇的反相高效液相色谱 法。样 品经过氢氧 化钾一乙醇皂 化提取后 ， 采用高效 液相色谱法 进行含 量测
定 。色谱 条件为 ： ｃ １ ８ 柱（ ４ ． ６ ｎ ｍ ｌ × ２ ５ ０咖 ， ５ ｍ ） ； 流动相为 乙腈／ 异丙醇 ＝ ５ ０ ／ ５ ０ ； 流速 １ ． ０ ｍ Ｌ ／ ｍ ｉ ｎ ； 紫外 检测器 ： 波长 ２ １ ０ ｎ ｌ ｎ ； 进样 量 １ ０ １ ￣ Ｌ ， 外标法定量。结果表明 ： Ｂ 一 谷 甾醇在 ５ ． ０～ ２ ５ ０ ｍ ｇ ／ Ｌ范围内线性 良好 ， 线性相关系数为 ０ ． ９ ９ ９ ９ ， 方法 回收率为 ９ ０ ％～ １ ０ ３ ％， Ｒ Ｓ Ｄ 为３ ． ７ ４ ％， 检出限为 ３ ． ０ｍ ｓ ／ ｋ ｇ 。本方法准确、 重复性好 、 灵敏度高 ， 可用于花生中 Ｂ一 谷甾醇的含量测定 。
ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ． Ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｐ ａ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｂ—ｓ ｉ ｔ ｏ ｓ ｔ ｅ ｏ ｒ ｌ Ｗ ｓ ａ ｃ ｏ ｎ ｄ ｕ ｃ ｔ ｅ ｄ ｏ ｎ ａ Ｃ ｌ ８ ｃ ｏ ｌ ｕ ｍ ｎ（ ４ ． ６ ｍ ｍ ×２ ５ ０ ｍ ｍ， ５ ｍ ）ｗ ｉ ｔ ｈ ｔ ｈ ｅ ｍｏ ｂ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｓ ｅ ｏ ｆ ａ ｃ ｅ ｔ ｏ ｎ ｉ ｔ ｒ ｉ ｌ ｅ ａ ｎ ｄ ｉ ｓ ｏ ｐ ｏｐ ｒ ａ ｎ ｏ ｌ （ ５ ０ ／ ５ ０ ） ． Ｔ ｈ ｅ ｌ ｆ ｏ ｗ ｒ ａ ｔ ｅ ｗ ａ ｓ １ ． ０ ｍＬ ／ ｍ ｉ ｎ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｖ ｏ ｌ ｕ ｍ ｅ ｗ ａ ｓ １ ０ １ ￣ Ｌ ．Ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗ ａ ｖ ｅ ｌ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ
高效液相色谱法测定花生中β-_谷甾醇的含量
分析检测高效液相色谱法测定花生中β-谷甾醇的含量闫超杰1，章 程1，张旭东1，王诗琦1，孙晓东2*（1.锦州海关综合技术服务中心，辽宁锦州 121013；2.大连民族大学 环境与资源学院，辽宁大连 116600）摘 要：目的：建立超声波辅助萃取-高效液相色谱法快速检测花生中β-谷甾醇的分析方法，并应用该方法对辽宁、山东和河南3个花生种植大省不同品种花生中β-谷甾醇的含量进行分析测定。
方法：样品经85%乙醇溶液（乙醇∶水=85∶15，V∶V）超声提取，离心，中性氧化铝去色素和杂质后，经Agilient ZORBAX SB-C18色谱柱分离，二极管阵列检测器检测，外标法定量。
结果：β-谷甾醇在1.0～100.0 mg·L-1范围内与峰面积线性关系良好，回归方程为y=10.070x+2.348（r=0.999 9）；平均加标回收率为88.5%～106.9%，相对标准偏差为2.31%～4.73%（n=6），检出限为0.5 mg/100 g。
运用该方法对30个花生样品进行检测，不同品种花生β-谷甾醇含量在31.6～77.0 mg/100 g。
结论：该方法简单快捷、重复性好、准确度和灵敏度较高，适用于花生中β-谷甾醇的快速检测。
关键词：花生；β-谷甾醇；超声波辅助萃取；高效液相色谱法（HPLC）Determination of β-Sitosterol in Peanuts by High PerformanceLiquid ChromatographyYAN Chaojie1, ZHANG Cheng1, ZHANG Xudong1, WANG Shiqi1, SUN Xiaodong2*(prehensive Technical Service Center of Jinzhou Customs, Jinzhou 121013, China; 2.College of Environmentand Bioresources, Dalian Minzu University, Dalian 116600, China)Abstract: Objective: To establish a rapid analytical method for the determination of β-sitosterol in peanuts by ultrasonic-assisted extraction-high performance liquid chromatography (HPLC).The method was applied to determine the contents of β-sitosterol in different peanut varieties from Liaoning, Shandong and Henan province. Method: The samples were extracted with 85% ethanol (ethanol∶water=85∶15, V∶V) by ultrasonic, after centrifugation and removing pigments and impurities with neutral alumina, separated by Agilient ZORBAX SB-C18 column, and then detected by diode array detector, and quantitated by external standard method. Result: β-sitosterol showed a good linear relationship with peak area in the range of 1.0～100.0 mg·L-1, and the regression equation was y=10.070x+2.348 (r=0.999 9). The average recoveries were 88.5%～106.9%, with RSD of 2.31%～4.73%, and the limit of detection was 0.5 mg/100 g. The method was used to detect 30 peanut samples, the content of the content of β-sitosterol in different peanuts ranged from 31.6 mg/100 g to 77.0 mg/100 g. Conclusion: The method has the advantages of simple, convenient, good repeatability, high accuracy and sensitivity, which can meet the requirements of rapid analysis of β-sitosterol in peanuts.Keywords: peanut; β-sitosterol; ultrasonic-assisted extraction; high performance liquid chromatography (HPLC)花生是我国重要的油料和经济作物[1]，目前我国花生种植面积排全球第二位，年总产量居世界首位[2-3]。
高效液相色谱法测定植物甾醇的研究
豆甾醇 （ｉ ａ ｅ １ ｓｇ ｓ ｒ） ｔｍ ｔ ｏ 、菜油甾醇 （ ｍ ｅｔ ｏ 和菜 ｅ ｐｓ ｒ ａ ｅＤ ｂｓ ｉ ｔ ｏ ｒ ｃ ｒ） ｓ 谷甾醇及豆甾醇结 相 ，流动 相为 甲醇 ： 水 （ 积 比为 １０： ） 体 ０ ４ ，检 籽甾醇 （ ａｓ ａ ｅ １。其中 口一 测 波 长 ２ ５姗 ，柱 温 ２ ℃ ，流 速 １ Ｄ ５ ． ｍＬ／ ｉ 构式如图 ｌ ０ ｍ ｎ， 所示 ：
图 １ Ｊ一谷甾醇和豆甾醇结构式 Ｂ
ｇａ ｈｃ ｍｅｈ ｄ ｓ ａ ｐｉｄ ｈ ｏ ｔｇａ ｈ ｃ ｃ ｎ ｉ ｒｐ ｉ ｔ ｏ ｓｗａ ｐ ｌ ．Ｃ ｒｍａｏ ｐ ｉ ｏ ｄ— ｅ ｒ
甾醇通常为具有旋光性的片状或粉末状 白色固 体 ，经溶剂结晶处理 的甾醇为 白色鳞片状或针状 晶
食 品 工 程
Ｆ ＯＯＤ Ｅ ＮＧＩ ＥＲＩ ＮＥ ＮＧ
２Ｏ Ｏ ７年第 ｌ 期 ３ 出版 月
高 效 液 相 色 谱 法 测 定 植 物 甾 醇 的 研 究
Ｄｅ ｅ ｍｉａ ｉｎｏ ｈ ｔ ｓｅ ｏ ｙ ＨＰＬ ｔ ｒ ｎ ｔ ｆ ｙｏ ｔ ｒ ｌ ｏ ｐ ｂ Ｃ
－
牟德华 赵玉华
进样 量 ２ ｉＬ ０ｔ 。建立 了用超 临界 Ｃ ： Ｏ 萃取技 术从 大 豆 油 脱 臭馏 出物 中提 取 的 植 物 甾 醇 的反 相 高效 液相 色谱分析 方法 。该方法准确、快速 、重现性
好。
Ｈ Ｈ３ Ｈ３
关键词
植物 甾醇
高效液相 色谱法
脱臭馏 出物
一
谷甾醇
ｗ ｔ ｔ Ｎｏ ａ Ｐ ｋ Ｃ ８ Ｃ ｌｍｎ ａ ｈ ｏｉ ｈ ｅ ｉＩ Ｉ ５／ ｍ ｖ － ａ １ ｏｕ ｔｅ ｓｌ ｐ ａ ； ｓ ｄ ｓ
植物油中甾醇的测定
植物油中甾醇的测定植物油是人们日常生活中常用的食用油之一，其中富含多种营养物质，包括甾醇。
甾醇是一类重要的生物活性物质，具有多种保健功效，如降低胆固醇、抗氧化等。
因此，准确测定植物油中甾醇的含量对于评估其营养价值和质量具有重要意义。
甾醇是一种具有四环结构的脂肪醇，广泛存在于植物中。
常见的甾醇有胆固醇、β-谷甾醇、α-麦芽甾醇等。
在植物油中，胆固醇是最常见的一种甾醇。
测定植物油中甾醇的方法有多种，其中较为常用的是高效液相色谱法。
该方法利用色谱柱对样品中的甾醇进行分离，并通过检测器检测其浓度。
在进行测定之前，首先需要对植物油样品进行前处理，包括提取和酯化等步骤。
将一定量的植物油样品加入适量的有机溶剂中，如正己烷。
然后，进行超声波提取或磁力搅拌提取，以使样品中的甾醇充分溶解到有机相中。
接下来，将提取液进行离心分离，收集上层有机相。
然后，将有机相进行酯化反应。
酯化反应是将甾醇与酯化试剂反应生成甾酯的过程，常用的酯化试剂有三氟甲磺酸三甲酯（TFAMT）或三氟甲磺酸四丁酯（TFABT）。
在酯化反应中，一般需要加入催化剂，如硫酸或氯化铝，以促进反应的进行。
完成酯化反应后，将反应液进行萃取。
一般采用有机溶剂，如正己烷或乙酸乙酯，进行反萃取，以将甾酯从反应液中提取出来。
然后，对提取液进行浓缩，得到甾酯样品。
接下来，采用高效液相色谱仪进行甾酯的测定。
色谱柱常采用C18柱，流动相为甲醇/水混合溶液。
通过调节流动相的组成和流速，使甾酯在色谱柱上进行分离。
然后，通过紫外检测器对甾酯进行检测，根据甾酯的峰面积或峰高来计算其浓度。
需要注意的是，测定植物油中甾醇的方法中，样品的制备和测定条件的选择都会对测定结果产生一定的影响。
因此，在进行测定时，需要严格控制实验条件，并与标准方法进行比对，以确保测定结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱法是测定植物油中甾醇含量的常用方法。
通过对植物油样品的提取、酯化和色谱分离，可以准确测定植物油中甾醇的含量，为评估植物油的营养价值和质量提供科学依据。
甾醇实验报告
甾醇实验报告
实验目的：
掌握提取甾醇的实验方法，熟悉测定甾醇纯度的方法，了解甾醇的物理性质和化学性质。
实验原理：
甾醇属于四环结构的多元醇类，可从动植物组织中提取得到。
实验采用溶剂萃取法和分离纯化法获取甾醇，通过熔点测定来测定甾醇的纯度。
实验步骤：
1. 取50克猪脾组织，粉碎成细末，加入150毫升氯仿，加热回流2小时，过滤滤渣。
2. 取出上层的氯仿液，再加入100毫升浓盐酸，混合均匀。
3. 从混合液中分离出水相，将有机相中的氯仿通过蒸馏脱除。
4. 最后得到的甾醇需进行熔点测定来测定其纯度。
实验结果：
实验中得到纯度为98.5%的甾醇，熔点为136℃。
实验分析：
实验使用溶剂萃取法和分离纯化法，使得甾醇得到了有效的提取和纯化，最终得到纯度较高的甾醇，达到了实验要求。
熔点测定也可以用于判断甾醇的纯度，根据熔点的高低可以初步判断样品的纯度，实验结果也印证了这一点。
实验结论：
实验成功地提取和纯化了甾醇，并使用熔点测定法得到了较高纯度的甾醇。
实验结果具有一定的实用价值。
植物甾醇液相检测方法
本方法适用于保健食品中植物甾醇的测定本方法谷甾醇和豆甾醇的检出限为0.02μg本方法线性范围为0.1~0.5mg/ml1.方法提要试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱C18柱分离，用紫外检测器检测，以外标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。
2.仪器高效液相色谱仪，带紫外检测器。
3.试剂除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
（1）异丙醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯（3）乙醇。
（4）β—谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取β-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g，移入10ml容量瓶中，加入乙醇，超声波振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为浓度1.0mg/ml的标准储备液。
4.测定步骤（1）样品处理：称取均匀样品0.25g（精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45μm微孔膜过滤，清液待分析。
（2）标准工作曲线绘制：精度吸取β-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml）1.0、2.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。
分别取10μl标准工作系列溶液进样分析，以测得的β-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对β-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线。
（3）色谱条件色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：乙腈＋异丙醇（70＋30，V/V）。
流速：1ml/min。
柱温：室温。
紫外检测波长：210nm。
（4）样品测定：取样品滤液10μl进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外标峰面积法进行定量。
5、结果计算根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式的样液中β—谷甾醇和豆甾醇含量，计算出样品中的含量。
样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量按下式进行计算X式中X-样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；C—进样液中β—谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；V—样品的定容体积（ml）；m—样品的取样量（g）。
植物油中甾醇含量快速测定方法
摘 要 在 ＧＢ／Ｔ ２５２２３—２０１０基础 上 ，对植 物油 中 甾醇含 量 的检 测 方法进 行 了简化 和优 化 ，并 对优 化后 的 方法进行 了重复性 、比对 和准确 率 实验 。实验 结果表 明 ：选 用胆 固醇 为 内标 物 ，氧化 铝 层析提 取 不 皂化 物作 为待 检样 品 ，样 品 中不加 硅 烷 化 试 剂 ，使 得 方 法 更 简便 ，快 速 ，成 本 更 低 。 简化 后 的 方 法 实验 重 复 性 ＲＳＤ 为 ０．０１２％ ～３．４％ ；豆 甾醇加标 实验 回收 率为 ９４．０７％ 一１０４．０％ ，说 明该 方 法的重 复性和 准确 性 良好 ，能较 好 地 应用在植 物 油 中 甾醇含 量 。
基金项 目：菜籽适度加 工技 术与智 能化装 备研 发与示 范 （２０１６ ＂ＹＦＤ０４０１４０１）
收稿 日期 ：２０１７—０９—２９ 作者简介 ：邹燕娣 ，女 ，１９８５年出生，硕士 ，植物油脂检测技术
度 ，即得浓 度为 ０．４７１ ８ ｍｇ／ｍＬ。 １．３ 仪器 分析 条件
活性 成分 ，具有 十分 重要 的生 理功 能 ，如 降胆 固醇浓 水浴锅 ；１０ ｅｍ ×１０ ｃｍ 普 通硅 胶 薄 层 板 ；碘单 质 ；玻
度 、抗 癌 作用 、基体抗 氧 化 、预 防心 脑 血管 、免 疫 调 节 璃展 开槽 ：合 适 １０ ｅｍ ×２０ ｃｍ 薄 层 板 的使 用 ；展 开
２０１８年 ５月 第 ３３卷 第 ５期
中 国粮 油 学 报
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｃｅｒｅａｌｓ ａｎｄ Ｏｉｌｓ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ
植物甾醇高效液相色谱法正相和反相检测方法对比
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｚｈ ｅ ｊ ｉ ａ ｎ ｇ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ａｇ ｒ ｉ ｃ ． ＆ Ｌｉ ｆ ｅ Ｓ ｃ ｉ ． ）
ｃ ａ ｍ ｐｅ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ ，ａ ｎｄ ｒ ａ ｐｅ ｓ ｅ ｅ ｄ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ１ ． Ｔｈｅ ｙ ｈ ａｖ ｅ ａｔ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｇｒ ｏｗｉ ｎ ｇ ａ ｔ ｔ ｅ ｎｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｗｉ ｎｇ ｔ ｏ ｔ ｈｅ ｉ ｒ ｂ ｅ ｎｅ ｆ ｉ ｃ ｉ ａ ｌ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ． Ｈ ｉ ｇｈ
醇 出峰 时 间 比 反 相 体 系快 ， 可 节 约 实验 时 间 ． 说 明在不要求各种 甾醇分离效果的前提下 ， 正 相 柱 更 适 合 用 于植 物
甾 醇检 测 ．
关键词
植 物 甾醇 ；高 效 液相 色谱 法 ；正相 色谱 柱 ； 反 相 色谱 柱 ；内标 法 ０ ６ ２ ９ ． ２ １ 文献 标 志 码 Ａ
相 为纯甲醇， 柱温３ ５℃ ， 流速 １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ， 检 测波长 ２ ０ ５ ｎ ｍ．结 果 表 明 ： 混 合 甾 醇在 反 相 柱 分 离下 出现 ３个 峰 ，
各 种 甾醇 的 分 离度 好 ； 正相 柱 的 甾醇 只 有 １个 峰 ， 但 样 品 在 正 相 体 系 中 的 溶 解 性 高 于反 相 体 系 ， 而且正相 体 系甾
植物 甾醇 高效 液 相 色 谱 法 正相 和 反 相检 测 方 法对 比
阮 慧 娜 ，刘 松 柏
（ 浙 江 大学 生 物 系统 工程 与食 品科 学 学 院食 品科 学 与 营 养 系 ， 杭州 ３ １ ０ ０ ５ ８ ）
植物油中甾醇含量快速测定方法
植物油中甾醇含量快速测定方法朋友们！今天咱来唠唠一个挺有意思的事儿——怎么快速测定植物油里甾醇的含量。
这可不是啥高深莫测、遥不可及的学问，咱就用接地气的方式把它整明白。
首先呢，咱得知道甾醇这玩意儿在植物油里可是个“小明星”。
它对咱人体健康那是有不少好处的，就像一个默默守护咱们身体的小卫士。
但是呢，要想知道植物油里到底有多少这个“小卫士”，那就得有个靠谱的测定方法。
咱先说说这个比色法。
这就好比给甾醇来一场“色彩派对”。
把植物油样品处理处理，让甾醇和一些特定的试剂混合，这时候就会发生奇妙的化学反应，产生特定的颜色。
然后呢，咱就可以用仪器去测测这个颜色的深浅。
颜色深，那就说明甾醇含量可能比较高；颜色浅呢，含量可能就低一些。
就像是看一个人的脸色，脸色红润可能状态就好，脸色苍白可能就不太妙，这甾醇的“脸色”也能给咱透露不少信息呢。
还有气相色谱法，这就像是给甾醇来一场“赛跑比赛”。
把植物油里的各种成分都送到一个特殊的赛道上，也就是色谱柱里。
不同的成分在这个赛道上的奔跑速度不一样，甾醇也有它自己独特的速度。
通过检测它跑出来的时间和信号强度，就能算出它在植物油里的含量啦。
这就好比在一群人里，每个人跑步速度不一样，咱通过观察谁先跑到终点、跑的状态咋样，就能把他们区分开，甾醇也能在这场“赛跑”中被咱准确识别出来。
不过呢，这些方法虽然都挺不错，但要想快速测定，还得注意一些小窍门。
比如说，样品的预处理可不能马虎，就像做饭前得把食材准备好一样。
要把植物油处理得干净、均匀，这样测出来的结果才准确。
而且在操作仪器的时候，也得像对待宝贝一样小心翼翼，按照操作规程来，不然一个不小心，可能就会得到不准确的结果，那可就白忙活啦。
另外，咱还可以多做几次平行实验。
就好比你做一道新菜，多做几次，味道可能就会越来越好，掌握得也更精准。
做平行实验也是这个道理，多测几次，取个平均值，这样得到的甾醇含量结果就更可靠啦。
总之呢，测定植物油中甾醇的含量虽然听起来有点复杂，但只要咱掌握了正确的方法和小窍门，就能又快又准地把这个事儿搞定。
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本方法适用于保健食品中植物甾醇的测定
本方法谷甾醇和豆甾醇的检出限为0.02μg
本方法线性范围为0.1~0.5mg/ml
1.方法提要
试样中的谷甾醇和豆甾醇经提取后在高效反相色谱C18柱分离，用紫外检测器检测，以外标法定量谷甾醇和豆甾醇的含量。
2.仪器
高效液相色谱仪，带紫外检测器。
3.试剂
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
（1）异丙醇：色谱纯。
（2）乙腈：色谱纯
（3）乙醇。
（4）β—谷甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（5）豆甾醇对照品：Fluka公司（纯度≥90%）
（6）谷甾醇和豆甾醇混合标准溶液：精度称取β-谷甾醇和豆甾醇对照品0.0100g，移入
10ml容量瓶中，加入乙醇，超声波振荡助溶，并用乙醇定容到10ml，此为浓度1.0mg/ml的标准储备液。
4.测定步骤
（1）样品处理：称取均匀样品0.25g（精确到0.1mg），置于50ml容量瓶中，加入40ml乙醇，超声波振荡60min取出，冷却后用乙醇定容至刻度，摇匀后经0.45μm微孔膜过滤，清液
待分析。
（2）标准工作曲线绘制：精度吸取β-谷甾醇和豆甾醇标准溶液（1.0mg/ml）1.0、2.0、5.
0ml，分别置于10ml容量瓶中，用乙醇定容，摇匀。
分别取10μl标准工作系列溶液进样分析，以测得的β-谷甾醇和豆甾醇的峰面积，分别对β-谷甾醇和豆甾醇的浓度绘制标准曲线。
（3）色谱条件
色谱柱：ODSC18液相色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：乙腈＋异丙醇（70＋30，V/V）。
流速：1ml/min。
柱温：室温。
紫外检测波长：210nm。
（4）样品测定：取样品滤液10μl进液相色谱仪分离测定，根据色谱峰保留时间定性，以外
标峰面积法进行定量。
5、结果计算
根据待测样品色谱峰面积，由标准曲线回归方程式的样液中β—谷甾醇和豆甾醇含量，计算出样品中的含量。
样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量按下式进行计算
X
式中X-样品中β—谷甾醇和豆甾醇含量（g/100g）；
C—进样液中β—谷甾醇和豆甾醇的浓度（mg/ml）；
V—样品的定容体积（ml）；
m—样品的取样量（g）。