猪皮组织胶原原纤维的三维结构

２ 结果
２ Ｉ 原 纤维 的表 面结 构 ． 图 １为扫 描 电镜 下 显示 的 猪皮 原纤 维 的周 期性 横纹 结构 和 其表 面形 态 。该 结 果 显示 原纤 维 的 表面 为周 期性 峰 谷 ， 其周 期 约为 ６ ｍ ， 电子 显微 镜 观 ７ｎ 与
察到 的 明暗周 期 性横 纹 较 为吻合 。
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图 Ｉ 原纤维的表 面结构 （ 扫描探针电 镜图） 状 层原纤维直径 ．×３ ０ ００ ０ 图 ８ 原纤维的侧 向聚 集 ．×３ ０ ００ ０
图 ２ 乳头层原纤维 。×１ ０ ００ ０
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ＪＳｃ ａ ｎｖ （ ｅ ｃ ｉ ｉｈｕ ｎＵ ｉ Ｍ ｄＳ ｉＥｄ ）Ｖｏ ． ４Ｎｏ ２２ ０ １３ ． ０ ３
Ｉ ２ 仪 器 ．
透 射 电镜 为 Ｈ一０ ６ ０型 （ 日本 日立 公 司 ）扫 描 探 ； 针 显微 镜 为 ｓ Ａ一３０型 （ Ｐ ０ 日本 Ｓ ｉｏ公 司 ） ｅ ｋ 。 图 像 处 理 ： 得 的 图像 经 扫 描 后 用 Ｃ ｒｌ 司 获 ｏｅ 公 的 ＤＲＡ １ Ｗ ０软件 处 理 ， 进行 分 析和 定量 。 计 算 ： 已知 胶 原 纤 维 周 期 性 横 纹 间距 ６ ｍ 以 ７ｎ 为 基 准 ， 获得 的 新结 果 进行 比较 。 与
Ｘｉ ｎ Ｔ ｏ， Ｇｕ Ｙ ｎ ｏｇ ａ ｏ ｏ ｇ，Ｃｈ ｎ ｎ ａ ｕ ｐｅ ｇ Ｚｈ ｏ，Ｙ ｎ ｅ Ｔａ ｕ ｆ ｉ ｉｎ．
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样 品 预 处理 ：猪 宰 杀 后 立 即 剥 皮 ， Ｉ ＇ 以 ＯＣ水洗 涤 降温 ， 以非 离 子表 面活 性 剂 脱脂 后 用 １ ５ｍｍ 打
孔 器在 规定 部位 取 样 ， 以 ２ ５ 戊 二 醛 和 １ 四氧 并 ．
化锇 固定 。
制 样 ：用 于透 射 电镜 观 察 的组 织样 品先 以丙酮 脱 水 ， 而 以丙酮 和 环 氧树 脂 ６ ８ 合 液 （ ： 继 １混 Ｖ Ｖ＝１ ：１ 进行 包 埋 ， 片 ， ） 切 以枸椽 酸 铅 染色 后 观察 。用 于 扫 描 电镜 观 察 的 组织 样 品 ， 固定 后 直 接 进 行 冰 冻 在 切片 ， 观察 ； 体 样 品在 适 度 稀释 后 ， 于 云 母 载 片 液 滴 上进 行观 察 。
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存 在 搭 接 。结 论 获 得 了猪 皮 组 织 胶 原 原 纤 维三 维 结 构 的数 据 ， 些 数 据 对 于 组 织 工 程 材 料 的 研 究 有 重 要 意 义 。 这 原 纤维 三 维 结 构 【 键词 】 猪 皮 关
【 中图 分 类 号 】 Ｑ９ ４ ５ ９ ５ ． ３
Ｔｈｒ ｅ ｄｉ ｅ ｉ ｅ — ｍ ｎｓｏｎａ ｒ ｃ ｕ ｅ ｏｆＣｏ ｌ ｇｅ ｂｒｌｏ ｇ ｋｉ ＬｉＺｈ ｑ ａ ｌＳｔ ｕ ｔ ｒ ｌａ ｎ Ｆｉ ｉ ｆ Ｐｉ ｓ ｎ ｉ ｉ ｎｇ ’，Ｗ ａｎ Ｙｉ ｇ ｎｇｍ ｅ，Ｃｈｅｎ Ｍ ｉ ， ａ Ｌ ｎ Ｌｉ ｏ ｏｎｇｆ， ｉ
１ ．四ＪＩ Ｉ ￣学 皮革化学 与工程教育部重点实验室 （ 成都 ６ ０ ６ ） ２ 四川大学华西基础与法 医学 院 ；． １ ０ ５ ；． ３ 四川大学分析 测试中心
【 摘要】 目的
研究猪 皮组织胶原原 纤维的三维 结构 ， 为猪皮组 织作为组 织工程材 料提供基 础数据 。方法
原纤维的表 面存 在着周 期约为 ６ ｍ 凹 ７ｎ
度 、 头 及 装配 方 式 等三 维 结构 信 息 。 于原 纤维 构 端 关
＊ 中 国 高 技 术 发 展 ８ ３计 划 （ 准 号 ２ ０ ＡＡ３ ２ ９ ） 国家 自 ６ 批 ０１ ６００和 然 科 学 基 金 （ 准 号 ２ ８ ６ ２ ） 助 批 ９７并确 定 了胶 原腱 的原 纤维 长 度 ， 研 Ｈａ ｈｚ ｍ 等 研 究 了人 骨 细 胞培 养 物 中的原 纤 维 ， ｓｉ ｕ ］
选 择兰 克夏 一 都华 阳猪 一代 杂 交 猪 种 ， 成 成年 猪
年龄 １ ２个 月 ， 量 约 １ ０ｋ ， 猪 ， 初 生 当 日， 重 ０ ｇ 乳 为 重 量 ０ ５ － ｇ ． ＂ １ｋ 。健 康猪 只 。
应用 扫描探针 显微镜和透射 电镜对猪 皮组 织胶原原纤维进 行观察 。 结果
凸结构 ， 原纤 维的直 径 ５ ～１ ５ｎ 在猪 皮组织 的乳头层 、 ７ ３ ｍ， 网状层 和下网状 层间存在很 大差异 ； 察到的原 纤维 的 观 端头 为膨大的球形 ， 原纤 维的 长度为 ５ １ ｍ， 纤维之 间的侧向聚集 与其周期性 横纹结构 相吻合 并在其首 尾 间 ～ ３ 原
确 定 了其 直 径 和 长 度 ， ｒｃ Ｈｉ ｈ等 贝 报 道 了 其 对 角 ｓ ］０
膜 原 纤 维 的 超 分 子 排 列 ， 些 研 究对 了解 原 纤 维 的 这 三 维 结构 是 十 分重 要 的 。 本研 究是 以猪 皮 为 对象 ， 以光 学 显微 镜 、 扫描 电 子 显 微 镜 和 透 射 电子 显 微 镜 结 合 的方 法 ， 过 对 大 通 量样 品的观察 ， 取 关于猪 皮组织原 纤维直径 、 获 长
猪 皮 在 组 织 工 程 材 料 的 制 造 中被 广 泛 应 用 ， 并 且 是 重要 的制 革原 料 皮 。研 究猪 皮组 织 的精 细结 构 对 于 正确 理 解 其性 能 并选 择合 理 的制造 工 艺是 十分 必要 的 。本 研 究所 曾对 猪 皮组 织 的纤 维结 构 进行 了 长 期 的研 究 ， 这 些 研 究 主要 是 基 于 光 学 显 微 镜 的 但
成 纤维 的模 式 ， 组 织 精 细结 构 在 猪 生 长过 程 中 的 皮 演变 、 皮 纤 维 精 细 结构 在 酶 作 用下 的变 化 等 研 究 猪
结果 将 另文 报道 。
１ 材料和 方法
１ １ 样 品 ．
观 察 ， 获 得 的结 果 主要 是 在纤 维 （ｉｅｓ 水平 上 的 所 ｆ ｒ） ｂ 结 构 信 息［ 。关 于胶 原 原纤 维 （ｉｒｓ 的研 究报 道 １ ］ ｆ ｉ） ｂｌ
维普资讯
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四 川 大 学 学
医 学 版
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猪 皮组 织胶 原原纤维 的三维 结构 ＊
李志 王英梅 陈 廖隆 向 杨 赵纯 田 。 强 敏 理 涛 果 培。 云飞
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