黑木耳多糖提取方法比较

黑木耳多糖提取方法比较

摘要：采用正交试验比较研究热水浸提法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法提取黑木耳（auricularia auricula）多糖的工艺及效率。热水浸提法最佳工艺为料水质量比1∶40、提取温度80 ℃、提取时间4 h，提取率为8.41%；微波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶30、微波功率560 w、微波时间90 s、提取温度80 ℃，提取率为14.08%；超声波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶40、超声功率80 w、超声时间20 min、提取温度60 ℃，提取率为15.22%。超声波辅助提取法效率最高，优于另两种方法。

关键词：黑木耳（auricularia auricula）；多糖；热水浸提；微波辅助提取；超声波辅助提取

中图分类号：r284.2 文献标识码：a 文章编号：0439-8114（2013）10-2386-03

黑木耳（auricularia auricula）味道鲜美、营养丰富，是一种药食两用大型真菌。我国是世界上最主要的黑木耳生产国，年产量占世界总产量的90%以上[1]，所以对黑木耳进行深入开发具有重要意义。研究表明木耳多糖是黑木耳的主要生物活性物质[2]，具有调节免疫功能、抗血栓、抑菌、降血糖、抗溃疡、抗肝炎、抗突变、降血脂和促进血清蛋白生物合成等多种功效[3，4]。目前黑木耳多糖的提取方法主要有水提醇沉法、碱液提取法、超声波辅助提取法、酶解法和微波辅助提取法等，这些方法都有其优点，也有其难以克服的不足之处[5-9]。

研究考察了传统的热水浸提法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法提取黑木耳多糖的工艺条件及提取效果，比较3种提取方法的效率，为黑木耳的深加工提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

干黑木耳产自吉林省，购自抚顺市农贸市场。苯酚、浓硫酸、葡萄糖均为分析纯。

1.2 方法

1.2.1 多糖的测定采用苯酚-硫酸法进行黑木耳多糖含量的测定，以葡萄糖为标准品[10]。

1.2.2 黑木耳多糖的提取方法

1）热水浸提法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g黑木耳粉，加入去离子水，通过水浴浸提，离心得到上清液，用无水乙醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。

2）微波辅助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g 黑木耳粉，加入去离子水，用微波处理，水浴浸提2 h，离心得到上清液，用无水乙醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。

3）超声波辅助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脱脂，取2.0 g 黑木耳粉，加入去离子水，用超声波处理，水浴浸提2 h，离心得到上清液，用无水乙醇沉淀，离心，干燥得到粗多糖。

1.2.3 正交试验采用l9（34）正交试验分别研究水浸提法、微波辅助提取法和超声波辅助提取法的工艺，各试验因素与水平见表

1、表2和表3。

2 结果

2.1 热水浸提法

通过l9（34）正交试验确定热水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工艺，直观分析结果见表4。热水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件是a3b3c3，即料水质量比1∶40，提取温度80 ℃、提取时间4 h。在此最佳条件下黑木耳多糖的提取率为8.41%。极差分析结果表明，热水浸提法各因素对黑木耳多糖提取率的影响为提取温度>提取时间>料水质量比。

2.2 微波辅助提取法

通过l9（34）正交试验确定微波辅助提取法提取黑木耳多糖的最佳工艺，直观分析结果见表5。微波辅助提取法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件是a2b2c3d3，即料水质量比1∶30、微波功率560 w、微波时间90 s、提取温度80 ℃。在此最佳条件下黑木耳多糖的提取率为14.08%。极差分析结果表明，微波辅助提取法各因素对黑木耳多糖提取率的影响为微波时间>微波功率>料水质量比>提取温度。

2.3 超声波辅助提取法

通过l9（34）正交试验确定超声波辅助提取法提取黑木耳多糖的最佳工艺，直观分析结果见表6。超声波辅助提取法提取黑木耳多糖的最佳工艺条件是a3b3c3d1，即料水质量比1∶40、超声功率80 w、超声时间20 min、提取温度60 ℃。在此最佳条件下黑木耳多

糖的提取率为15.22%。极差分析结果表明，黑木耳多糖提取率的影响为超声时间>超声功率>提取温度>料水质量比。

2.4 3种黑木耳多糖提取方法的比较

由表7可知，从提取效果来看，提取率最高的是超声波辅助提取法，其次是微波辅助提取法，热水浸提法的提取率最低，还不到前两种方法的2/3，表明微波和超声波在辅助提取黑木耳多糖中发挥了重要作用。从料水质量比来看，3种方法相差不大，而且对于这3种方法来说，料水质量比都不是最主要的影响因素。微波辅助提取法提取液用量相对较少，可能是由于微波时间较短，太多的提取液可能造成微波处理不充分。从提取时间来看，热水浸提法需要的时间最长，而微波辅助和超声波辅助能大大缩短提取的时间。而且超声波辅助提取法中的超声时间和微波辅助提取法中的微波时间都是最主要的影响因素，可能是由于足够时间的超声波和微波作用有助于充分破坏细胞，促进多糖的提取。从提取温度来看，超声波辅助提取法所需的温度最低，说明充分破坏细胞结构不需要太高的温度。微波辅助提取法中微波作用的时间相对较短，对细胞结构的破坏可能不如超声波辅助提取法充分，所以仍需要较高的提取温度。热水浸提法需要的温度也较高，而且提取温度是该方法的主要影响因素，说明生产中如果提取温度达不到一定高度，会较大程度地影响提取效果。总的来说，超声波辅助提取法提取率最高，提取温度最低，在黑木耳多糖的提取中具有一定优势。

3 小结

热水浸提法最佳工艺为料水质量比1∶40、提取温度80 ℃、提取时间4 h，提取率为8.41%；微波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶30、微波功率560 w、微波时间90 s、提取温度80 ℃，提取率为14.08%；超声波辅助提取法最佳工艺为料水质量比1∶40、超声功率80 w、超声时间20 min、提取温度60 ℃，提取率为15.22%。超声波辅助提取法效率最高，优于另两种方法。

参考文献：

[1] 郭平，卢家炯，林海霞.黑木耳多糖功效与提取方法[j].中国林副特产，2006（6）：72-74.

[2] 吴瑞宪.黑木耳的质量标准及营养成份[j].中国林副特产，1996（1）：21-22.

[3] 郑炯，黄发明，张坤.黑木耳多糖生物活性研究进展[j].粮食与油脂，2006（10）：45-47.

[4] 樊黎生，龚晨睿，张声华.黑木耳多糖抗辐射效应的动物实验[j].营养学报，2005，27（6）：525-526.

[5] 李福利，张丽娟，于国萍.酶法提取黑木耳多糖的纯化与鉴定[j].中国林副特产，2011（4）：4-6.

[6] 陆雯，蔡振优，鲜乔，等.黑木耳多糖提取工艺条件的研究[j].中国食品添加剂，2010（6）：99-102.

[7] 徐秀卉，杨波.超声波法提取黑木耳多糖的工艺[j].药学与临床研究，2011，19（2）：189-190.

[8] 曾维才，张曾，贾利蓉.响应面法优化微波辅助提取黑木耳