离心机基础知识
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心机的维护
①
②
③
④
转头应定期(视使用频率确定)清洗和消毒。 离心时,如有溅出物,应尽快清除离心机机 舱内的全部溅出物。 清洁消毒时,首先切断电源,选择适当的中 性消毒液(如75%乙醇溶液)擦拭。 擦拭离心机舱时动作要轻,以免损坏机舱内 温度感应器。 离心机在使用过程中出现异常,应立即关闭 电源,报请有关专业人员检修。每次操作完 毕,应做好使用情况记录,并定期对机器各 项性能进行检修。
相对离心力(RCF,Relative centrifugal force)是指在离心场 中,作用于颗粒的离心力相当于地 球重力的倍数,单位是重力加速度 “g” 。例如25000×g,则表示相 对离心力为25000。
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二、离心力和相对离心力
离心力通常以相对离心力(Relative centrifugal force,RCF)表示,即 离心力F的大小相对地球引力(G) 的多少倍,单位为g 相对离心力 RCF的值 (g值)取决 于转子的转速 (rpm)和旋转半径 (r, 以mm计算),可用如下公式表 示
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心机的维护 ⑤ 离心机转头卡口和离心杯卡口处应定 期清洁并上油,避免生锈,或达不到 离心要求。 ⑥ 移动离心机后应检查其水平度,没有 调水平的设备会造成驱动机械装臵的 损坏。移动后预防性维护,可以预防 很多问题的发生并保证设备
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三、离心机的分类与结构
高速离心机:最大转速为20000~25000rpm,
最大容量可达 3 升。转头多样。一般都有制冷系统, 以消除高速旋转转头与空气之间摩擦而产生的热量, 离心室的温度可以调节和维持在 0 ~ 40C 。通常用 于微生物菌体、细胞碎片、大细胞器、免疫沉淀物 等的分离纯化工作,但不能有效地沉降病毒、小细 胞器(如核蛋白体)或单个分子。
离 心机 组成 结构 : 驱 动
电机、制冷系统、显示系 统、自动保护系统和控制 系统组成。必要的配件为 离心转头和离心管。
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三、离心机的分类与结构
离心转头与离心杯
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三、离心机的分类与结构
离心转头
☼ 离心转头的注意事项
1.每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时, 使用转头时要查阅说明书,不得过速使用。每一 转头都要有一份使用档案,记录累积的使用时间, 若超过了该转头的最高使用限时,则须按规定降 速使用。
F为离心力的强度 m为沉降颗粒的有效质量 ω为离心转子转动的角速度,其单位为rad/s r为离心半径(cm),即离心机轴中央到水平离 心机试管底部的距离,或垂直式离心机试管 口中央的距离。
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二、离心力和相对离心力
离心力与转速、颗粒质量和离心半径相 关,转速和颗粒质量越大,离心力越大, 也随着离心半径的减小而降低。
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三、离心机的分类与结构
超高速离心机:转速可达50000~80000rpm,
相对离心力最大可达510000g,离心容量由几十毫 升至两升,设有冷冻系统、真空系统和安全保护 系统。分离的形式是速率区带离心和等密度区带 离心。最著名的生产厂商有美国的贝克曼公司和 日本的日立公司等。
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三、离心机的分类与结构
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一、离心机的基本原理
由于不同颗粒的质量、密度、 大小及形状等彼此各部相同,在同 一大小的离心场中沉降速度也就不 相同,颗粒沉降的顺序有颗粒密度 的大小所决定的,密度越大越先沉 降,由此便可以得到相互间的分离。
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二、离心力和相对离心力
液体中的固相颗粒做圆周运动时 产生一个向外的力,称之为离心 力。 F=mrω2
分离分析仪器
离心机 (centrifuge)
青海省血液中心
检验科
内容提纲
一、离心机基本原理
二、离心力和相对离心力 三、离心机的分类与结构 四、离心机的使用和维护
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引 言
在临床核酸检测中,从血液标本中把特定靶 核酸纯化至适用于扩增检测,常需台式高速离 心机。离心分离对于血液核酸检测来说,是一 个必不可少的手段。充分了解离心机的性能特 性,并正确使用离心机,对保证核酸提取的成 功极为重要。
2.转头是离心机中须重点保护的部件,搬动时要小 心,不能碰撞,避免造成伤痕,转头长时间不用 时,要涂上一层上光腊保护。
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三、离心机的分类与结构
离心机转头损坏的原因 (操作或使用不当所造成的) 过速 腐蚀
金属疲劳
不平衡
四、离心机的使用和维护
离心机的使用尽管比较简单,但必 须严格按照操作说明书进行操作,各种 型号的离心机操作方法常有一些差异。 在离心机的使用中最为重要的是平衡。 虽然现在大多数离心机带有自动平衡功 能,但在实际使用中仍需注意,对侧离 心杯内标本数量必须一致,有条件时可 使用天平对两侧离心杯进行配平,可提 高离心机转子的寿命并提高了安全性。
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三、离心机的分类与结构
根据离心机的转速,离心机可分 为: 低速离心机 高速离心机 超高速离心机
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三、离心机的分类与结构
低速离心机:最大转速10000rpm,容量为几十
毫升至几升。转子有角式和外摆式,其转速不能 严格控制,通常不带冷冻系统,于室温下操作, 用于收集易沉降的大颗粒物质,如血细胞的分离 等。
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一、离心机的基本原理
离心技术应用很广,在生命科学和工业生产 的各个领域都有相应的使用。
生物学领域:分离出化学反应后的沉淀物, 天然的生物大分子、无机物、有机物。
医学领域:主要用于分离、纯化细胞、病毒、
蛋白质、酶和核酸。
一、离心机的基本原理
离心机对旋转颗粒进行沉降分离 的物理学基础是通过离心力对旋 转颗粒的作用。 当将样品放入离心机转头的离心 管内,离心机驱动时,样品液就 随离心管做匀速圆周运动,于是 就产生了一个向外的离心力 旋转区域的半径越大、旋转的速 度越快,则离心力越大,颗粒沉 降也越快。
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心机的使用原则
① ② 离心机在使用前,操作者应认真阅读器使 用说明书。 离心机应放臵在平稳、坚固的台面上,并 力求离心机处于水平位臵,以免离心时造 成机器震动。 离心机必需在放臵离心管后运转,严禁空 架运转。 选择合适的转头,控制转头的转速。
③ ④
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心机的使用原则
⑤ 使用时注意转速、相对离心力、离心 时间是否符合要求 ⑥ 每次使用后注意转头内清洁,以保持 平衡。 ⑦ 注意预冷处理
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心操作的注意事项
① 使用离心机时,在天平上配平离心管和其 内容物,转头中绝对不能装载单数的管子, 当转头只是部分装载时,管子必须互相对 称地放在转头中。 ② 装载血液标本时,要根据各种离心机的具 体操作说明进行。有的离心管必须加盖, 以防血液离心时甩出,造成转头不平衡、 污染、离心机内生锈或被腐蚀。
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使用前一定要先阅读手册!
Refer to rotor manuals for operation
Use log books to record history of rotor use
四、离心机的使用和维护
离心机如长期不使用,再次使用 时应有专业人员检查离心机转子、 转头。每次使用前应反复检查转头 卡口与离心杯卡口是否对准,并严 格转头的转速限制,禁止不同型号 间转头互换使用。控温离心(如核 酸检测标本需在2-8℃条件下离心) 时应提前打开离心机,待离心机内 温度达到所需温度时方可使用。
③ 若要控温离心时。离心机应提前打开预冷, 待到所需温度时使用。
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四、离心机的使用和维护
☼ 离心操作的注意事项
④ 离心过程中不得随意离开,应随时观察离心 机上的仪表是否正常工作,如有异常的声音 应立即停机检查,及时排除故障。 离心机机体应始终处于水平位臵,外界电源 的电压要匹配,并要求有良好的接地线。 开机前应检查转头安装是否牢固,机腔内是 否有异物掉入。 离心机运行时,离心机周围30cm范围内不能 有人或危险物品
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此外,根据RCF值(g值)、rpm值和r值之间的关系,可以从图A 图B中大致读出各种数值。
二、离心力和相对离心力
卫生部临检中心建议核酸样本离心 条件为800-1600g 20min 检验科自动平衡恒温离心机旋转半径 为100mm,则应选择转速为: 2700-3800 r/min 由于F值的不同,RFC相差也会很大, 实际应用时一般取平均值,检验科 对核酸样本的离心条件为:离心机 内温度2-8℃,转速在3000 r/min, 离心20分钟。
(rpm :revolutions per minute每分钟转数,r/min)
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二、离心力和相对离心力
根据RCF值(g)、 rpm值 ( r/min )、r值(mm)之间的 关系,如已知其中两个值即可计 算出未知值。 如某离心机转速为8000 r/min ,旋 转半径为20mm时,相对离心力 RCF值约为150000g 如某离心机转速为5000 r/min ,旋 转半径为40mm时,相对离心力 RCF值约为1100g