医院检验中心酯酶染色中性非特异性脂酶染色操作规程
非特异性酯酶染色
【目的】指导非特异性酯酶染色检查。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
【染色原理】作用于短链脂肪酸的酶，称为“非特异性酯酶”。
此酶将乙酸α－萘酚水解，产生萘酚，萘酚再与重氮盐偶联，形成不溶性的有色沉淀物，定位于酶活性存在处。
【用途】急性白血病的鉴别，急性单核白血病阳性，亦称“单核细胞酯酶”。
【试剂配置】1）固定液，10％甲醛生理盐水。
2）0.05mol/L磷酸缓冲液0.067mol/L磷酸氢二钠44ml0.067mol/L磷酸二氢钾12ml3）作用液0.05mol/L磷酸缓冲液40ml1%乙酸α－萘酯（以丙酮做溶剂）0.4ml振荡。
溶解后加蒸馏水0.4ml坚牢蓝B，40mgrj溶解，过滤4）1%甲绿水溶液。
【染色步骤】1．固定：新鲜血或骨髓涂片，置10%甲醛生理盐水中10分钟。
2．水洗：自来水冲洗5分钟。
3．孵育：放入作用液1小时。
4．水洗：自来水冲洗5分钟。
5．复染：1%甲绿染5分钟。
6．水洗：晾干，镜检。
【对照标本】染色步骤同上，作用液中减去乙酸α－萘酚。
【结果判断】阳性反应为棕黑色片块状沉淀，定位于胞浆中。
计数方法如下：0 胞浆呈原色。
+ 胞浆呈棕灰色，无颗粒。
++ 胞浆呈棕黑色，云絮状。
+++ 胞浆呈黑棕色，云絮状。
++++ 胞浆呈深黑色，云絮状。
【临床意义】在中性PH值，用乙酸α－萘酚做底物时，单核细胞呈阳性反应，其强度随细胞发育成熟而逐渐增加。
巨噬细胞、巨核细胞、血小板与淋巴细胞也偶见，其他血细胞则呈阴性或弱阳性反应。
【注意事项】1.涂片宜新鲜，不超过两天为宜。
2.重氮盐的选择，以坚牢蓝B，坚牢蓝RR和坚牢蓝黑B重氮盐为好，使酶反应产物呈颗粒状，定位清楚。
操作人员部门主管质量负责人姓名王烈日期 04年07月15日。
医院检验科完整SOP程序文件
F、血库
第一章临床输血技术规范
第二章输血申请
第三章受血者血样采集与送检
第四章交叉配血
第五章血液入库、核对、贮存
第六章发血
第七章输血
附件一成分输血指南
附件二自身输血指南
附件三手术及创伤输血指南
附件四内科输血指南
附件五术中(5)负责本科的业务训练、人才培养和技术考核工作。安排进修、实习人员的培训，并担任教学工作。
(6)学习、运用国内外先进技术，组织开展新业务、新技术和科研工作。总结经验，撰写学术论文。
(7)督促检查本科人员履行各自的职责，认真执行规章制度及技术操作常规；经常进行医疗安全教育，严防事故、差错。
(8)负责本科医德医风建设。掌握所属人员的思想、业务能力和工作表现，提出考核、晋升、奖惩和培养使用的意见。
附件七临床输血申请单
附件八输血记录单
附件九输血不良反应回报单
一、科室设置
1、科室各实验室设置及负责人
2、科室人员结构
姓名
性别
出生
年月
学历
毕业院校
参加工作时间
现任职称
手机
3、科室平面图
4、检验中心工作流程图
住院病人就诊检验流程
门诊病人就诊检验流程
二、检验中心工作职责
（一）检验中心各级人员工作职责
1、检验中心主任、副主任工作职责
副主任协助科主任工作，在科主任领导下，按分工履行主任职责的相应部分。
2、主任检验师工作职责
(1)在科主任的领导下，负责本专业的业务、教学、科研和仪器设备的管理工作。
(2)负责本科主要仪器、设备的购置论证、验收、安装和调试，定期检查和指导仪器、设备的使用和维修保养。解决本科复杂、疑难的技术问题，并参加相应的诊断工作。
SOP文件酯酶染色中性非特异性脂酶αNAE染色
SOP文件酯酶染色中性非特异性脂酶αNAE染色1. 引言本SOP文件旨在描述酯酶染色中使用的中性非特异性脂酶αNAE染色方法。
中性非特异性脂酶αNAE是一种酯酶，广泛存在于许多生物体中。
该酶在许多生理和病理过程中起着重要作用，因此其检测和定量对于研究和临床应用具有重要意义。
2. 实验材料•甲醇（CH3OH）•乙醇（C2H5OH）•碘酒（I2）•活化碳（C）•磷酸氢钾（KH2PO4）•污染物样品3. 实验步骤步骤1：制备甲醇和乙醇溶液1.取适量的甲醇和乙醇，分别加入两个容器中。
2.分别将甲醇和乙醇容器标记为“甲醇溶液”和“乙醇溶液”。
步骤2：制备碘酒溶液1.取适量的碘酒，加入一个容器中。
2.将该容器标记为“碘酒溶液”。
步骤3：制备活化碳溶液1.取适量的活化碳，加入一个容器中。
2.将该容器标记为“活化碳溶液”。
步骤4：制备磷酸氢钾缓冲液1.取适量的磷酸氢钾，加入蒸馏水中，搅拌至完全溶解。
2.将溶液调节至pH 7.0，并标记为“磷酸氢钾缓冲液”。
步骤5：制备实验样品1.取适量的污染物样品，加入离心管中。
2.加入适量的磷酸氢钾缓冲液，使样品浓度适宜。
步骤6：进行染色实验1.取一块载玻片，将其置于实验台上。
2.取一滴甲醇溶液，滴在载玻片上。
3.将样品与甲醇溶液混合，使其均匀分布于载玻片上。
4.将载玻片置于离心机中，进行离心，以去除残留液体。
5.取一滴乙醇溶液，滴在载玻片上。
6.将载玻片置于离心机中，进行离心，以去除残留液体。
7.取一滴碘酒溶液，滴在载玻片上。
8.将载玻片置于离心机中，进行离心，以去除残留液体。
9.取一滴活化碳溶液，滴在载玻片上。
10.将载玻片置于离心机中，进行离心，以去除残留液体。
步骤7：观察和分析结果1.取一滴适宜的显微镜油，滴在载玻片上。
2.取显微镜封片，将其覆盖在载玻片上。
3.使用显微镜观察载玻片下的染色结果。
4.记录观察结果，并进行结果分析。
4. 结论本实验SOP文件描述了酯酶染色中性非特异性脂酶αNAE染色的方法。
检验科完整SOP程序文件
一、科室设置1、科室各实验室设置及负责人2、科室人员结构3、检验中心平面图4、检验中心工作流程图二、检验中心工作职责（一）检验中心各级人员工作职责1、检验中心主任、副主任工作职责2、主任检验师工作职责3、主管检验师工作职责4、检验师工作职责5、检验士工作职责（二）检验中心各实验室工作职责1、临检室人员岗位职责2、生化室人员岗位职责3、免疫室人员岗位职责4、细菌室人员岗位职责5、骨髓细胞室人员岗位职责6、急诊检验人员岗位职责三、检验中心各项规章制度1、生物安全管理制度2、检验质量管理制度3、血型安全鉴定制度4、差错事故登记制度5、安全制度6、急诊检验制度7、技术管理制度8、工作职责制度9、试剂管理制度10、天平称量制度11、实习生管理制度12、仪器管理制度13、标本管理制度14、档案管理制度15、为民服务公约16、细菌培养室无菌制度17、同位素实验室管理制度18、会议学习制度19、请示报告制度20、保密守则21、职工考勤制度22、人事考核制度23、治安保卫制度24、消防安全制度25、业务学习管理制度26、物资报废制度27、赔偿制度28、奖罚制度29、质量信息反馈制度30、计算机使用管理制度31、血常规复查制度32、卫生制度四、检验中心标准操作规程（一）检验中心各类仪器标准操作规程1、BECKMAN CX9生化操作规程2、日立7600生化仪操作规程3、RA-1000生化仪操作规程4、644电解质仪操作规程5、SP-4430干式生化仪操作规程6、拜耳248血气分析操作规程7、ACCESS化学发光操作规程8、AXSYM化学发光仪操作规程9、Array 360型全自动特定蛋白分析仪操作规程10、BIO-RAD-Model 550酶标仪操作规程11、FJ放射免疫γ计数仪操作规程12、ACL200自动血凝仪操作规程13、CoAg-A-MTX全自动血凝仪操作规程14、HMX全自动血细胞分析仪操作规程15、CD—1700全自动血细胞分析操作规程16、Coulter EPICS XL流式细胞仪操作规程17、MONITOR JI红细胞沉降仪操作规程18、NycoCard Reader II型多功能全定量金标检测仪操作规程19、UF-100全自动尿液分析仪操作规程20、盈东尿十一项化学分析仪操作规程21、ATB 细菌鉴定仪操作规程22、二氧化碳孵箱操作规程23、BacTAlert120全自动血培养操作规程24、伟力彩色精子动态分析仪操作规程25、DiaMed-ID Micro TyPing System达亚美微量定型系统操作规程26、1575型微孔板清洗器操作规程（二）检验中心检测项目标准操作规程A、临检室A1、血常规检验标准操作规程A2、嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程A3、红细胞沉降率测定标准操作规程A4、血型鉴定标准操作规程A5、尿常规标准操作规程A6、一小时尿沉渣计数标准操作规程A7、尿乳糜定性检查标准操作规程A8、大便常规标准操作规程A9、虫卵及包囊浓缩检查标准操作规程A10、隐血试验标准操作规程A11、脑脊液检验标准操作规程A12、浆膜腔积液检查标准操作规程A13、精液检查标准操作规程A14、前列腺液检查标准操作规程A15、阴道分泌物检查标准操作规程A16、胃液检查标准操作规程B、生化室B1、血氨测定标准操作规程B2、17-KS测定标准操作规程B3、17-OH测定标准操作规程B4、VMA标准操作规程B5、Insulin Autoantibadies(IAA) 胰岛素自身抗体标准操作规程B6、Islet Cell Autoantibodies (ICA) 胰岛细胞自身抗体标准操作规程B7、脯氨酸肽酶测定(Prolidase Test Kit) 标准操作规程B8、I型糖尿病检测（诊断酶联试剂盒）标准操作规程B9、血清Ⅳ胶原蛋白（PANASSAY Ⅳ． C）标准操作规程B10、血清蛋白电泳标准操作规程B11、N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG) 标准操作规程B12、腺苷脱氨酶(ADA) 标准操作规程B13、尿肌酸测定标准操作规程B14、肌钙蛋白(TNT)测定标准操作规程B15，肿瘤相关物质测定标准操作规程C、免疫室、发光、放免室C1、HAVAbIgM标准操作规程C2、PreS1标准操作规程C3、HBSAg 标准操作规程C4、HBSAb标准操作规程C5、HBEAg标准操作规程C6、HBcAb标准操作规程C7、HBcAbIgM标准操作规程C8、HCVIgG标准操作规程C9、HCVIgM 标准操作规程C10、HDVAg标准操作规程C11、HDVIgG标准操作规程C12、HDVIgM标准操作规程C13、HEVAbIgG标准操作规程C14、HEVAbIgM标准操作规程C15、HGVAb标准操作规程C16、TTV-IgG标准操作规程C17、寒冷凝集反应标准操作规程C18、ENA多肽抗体谱标准操作规程C19、ANA标准操作规程C20、ds-DNA标准操作规程C21、幽门螺杆菌抗体标准操作规程C22、嗜异性凝集试验标准操作规程C23、肥达氏反应标准操作规程C24、胰岛素测定标准操作规程标准操作规程C25、C肽测定标准操作规程标准操作规程C26、胰高血糖素测定标准操作规程标准操作规程C27、α1-微球蛋白测定标准操作规程C28、β2-微球蛋白测定标准操作规程C29、THP-蛋白测定标准操作规程C30、抗TG，TM抗体测定标准操作规程C31、抗INS-抗体测定标准操作规C32、人III型前胶原放射免疫测定标准操作规程C33、逶明质酸放免测定标准操作规程C34、Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程C35、内皮素放免测定标准操作规程C36、肺肿瘤标记CY21-1放免测定标准操作规程C37、T3 T4 TSH FT3 FT4 测定标准操作程序（SOP）C38、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、 fPSA，Ca-125，Ca-199，Ca-153测定标准操作程序（SOP）C39、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睾酮)测定标准操作程序（SOP）C40、铁蛋白、叶酸、VitB12测定标准操作程序（SOP）C41、CKMB、cTnI、MYO测定标准操作程序（SOP）C42、IgE测定标准操作程序（SOP）C43、地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠，丙戊酸，安定，环胞霉素标准操作程序C44、DPD测定标准操作程序（SOP）C45、过敏原测定标准操作程序D、血液、骨髓室、FCMD1、D-二聚体标准操作规程D2、3P试验标准操作规程D3、骨髓细胞学检查标准操作规程D4、过氧化物酶(POX)染色标准操作规程D5、苏丹黑B(SBB)染色标准操作规程D6、中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良GOmorI氏钙钴法标准操作规程D7、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法标准操作规程D8、糖原(PAS)染色标准操作规程D9、酯酶染色---中性非特异性脂酶(α-NAE)染色标准操作规程D10、铁染色标准操作规程D11、酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程D13、自体溶血试验标准操作规程D14、血清酸化溶血试验(Ham试验) 标准操作规程D15、热溶血试验(定性) 标准操作规程D16、蔗糖溶血试验(糖水试验) 标准操作规程D17、变性珠蛋白小体检查(Heinz小体染色) 标准操作规程D18、血浆游离血红蛋白测定标准操作规程D19、淋巴细胞亚群测定标准操作规程D20、HLA B27 / HLA B7 测定标准操作规程D21、活化细胞亚群测定标准操作规程D22、活化血小板测定标准操作规程D23、APO 2.7测定标准操作规程D24、CD25/CD3 测定标准操作规程D25、MDR(P—gP)多药耐药基因）测定标准操作规程D26、TdT(MRD白血病残留病灶)测定标准操作规程D27、血小板糖蛋白测定标准操作规程D28、CD23(Ige低亲和力受体)测定标准操作规程D29、CD95 / Fas 测定标准操作规程D30、FCM试剂配制标准操作规程D31、Bcl-2 测定标准操作规程D32、ANNEXIN V 测定标准操作规程D33、P53 测定标准操作规程D34、λ链测定标准操作规程D35、CD55 测定标准操作规程D36、血小板抗体测定（PAIgG，PAIgM，PAIgA）标准操作规程D37、DNA测定标准操作规程D38、干细胞CD34测定标准操作规程D39、CD34+ 细胞绝对计数标准操作规程D40、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）活性测定(发色底物法) 标准操作规程D41、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）活性测定（发色底物法）标准操作规程D42、血管性假血友病因子(vWF)含量测定（ELISA）标准操作规程E、细菌室E1、革兰氏阴性鉴定卡及药敏卡（GNI及GNS卡的操作步骤）标准操作规程E2、革兰氏阳性鉴定卡及药敏卡（GPI 及GPS卡的操作步骤）标准操作规程E3、酵母菌鉴定卡(YBC卡) 标准操作规程F、血库第一章临床输血技术规范第二章输血申请第三章 受血者血样采集与送检 第四章交叉配血第五章 血液入库、核对、贮存第六章 发血 第七章 输血附件一 成分输血指南 附件二 自身输血指南附件三 手术及创伤输血指南 附件四 内科输血指南附件五 术中控制性低血压技术指南 附件六 输血治疗同意书 附件七 临床输血申请单 附件八 输血记录单附件九 输血不良反应回报单一、科室设置1、科室各实验室设置及负责人2、科室人员结构3、科室平面图4、检验中心工作流程图住院病人就诊检验流程门诊病人就诊检验流程大小便体液 血液标本二、检验中心工作职责（一）检验中心各级人员工作职责1、检验中心主任、副主任工作职责(1) 在院长、院党委领导下，负责本科的业务、教学、科研及行政管理工作(2) 负责组织本科业务技术建设规划、年度工作计划和诊断质量监测控制方案的制定、实施、检查和总结。
骨髓细胞特异性酯酶染色标准操作程序
骨髓细胞特异性酯酶染色标准操作程序1.检验目的急性白血病鉴别；鉴别嗜碱性细胞(阴性或弱阳性)与组织嗜碱细胞(阳性)。
2.检测原理（包括结果计算）氯乙酸AS-D萘酚被细胞内酯酶水解，产生萘酚AS-D，再与六偶氮新品红作用，生成不溶性红色沉淀，定位于细胞质内。
3.性能特征无。
4.标本要求（包括病人准备、容器、样本类型等）4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。
凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
4.2 标本类型：骨髓。
4.3标本容器：洁净载玻片。
4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。
4.4.2已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存10年以上。
4.5 标本运输:室温条件下运输。
4.6 标本拒收标准：参照《采集手册》。
5.仪器和试剂5.1试剂名称:氯乙酸AS-D萘酚酯酶（AS-DNCE）染色液5.2试剂来源：：上海太阳生物技术有限公司5.3试剂准备：试剂为即用式。
5.4试剂贮存：2～8℃保存，有效期九个月。
5.5试剂组成：Ⅰ液：30mg×5,Ⅱ液：30ml×5。
5.5.l 甲醛-丙酮缓冲液(pH6.6)5.5.2 0.067 mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 7.6)Na2HP04 8.8 gKH2P04 0.9 g蒸镏水 1000 ml5.5.3 40 g/L 新品红(new fuchsin)新品红 1 g2 mol/L盐酸液 25 ml(20±5)℃贮存，避免阳光照射，此液可长期保存。
5.5.4 40 g/L亚硝酸钠制液，4℃保存，每周新鲜配制。
5.5.5 六偶氮新品红液：使用前等体积新品红和40 g/L亚硝酸钠液立即混合，反应1 min。
5.5.6 氯乙酸AS-D萘酚酯酶氯乙酸AS-D萘酚 5 mgN,N-二甲基在甲酰胺 2.5 ml5.5.7 底物液六偶氮新品红液 0.2 ml氯乙酸AS-D萘酚液 2 ml0.067 mol/L磷酸盐缓冲液38 ml最终pH 7.2-7.4。
急性髓细胞白血病分型
3、分类及诊断标准⑴、M1 急性髓细胞白血病未成熟型1.血象:贫血显著，外周血可见幼红细胞，白细胞总数升高。
血片中以原始粒细胞为主，少数患者可无或极少幼稚粒细胞出现。
血小板中度到重度减少。
2.骨髓象:骨髓增生极度活跃或明显活跃，少数病例可增生活跃甚至减低。
骨髓中原始粒细胞大于90%(NEC)，白血病细胞内可见Auer 小体，幼红细胞及巨核细胞明显减少，淋巴细胞也减少。
3.细胞化学染色:POX染色至少有3%原粒细胞POX阳性。
⑵、M2 急性髓细胞白血病部分成熟型1.血象:贫血显著，白细胞中度升高和M1相似，以原始粒细胞及早幼粒细胞为主。
血小板中度到重度减少。
2.骨髓象:骨髓增生极度活跃或明显活跃，骨髓中原始粒细胞占30%~89%(非红系)，早幼粒、中幼粒和成熟粒细胞大于10%，白血病细胞内可见Auer小体，幼红细胞及巨核细胞明显减少，此型白血病细胞的特征是形态变异及核质发育不平衡。
3.细胞化学染色(1)P0X与SB染色: 均呈阳性反应。
(2)PAS染色:原粒呈阴性反应，早幼粒细胞为弱阳性反应。
(3)中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP):成熟中性粒细胞的NAP活性明显降低，甚至消失。
(4)特异性和非特异性酯酶染色:氯醋酸AS-D萘酚酯酶染色呈阳性反应。
醋酸AS-D萘酚酯酶染色(AS-D-NAE)可呈阳性反应，但强度较弱，且不被氟化钠抑制。
(5)Phi(ф)小体染色:原始和幼稚粒细胞内出现Phi(ф)小体。
(6)染色体及分子生物学检验:特异性染色体重排t(6;9)约见于1%的AML，主要为本型。
4.免疫学检验:表达髓系抗原，可有原始细胞和干细胞相关抗原，CD34、HLA- DR、CD13、CD33和CD57阳性。
5.染色体和分子生物学检验:t(8;21)(q22;q22)易位是M2b的一种常见非随机染色体重排，其检出率高达90%。
AML1基因重排可作为本病基因诊断的标志。
⑶、M3急性早幼粒细胞白血病1.血象:血红蛋白及红细胞数呈轻度到中度减少，部分病例为重度减少。
骨髓细胞非特异性酯酶染色标准操作程序
骨髓细胞非特异性酯酶染色标准操作程序1.检验目的α-丁酸萘酚酯酶(非特异性酯酶)检查主要目的是结合瑞姬染色鉴别诊断急性粒细胞白血病和急性单核细胞白血病。
2.检测原理（包括结果计算）细胞中非特异性酯酶将α-丁酸萘酚水解，产生α-萘酚，再与重氮盐偶联，生成不溶性有色沉淀，定位于细胞质。
3.性能特征无。
4.标本要求4.1 病人准备：了解病人是否对局麻药有过敏史。
凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病，穿刺部位有炎症或有畸形，晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
4.2 标本类型：骨髓。
4.3标本容器：洁净载玻片。
4.4 标本存放:4.4.1未检测标本的存放：放于细胞室未检测标本架上。
4.4.2已检测标本的存放：骨髓存片柜，保存10年以上。
4.5 标本运输:室温条件下运输。
4.6 标本拒收标准：参照《采集手册》。
5.仪器和试剂5.1试剂名称:α-丁酸萘酚酯酶(非特异性酯酶)5.2试剂来源：上海太阳生物技术有限公司5.3试剂准备：试剂为即用式。
5.4试剂贮存：2～8℃保存，有效期九个月。
5.5试剂组成：Ⅰ液：30mg×5,Ⅱ液：30ml×5。
5.5.1 O.067 mol/L 磷酸盐缓冲液(pH 7.6)Na2HP04 8.8 gKH2P04 0.9 g蒸镏水 1000 ml5.5.2 10 g/L a-丁酸萘酚(以50% 丙酮为溶剂)液5.5.3底物液a-丁酸萘酚 0.8ml固蓝BB 40mg0.067 mol/L磷酸盐缓冲液 40ml5.5.4 10 g/L 甲基绿溶液6.环境和安全此试剂为体外诊断用，存在一定的刺激性和毒性；不要入口，避免和眼睛，皮肤或衣服接触，一旦接触，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟，接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。
7.检测前准备在玻片头端贴上标签编号。
8.校准/定标无。
9.质量控制无。
10.标本检测10.1 新鲜涂片用甲醛蒸气固定5～10 min。
10.2 水洗5 min，晾干。
医院检验科完整SOP程序文件
C2、PreS1标准操作规程
C3、HBSAg标准操作规程
C4、HBSAb标准操作规程
C5、HBEAg标准操作规程
C6、HBcAb标准操作规程
C7、HBcAbIgM标准操作规程
C8、HCVIgG标准操作规程
C9、HCVIgM标准操作规程
C10、HDVAg标准操作规程
C11、HDVIgG标准操作规程
附件七临床输血申请单
附件八输血记录单
附件九输血不良反应回报单
一、科室设置
1、科室各实验室设置及负责人
2、科室人员结构
姓名
性别
出生
年月
学历
毕业院校
参加工作时间
现任职称
手机
3、科室平面图
4、检验中心工作流程图
住院病人就诊检验流程
门诊病人就诊检验流程
二、检验中心工作职责
（一）检验中心各级人员工作职责
1、检验中心主任、副主任工作职责
D26、TdT(MRD白血病残留病灶)测定标准操作规程
D27、血小板糖蛋白测定标准操作规程
D28、CD23(Ige低亲和力受体)测定标准操作规程
D29、CD95 / Fas测定标准操作规程
D30、FCM试剂配制标准操作规程
D31、Bcl-2测定标准操作规程
D32、ANNEXIN V测定标准操作规程
D33、P53测定标准操作规程
D10、铁染色标准操作规程
D11、酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程
D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程
D13、自体溶血试验标准操作规程
D14、血清酸化溶血试验(Ham试验)标准操作规程
D15、热溶血试验(定性)标准操作规程
临床医学检验主治医师《相关专业知识》试题(网友回忆版)
临床医学检验主治医师《相关专业知识》试题（网友回忆版）[单选题]1.下列哪种胆红素有细胞毒性()A.非结合胆红素B.单葡萄（江南博哥）糖醛酸结合胆红素C.双葡萄糖醛酸结合胆红素D.与血清白蛋白牢固结合的胆红素E.蛋白非结合型胆红素参考答案：E参考解析：本题考查胆红素的生理生化特点。
蛋白非结合型胆红素为脂溶性，极容易透过细胞膜产生细胞毒性。
[单选题]2.非特异性酯酶染色对诊断下列何种白血病意义最大()A.AML-M2型B.AML-M7型C.AML-M5型D.急性淋巴细胞白血病E.慢性粒细胞白血病参考答案：C参考解析：本题考查非特异性酯酶染色的临床意义。
非特异性酯酶染色AML-M2（＋）；AML-M7（-）；AML，M5（＋）；AML（-）；慢性粒细胞白血病（-）。
[单选题]3.下列组合正确的是()A.纯红再生障碍性贫血-小细胞低色索性贫血B.AML-M4型白病细胞-酯酶双染色阳性C.服华法林的监测指标-APTD.TT延长，被甲苯胺蓝纠正-血中存在狼疮抗凝物质E.多毛细胞白血病-酸性磷酸酶染色阳性，且被L酒石酸抑制参考答案：B[单选题]4.关于试带法检测血尿的叙述，下列错误的是()A.尿中游离血红蛋白、肌红蛋白均呈阳性反应B.尿中红细胞呈阳性反应C.阳性程度与镜检法呈正相关D.不同型号的试带敏感性不同E.维生素C对试验有干扰作用参考答案：C参考解析：本题考查干化学法检测血尿的原理及注意事项。
干化学法既可与完整的红细胞反应，又能测定游离的血红蛋白，且尿中含有的不耐热酶、肌红蛋白或菌尿也可引起假阳性，而大量维生素C又可引起假阴性，因此阳性程度与镜检时尿中红细胞数不一定呈正相关。
[单选题]5.检测浆膜腔积液何种肿瘤标志物，有助于胰腺癌诊断()A.癌胚抗原B.甲胎蛋白C.CA199D.CA125E.CA724参考答案：C[单选题]6.血涂片经瑞氏染色后结果偏碱，不会见到下述何种现象()A.所有细胞呈灰蓝色B.嗜酸颗粒呈暗褐色C.中性颗粒偏粗，呈紫黑色D.淋巴细胞染成黑色E.嗜酸性颗粒呈橘红色，中性颗粒呈粉红色参考答案：E参考解析：本题考查瑞氏染色原理及效果判断。
非特异性酯酶染色实验条件探讨
１ 陈云俊． ． 格拉 司琼用于硬膜外镇痛抗呕吐作用的观察Ⅱ． 】
临 床 麻 醉 学 杂志 ，０ ４ １ ：２ ２０ ；０ ６ ８ ２ 刘俊 杰 ， ． 赵 版 社 ：４ ０ １５
３． Ｗ ａｃ Ｆ， ｈｔ ｔｈａ Ｍ Ｗ ｉｅ ＰＦ． ｓｏ ｒ ｔ ｌ Ｈ ｅ ｎｄ ｖ Ｐｏ ｔ ｐｅａｉ ｌａ ｓ ａ ａ ｏｍｉｉ ｖｅ ｔ ｎｇ：
７ １ ３２ ７：６
外 周 的双重 作 用［ 从 而产生 强效 止吐 作 用 。笔 者 临 ４ １ ，
床观察 发 现 ， Ｉ 和 Ⅱ组 恶心 呕吐 的发 生 率 明显 低 组 于 Ⅲ组 ，说 明盐 酸格 拉 司琼可 显著 减少 术 后呕 吐 的
４ 杭 燕 南 主 编 ． 麻 醉 与 复 苏 ［ ． 海 科学 技术 出版 社 ， ． 当代 Ｍ】 上
６ ６ ０ ；成 都市 第二 人 民 医 院检 验 科 ） ４０ ０ ’ （ 州市 人 民 医院 检 验 科 ， 川 泸 州 泸 四 摘
要 目的 ： 讨 非特 异 性 酯 酶 染 色 的 实验 条件 。 法 ： １％甲醛 生 理 盐 水 ，０ 探 方 用 ０ ４ ％甲醛 和 甲醛 蒸 气 对 非特 异性 酯 酶 染 色 固
定 条 件 进 行 了 测 定 ， 时 用 １１ｍｏ／ 、／５ ｌ 、／ ０ ｌＬ的磷 酸 盐 缓 冲 （ Ｈ ．） 制 的 基 质 液 分 别 在 ４ 、０ ９ 钟 的 染 同 ／４ ｌ １１ｍｏ／ １２ ｍｏ／ Ｌ Ｌ ｐ ７４ 配 ５ ６ 、０分 色条 件 进 行 了 测 定 。结果 ： 选 择 甲醛 固定 ５ 钟 染 色结 果 最 好 。三 种不 同浓 度 的 磷 酸 盐 缓 冲液 和 三 个 不 同 的 孵 育时 间 的染 色 是 分 结 果 经 多因 素 方 差 分 析 ，＜ ． ， Ｐ Ｏ ５ 结果 有统 计 学 意 义 。 论 ： 佳 染 色 条 件 为 甲醛 蒸气 固定 ５分 钟 ， １１ｍｏ Ｌｐ ７４ 酸 盐 缓 ０ 结 最 用 ／５ ￣ Ｈ ．磷
血液学血细胞化学染色
B图：急性单核细胞白血病 α-NAE氟化钠抑制染色
原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制 （与A图为同一标本）
B
.
79
【临床评价】
主要用于鉴别急性白血病类型
急单 急粒 急性早幼粒 急粒单 急淋
α-NAE +++或 -或 ++ ++++ 弱+
.
13
原理
酸性环境
铁 ＋亚铁氰化钾
亚铁氰化铁
普鲁士蓝 反应
(蓝色沉淀在含Fe部位)
骨髓小粒中的含Fe血黄素（细胞外铁）
骨髓中贮存铁
幼红细胞内的Fe（细. 胞内铁）
14
二、结果判断
1. 细胞外铁(骨髓小粒－含铁血黄素) 铁颗粒、铁小珠、铁团块
.
15
细胞外铁(低倍镜观察)
（－）：无颗粒
（＋）：有少量铁颗粒或偶见铁小珠
.
4
二、必要性
从形态学观察，存在较多的主观性； 有些原始细胞形态较相似，难以鉴别； 结合细胞化学染色，提高疾病的诊断率。
.
5
三、临床应用
1. 辅助判断急性白血病的细胞类型 2. 辅助血液系统疾病的诊断和鉴别
诊断 3. 观察疾病的疗效和预后 4. 疾病发病机制的探讨
.
6
白血病的诊断：MICM分型
.
71
α-醋酸萘酚
（基质液中）
【原理】
水解 α-醋酸萘酚酯酶 （细胞内）
α-萘酚
重氮盐
（坚牢蓝B）
胞浆不溶性灰黑色 或棕黑色沉淀
.
72
【结果判断】
胞浆内有灰黑色或棕黑色弥散性颗粒状 沉淀为阳性。
.
酸性α-醋酸萘酚酯酶染色标准操作规程
酸性a-醋酸萘酚酯酶（a-NAE ）染色标准操作规程1.【目的】用于血细胞内a-醋酸萘酚酯酶的染色测定。
2.【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。
2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
3.【标本类型及实验前准备】1.标本类型1.新鲜涂片2.样本宜新鲜，若不能及时测定可先用固定液处理后，可保存数天。
3.样本不能沾有酸、碱类物质和有机溶剂，以免产生假阴性。
2.患者准备成人一般取骼后、骼前上棘，其次为胸骨、棘突部位。
2岁以下小儿可穿刺胫骨。
3.容器、添加剂类型骨髓液量不宜过多，不需抗凝，迅速置于载玻片上，必要时可用EDTA2K抗凝。
4.仪器设备捷达骨髓成像系统，OLYMPUS显微镜5.实验试剂1.固定液（A液）：甲醛2.偶氮溶液（B液）：副品红3.亚硝酸钠溶液（C液）：亚硝酸钠4.磷酸盐缓冲溶液（D液）：磷酸盐5.a -醋酸萘酚溶液（E液）：a -醋酸萘酚6.甲基绿溶液（F液）：甲基绿7.NaF液：氟化钠4.【测定原理】盐酸副品红与亚硝酸钠反应生成六偶氮副品红（重氮盐），底物a-醋酸萘酚在酯酶的作用下分解产生a-萘酚，a-萘酚与六偶氮副品红结合生成棕红色沉淀，定位于细胞浆中，本染色液对酯酶染色无特异性，故又称非特异性酯酶染色。
5.【程序性操作步骤】1.工作液配制：1.1浸染工作液配制（一份浸染工作液量为33ml,至少可同时放置8-10张涂片）:1.1.1重氮盐溶液的准备：B液1 ml与C液1ml彻底混匀，静置2分钟；1.1.2染缸（自备染液缸）内加入D液30ml；1.1.3将重氮盐溶液倒入染缸内，混匀；1.1.4再加E液1ml入染缸内，轻轻混匀。
1.2滴染工作液配制（一份滴染工作液量为1.65ml）:使用器材：一次性塑料试管、微量移量液器、一次性吸嘴、滴管。
操作：于试管内加B液50ul、C液50ul，静置1分钟，再加D液1.5ml，E液50ul，混匀，静置2分钟备用（NaF抑制试验加NaF液1滴）。
α乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)操作步骤及染色结果
α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)操作步骤及染色结果货号：G1760有效期：6个月名称3×10ml3×20ml Storage试剂(A):NAE固定液10ml20ml RT避光B1:α-NAE Solution0.2ml0.4ml4℃避光B2:FBB Solution5ml10ml-20℃避光试剂(B):α-NAE孵育液B3:α-NAE Buffer5ml10ml RT临用前，按1:25:25混合，现用现配试剂(C):甲基绿染色液10ml20ml RT避光试剂(D):NaF solution0.2ml0.4ml RT避光产品说明：酯酶主要分为非特异性酯酶(non-specific esterase)、酯酶(lipase)、胆碱酯酶(choli-esterase)。
α-乙酸萘酚酯酶染色液(α-NAE法)又称非特异性酯酶染色液，其原理是细胞中的非特异性酯酶将α-乙酸萘酚水解产生α-萘酚，α-萘酚再与重氮盐偶联，生成不溶性有色沉淀，定位于细胞质。
本染色液对酯酶染色无特异性，故又称作非特异性酯酶染色液。
操作步骤(仅供参考)：1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切入α-NAE固定液固定10-15min。
2、水洗5min，晾干。
3、入配制好的α-NAE孵育液，放入湿盒中，37℃避光孵育1h，水洗。
4、入甲基绿染色液复染，水洗，镜检。
染色结果：细胞质：灰黑色或棕黑色弥漫性或颗粒状沉淀细胞核：绿色注意事项：1、血液或骨髓细胞涂片应新鲜，薄厚适宜，2天内染色，否则会影响酶活2、α-NAE孵育液易失效或降低阳性强度，即配即用，不宜久置。
3、α-NAE孵育液配置后可能出现浑浊，这不会影响染色效果4、每次染色时，应有阳性对照片。
酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色
酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色[方法学]酯酶染色的方法很多，根据与pH底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。
后者又可分为3类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。
②酸性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酯酶和α—丁酸菜酯酶。
②碱性非特异性酯酶染色法：α—丁酸菜酯酶。
中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血病区别的重要方法，一般实验室可选用此法。
[原理]α—乙酸萘酚经酯酶水解产生萘酚，萘酚与重氮盐偶联，生成灰黑或棕黑色沉淀物，定位于胞浆中。
[试剂]1．α—醋酸萘酯丙酮液：α—醋酸萘酯1g，加丙酮和蒸馏水混合液100m1，溶解后贮于磨口带塞三角瓶内，4℃保存，可使用半年。
2.pH7．4磷酸盐缓冲液：0．07MNa2HPO4(即Na2HPO4)3．基质液：磷酸盐缓冲液82ml，缓慢滴加α-醋酸萘酯丙酮液1．6ml(滴速约每分钟40滴)，边加边用力振摇。
根据5分钟后，加坚牢蓝B80mg，剧烈振摇10分钟，立即过滤，滤液两杯，各40ml。
4．氟化钠基质液：称取氟化钠(NaF)61mg加入上述其中基质液1杯内，混匀后，标上标记。
[操作](1)新鲜涂片两张，分别标上NSE和NaF记号，滴加10％甲醛生理盐水，固定5分钟，用自来水轻轻冲洗，当心血膜脱落，晾干。
(2)两张涂片同时放入各自染色杯内，37℃水浴1小时。
(3)取出后水洗，晾干后镜检。
不用复染。
[结果观察]在胞浆内若有棕黑色或灰黑色弥漫性颗粒沉淀者为阳性，细胞脑浆为黄色者为阴性。
[临床意义]1．阳性：单核细胞和组织细胞呈强阳性，但可被氟化钠抑制；巨核细胞及血小板呈阳性；早幼粒细胞白血病时早幼粒细胞可阳性，且不受氟化钠抑制。
编写：谢平制定日期：2011.12.12．弱阳性及阴性：粒细胞、淋巴细胞一般为阴性，若有弱阳性也可被氟化钠抑制。
3．临床鉴别：主要用于鉴别急性单核细胞性白血病与急性粒细胞性白血病，前者NSE阳性，且受氟化钠(NaF)抑制；而后者NSE阴性，若有阳性也不受氟化钠抑制。
血液学检验2.2.3 酯酶染色(SE、NSE)
根据
酯酶ห้องสมุดไป่ตู้特异 性高 低分 为:
特异性酯酶(氯乙酸AS-D萘酚酯酶)
酸性酯酶(酸性α- 醋酸萘酚酯酶 )
pH值不同
非特异性酯酶
α- 醋酸萘酚酯酶 中性酯酶
醋酸AS-D萘酚酯酶
碱性酯酶( α-丁酸萘酚酯酶 )
（一）特异性酯酶染色法如氯乙 酸AS-D萘酚酯酶（ NAS-DCE ）
该酶主要分布在粒细胞和肥大细胞中，原粒细胞
［原理］
临床意义
急性单核细胞白血病：白血病细胞呈强阳性反应，且能 被氟化钠抑制。
急性粒细胞白血病时，白血病细胞呈阴性反应，少数可 呈阳性反应，不被氟化钠抑制。
急性淋巴细胞白血病时，白血病细胞呈阴性反应。
A图：急性单核细胞白血病α-NAE染色 原始、幼稚单核细胞多呈强阳性
A
B图：急性单核细胞白血病 α-NAE氟化钠抑制染色
原始、幼稚单核细胞阳性反应被氟化钠抑制 （与A图为同一标本）
B
为阴性或阳性反应，早幼粒细胞、中幼粒细胞呈强阳
性反应，中性分叶核粒细胞酶活性下降。 故称为粒细
胞脂酶或特异性脂酶。
M1
M3
M5
氯乙酸酯酶染色的主要临床意义鉴别白血病类型： 急粒为阳性； 急淋、急单为阴性； 急粒单为部分细胞阳性，部分细胞阴性。
（二）非特异性酯酶染色（a－醋酸 萘酚酯酶染色α-NAE ）
细胞化学染色
55
疾病鉴别 （1）红细胞系统疾病：M6、MDS呈阳性（均匀或块状红色） ；巨幼贫、再障呈阴性。 （2）白血病： 急淋及慢淋：粗颗粒或块状阳性 急粒：阴性或弱阳性（弥散细颗粒） 急单：阳性，多为细颗粒有时可见粗颗粒 急性巨核细胞白血病：阳性（块状）
整理版ppt
5656
PAS
AML-M6 幼红细胞呈阳性反
整理版ppt
5050
4.注意事项 （1）所用染色缸及器具应十分清洁、干燥。 （2）雪夫氏染液应避光密封保存，变红则失效。 （3）放入雪夫氏溶液之前，用蒸馏水洗涂片， 而且一定要完全干燥，若有水，试剂变色失效。
整理版ppt
5151
（4）染色时间和温度应相对恒定，一般37℃效果最 好。 （5）染好的标本不能久放，8天后渐退色，因此应及 时观察。
整理版ppt
5454
正常血细胞PAS染色
1.原始粒细胞（-） 2.早幼粒细胞（+） 3.中性中幼粒细胞（++）
4.中性晚幼粒细胞（+++）5.中性杆状核粒细胞（++++） 6.中性分叶核粒细胞（++++）
7.嗜碱性粒细胞（+++）8.嗜酸性粒细胞（+++） 9.单核细胞（±）
整理1版0p.p淋t 巴细胞（++++）
应
MA 幼红细胞呈阴
性反应
整理版ppt
57
急性淋巴细胞白血病PAS染色 原始、幼稚淋巴细胞均阳性，呈粗颗粒状阳性
整理版ppt
2424
5.结果观察:(对照片成熟中性粒细胞中出现棕
黑色颗粒为阳性细胞，说明染色成功) 正常人除成熟中性粒细胞NAP可见阳性外，其 它血细胞均为阴性。且正常阳性率＜40%，积分 值30～130分。
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医院检验中心酯酶染色---中性非特异性脂酶(α—NAE)染色操作规程
[方法学]
酯酶染色的方法很多，根据与pH底物等不同作用，将常用的酯酶染色法分为两大类，即特异性酯酶染色和非特异性酯酶染色。
后者又可分为3类：①中性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酚酯酶、乙酸菜酚酯酶和乙酸菜酚AS-D酯酶。
②酸性非特异性酯酶染色法：α—乙酸菜酯酶和α—丁酸菜酯酶。
②碱性非特异性酯酶染色法：α—丁酸菜酯酶。
中性非特异性酯酶染色是单核细胞与粒细胞白血病区别的重要方法，一般实验室可选用此法。
[原理]
α—乙酸萘酚经酯酶水解产生萘酚，萘酚与重氮盐偶联，生成灰黑或棕黑色沉淀物，定位于胞浆中。
[试剂]
1．α—醋酸萘酯丙酮液：α—醋酸萘酯1g，加丙酮和蒸馏水混合液100m1，溶解后贮于磨口带塞三角瓶内，4℃
保存，可使用半年。
2.pH7．4磷酸盐缓冲液：0．07MNa2HPO4(即Na2HPO4)
3．基质液：磷酸盐缓冲液82ml，缓慢滴加α-醋酸萘酯丙酮液1．6ml(滴速约每分钟40滴)，边加边用力振摇。
根据5分钟后，加坚牢蓝B80mg，剧烈振摇10分钟，
立即过滤，滤液两杯，各40ml。
4．氟化钠基质液：称取氟化钠(NaF)61mg加入上述其中基质液1杯内，混匀后，标上标记。
[操作]
(1)新鲜涂片两张，分别标上NSE和NaF记号，滴加10％
甲醛生理盐水，固定5分钟，用自来水轻轻冲洗，当
心血膜脱落，晾干。
(2)两张涂片同时放入各自染色杯内，37℃水浴1小时。
(3)取出后水洗，晾干后镜检。
不用复染。
[结果观察]
在胞浆内若有棕黑色或灰黑色弥漫性颗粒沉淀者为阳性，细胞脑浆为黄色者为阴性。
[临床意义]
1．阳性：单核细胞和组织细胞呈强阳性，但可被氟化钠抑制；巨核细胞及血小板呈阳性；早幼粒细胞白血
病时早幼粒细胞可阳性，且不受氟化钠抑制。
2．弱阳性及阴性：粒细胞、淋巴细胞一般为阴性，若有弱阳性也可被氟化钠抑制。
3．临床鉴别：主要用于鉴别急性单核细胞性白血病与急性粒细胞性白血病，前者NSE阳性，且受氟化钠
(NaF)抑制；而后者NSE阴性，若有阳性也不受氟
化钠抑制。
[附注]
(1)坚牢蓝B和氟化钠可小包分装后干燥器保存
(2)基质液配制过程中要振摇，以促使基质溶解。
冬天配
制时应适当加温(置于37℃水箱操作)。
基质液现配现
用，不能保存，过滤后应尽快试验，以免大量沉淀物析出，影响染色效果。
D10、铁染色
[原理]
骨髓细胞外铁和有核红细胞中的铁粒，在酸性环境下与亚铁氰化钾作用，呈阳性普鲁士蓝反应。
[试剂]
(1)200g/L亚铁氰化钾溶液，溶液可保存数周，明显发绿
和较多沉渣时应重配。
(2)浓盐酸，可取少量贮存于油瓶内备用。
放置时间太长
或用时未见冒烟现象，应即更换。
(3)铁染色应用液，即加浓盐酸约20滴于干净的10mL离
心管(或小量杯)中，再加200g儿亚铁氰化钾溶液少量，混合液变泥浊，然后缓慢再滴加双铁氰化钾溶液’，
使混浊消失即可。
此液不必过滤，也不用离心。
但应
现配现用，不能保存.
[操作]
(1)取骨髓小粒较多的涂片1张，用铅笔写上姓名、时间。
最好用蜡笔在涂片体、尾部划两条线，以防做细胞内
铁染料复染时液体渗出。
(2)使应用液盖满涂片，于室温作用30分钟，冬天可适当
延长，后以自来水轻轻冲洗，以免髓膜脱落。
(3)待干后，在蜡笔线中间区加0．5％伊红乙醇溶液复染
2分钟。
水洗，待干。
(4)在骨髓小粒内观察细跑外铁，在伊红复染区镜检红细
胞内铁。
[结果观察]
1．细胞外铁：常用低倍镜观察
(-)：骨髓小粒呈黄色，无蓝龟成分。
(+)：小粒网架中分布较淡的蓝色成分。
(++)：有较多蓝色铁粒和深蓝色的圆形小珠。
(+++)：肉．眼可观察到小粒变为蓝色;镜下有许多铁
粒、小珠和少数蓝色小块。
(++++)：肉眼可观察到小粒明显变蓝色。
有大量的铁
粒、小珠和许多蓝色小块。
2．细胞内铁：
计数100个有核红细胞，记录阳性细胞(胞浆中有蓝色颗粒)的百分率。
同时注意细胞内铁颗粒数目、大小、染色深浅，特别应注意有无环状铁粒幼红细胞。
[参考值]
细胞内铁：各人变化较大，一般在O．10—0．80(10—80％)。
换算系数：=％×0.01
细胞外铁：(+)一(++)
[临床意义]
(1)缺铁性贫血的外铁阴性：内铁平均6％，其铁粒细小，
数目4—2个。
此类贫血约占总贫血病人的80％以上。
(2)铁粒幼细胞性贫血，环形铁粒(环核排列的粗大铁粒5
个以上或铁粒排列在核周1／3以上)的幼红细胞占总
有核红细胞的15％以上。
(3)其他贫血的铁染色情况不一，如巨幼细胞性贫血可伴
有缺铁。
也可以出现正常或增多。
[附注]
(1)铁染色用的玻片、杯子、试剂等应避免受铁剂污染。
玻片事先应作好除铁处理，不能放有铁锈的烤箱内烘
烤。
(2)亚铁氰化钾消除混浊时，因反应较慢，后期滴加速度
不宜太快。
(3)反应时间不宜太长，否则析出的结晶会沉积在涂片上，
较难冲洗之。
(4)伊红易结晶析出，故复染时间太长或浓度太高，均会
影响细胞内铁的观察。
(5)铁染色作为一种最简便的常规组化，有助于各种贫血的诊断和鉴别诊断，当涂片无骨髓小粒，虽无法观察外铁，但内铁的观察对贫血的诊断也可起决定性的作用。