术中快速冰冻切片的规范及程序
术中快速冷冻病理诊断工作制度与程序
术中快速冷冻病理诊断工作制度与程序（一）术中快速冷冻病理诊断工作制度手术中快速冷冻切片病理诊断（以下简称“冷冻”）是将手术切下的病变组织在冷冻切片机中迅速冷冻后制成切片，进行病理诊断。
一般在30分钟左右得出诊断意见，为临床手术提供参考。
冷冻是一种高技术、高难度、高风险的病理项目。
其主要作用：（1）确定送检标本组织是否有病变存在；⑵确定病变或肿瘤的性质；⑶确定手术切缘有否肿瘤；⑷确定送检组织有否癌浸润或转移等。
但由于取材局限、标本冰晶及时间短等问题，冷冻切片质量不能达到常规石蜡切片的精确度，诊断准确率受到影响。
可以出现以下情况：（1）只能做良、恶性鉴别，为临床提供一个参考性意见；（2）诊断困难，允许发延迟报告或等待石蜡切片诊断，发出最终报告；（3）冷冻诊断与常规石蜡诊断不符时，以石蜡切片报告为准。
“三甲”医院要求冷冻诊断的准确率≥96%。
为减少和防止医疗差错和纠纷，有利于此项工作的规范化开展，特制定该制度。
1. “冷冻”预约规定：需做术中快速冷冻病理诊断时，各手术科室提前1～2天详细填写冷冻申请单（可用普通病理申请单代替）送病理科。
要求尽可能填全各项内容，注明做冷冻的具体年、月、日、时，以便病理科做好准备；除填临床诊断外，请提出要解决的问题，如确定“病变性质”、“切缘有否浸润”、”淋巴结有否转移“等等。
送冷冻标本时应同时送交“术中病人情况所见通知单”。
一般不提倡急诊“冷冻”申请。
如确需急诊冷冻时，要及时与病理科主任联系，说明情况。
病理科尽量创造条件，满足临床需要。
2. 病理科实行“冷冻查房“制度：病理各级医师在手术前1日应下病房查病人、看病历或请病人来病理科接受查体，与主管医师交换意见，全面了解有关冷冻方面的病人情况。
3. 实行“手术中快速冷冻病理诊断知情同意书”（样本附后）签字制度。
术前由病理及临床医师，在病理科共同向病人和其家属谈话，交代冷冻有关事项，征得其理解、同意并签字。
“知情同意书”一式两份，一份留为临床原始资料，放入病历中；另一份存于病理科。
医院冰冻切片技术操作规程
冰冻切片技术操作规程
1.接通电源开关，打开箱内照明灯，设定或调整切片温度（-25℃左右）。
将切片刀装入持刀架上固定。
2.将待切样品以OCT包埋在持物托上置于切片机冷冻台冷冻，打开速冻开关。
待切片机箱内温度达到设定温度及样品冻硬后，将样品连同持物托一同置于持物架上，固定。
3.右手转动旋转轮，左手间断按动样品前进开关，使样品徐徐向前推进，直至组织平面完全修出平整。
4.调整好防卷板至刀刃平行，定好欲取切片的厚度标尺（6-10微米），放下防卷板，速度均匀的转动切片机旋转轮，切片。
5.打开防卷板，用玻片吸附切片，切片会自然附贴于玻片上。
以95%乙醇固定1-3分钟即可进行染色。
6.染色完毕后，将持物托上的剩余组织放入有编号的包埋盒内并固定。
将持物托用水洗涤干清、擦干备用。
7.将切片机中的碎组织彻底清理干净，用棉花蘸无水酒精轻轻擦拭防卷板及刀架。
8.关闭箱内照明灯，将切片机温度调至保持温度（-6℃）。
术中冰冻病理,您知多少?
术中冰冻病理,您知多少?术中冰冻病理全称为术中快速冰冻切片病理检查，此项技术是现今手术中病理诊断最快的一种方法。
其最大的价值在于对术中性质不明的病变予以确诊，通常可以在30分钟内给出诊断报告，使临床能立即确定手术治疗方案。
如果诊断为恶性肿瘤，就可以直接根据结果选择手术方式及手术范围，优化手术方案，从而有效避免了二次手术及损伤，缩短诊疗过程，减轻患者痛苦，减少医疗费用。
那么术中冰冻病理是如何进行的呢？都适用于哪些疾病呢？下面我们一起看看吧。
一、术中冰冻病理检查对于确诊的肿瘤，临床医生通常选择手术进行切除治疗，但是肿瘤分为恶性和良性，针对于良性的肿瘤只需要完整的切除肿瘤就可以达到治疗的目的，周围组织正常处理就可以关闭切口了。
如果是恶性肿瘤，那就需要扩大切除并且对周围淋巴结进行清扫等其它处理方式。
如何知道肿瘤的性质，就需要进行病理检查了。
此时肿瘤被主治医生装进一个干燥无菌的病理标本袋中，送去病理科进行术中冰冻病理检查，这个检查通常在半个小时内就会出结果。
术中冰冻病理诊断报告是主治医生决定下一步手术方式最重要的依据。
并且术中冰冻病理也可以了解恶性肿瘤扩散情况，如肿瘤是否浸润邻近组织、有无淋巴结转移情况；确定手术切缘有无肿瘤组织残留，比如乳腺癌进行保乳手术时，需要在手术中判断切除后组织边缘有无肿瘤残留，从而判断手术是否达到目的。
二、术中冰冻病理检查的流程首先病理科工作人员对对手术室送来的标本和申请单进行核对交接验收，然后病理医生对标本进行仔细的观察、拍照、描述、记录并切取典型病变组织进行切片。
将切下的病变组织放在冰冻头上，加入冷冻包埋剂OCT，OCT是一种聚乙二醇和聚乙烯醇的水溶性混合物，长得有点像胶水，特点就是好冻，好切，溶于水。
使其完全覆盖组织并将冰冻头放入冰冻机中，迅速冷却到-15℃至-20℃，以便于技术人员利用冰冻切片机将组织切成4-5微米的薄片，随后将组织薄片贴在载玻片上并放入固定液内固定约1分钟。
术中冰冻病理工作制度
冰冻切片检查工作制度
1.由于取材、技术固有缺陷等因素，应在术前向病人或家属介
绍冰冻切片有一定局限性，签署冰冻快速诊断知情同意书。
2.应在手术前一天通知病理科并送病理申请单。
送标本时，应
电话详细介绍手术所见、取材部位及手术诊断情况，骨科患者应送软组织并提供X光照片参阅。
3.冰冻标本必须新鲜立即送检，避免过度湿润，切忌以盐水等
浸泡,严禁放入福尔马林固定液中，最好用干纱布包裹组织送检。
4.单件标本的冰冻切片制片应在15分钟内完成，诊断应在30
分钟内完成。
保留所剩组织，固定后作常规石蜡切片。
5.对于难以明确诊断、交界性病变、送检组织不适宜等状况，
病理医师可以不作出明确诊断，等待石蜡切片报告。
6.术中快速诊断仅作为手术中治疗的参考，不是最终诊断。
7.冰冻切片诊断报告必须采用书面形式（可传真），为防止误听
和误传，严禁采用口头或电话报告的形式。
8.从标本接收到发出报告的时间，应在病理申请单上注明。
9.冰冻病理诊断医师应具有副高级以上病理学专业技术任职资
格，并有5年以上病理阅片诊断经历。
10.冰冻切片诊断报告书应由病理医师签署全名。
11.冰冻切片标本验收、核对、编号、登记、报告及切片管理同
常规病理检查。
手术中冰冻组织病理检查的一般流程
手术中冰冻组织病理检查的一般流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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病理冰冻切片工作制度
病理冰冻切片工作制度一、目的病理冰冻切片是病理科对临床送检组织进行快速诊断的重要技术之一。
本制度的建立旨在规范病理冰冻切片工作的操作流程，确保切片质量，提高诊断准确率，保证医疗安全。
二、适用范围本制度适用于病理科所有从事病理冰冻切片工作的医护人员。
三、工作流程1. 接收标本：病理科收到临床送检的组织标本后，应及时登记，并对标本进行核对，确保标本的完整性和准确性。
2. 取材：病理科医生根据临床申请单上的要求，选取适当的组织块进行切片。
组织块应尽量选取有代表性的部位，避免坏死、出血等影响诊断的因素。
3. 固定：将选取的组织块放入适当的固定液中，固定时间为1-2小时。
固定液的选择应根据组织类型和切片要求进行调整。
4. 切片：将固定后的组织块放入切片机中，调整切片厚度，进行切片。
切片过程中应保持切片机清洁，避免切片的污染。
5. 染色：将切好的切片放入染色剂中，根据染色剂的要求进行染色。
染色时间为1-2小时。
6. 脱水：将染色后的切片进行脱水处理，脱水时间为1-2小时。
7. 透明化：将脱水后的切片进行透明化处理，透明化时间为1-2小时。
8. 封片：将透明化后的切片放入封片机中，进行封片。
封片时应避免气泡的产生。
9. 诊断：病理科医生对切片进行镜下观察，并根据诊断结果填写病理报告。
10. 质控：病理科应定期进行质量控制，确保切片质量和诊断准确率。
四、工作规范1. 病理冰冻切片工作应由具有相关专业背景和经验的医护人员负责。
2. 病理科医生在进行切片前，应仔细阅读临床申请单，了解患者的病史和临床表现，以便更好地进行切片选择和诊断。
3. 病理冰冻切片应按照标准化操作流程进行，确保切片质量和诊断准确率。
4. 病理科医生在镜下观察切片时，应仔细观察组织的形态、结构、细胞学特征等，并根据诊断标准进行诊断。
5. 病理科医生在填写病理报告时，应准确、清晰地描述诊断结果，并提供相应的临床建议。
6. 病理科应定期对病理冰冻切片工作进行质量控制，包括切片质量检查、诊断准确率评估等，并对存在的问题进行及时改进。
病理科手术中快速冰冻病理诊断工作制度
病理科手术中快速冰冻病理诊断工作制度手术中快速冰冻切片病理诊断（以下称“冰冻”）是一种高技术、高难度、高风险的项目。
三甲医院要求冰冻诊断的准确率≥98%。
该项目的主要作用：（1）确定病变性质，2）确定切除范围，（3）确定淋巴结有无肿瘤转移，（4）辨认组织，（5）为标本进一步检查和研究提供依据，（6）证明送检标本组织是否有病变存在，（7）确定病变或肿瘤的性质，（8）确定手术切缘有否肿瘤残余，（9）确定送检组织有否癌浸润或转移等。
由于取材局限、标本冰晶、技术及时间等问题，可能出现诊断困难和冰冻诊断与常规石蜡诊断不符的现象，所以病理确诊难以做到100%。
为减少和防止医疗差错和纠纷，有利于此项工作的规范化开展，特制定该制度。
一、“冰冻”预约规定：需做术中快速冰冻病理诊断时，各手术科室提前1天详细填写冰冻申请单（可用普通病理申请单代替）送至病理科。
要求尽可能填全各项内容，注明做冰冻的大致时间，以便病理科做好准备;除填临床诊断外，请提出要解决的问题，如确定“病变性质”“切缘有否浸润”“淋巴结有否转移”等。
送冰冻标本时务必同时送交“术中病人情况所见通知单”。
二、一般不提倡急诊“冰冻”。
如确需急诊冰冻时，要及时与病理科主任联系，说明情况。
病理科尽量创造条件，满足临床需要。
二、以下情况不宜做“冰冻”：骨组织含钙及脂肪组织不能切片;怀疑为淋巴瘤的组织难以定性;甲状腺滤泡型癌等要看被膜等处的局部浸润;一些软组织肉瘤依赖核分裂相计数等冰冻切片均难以做到，所以故不适合做冰冻病理诊断。
特殊情况下，临床病人坚持要做，在病理与临床医师达成共识后，可以试做。
三、病理科实行“冰冻查房”制度：病理各级医师在手术前一日都应下病房查病人、看病历，与主管医师交换意见，全面了解有助于冰冻方面的病人情况。
实行“手术中快速冰冻病理诊断知情同意书”签字制度。
术前由病理及临床医师，在病理科共同向病人或其家属谈话，交代冰冻有关事项，征得其理解、同意后签字。
冷冻切片操作
冷冻切片操作程序：
1. 冷冻切片机要始终处于运行状态，即使在不做冷冻切片时也要开着致冷，不能时开时关，以免影响机器寿命。
2. 手术取下的新鲜组织不要固定，因固定过的组织不利于切片，而且还会影响染色。
3. 用OCT做包埋剂，起到支撑的作用。
先将OCT标在固定头上再将组织放在OCT上，OCT不要太多，以免流到固定头外，组织表面露在OCT外。
4. 外固定头放在冷冻机内的速冷台上，在-25℃左右，冻10min，视组织不同而时间略有差异，组织较大或脂肪组织时间可长一些，一般情况下10min左右即可。
如果冷冻不足，则切片可呈粥糜状或切不下来；如果冷冻过分，则切片呈碎悄状或切片上呈条痕状，都得不到良好的切片。
5. 高速刀的角度，固定好，切片刀要快。
6. 把冻好的冻头夹到切片机上，用精调修平组织，使其暴露最大切面，将微调刻度调在5μm，放下抗卷板开始切片，得到满意切片后，打开抗卷板，将组织贴在载玻片上。
载玻片要放平。
动作要稳，一次完成，这样才能将切片完整的贴在载玻片上。
7. 切片晾干后用95％乙醇固定10s，水洗后进行常规染色。
8. 冷冻切片完成后取下冻头组织，固定后做常规切片。
将冷冻机内的组织碎屑清扫干净，定期打开紫外线消毒。
划重点！冰冻切片流程和注意事项都在这了！快快get起来~
划重点！冰冻切片流程和注意事项都在这了！快快get起来~冰冻切片定义冰冻切片是指新鲜组织不经过任何固定、脱水、透明等处理，不需要石蜡包埋，直接在冰冻切片机上进行切片的一种方法。
冰冻切片特点：操作简单，耗时短，对组织抗原损伤小，对环境污染小。
冰冻切片流程（10-15min内即可完成）：取材→包埋（<30s）→冷冻（1-3min）→切片（2-5min）→固定（10-15s）→染色（4-5min）→封片（<1min）1、取材（1）新鲜组织取材不能遇水，如果组织自身带水较多，可用滤纸吸干（目的是为了防止冰晶空洞等现象在切片过程中产生）；（2）取材的工具也要保持干燥，取材时所取的范围应尽量避开出血坏死区域及脂肪区域；（3）取材组织大小要合适，厚度尽量在3mm，最多不要超过5mm（组织过大切片时阻力加大，易产生刀痕和褶皱）。
2、包埋（1）包埋机一般使用OTC或普通胶水，OTC包埋剂质感细腻，对刀片损伤小，有利于切片；（2）包埋时要将包埋剂涂抹均匀，确定好组织的包埋方向，例如管腔、皮肤、囊壁等要竖立包埋；（3）包埋体积较小的组织，可以先挤压少许的包埋剂形成一个平台，再放入小组织进行包埋。
3、冰冻温度与时间（1）冰冻温度与时间是冰冻切片的关键步骤，要根据组织的类型和大小来调节；（2）冰冻温度过低，会造成组织过硬，切片碎裂；温度过高会造成组织硬度不够，难以切片；（3）不同组织冰冻切片适宜温度：4、切片（1）在组织和包埋剂冷冻到发白后即可开始切片；（2）切片时右手摇动手轮要力道均匀、柔和、缓慢，切片厚度控制在5um左右，左手持毛笔在切片形成时轻按住组织边缘，使其不发生卷曲；（3）将切片展平粘贴在干净的载玻片上，应立即放入固定液中固定，如果固定不及时，会发生细胞退变，切片中细胞核模糊不清呈雾状。
5、染色流程：固定（95%乙醇）→苏木素→水洗→盐酸乙醇分化（0.5~1%）→水洗→温水返蓝→伊红→梯度酒精→二甲苯透明→封片6、注意事项（1）纤维及结缔丰富的组织，应顺着纤维纹理切片，否则容易崩裂；（2）较硬较脆的组织应尽量切的薄一些；（3）选择合适的固定液（95%乙醇、甲醛、甲醇、丙酮），且固定液要保持新鲜，及时更换固定液；（4）组织尽量快速冷冻，组织间隙的自由水易冷冻凝结形成冰晶，组织冷冻越缓慢，冰晶形成的数量越多，体积越大。
冰冻切片的步骤要求和作用
冰冻切片的步骤要求和作用环境要求：冰冻切片是一种常用的实验技术，在生物学研究、组织学以及免疫组织化学等领域中广泛应用。
它的作用是在保持组织的形态和结构的同时，为后续的研究提供高质量的样品。
下面是冰冻切片的步骤要求和作用的详细介绍。
步骤要求：1.样本选择：选择适合冰冻切片的样本，例如组织的大小适中且不易破裂的组织。
2.固定样本：使用适当的固定剂对样本进行固定，以保持组织的形态和结构。
3.处理样本：用缓冲液对样本进行洗涤处理，去除细胞液和外源性污染物。
4.冻结样本：将样本在低温条件下冻结，最常用的方法是使用液氮或酒精浴。
5.切片样本：使用切片机将冻结的样本切成薄片，通常为10-50微米的厚度。
6.挂片或贴片：将切片移至载玻片或切片笼中，并在玻片上做相应的标记。
作用：1.保持组织形态和结构：冰冻切片可以保持组织的天然形态和结构，避免固定和染色等过程对组织产生的变性和变形。
2.提供高质量的样品：因冰冻切片的快速切割过程，可以获得高质量、无伤害的组织样品，适合各种形态和形状的组织切片。
3.便于固定和染色：冰冻切片可以便于进一步固定和染色处理，以进行组织学、免疫组织化学等研究。
4.保存组织信息：冰冻切片可以有效保存组织的蛋白质、核酸和其他生物大分子的信息，保留了研究的全面性和综合性。
5.实时观察组织结构：冰冻切片可以随时进行观察和实时分析，不需要特殊的染色处理，有利于实验结果的快速获取。
总结：冰冻切片是一种常用且重要的实验技术，在生物学研究中发挥着重要的作用。
它的步骤要求和作用都与保持组织形态和结构、提供高质量样品、便于进一步处理和观察等方面密切相关。
通过冰冻切片技术，我们可以更好地理解和研究生物体内部的结构和功能，为生物学研究的进展提供有力支持。
病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不一致时的追踪与讨论的规定与程序
病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不一致时的追踪与讨论的规定与程序
病理报告与术中快速冰冻切片检查及术后诊断不一致时的
追踪与讨论的规定与程序
在手术中快速冰冻病理诊断病例中当出现术中快速冰冻切片检查病理报告与术后病理报告诊断不一致时，相关科室应开展追踪、讨论的程序。
1、病理科科主任组织科内相关人员进行相关病例的讨论（2周内），分析两者诊断报告不一致的原因和存在问题，主要从以下几方面查找原因并准确记录：
1）术中快速冰冻切片送检标本手术医师取材是否准确；
2）申请冰冻切片诊断的病例是否符合进行冰冻切片诊断的要求；（3）病理取材是否规范，有无遗漏病变；
4）病理技术员制片是否优良，有无影响切片诊断的因素；
5）诊断中是否存在假阴性或假阳性；
6）有无请高级职称病理医师复诊；
7）术中病理医师与临床手术医师是否进行信息交流沟通等。
2、明确存在的问题后，对发生的原因进行讨论分析，提出针性的改进措施，同时针对相同科室、送检相同部位术中冰
冻切片诊断的病例进行复查、追踪，落实改进措施，避免类似情况再次发生。
3、病理科应与临床科室进行交流，讨论呈现诊断结果不同等的缘故原由以及此后需要改进的地方。
冷冻切片操作指南
冷冻切片操作指南在医学、生物学和食品科学等领域中，冷冻切片是一种重要的技术，用于将样品冷冻固化后，切割成薄片以供进一步观察和研究。
本文将为读者提供一份冷冻切片操作指南，介绍冷冻切片的基本原理、实验室操作步骤和注意事项。
一、冷冻切片的基本原理冷冻切片是将样品通过快速冷冻技术使其迅速固化，然后使用切片机或显微切片机将固化的样品切割成薄片。
冷冻切片的目的是保留样品的形态和结构，避免切片过程中的伤害和变形。
冷冻切片一般适用于需要保留细胞和组织结构的实验。
二、实验室操作步骤1. 样品准备：将待切割的样品准备好，可以是细胞、组织或食物等。
样品处理过程中需要注意保持样品的完整性和活性。
2. 冷冻固化：将样品放置在冷冻剂中，例如液氮或冷冻盒中的冰水混合物中，进行快速冷冻固化。
冷冻时间需要根据不同样品的特性进行优化，一般在几分钟至数小时之间。
3. 选用切片仪器：根据实验需求，选择合适的切片仪器，可以是手动的切片机或半自动/全自动的显微切片机。
4. 切片调整：根据实验需求，调整切片仪器的切割参数，例如切片厚度和速度等。
通常，薄片的厚度在几微米至数十微米之间。
5. 切片过程：将冷冻固化的样品放置在切片仪器的切片台上，固定好，并且调整好切割参数。
使用手动或电动操作切片仪器，将样品切割成所需的薄片。
6. 切片收集：将切割好的薄片收集起来，可以使用切片刷或显微镊子等工具进行操作。
注意保持薄片的完整性和干燥，避免受到污染和损坏。
7. 切片处理：根据实验需求，进行切片的进一步处理，例如染色、免疫组化等。
三、注意事项1. 样品处理过程中需要注意保持样品的完整性和活性，避免样品受到损伤和变性。
在样品处理过程中，可以使用缓冲液或甘油等物质进行保护。
2. 冷冻固化的时间和温度需要根据不同样品的特性进行优化。
过长或过短的冷冻时间都可能导致样品质量下降。
3. 在选择切片仪器时，需要根据实验需求和预算等因素进行权衡。
手动切片机相对便宜，但操作较为繁琐；半自动/全自动的显微切片机操作更为方便，但价格较高。
手术中快速冰冻切片标本送检操作规范
手术中快速冰冻切片标本送检操作规范【目的】及时送检快速冰冻切片标本，为手术治疗提供参考。
【操作程序】[评估]评估手术间环境，操作台清洁干燥。
[实施要点]1.仪表（1）着装整洁、规范。
（2）指甲平短、清洁，不涂指甲油。
（3）不戴耳环、手镯和戒指。
（4）口罩、帽子佩戴规范。
2.用物标本袋（大、中、小号），专用标本袋标签、手套、笔、抹布、登记薄。
3. 操作流程及评分标准项目要求分值扣分原因得分目的及时送检快速冰冻切片标本，为手术治疗提供参考5评估评估手术间环境，操作台清洁干燥5仪表1.着装整洁、规范2.指甲平短、清洁，不涂指甲油3.不戴耳环、手镯和戒指4.口罩、帽子佩戴规范2111用物标本袋（大、中、小号），专用标本袋标签、手套、笔、抹布、登记薄5操作1. 洗手，戴口罩 32. 备齐用物，备清洁干燥操作台 5步骤3. 与手术医生确认，术前1天已将快速冰冻切片检查申请单交于病理科54. 根据标本的大小、数量选择合适的标本袋4 5. 检查标本袋是否破损，标本袋清洁干燥56. 标本袋贴上专用标签 57. 标签上逐项填写患者姓名、年龄、住院号、科别、床号、标本名称及日期5 8. 待手术医生切除标本，立即戴手套，打开标本袋封口，将标本装袋并封口（每个标本袋只装一个标本）5 9. 与手术医生一起核对，标本与 5标签上注明的标本名称是否正确10. 巡回护士携已装好的标本到手术室家属等候区，呼叫患者家5 属，请患者家属看标本。
并向患者家属做好解释11. 呼叫服务中心人员，立即安5 排熟悉的送检人员送往病理科12. 将标本交于送检人员后脱手3 套13. 登记薄上登记患者姓名、住院号、标本名称、标本数量及送5 检日期和时间14. 巡回护士与送检人员双方签3 名15. 告知手术医生标本送检时 3间，整理用物服务态度1.以患者为中心，按程序进行操作2.讲普通话，语言规范，情感表达适当3.态度和蔼，关心体贴患者5注意事项1.快速冰冻切片标本不需任何处理，不可染有杂物及溶液，以免影响病检结果2.同一患者有数个标本时，标本要排序，标本袋标签上依次注明（如1、2、3等）。
医院术中快速或冷冻切片检查工作制度
文档序号：XXYY-ZWK-001
文档编号：ZWK-20XX-001
XXX医院
术中快速或冷冻切片检查工作制度
编制科室：知丁
日期：年月日
xx医院术中快速或冷冻切片检查工作制度
1.每日上午上班时由值班技术人员根据前日预约的快速或冷冻切片申请单，提前将机器开启做好准备工作。
2.组织送达病理科时，由值班医师负责接诊，并核对送检标本与申请单上的姓名、科室是否相符。
询问相关的临床及手术情况，记录手术间的电话号码。
3.值班医师应根据送检标本的大小，及时准确取材，取材时应尽量避免脂肪、钙化、坏死及骨组织。
对送检组织过小或不易做病理切片的组织，应及时通知手术科室重新取材或取消冷冻切片。
4.取材时需要分部位的多块组织切片请做好标记，将剩余组织装入标本容器中。
并由技术员做好大体标本描写的记录，申请单的登记、编号。
5.值班技术员在接到病理标本后迅速处理或冷冻，并按《病理科冷冻切片操作常规》和《病理科冷冻切片染色常规》在10~15分钟内做出切片。
贴好标签送至诊断室。
6.诊断室做出病理报告后，将报告及时电话通知手术医生，随后将报告送手术室；并将申请单及切片送回技术室。
切片及时保存，以免损坏或丢失。
7.快速或冷冻报告发出后，技术员将冷冻切片组织取下，
同取材的剩余组织加固定液固定。
8.将样品托清洗干净，放回原处，并将机器清理干净，并及时消毒。
知丁。
冰冻切片的步骤及注意事项
冰冻切片的步骤及注意事项嘿，友友们！今天咱来唠唠这冰冻切片的那些事儿，可别小看它哟，这里头的步骤和注意事项那可不少呢！
先说这第一步，取材那可是相当关键呐！就好比你要做一道超级美味的菜，原料得新鲜吧！取材的时候就得眼疾手快，别磨蹭，不然那材料都不新鲜啦！而且取的位置也得准，不然切出来的片子可就不地道喽。
然后就是速冻啦，这就像是给材料来个急速冰镇。
嘿，可别慢悠悠的，得赶紧把它冻得邦邦硬，不然切片的时候可就不好玩啦。
想象一下你切个软不拉几的玩意儿，那能成啥样！
接着就是切片啦，这可是个技术活。
就跟咱削苹果似的，你得手法稳，不然切出来那一片片厚的厚，薄的薄，那可不行！我跟你说，这时候就得开启“大师模式”，每一刀都得恰到好处，别整那些歪七扭八的片子出来。
哎呀，这过程中可得注意好多事儿呢。
比如说温度得控制好，太高了不行，太低了也不行。
温度不对，那切出来的片子不是皱皱巴巴就是碎成渣，这可不是咱想要的结果嘛。
还有呢，切片机也得爱护好，就跟咱的宝贝似的，不然它捣乱起来，你可就有的愁喽。
有时候啊，这冰冻切片就跟一场战斗似的，你得和各种因素斗智斗勇。
一不小心哪里出点差错，那片子可不就给你颜色看啦！但咱也不能怕呀，就得勇敢面对，慢慢摸索，找到最佳的方法。
我还记得刚开始接触冰冻切片的时候，那真叫一个手忙脚乱啊。
不是这儿出问题就是那儿不行，简直让我哭笑不得。
不过呢，随着经验的积累，现在咱也能轻松应对啦。
总之呢，冰冻切片虽然有些麻烦，但只要咱掌握了步骤和注意事项，加上那么一点点的耐心和细心，就一定能把它搞定！友友们，加油干吧，让我们在冰冻切片的世界里闯出一片天！。
冰冻切片的原理、流程和注意事项
冰冻切片的原理、流程和注意事项1冰冻切片的原理冰冻切片是指新鲜组织不经过任何固定、脱水、透明等处理，不需要石蜡包埋，直接在低温恒冷切片机冷冻后马上进行切片的一种方法。
冰冻切片具有操作简单、对环境污染小和对组织抗原损伤小的特点。
又因制作时间和材料有限，保证高质量的冰冻切片非常重要，直接影响病理诊断的正确率。
2冰冻切片的操作流程整体流程：送检和取材要求：•送检标本及时新鲜，组织无需固定，不能遇水，防止冰晶空洞等现象在切片过程中产生•取材的器械要保持干燥，取材时所取的范围应尽量避开出血坏死区域及脂肪区域•所取组织块大小应合适。
组织过大切片时阻力加大，难免产生刀痕及褶皱，加大了制片的难度包埋：•包埋剂一般使用OCT或普通胶水•包埋时将包埋剂涂抹均匀，并根据组织情况和医生的要求确定包埋方向，如管腔、皮肤、囊壁等要立埋•组织体积较小，可先挤入少许胶在包埋托上形成一个”平台“，再放入小组织进行包埋冰冻温度与时间：冰冻的温度与时间时制作冰冻切片的关键因素，需要根据组织的种类、厚度和大小来调节。
如果温度过低，会造成组织过硬、切片破碎；温度过高会造成组织硬度不够，难以切片切片和染色：•在组织和包埋机冻到发白后可以开始切片•是否使用防卷板可根据操作者的习惯，如使用防卷板，一般将其调整到与切片呈5度夹角•切片时右手摇轮转要力道均匀、柔和、缓慢，切片厚度掌握在5微米，左手持毛笔在切片形成时按住组织边缘，使其不发生卷曲•将切片展平粘贴在结晶载玻片上后，应当立即放入固定液中加以固定，如固定不及时，会发生细胞蜕变，切片中细胞核显示不清，呈”云雾状“表现冰冻切片HE染色流程：3冰冻切片的注意事项1. 组织取材要规范冰冻切片的组织要尽可能新鲜，不触碰谁，取材要及时，动作要迅速。
2.取材大小要厚薄适中在确保渠道主要病变的前提下，尽量避开钙化、坏死、脂肪等。
3. 保持取材台面和器材的干净，防止污染4. 组织表示及编号要明确5. 切片固定要及时制片过程要求快速冷冻、快速切片、快速固定。
冰冻切片实验步骤
冰冻切片实验步骤冰冻切片是一种常用的实验技术，用于研究生物样品的结构和功能。
在冰冻切片实验中，样品必须被快速冻结并制成非常薄的切片，以保持样品的原始结构和形态。
以下是一个冰冻切片实验的一般步骤，供参考。
1.准备工作：-准备所需的实验材料和设备，包括动物或细胞样品、细胞培养基、PBS缓冲液、冷冻剂（如液氮或干冰）、冷冻切片机、切片刀片、切片贴片和载玻片等。
-充分冷却冷冻切片机，并确保切片刀片处于锋利和清洁状态。
-确保实验环境卫生干净，并且操作台面上没有其他杂物和细菌。
2.过度冷冻：-在离心管或培养皿中收集样品，如组织块或细胞团。
-将样品迅速置于冷冻剂中，以快速冷冻样品。
在制备过程中，样品冷冻的速度非常重要，可以使用冰浴或液氮使样品迅速冷冻。
3.制备冷冻样品：-将冷冻固态样品放入冷冻切片机的样品夹内，确保样品与夹具接触良好。
-调整切片刀片的角度和位置，以确保薄片的切割。
-使用冷冻切片机制备冷冻样品，比如用于大脑切片的考尔密斯键切片机。
4.切片过程：-打开冷冻切片机的刀片和样品夹，以容纳载玻片。
-将切片刀片横跨切片机的切片口，并确保刀刃与样品夹接触。
-使用微调装置，轻轻地将切片刀片向下移动，以制备样品切片。
可以根据需要调整切片的厚度。
5.取样和处理：-将切制好的样品轻轻地使用毛刷或细针取下，并将其浸泡在PBS缓冲液或其他处理液中进行进一步处理。
-根据实验需求，可以进行染色、免疫标记和显微镜检查等处理。
6.制备切片贴片和载玻片：-取出切片贴片并将其浸泡在PBS缓冲液中，让其变湿。
-使用镊子或其他工具将处理好的样品放在切片贴片上，然后轻轻地将切片贴片放在载玻片上。
确保样品均匀分布在切片贴片上，并避免形成气泡。
7.干燥和封装：-将切片贴片从PBS缓冲液中取出，用纸巾或吸水纸轻轻地吸去多余的液体。
-将载玻片置于干燥盒中，确保切片在常温下彻底干燥。
-使用合适的密封胶将载玻片封装，以防止切片的氧化和损坏。
总结：冰冻切片实验是一种常用的技术，用于研究生物样品的结构和功能。
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术中快速冰冻切片的规范及程序
１.冰冻切片的制备
１.１打开照明开关，打开冰冻切片机的玻璃箱盖。
１.2选择冻头，在冻头滴上冰冻切片机包埋剂适当。
１.3 待组织完全冷冻后，将冻头移到切片刀口的冻口内，扭紧冻头，进行切片，切片时有节奏的来回推动摇手柄，切得完整且较薄的切片（厚度8-9um），即可贴在玻璃片上。
１.4 将切好的片子用95%的乙醇固定，然后进行染色、封片、镜检（同石蜡切片H-E染色步骤）。
１.5工作完毕后将冻头上组织取出，放回送检的标本袋内，用10%的中性甲醛固定液固定。
１.6清扫切冰冻切片机箱，将冻头擦干后放回冰冻切片机内。
１.7关好冰冻切片机的玻璃箱盖，关闭照明电源。
２.冰冻切片机须24h开机，长假或节假日前检查切片机箱内的结冻情况，必要时关机，化霜，清洁冰冻切片机。
３.注意事项
３.1 制作冷冻切片所需的试剂和设备等应处于随时可供使用状态。
３.2 切取的组织块大小适宜（厚度<2mm），并尽快置于冷冻组织切片机上制备切片。
３.3 调节冷冻程度，试切合合适时便迅速切片。
冷冻不足无法切片，冷冻过度切片易碎。
３.4 冷冻切片固定液
95%乙醇50ml
４.单体标本的冰冻制片应在１５min内完成。
术中快速冰冻诊断的规范及程序
１.临床医师在术前向患者或近亲属告知术中快速病理诊断的局限性，签署术中快速病理诊断知情同意书。
２.从标本接收到发出报告的时间，应在病理申请单上注明。
３.有条件的由两位中／高级称职的病理医师共同签署快速活检的病理诊断意见。
对于病变疑难、手术切除范围广泛和会严重致残的手术中快速活检，应由两位高级称职的病理医师共同签署会诊意见。
主检病理医师签名的字迹应能辨认。
４.快速活检诊断意见一般在收到送检标本后３０min内发出；同一时间段内相继收到的多例患者标本或是同一例患者的多次标本，其发出报告的时间依次类推。
对于疑难病变，可酌情延时报告。
５.对于难以即时快速诊断的病变（例如病变不典型、交界性肿瘤病变或送检组织不足以明确诊断等），主检病理医师应向手术医师说明情况，恰如其分地签发病理诊断意见或告知需要等待常规石蜡切片进一步明确病理诊断。
６.主检病理医师签署的快速活检病理诊断意见，以书面形式报告（可传真或网络传输）。
快速活检病理诊断意见报告书发出前应认真核对无误。
７.冷冻切片后剩余组织的处理
７.１冷冻切片后剩余的冷冻组织（简称“冻后”）和冷冻切片取材后剩余、未曾冷冻的组织（简称“冻剩”），均应保存，用以制备常规石蜡切片，以便与冷冻切片进行对照观察。
７.２“冻后”／“冻剩”组织的蜡块和切片需与同一病例手术后送检的切除标本编为同一病理号，并作出综合性诊断。
７.３当冷冻切片病理诊断意见与其“冻后”组织的常规石蜡-HE片的病理诊断不一致时，该例的病理诊断一般应以石蜡-HE片诊断为准。