病原生物学检验讲解

第一章细菌的形态及其检测方法

一、革兰氏阴菌在肽聚糖层外还有特殊的三层外膜结构，由内向外依次为脂蛋白、脂质双层、脂多糖。脂多糖为细菌的内毒素，是由类脂A、核心多糖和特异多糖三部分组成，与细菌的致病性有关，也的革兰氏阴菌的菌体抗原，决定细菌的抗原性。

第二章细菌的生理学和生化试验

一、革兰氏阴菌（外膜）和革兰氏阳性菌（磷壁酸）在细胞壁上的差异的生物学意义

1、与细菌的染色性有关

2、与细菌的药物敏感性有关

3、与细菌的致病性有关

4、与细菌的抗原性有关

二、鞭毛的功能

1、鞭毛是细菌的运动器官。有鞭毛的细菌能运动，可作为鉴别细菌的指标之一

2、鞭毛具有抗原性。可用于对细菌的鉴别和分型

3、有些细菌的鞭毛与致病性有关。

三、动力试验不属于生化试验

四、细菌生长和繁殖的条件

1、充足的营养物质

2、适宜的酸碱度

3、合适的温度

4、必要的气体

五、选择培养基：在基础培养基中加入抑制剂，可抑制费目的的菌生长，选择性的促进目的菌生长。多为固体平板，用于从混杂标本中分离出病原菌。

六、菌落：将标本或培养物化纤接种稻谷体培养基表面，一般经过18~24h培养后，单个细菌可分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团，称为菌落。选取一个菌落移种至另一培养基，生长出来的细菌即时由一个菌体繁殖而成的纯种，称为纯培养。

七、菌落课分为三型：光滑型菌落、粗糙型菌落、粘液型菌落

八、氧化发酵试验的结果（O/F试验）（原理：细菌对葡萄糖的分解有三种不同的类型）：若两管均不变色，为产碱型或不活动型，O/F试验为阴性；两管均产酸变为黄色为发酵型；仅开管产酸变黄，闭管不变色，为氧化型。（铜绿假单胞菌为氧化型）。

九、吲哚试验原理：某些细菌含有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚，吲哚与对二甲基氨基苯甲醛作用，形成玫瑰吲哚而呈红色。该实验也称靛基质试验。

十、凝固酶试验的应用：用于常规鉴定金黄色葡萄球菌与其他葡萄球菌，作为鉴定葡萄球菌致病性的主要依据。经黄色葡萄球菌的凝固酶阳性，表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌的凝固酶阴性。

十一、ＣＡＭＰ试验原理：Ｂ群溶血性链球菌（无乳链球菌）能产生一种胞外物质——CAMP因子，该物质课促进金黄色葡萄球菌β-溶血素溶解红细胞，故在血平板上两种细菌交界处溶血力增强，形成箭头状透明溶血区。

第三章细菌遗传的物质基础与基因诊断技术

一、质粒的基本特征

1、质粒具有自主复制能力

2、质粒DNA所编码的产物可赋予宿主菌某些生物学性状

3、质粒的转移性，质粒可通过接合、转化或传导的方式在细菌之间转移

4、质粒具有不相容性

二、耐药质粒分为两种类型，即接合型和非接合型。接合型耐药质粒又称R质粒，由两部分组成①耐药决定因子（r因子）：具有1至数个耐药基因，是细菌对抗生素产生耐药性；②耐药传递因子（RTF）：编

码宿主菌产生接合和自主复制的蛋白，最主要为性菌毛，具有传递因子的功能。

三、噬菌体可分为两类：毒性噬菌体和温和噬菌体

四、常将失去鞭毛的变异称为H-O变异，此变异是可逆的，失去鞭毛的细菌在五石碳酸的培养基上又可长出鞭毛。

五、S型菌落表面光滑、湿润、边缘整齐，经人工培养多次传代后菌落表面变为粗糙、干燥、边缘不整，即从光滑型变为粗糙型称为S-R变异。S-R变异是由于细菌失去LPS的特异性寡糖重复单位引起的。

第四章其他微生物检验技术

一、双份血清学诊断试验是将血清配对，一份在疾病的发病期（发生症状的7天内），另一份是在恢复期（疾病的3~4周后），恢复期较急性期的总抗体滴度增长4倍或更多可认为有临床诊断意义。

二、影响纸片法药敏结果的因素

1、培养基的质量，如PH、厚度、硬度和表面湿度等。

2、药敏纸片的质量，含药量和保存方式

3、接种菌量正确与否是影响结果的重要因素之一，取决于麦氏比浊标准的配制、正确使用和保存。

4、试验操作质量

5、孵育条件、温度和时间

6、抑菌圈测量工具的精密度

7、质控标准菌株本身的药敏特性是否合格，有无变异

三、稀释法所测得的某抗菌药物能抑制检测菌肉眼可见生长的最低浓度，称为最低抑制浓度（ＭＩＣ）

四、抗菌药物联合运用后的结果有四种类型：①协同作用；②相加作用；③无关作用；④拮抗作用

五、β—内酰胺酶检测碘测定法：青霉素的β－内酰胺环能被细菌产生的β－内酰胺酶水解变为青霉噻唑酸，后者与碘结合，使蓝色的碘－淀粉复合物转变为无色即为阳性，否则

仍为蓝色。

第五章细菌的分类和命名

一、具有某种细菌典型生物学特殊性的菌株称为该菌的标准菌株或代表株

二、细菌的科学命名采用国际上通用的拉丁文双命名法，一个细菌种的学名包括种名和属名。属名在前，用名词，首字母要大写，种名在后，用形容词，首字母小写

第六章病原性球菌的鉴定

第一节葡萄球菌属

一、

二、在高盐甘露琼脂平板上，金黄色葡萄球菌的菌落呈（CNS）的菌落多为白色

三、蛋白抗原为葡萄球菌细胞壁上的一种蛋白成分，称为葡萄球菌A蛋白（SPA），它与IgG的Fc段能非特异的接合而不影响Fab段的免疫活性，故可作为检测各种抗原或抗体的试验诊断试剂。

四、肠毒素30%~50%金黄色金黄色葡萄球菌可产生这种外毒素，耐热，100℃30分钟不被破坏，尚可对抗胰蛋白酶的消化。该毒素分为A、B、C、D、E、F六个类型。金黄色葡萄球菌引起的毒素型食物中毒以A型多见，其次为B、C型。

五、目前临床上已把耐热核酸酶作为判断葡萄球菌有无致病力的重要指标

六、甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和表皮葡萄球菌（MRSE）已成为医院感染的主要病原菌。CNS

作为条件致病菌成为医源性感染的常见的病原菌。MRSA的治疗，轻度感染可选用利福平，SMZ-TMP和