百草枯残留检测方法紫外分光光度法
D-异抗坏血酸钠显色分光光度法测定尿液中百草枯含量
D-异抗坏血酸钠显色分光光度法测定尿液中百草枯含量陈晓兵;徐伟;王苏南;王钰;徐雅露;胡香香;李小民;沙鸥【摘要】D-异抗坏血酸钠在碱性条件下能将百草枯还原成蓝色的自由基,该自由基在604 nm波长处有最大吸收,据此建立了p异抗坏血酸钠分光光度法测定百草枯含量的新方法.百草枯标准溶液质量浓度在0.5～20.0 mg/L范围内与吸光度呈良好线性关系,线性回归方程为A=0.038 97C+0.024 08,线性相关系数r=0.997 0.将该法用于尿液中百草枯的含量分析,回收率在91.6％～109％之间,结果满意.【期刊名称】《淮海工学院学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(025)002【总页数】4页(P42-45)【关键词】分光光度法;D-异抗坏血酸钠;百草枯;尿液【作者】陈晓兵;徐伟;王苏南;王钰;徐雅露;胡香香;李小民;沙鸥【作者单位】连云港市第一人民医院急诊医学科,江苏连云港222002;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;连云港市第一人民医院急诊医学科,江苏连云港222002;淮海工学院化学工程学院,江苏连云港222005;江苏省海洋资源开发研究院,江苏连云港222005【正文语种】中文【中图分类】R595.4百草枯又名对草快,化学名1,1’-二甲基-4,4’-二氯二吡啶阳离子盐,为有机杂环类接触性脱叶剂及除草剂,被广泛应用于农业除草,成为全球使用最广泛的除草剂.但在除草剂使用过程中,发现其对人类健康有较大影响.人体误服或直接接触百草枯后,其可通过胃肠道、呼吸道及皮肤粘膜吸收,引起致死性的肺纤维化、肝肾功能损伤等[1-3].由于百草枯的致死量小,其摄入量与预后密切相关,而目前临床检测百草枯的方法以及判断中毒程度的依据缺乏,给临床快速判断带来一定困难,快速测定中毒者尿液中百草枯含量可为临床诊断和治疗提供依据[4-5].目前,百草枯的分析检测方法主要有分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、液相色谱法、质谱联用法和毛细管电泳法等[6-13].气相色谱法需要对样品进行特殊的衍生或裂解处理后才能进行检测,操作比较复杂.质谱联用检测结果准确可靠、重复性好,但仪器设备较昂贵,技术含量较高,较难推广应用.毛细管电泳技术应用于百草枯中毒的检验方面还比较少,分析检测结果不理想,有待于进一步研究.由于百草枯的强极性及高沸点,高效液相色谱分析法报道最多,因此高效液相色谱法一直成为众多研究者测定百草枯的首选检测仪器.紫外可见分光光度法尽管测定灵敏度低,干扰因素较多,但其仪器操作简单且常见,因此寻找一种合适的能够快速测定百草枯的显色剂,并在此基础上建立一种临床快速检测分析方法与检测试纸具有一定的研究前景与研究意义[14-17].本研究采用D-异抗坏血酸钠作为还原剂,利用在碱性条件下百草枯能与D-异抗坏血酸钠发生蓝色反应的特性设计了比色法来检测尿液中百草枯含量.1.1 仪器及试剂TU-1901型分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司).百草枯(中国药品生物制品检定所,质量分数为99.0%).百草枯储备液:质量浓度1g/L,临用时逐级稀释;6mol/L的NaOH溶液;D-异抗坏血酸钠(阿拉丁试剂,质量分数为98%).1.2 实验方法准确移取一定量质量浓度为100.0mg/L百草枯溶液或者样品溶液于5mL的比色管中,依次加入0.2mL6.0mol/L的NaOH溶液和0.50mL24.84g/L的D-异抗坏血酸钠溶液,用蒸馏水稀释至刻度线,摇匀,配制相应的试剂空白,在300～800nm波长范围内利用TU-1901双光束紫外可见分光光度计进行光谱扫描.1.3 样品处理取人尿液样品,加入一定质量浓度的百草枯溶液作为测试液,混匀后用慢速定量滤纸过滤后,取4mL尿液按“1.2”实验方法操作,同时配制相应空白尿液作为参比,按上述“1.2”实验方法操作.2.1 测定波长选择按“1.2”实验方法,在300～800nm波长范围内对百草枯体系、D-异抗坏血酸钠体系以及百草枯+NaOH+D-异抗坏血酸钠体系进行吸收光谱扫描,以相应试剂空白为参比,试验结果如图1所示.图1中的曲线1是百草枯溶液的吸收光谱,曲线2是D-异抗坏血酸钠溶液的吸收光谱,曲线3是百草枯+NaOH+D-异抗坏血酸钠体系的吸收光谱.试验结果表明,当向一定质量浓度的百草枯溶液中加入NaOH和D-异抗坏血酸钠溶液后,溶液呈蓝色,并在395和604nm波长处体系有最大吸收,395nm处虽有最大吸收,但该波长下其他物质干扰大且吸光度不稳定.因此本试验选择604nm作为测定波长.2.2 NaOH用量选择按“1.2”实验方法,研究了NaOH用量对体系吸光度的影响.试验结果表明,随着NaOH用量的增加,体系吸光度逐渐增加,当6mol/LNaOH用量在0.15～0.5mL时,该体系的吸光度达到较大且稳定.故试验选择0.2mL浓度为6mol/L的NaOH溶液进行试验.2.3 反应时间选择试验研究了体系反应时间对吸光度的影响.试验结果表明,吸光度在4min后开始稳定且在20min内保持不变,20min后吸光度逐渐降低.故选择反应后稳定4min再进行吸光度测定.2.4 D-异抗坏血酸钠用量选择按“1.2”实验方法,研究了D-异抗坏血酸钠用量对体系吸光度的影响,结果如图2所示.试验结果表明,随着D-异抗坏血酸钠用量的增加,体系吸光度逐渐增加,当D-异抗坏血酸钠的用量在0.25～1.0mL时,该体系的吸光度达到较大且稳定.故试验选择0.5mL质量浓度为24.85g/L的D-异抗坏血酸钠溶液进行试验.2.5 工作曲线绘制分别配制一系列不同质量浓度的百草枯溶液,按“1.2”实验方法测定其吸光度.试验结果表明,当百草枯溶液质量浓度在0.5～20.0mg/L范围内时与吸光度A有良好的正相关线性关系,其线性回归方程为A=0.038 97C+0.024 08(mg/L),线性相关系数r为0.997 0,表观摩尔吸光系数ε=1.01×104L/(mol·cm).2.6 干扰试验在本试验条件下,控制测量误差在±5%以内,固定百草枯质量浓度为5mg/L,考察常见离子对测定的影响.结果表明:500倍的倍的Pb2+；20倍的Ca2+,Ni2+；5倍的Fe3+,Cu2+等以上物质均不干扰测定.2.7 样品测定对尿液样品进行测定,每份样品平行测定3次,测定结果如表1所示.尿液中百草枯的回收率在91.6%～109%之间.本研究建立了测定尿液中百草枯含量的D-异抗坏血酸钠分光光度法,系统考察了D-异抗坏血酸钠、氢氧化钠用量以及显色时间等的影响.在最佳条件下,对尿液中百草枯的含量进行了测定,考察了该方法的加标回收率,并将测定结果与连二亚硫酸钠法测定结果进行对比.结果表明,两种方法测定结果一致,且采用本文方法能够检测出的尿液百草枯质量浓度为0.6mg/L.【相关文献】[1] 郭利民.急性百草枯中毒血液灌流临床疗效观察[J].当代医学,2012,18(11):67-68.[2] 王道良,蔡正哲,黄宜谋,等.急性百草枯中毒20例临床分析[J].当代医学,2011,17(21):56-57.[3] 许家珠,郝阳.草枯中毒患者规范化救护新进展[J].临床护理杂志,2013,12(3):51-54.[4] 黄璐瑶,廖林川,陈礼莉,等.硼氢化钠/氯化镍还原-GC/TSD法检测血液和尿液中百草枯[J].法医学杂志,2008,24(6):429-432.[5] 程辉,周宇明,钟振洲,等.百草枯尿液检测试剂盒行床旁尿液检测在百草枯中毒中的应用[J].江西医药,2015,50(1):11-13.[6] 许启荣,麦剑平,陈纠,等.离子色谱法测定百草枯中毒患者尿液中百草枯浓度[J].现代医院,2016,16(3):381-382,385.[7] 朱海霞,陈礼明,陈姿如.分光光度法定量分析尿液中百草枯[J].天津医药,2011,39(7):642.[8] 王明明,沈菁,宋婷,等.场放大样品进样-压力辅助毛细管区带电泳测定饮用水中的百草枯[J].分析化学,2012,40(5):809-810.[9] 陈静,刘召金,安保超,等.在线净化/固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水和环境水体中的百草枯和敌草快[J].色谱,2012,30(10):1068-1073.[10] 李俊,王震,郭晓关,等.测定鱼腥草中百草枯和乙草胺残留的三重四级杆气相色谱质谱法[J].山地农业生物学报,2012,34(4):341-344.[11] 王俊新.自动固相萃取薄层色谱法检验水中百草枯[J].广东公安科技,2010(4):74.[12] 胡志强，蒋锋，姚忠.RP-HPLC法测定青蒿琥酯阿莫地喹片中主药的含量[J].淮海工学院学报(自然科学版),2014,23(2):59-61.[13] 顾海芳,李音卓.高效液相色谱法测定氨甲基磷酸的含量[J].淮海工学院学报(自然科学版),2015,24(2):49-51.[14] 沙鸥,孙梅,顾叶华,等.Fe2+-2,2′-联吡啶分光光度法测定针剂中头孢他啶含量[J].淮海工学院学报(自然科学版),2010,19(4):37-39.[15] 赵燕燕,刘会芳,王丽娟,等.推扫富集胶束电动毛细管色谱法和紫外分光光度法测定血液灌流前后血清中百草枯浓度的比较[J].应用化学,2008(9):1069-1072.[16] 赵英英,谢晖,孟潇潇,等.二阶导数分光光度法检测百草枯浓度在大鼠实验模型中的应用[J].临床急诊杂志,2015,16(2):118-122.[17] 白云,范川鹏,李素燕,等.紫外分光光度法测定血液中的百草枯[J].国际检验医学杂志,2013,34(11):1421-1422.。
探讨分光光度法在蔬菜农药残留检验中的应用
【关键词】分光光度法；蔬菜；农药残留；检验
4结语
蔬菜中残留的农药种类很多，采用分光光度法检验蔬菜中是否存在农药残留，能够快速、准确地得出結果。
参考文献：
[1]王棚.分光光度法检测蔬菜中有机磷农药残留的研究[J].现代农业科技，2010（11）：168-169.
[2]钱允辉，陆自强.农药残留速测技术方法与进展[J].中国测试技术，2008，34（5）：85-88.
3.1.2方法。蔬菜中残留有机磷类农药时，会在一定程度上抑制乙酰胆碱酯酶的催化活性，导致其在酶源检测底物中无明显的表现，底物基本不会在乙酰胆碱酯酶的作用下发生水解，进而降低酶解的显色。采用分光光度法时，设计一组对照组和试验组，对照组直接采用含有乙酰胆碱酯酶的溶液进行，试验组则是蔬菜中提取的乙酰胆碱酯酶，经过分光光度试验后，检验有机磷农药的残留【7-9】。如检测组选择浓度为0.01、1.00 mg/L的硫磷溶液，连续检验7次，得出的相对标准偏差是0.41%和0.91%。又如首先对被检测的蔬菜喷洒一定量的农药并搁置12 h，蔬菜剪成1 cm2的碎片；然后放在试管内，加入丙溶剂，融合并振荡，过滤后丙酮溶液定容至10 mL，检验有机磷农药的回收率；之后在样本中加入2 mg/L的有机磷农药样本，重复测定3次，计算平均值。有机磷类农药的测得量是0.019 mg/L，标准加入量是2 mg/L，回收量是1.930 mg/L，回收率是96.5%，表明分光光度法具有较高的检验效率。
3分光光度法在蔬菜农药残留检验中的应用
现以2类典型农药为例，分析分光光度法的实践应用。
推扫富集胶束电动毛细管色谱法和紫外分光光度法测定血液灌流前后血清中百草枯浓度的比较
２５ ） ．０ 为缓 冲溶 液 ， 分离 电压 ２ Ｖ， ２ｋ 进样 压力 ５ｋ ａ在 ６０ ｓ Ｐ ， ０ 内富集倍数达到 ６ ０倍 ， ５ 检测 波长 ２ ０ａ 在 紫 ６ ｍ。
需 要多 次灌 流 。目前 ， 临床 缺 少 检 测 血 液 灌 流前 后
…
Ｐ ｒ ｑｕ ｔ 凭 经 验 决 定灌 流 次 数 。本 文 仅
建 立 了血 液 灌 流 前 后 血 液 中 百 草 枯 浓 度 的检 测 方 法 ． 临床监 测 及救 治百 草枯 中毒提供 标 准 和依据 。 为
外分光 光 度 法 中 ， 清 样 品经 体 积分 数 为 ２ ％ 三氯 乙酸 去 蛋 白处 理 ，０ 血 ０ ５
度 法 对 百 草枯 的 检 测 限 为 ００ ｇ Ｌ 相 对 标 准偏 差 Ｒ Ｄ 为 ２ ５ ％ 。 ． １ｍ ／ ． Ｓ ．０
微 量 比色 池 ， 外检 测 波 长 紫
２ ７ｎ ５ ｍ。胶束 电动 毛细管色谱 法对百草枯 的检测 限为 ０ ０ ２ｍ ／ ， ．０ ｇ Ｌ 相对标准偏差 Ｒ Ｄ为 ２ ９ ％ ； Ｓ ． ５ 紫外分光光
低 ． 适合 多次 灌流后 血 清 中痕量 百草 枯 的检 测 。 更
１ 实验部分
１ １ 仪器 和试 剂 ．
Ａ ｉｎ Ｅ型毛 细管 电泳仪 ， 极 管 阵 列 检 测 器 ； ｇｅｔ ｅｈｏ ｇｅ Ｃ ｅ ｔｉｎＦｍｉ ｇｅｔ ｌ Ｃ 二 Ａ ｉ ｎ Ｔｃｎｌ ｉ ｈｍＳａｏ ａ ｌ ｌ ｏ ｓ ｔ ｙ色谱 工 作 站 ；Ｈ ．Ｃ型酸度 计 （ Ｐ Ｓ３ 上海 雷 磁 仪 器 厂 ） Ａ ｋ Ｇ ．６ ； ｎｅＴ Ｌ１Ｇ型 台式 高 速 离 心 机 （ 海 安 亭 科 学 仪 器 厂 ） 上 ； Ｕ ２ ５ 紫外 分光 光度 计 （日本 岛津 ）５ Ｌ微 量 比色池 ， 测 波长 为 ２７ｎ Ｃ ６０型 电热恒 温水 Ｖ－５０型 ，０ 检 ５ ｍ； Ｕ ０ 箱 ：Ｋ １型快 速混 匀器 。 Ｓ．
一种快速检测尿中百草枯、敌草快的方法[发明专利]
![一种快速检测尿中百草枯、敌草快的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/3e50ff310640be1e650e52ea551810a6f524c8d4.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010688844.5(22)申请日 2020.07.17(71)申请人 吉林大学地址 130012 吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人 李海峰 荣颖 (74)专利代理机构 长春市恒誉专利代理事务所(普通合伙) 22212代理人 鞠传龙(51)Int.Cl.G01N 21/78(2006.01)G01N 21/29(2006.01)(54)发明名称一种快速检测尿中百草枯、敌草快的方法(57)摘要本发明公开了一种快速检测尿中百草枯、敌草快的方法，其方法为：步骤一、配制不同浓度含百草枯、敌草快的尿液；步骤二、制作比色表；步骤三、试管准备；步骤四、试剂准备；步骤五、待检测尿液与试剂结合；步骤六、观察检测尿液颜色变化。
本发明的有益效果：本发明的应用，使得对百草枯和敌草快中毒的早期诊断成为可能，使得临床医生在短短数分钟内就可以做出正确诊断，进而有针对的指导下一步治疗，单次检测费用在10元以内，由此增加的患者的经济负担几乎可以忽略。
权利要求书1页 说明书5页 附图1页CN 111781199 A 2020.10.16C N 111781199A1.一中快速检测尿中百草枯、敌草快的方法，其特征在于：其方法如下所述：步骤一、配制不同浓度含百草枯，敌草快的尿液：把浓度为20％百草枯、敌草快1.25ml 加入248.75ml尿液，配成的混合液浓度为1000ug/ml；取前述配好的50ml尿液，加入50ml水，配成浓度为500ug/ml的混合液；以此类推经过9次配制，配成的混合液分别为：浓度为1000ug/ml；浓度为500ug/ml；浓度为250ug/ml；浓度为125ug/ml；浓度为62.5ug/ml；浓度为31.25ug/ml；浓度为15.6ug/ml；浓度为7.8ug/ml；浓度为3.9ug/ml；九管含有不同浓度百草枯、敌草快的尿液并标记好，并记录好每个试管中的颜色；步骤二、制作比色表：分析步骤一中不同浓度百草枯在试管中的颜色变化，低浓度百草枯尿液呈现浅蓝色，浓度越高颜色越深，直到呈现深蓝色，尿液中百草枯浓度越高，反应越灵敏，特异性越好，当浓度低于7.8mg/L、即7.8ug/ml，颜色变化肉眼难以分辨，故排除在比色表中，根据百草枯浓度和颜色变化关系制作比色表1，分析不同浓度敌草快在试管中的颜色变化，发现低浓度敌草快尿液呈现浅绿色，浓度越高颜色越深，直到呈现深绿色，尿液中敌草快浓度越高，反应越灵敏，特异性越好，当浓度低于7.8mg/L、即7.8ug/ml，颜色变化肉眼难以分辨，故排除在比色表中，根据敌草快浓度和颜色变化关系制作比色表2；步骤三、试管准备：每个试管容积为1.5毫升，试管的材质为透明塑料，口部用一层软质塑料薄膜密封，该塑料薄膜能够被医用注射器针头刺穿，十个为一组，通过顶部相连，连接处设置有打孔的拆分线，使得每个试管能够轻易分离，每个试管都设置有最小刻度为1毫升的刻度，每个试管口通过塑料薄膜严密覆盖，保证每个试管内部处于真空状态；步骤四、试剂准备：取步骤三中制得的试管，分为AB两组，A组中的每个试管填充有氢氧化钠0.06克，B组中的每个试管填充有连二亚硫酸钠0.02克，每个试管均为真空密封；步骤五、待检测尿液与试剂结合：操作时，用注射器从待检测的尿杯中吸取1毫升尿液，直接用针头通过A试管口塑料薄膜刺入试管内，注入待检测尿液，并摇晃使得检测尿液与A 试管内的试剂充分混合，混合好后，再次通过注射器把检测尿液从A试管内吸出并导入B试管中，导入B试管尿液后再次轻轻摇晃试管，使试管内的氢氧化钠和连二亚硫酸钠试剂充分溶解在待检测尿液里；步骤六、观察检测尿液颜色变化：当含有不同浓度百草枯、敌草快尿液与试管中试剂充分混合后，尿液颜色也会立即出现变化，立即照相；并根据检测尿液的颜色与比色表1或比色表2进行比对，从而推算出检测尿液中百草枯、敌草快的含量。
百草枯检测
液相色谱_串联质谱法快速测定植物源性食品中的百草枯摘要:建立了水果、蔬菜、豆类和粮谷中百草枯残留的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS /MS)分析方法。
用水提取样品中的百草枯，弱阳离子交换(WCX) 固相萃取柱( SPE) 净化。
采用CAPCELL PAK ST 色谱柱(150 mm × 2. 0mm)，乙腈-10 mmol /L 乙酸铵水溶液( 用甲酸调至pH 4. 0) 为流动相，以电喷雾离子源正离子模式多反应监测(MRM)定性、定量测定百草枯。
百草枯在0. 01 ～ 0. 1 mg /L 范围内峰面积与质量浓度呈线性关系，相关系数为0. 993。
在空白样品中添加百草枯，测得方法的回收率为84. 0% ～ 106. 0%，相对标准偏差(RSD) 为7. 8% ～ 18. 8%。
果蔬和粮谷样品中百草枯的定量限分别为0. 01 mg /kg 和0. 05 mg /kg，满足各国残留限量要求。
百草枯，英文名paraquat，化学名1，1-二甲基-4，4'-联吡啶阳离子，是有机杂环类季铵盐除草剂，商品多为其硫酸盐或氯化物形式。
由于其具有优良的除草效果，在世界上120 多个国家广泛使用。
百草枯对人、畜有较强的毒性作用，且一旦中毒无药可解。
百草枯的结构稳定，半衰期长，容易在环境和食物中形成残留累积，对人类健康和自然环境构成潜在危害。
因此，国际农残法典委员会(CAC)、欧盟和美国等都规定了水果、蔬菜、粮食和肉类中百草枯残留物的限量标准。
“中国技术性贸易措施网”收录的CAC 和一些国家及地区的百草枯残留限量标准多达391 条，其中水果和蔬菜中百草枯残留限量多为0. 05 mg /kg;我国GB 16333 中规定菜籽油、成品粮、柑橘、苹果和梨中百草枯的最大允许残留量分别为0. 05、0． 5、0. 2、0. 05 和0. 05 mg /kg。
因此，研究食品中百草枯残留测定方法十分必要。
紫外分光光度计在蔬菜农药残留检测中的应用
有机磷农药是神经毒物，进入人体后主要是抑制血液和组织中的乙酰胆碱酯酶
1
的活性，引起神经功能紊乱、出汗、震撼、精神错乱、语言失常等一系列表现。
（三）酶抑制法
有机磷酸酯类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类是目前杀虫剂的三大支柱，特别 是有机磷酸酯类杀虫剂仍在生产上起主导作用，更是菜农喜欢使用的一类杀虫 剂。
酶活性抑制测定是利用有机磷和氨基甲酸酯类农药具有抑制乙酰胆碱酯酶活 性。乙酰胆碱酯酶是一种水解酶，使乙酰胆碱分解为乙酸和胆碱，乙酰胆碱酯酶 抑制剂与正常底物争夺乙酰胆碱酯酶结合部位，形成稳定的抑制剂——乙酰胆 碱酯酶复合体，使酶丧失活性。
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GB/T5009.199-2002
蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留快速检测方法
酶抑制率法
1 范围
本标准规定了由酶抑制率法测定蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农 药残留的快速测定方法。
本标准适用于蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留的快速测定。 2 原理 在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用， 其抑制率与农药的浓度呈正相关系。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙 酰胆碱)水解，其水解产物显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计测定吸光 度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有有机 磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 3 试剂 3.1pH8.0 缓冲溶液：分别取 11.9 克无水磷酸氢二钾与 3.2 克磷酸二氢钾，用 1000 毫升纯水水溶解。 3.2 显色剂：分别取 160mg 二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）和 15.6mg 碳酸氢纳， 用 20ml 缓冲溶液溶解，4C 冰箱中保存。 3.3 底物：取 25.0mg 硫代乙酰胆碱，加 3.0ml 蒸馏水溶解，摇匀后置 4℃冰箱 中保存备用，保存期不超过两周。 3.4 乙酰胆碱酯酶：根据酶的活性情况，用缓冲溶液溶解，按 5.3 测定项操作， A0 值应控制在 0.3 以上。 3.5 纯水 4 仪器 4.1 普析通用紫外可见分光光度计 TU1800 或 1800PC 4.2 常量天平 4.3 恒温水浴锅或恒温箱
百草枯的检测方法及其控制的研究进展
百草枯的检测方法及其控制的研究进展作者：王良哲单雪晴孙秀兰孙嘉笛来源：《安徽农业科学》2021年第19期摘要百草枯在农业生产中被广泛应用于除草。
美国环境保护署（United States Environmental Protection Agency，U.S.EPA）设定饮用水中含量低于3 μg/L，欧洲指令（European Union Directive，98/83/EC）限制更严格，规定饮用水中允许的最大浓度为0.1μg/L。
此外，世界卫生组织（world health organization，WHO）对饮用水的参考值为10 μg/L。
为了保护人类健康和环境免受这种除草剂的有害影响，需要简单有效的样品制备、灵敏的分析方法来测定环境水中的百草枯，并需要强有力和实用的处理工艺来去除水基质中的百草枯。
详细介绍了用于检测百草枯的各种方法，如比色法、分光光度法、表面增强拉曼散射、液相色谱、气相色谱法以及能够实现现场快速检测的电化学检测方法和百草枯的降解与脱除的方法。
关键词百草枯;检测方法;限量标准;催化降解;电化学检测中图分类号 TS 207.5 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2021）19-0005-08doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.19.002开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Research Progress on Detection Methods and Control of ParaquatWANG Liang-zhe， SHAN Xue-qing， SUN Xiu-lan et al（State Key Laboratory of Food Science and Technology， School of Food Science， Jiangnan University， Wuxi， Jiangsu 214122）Abstract Paraquat is widely used in weeding in agricultural production. The United States Environmental Protection Agency （USEPA） sets the content in drinking water to be less than 3μg/L， and the European Union Directive （98/83/EC） has stricter restrictions， stipulating the maximum concentration is 0.1 μg/L. In addition， the World Health Organization （WHO）reference value f or drinking water is 10 μg/L. In order to protect human health and the environment from the harmful effects of this herbicide， simple and effective sample preparation and sensitive analysis methods are needed to determine paraquat in environmental water， and a powerful and practical treatment process is required to remove the water matrix paraquat. This article described in detail various methods used to detect paraquat， such as colorimetry， spectrophotometry， surface-enhanced Raman scattering， liquid chromatography， gas chromatography， as well aselectrochemical detection methods and paraquat that can achieve rapid on-site detection degradation and removal methods.Key words Paraquat;Detection method;Limit standard;Catalytic degradation;Electrochemical detection基金項目江苏省农业科技自主创新资金项目（CX（17）3007）。
光催化——分光光度法测定残留有机磷农药
光催化——分光光度法测定残留有机磷农药[摘要]系统全面地对含磷农药进行光催化降解-分光光度法测定研究，并和国标方法对照，表明光催化降解含磷农药可以达到与国标法基本相同的降解效果，对十五种常用含磷农药的光催化降解后总磷的测出率均在95%以上，本文方法的标准偏差SD 为2.86×10-3，检出限为2.10×10-3 mg/L，效果令人满意。
该方法可以作为环境水体及食品农残中痕量总磷测定的可靠方法。
[关键词]有机磷农药光催化纳米TiO2 分光光度法总磷一、前言有机磷农药是世界上继有机氯之后生产和使用得最多的农药品种，它具有药效高、使用方便、应用范围广等特点，一直在杀虫剂中占有相当重要的地位。
但是残留的农药废水进入环境，必然对生态平衡造成不良的影响。
因此对农药残留监测一直是各国政府和有关国际组织非常重视的问题。
测定有机磷农药常用气相色谱和液相色谱法。
近年来，一些新的分析、检测技术，如同位素示踪技术、毛细管电泳、直接光谱分析技术、免疫分析法和传感器法的应用研究也日益增多。
但这些分析技术均需昂贵的仪器设备，且样品的处理相当麻烦，测定结果重现性低，因此有人提出用光解、微波、超声波等方法进行消解样品。
陈士夫等以二氧化钛小球作光催化剂，研究磷酸酯类农药光催化降解的规律。
赵梦月等以中压汞灯为光源，研究磷酸酯类及硫代磷酸酯类农药光催化降解为PO43-的规律。
钟爱国等采用超声波降解甲胺磷等。
目前国内尚没有人系统全面地做过TiO2光催化氧化法降解含磷农药并测定的研究。
本文采用一种新型光催化反应器以紫外光引发TiO2光催化氧化反应降解水样中的含磷农药，再用磷钼蓝法进行分光光度测定，从而达到检测水中总磷的目的。
通过与国标法对比，有机磷降解率达95%以上，结果令人满意。
二、实验部分（一）试剂过硫酸钾溶液（40g/L）硫酸（1:35和1:1）氢氧化钠溶液（0.1mol/L）磷标准储备溶液（500.0mg/L，以PO43-计）：称取0.7165g已于100～105℃恒重的磷酸二氢钾，水溶后，定容于1000mL容量瓶中，临用时稀释成20.00mg/L抗坏血酸溶液（20g/L）：10g抗坏血酸，0.2g乙二胺四乙酸钠，溶于200mL 水中，加入8.0mL甲酸，稀释至500mL，储存于棕色瓶中钼酸铵溶液（26g/L）：13g钼酸铵，0.5g酒石酸锑钾，溶于200mL水中，加入230mL硫酸（1:1）溶液，稀释至500mL纳米二氧化钛P25（德国Degussa公司）所用水为去离子水二次蒸馏水（二）仪器721型分光光度计、超声波振荡器、自制光催化反应装置、TDL-40B型离心机、JJ-1型定时电动搅拌器、电子天平、Agilent6890N气相色谱仪(美国Agilent 公司)、WFZ-26A紫外可见分光光度计。
测定鱼腥草中百草枯和乙草胺残留的三重四级杆气相色谱质谱法
测定鱼腥草中百草枯和乙草胺残留的三重四级杆气相色谱质谱法李俊;王震;郭晓关;庞宏宇;杜楠【摘要】试验建立了测定鱼腥草中百草枯和乙草胺残留物的三重四级杆气相色谱质谱方法.样品采用高速匀浆提取,固相萃取(SPE)净化,(GC - MS/MS)检测,在0.02 ～ 0.50 mg/L范围内,目标物的峰面积与其质量浓度的线性关系良好(R2 ＞0.99)；在0.02、0.10、0.50 mg/kg添加水平,样品添加平均回收率为73.5％～81.2％,相对标准偏差(RSD,n=6)为3.43％～ 4.49％.乙草胺检出限为0.00020 mg/kg,定量限为0.0008 mg/kg；百草枯检出限为0.0014 mg/kg,定量限为0.0050 mg/kg.该方法具有灵敏、快速、准确、线性范围宽等优点,适用于鱼腥草中农药残留检测.%A triple quadrupole gas chromatography mass spectrometry method was developed for the determination of paraquat and acetochlor residues in Houttuynia cordata in the current work. The sample were extraced using high-speed homogenate, and then purified by solid phase extraction (SPE) determined by GC-MS/MS. The linear relation between peak area and mass concentration of sample were good from 0.02 mg/L to 0. 50 mg/L(R2＞0. 99). The average recovery rate were 73.5% ～ 81. 2% of target compounds and the relative standard deviation (RSD, n = 6) were from3.43% to 4.49% in three spiked levels at 0.02mg/kg, 0. 10 mg/kg and 0.50mg/kg. The limit of detection quantification of acetochlor was 0. 000 2 mg/kg and limit of quantification 0. 0008 mg/kg. The limit of detection quantification of paraquat was 0. 0014 mg/kg and limit of quantification 0.0050 mg/kg. The method is sensitive, rapid, precise,and widely linear, therefore it is suitable for the determination of Houttuynia cordata pesticide residues.【期刊名称】《山地农业生物学报》【年(卷),期】2012(031)004【总页数】4页(P341-344)【关键词】鱼腥草;农药残留;气相质谱联用仪【作者】李俊;王震;郭晓关;庞宏宇;杜楠【作者单位】贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,农业部农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳550004;贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,农业部农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳550004;贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,农业部农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳550004;贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,农业部农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳550004;贵州省农产品质量安全监督检验测试中心,农业部农产品质量安全监督检验测试中心,贵州贵阳550004【正文语种】中文【中图分类】S481.8鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb)，又名折耳根、蕺菜、菹菜等，属三白草科(Saururaceae)蕺菜属(Houttuynia)多年生草本植物，主要分布在我国长江流域及以南各省［1］。
百草枯检测方法研究进展
百草枯又名克无踪、对草快，化学名为１，卜二甲基４，４一联吡啶阳离子盐，其分子式为ＣｔｚＨ－小ｚ，纯 品为白色晶体。３００℃上分解，极易溶于水，微溶于低分子量的醇类，不溶于烃类溶剂。在酸性、中性溶 液中稳定，碱性溶液中易分解。其商品为深绿色有气味的液体。百草枯是速效接触型灭生性除草剂．对植 物绿色组织有很强的破坏作用。由英国上世纪５０年代开发，６０年代初期投入使用，至今已有４０多年历史。 是目前世界上使用量仅次于草甘膦的最受群众欢迎的除草剂之一。使用遍及全世界１３０多个国家和地区。 １９７８年黑龙江农垦首先从英国进口百草枯进行使用，１９８４年正式进入中国市场，随着它在中国的日益推 广使用，使用量逐步扩大。然而百草枯对人体健康和生态环境存在严重危害，在一定程度上已成为了社会
参考文献： １．杨世杰．．药理学［Ｍ］．第１版．北京；人民卫生出版社，２００７：４１６． ２． 胡秀春，吴正享，刘兰英．７一氨基头孢烷酸职业哮喘８例临床分析［Ｊ］．职业与健康，２００２，１８（１０）：３２－３３． ３． 白金，邹建芳，孙少秋等．７一氨基头孢烷酸致支气管哮喘二例［Ｊ］．中华劳动卫生职业病杂志，２００７，２５（１０）：６１６－６１７． ４．刘镜愉．哮喘的职业评价［Ｊ］．中国工业医学杂志，１９９５，８（２）：１２１． ５．ＧＢＺ５７－－２００８，职业性哮喘诊断标准，附录Ａ，正确使用本标准的说明．
．．３２９．
问题。百草枯对人、畜均有较强的毒性作用。目前尚无特效治疗方法，病死率较高。百草枯也是环境和农 产品残留物中需要检测的重要物质之一。其高毒性与广泛应用性，使得建立快速、高选择性、高灵敏度的 测定百草枯方法是非常必要的。现将百草枯检测方法综述如下。
液相色谱_串联质谱法快速测定植物源性食品中的百草枯
2011年2月Vol．29No．2February 2011Chinese Journal of Chromatography180 183技术与应用DOI ：10．3724/SP．J．1123．2011．00180*通讯联系人：薄海波，高级工程师，博士，从事食品安全与质量分析研究．Tel ：（0311）85980504，E-mail ：bohb1212@163．com．收稿日期：2010-10-23液相色谱-串联质谱法快速测定植物源性食品中的百草枯薄海波*（河北出入境检验检疫局，河北石家庄050051）摘要：建立了水果、蔬菜、豆类和粮谷中百草枯残留的高效液相色谱-串联质谱（HPLC-MS /MS ）分析方法。
用水提取样品中的百草枯，弱阳离子交换（WCX ）固相萃取柱（SPE ）净化。
采用CAPCELL PAK ST 色谱柱（150mm ˑ2.0mm ），乙腈-10mmol /L 乙酸铵水溶液（用甲酸调至pH 4.0）为流动相，以电喷雾离子源正离子模式多反应监测（MRM ）定性、定量测定百草枯。
百草枯在0.01 0.1mg /L 范围内峰面积与质量浓度呈线性关系，相关系数为0.993。
在空白样品中添加百草枯，测得方法的回收率为84.0% 106.0%，相对标准偏差（RSD ）为7.8% 18.8%。
果蔬和粮谷样品中百草枯的定量限分别为0.01mg /kg 和0.05mg /kg ，满足各国残留限量要求。
关键词：弱阳离子交换；高效液相色谱-串联质谱；百草枯；残留；植物源性食品中图分类号：O658文献标识码：A文章编号：1000-8713（2011）02-0180-04Determination of paraquat residue in plant-derived foodstuffsby high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometryBO Haibo *（Hebei Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau ，Shijiazhuang 050051，China ）Abstract ：A sensitive and selective method is presented for the determination of paraquat residue in fruits ，vegetables ，beans and grain by high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS /MS ）．Paraquat in samples was extracted with water and cleaned-up with a weak cation ex-change （WCX ）column to obtain an extract suitable for analysis using HPLC-MS /MS．The paraquat was separated by a CAPCELL PAK ST column （150mm ˑ2.0mm ）and with acetonitrile-10mmol /L ammo-nium acetate solution （adjusted to pH 4.0by formic acid ）as the mobile phase ，and multiple reaction monitoring （MRM ）was used with electrospray ionization in the positive ion mode．The calibration curve was linear between the peak area and the mass concentration of paraquat from 0.01to 0.1mg /L with the correlation coefficient of 0.993．Recoveries of paraquat spiked in samples at three levels ranged from 84.0%to 106.0%with the relative standard deviations of 7.8%－18.8%．The limits of detection （LODs ）of paraquat were 0.01mg /kg in fruits and vegetables and 0.05mg /kg in beans and grain．The LODs can meet the requirements of international maximum residue limit．Key words ：weak cation exchange ；high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （HPLC-MS /MS ）；paraquat ；residue ；plant-derived foodstuffs 百草枯，英文名paraquat ，化学名1，1-二甲基-4，4'-联吡啶阳离子，是有机杂环类季铵盐除草剂，商品多为其硫酸盐或氯化物形式。
农残分析可见紫外分光光度法课件
可见紫外分光光度法的缺点
干扰因素多
可见紫外分光光度法容易受到样品中 其他物质的干扰，如色素、蛋白质等 。
定量精度差
由于可见紫外分光光度法是一种相对 测量方法，其定量精度相对较差。
检测限较高
对于某些低浓度农残的检测，该方法 的检测限较高。
稳定性较差
可见紫外分光光度法的稳定性相对较 差，容易受到环境因素的影响。
03
04
有机物分析
可用于有机物的定性和定量分 析，如酚类、胺类、醇类、酯
类等。
无机离子分析
可用于无机离子的定性和定量 分析，如铁、铜、锌、铅等。
药物分析
可用于药物的有效成分和杂质 的分析，如抗生素、维生素等
。
环境监测
可用于环境监测中各种污染物 的分析，如重金属离子、有机
污染物等。
03
农残分析的可见紫外分光光度法 实验过程
06
结论
总结
可见紫外分光光度法是一种广泛应用 于农残分析的检测方法，具有操作简 便、准确度高等优点。
在实际应用中，需要注意控制实验条 件，如波长选择、显色剂用量、反应 时间等，以确保实验结果的准确性和 可靠性。
该方法通过测定样品在特定波长下的 吸光度值，结合标准曲线，可快速准 确地测定出样品中的农残含量。
01
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物质与光相互作用
当光与物质相互作用时， 光子的能量可以被物质吸 收、反射、折射或散射。
分子能级跃迁
物质中的分子吸收特定波 长的光后，电子从低能级 跃迁至高为400760nm，其中可见光范围 为400-760nm，紫外光 范围为200-400nm。
可见紫外分光光度法的原理
吸光度与浓度关系
吸光度是物质吸收光强度 的量度，吸光度与物质浓 度呈线性关系。
GB26130-2010食品中百草枯等54种农药最大残留限量
4.17.1 主要用途：杀菌剂
4.17.2ADI：0.2mg/kgbw
4.17.3 残留物：噁霉灵
4.17.4最大残留限量：应符合表17的规定。
表17
食品名称
最大残留限量（mg/kg）
糙米
0.1**
4
4.18.1 主要用途：杀虫剂
4.18.2ADI：0.005mg/kgbw
4.18.3 残留物：二嗪磷
4.21.3 残留物：氟氯氰菊酯
4.21.4最大残留限量：应符合表21的规定。
表 21
食品名称
最大残留限量（mg/kg）
蘑菇
0.3
4.21.5检测方法：按GB/T 19648、NY/T 761规定的方法执行。
4
4.22.1 主要用途：杀菌剂
4.22.2ADI：0.1mg/kgbw
4.22.3 残留物：腐霉利
4.6.3 残留物：丙森锌（以CS2计）
4.6.4最大残留限量：应符合表6的规定。
表6
食品名称
最大残留限量（mg/kg）
大白菜
5
番茄
5
黄瓜
5
4.6.5检测方法：按GB/T 20769规定的方法执行。
4
4.7.1 主要用途：除草剂
4.7.2ADI：1mg/kgbw
4.7.3 残留物：草甘膦
4.7.4最大残留限量：应符合表7的规定。
3.2
最大残留限量 maximium residue limits（MRLs）
在生产或保护商品过程中，按照农药使用的良好农业规范（GAP）使用农药后，允许农药在各种农产品及食品中或其表面残留的最大浓度。
3.3
每日允许摄入量 acceptable daily intakes（ADI）
分光光度法检测蔬菜中有机磷农药残留的研究
分光光度法检测蔬菜中有机磷农药残留的研究摘要:酶抑制原理的分光光度法是当前较简便、合理、快速检测农药残留的一种方法。
不同种类的酶会严重影响该方法的灵敏度,于是人们通过筛选多种动物来源的胆碱酯酶来提高分光光度法的灵敏度。
鉴于此,利用酶抑制分光光度法快速检测蔬菜中有机磷的农药残留这一问题进行了研究,结果表明该方法具有较好的实用性。
关键词:乙酸胆碱酯酶;有机磷农药;分光光度法;蔬菜农药残留通常检测蔬菜中有机磷的农药残留普遍采用方法有免疫分析法、质谱联用法、气相色谱法、波谱法和高效液相色谱法等,尽管这些方法能够比较准确地检测出蔬菜中有机磷农药的残留量,但是由于传统的农药残留检测方法成本高、耗时长、有较大的抗体制备难度,因此不能很好地满足现场快速检测农药残留的需要[1-2]。
相对而言,酶抑制分光光度检测法则不需要昂贵的仪器设备,能有效为有机磷农药的检测提供一条简便、快速的途径,对大量样品筛选或现场检测非常适用。
1材料与方法1.1主要仪器和试剂在WFJ-7200型分光光度计上进行分光光度法试验,溶液的酸度用PHS-3C型酸度计测定。
备好乙酞硫代胆碱(AsCh)和二硫代二硝基苯甲酸(DTNB),农药是50%对硫磷乳油、40%辛硫磷乳油和40%氧化乐果乳油,以丙酮为溶剂分别配制成1 000 mg/L的储备液,可以根据所标示的有效成分计算农药浓度。
1.2酶的提取在砍掉鸡的头后,立刻将鸡脑取出,并用pH值为7.5的磷酸盐缓冲溶液(0.001 moL/L)将鸡脑的余血冲洗干净,然后将鸡脑捣破弄碎,均匀成浆;随后将0.7%的1.0 mL曲拉通X-100倒入,待均匀搅拌之后,放到离心管中以2 500 r/min离心速度持续5 min,并重复离心3次,取出上清液便可以作为酶源。
以上过程一般均在0~4 ℃进行操作。
1.3酶活性的测定分别将上面提取的酶原液依次稀释2、4、8、16、32、64倍,取稀释后的酶液0.5 mL,倒入6支干净的试管中,分别加入1.0 mL浓度为1.0 mmoL/L的乙酞硫代胆碱(AsCh)溶液,在温度为27 ℃的水浴中温育10 min之后,加入浓度为 1.0 mmoL/L的二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)磷酸盐缓冲溶液2.0 mL,以0.001 moL/L磷酸盐缓冲溶液(pH值7.2)在412 nm处作空白,对其吸光度进行测量,重复3次。