绿叶中色素的提取和分离
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一、实验目的：
• 掌握叶绿体色素的提取方法； • 掌握纸层析法分离叶绿体色素的原理和步 骤； • 掌握叶绿体色素的部分理化性质； • 探究多种植物绿叶中色素的分布
二、实验原理
1、绿叶中的色素种类 叶绿素a 绿 叶 中 的 色 素 类 素 14 叶 素 色 素 色 叶绿素 14 叶绿素b 绿色 绿色
药勺，干燥的定性滤纸，毛细吸管， 量筒，天平，棉塞；
实验试剂：无水乙醇，层析液（由20份在60~90℃
下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份 苯混合而成），碳酸钙，二氧化硅。
四、实验步骤
1、提取绿叶中的色素 （1）称取5克绿叶，剪碎，放入研钵中。 （2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再 加入10mL无水乙醇，进行快速的充分的研磨。 （3）将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗的基部 放一块纱布）中进行过滤，将滤液收集到试管中， 及时用棉塞将试管口塞严。
2、制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成长6厘米、宽一厘米的 滤纸条，将滤纸的一端剪去线。 3、画滤液细线 用毛细管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出 一条细线。待滤液干后，再画两次。
4、分离绿叶中的色素 将适量的层析液 倒入小烧杯中，将滤 纸条有滤液细线的一 端朝下插入层析液中。 注意：不要将滤液细 线接触接触到层析液 并将培养皿盖住小烧 杯口。
5、观察与记录 观察滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色 素带的颜色。将观察结果记录下来。 6、小组实验 将学生分组，每三位学生一组。每组提取一种 蔬菜叶的叶绿素。最后将每组的实验结果进行对比， 比较不同的蔬菜叶所含的色素及含量的差异。找出 适宜提取色素的材料。
五、注意事项:
1、因乙醇和层析液都是易挥发且有一定毒性的 有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞 塞住，层析时要加盖，减少有机溶剂的挥发。 2、分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液 中，导致色素带不清晰，影响实验效果。 3、画滤液细线时要细、齐、直，重复画线时必 须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。
六、实验结果
菠菜叶色素的提取结果
七、讨论
比较几组蔬菜叶色素的提取结果，比较不同 的蔬菜叶所含的色素及含量的差异。找出适宜提 取色素的材料。
2、叶绿素的提取
• 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 所以可以用无水乙醇提取色素； • 绿叶中的不同的色素在层析液中的溶解度不同。 溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度 低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以可以用纸 层析法将绿叶中的色素分离。
三、实验器材及试剂
实验材料：菠菜，韭黄，紫甘蓝，青菜； 实验仪器：试管，漏斗，纱布，研钵，剪刀，
• 掌握叶绿体色素的提取方法； • 掌握纸层析法分离叶绿体色素的原理和步 骤； • 掌握叶绿体色素的部分理化性质； • 探究多种植物绿叶中色素的分布
二、实验原理
1、绿叶中的色素种类 叶绿素a 绿 叶 中 的 色 素 类 素 14 叶 素 色 素 色 叶绿素 14 叶绿素b 绿色 绿色
药勺，干燥的定性滤纸，毛细吸管， 量筒，天平，棉塞；
实验试剂：无水乙醇，层析液（由20份在60~90℃
下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份 苯混合而成），碳酸钙，二氧化硅。
四、实验步骤
1、提取绿叶中的色素 （1）称取5克绿叶，剪碎，放入研钵中。 （2）向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再 加入10mL无水乙醇，进行快速的充分的研磨。 （3）将研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗的基部 放一块纱布）中进行过滤，将滤液收集到试管中， 及时用棉塞将试管口塞严。
2、制备滤纸条 将干燥的定性滤纸剪成长6厘米、宽一厘米的 滤纸条，将滤纸的一端剪去线。 3、画滤液细线 用毛细管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出 一条细线。待滤液干后，再画两次。
4、分离绿叶中的色素 将适量的层析液 倒入小烧杯中，将滤 纸条有滤液细线的一 端朝下插入层析液中。 注意：不要将滤液细 线接触接触到层析液 并将培养皿盖住小烧 杯口。
5、观察与记录 观察滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色 素带的颜色。将观察结果记录下来。 6、小组实验 将学生分组，每三位学生一组。每组提取一种 蔬菜叶的叶绿素。最后将每组的实验结果进行对比， 比较不同的蔬菜叶所含的色素及含量的差异。找出 适宜提取色素的材料。
五、注意事项:
1、因乙醇和层析液都是易挥发且有一定毒性的 有机溶剂，所以研磨要快，收集的滤液要用棉塞 塞住，层析时要加盖，减少有机溶剂的挥发。 2、分离色素时，一定不要让滤纸条上的滤液细 线接触到层析液，这是因为色素易溶解在层析液 中，导致色素带不清晰，影响实验效果。 3、画滤液细线时要细、齐、直，重复画线时必 须等上次画线干燥后再进行，重复2-3次。
六、实验结果
菠菜叶色素的提取结果
七、讨论
比较几组蔬菜叶色素的提取结果，比较不同 的蔬菜叶所含的色素及含量的差异。找出适宜提 取色素的材料。
2、叶绿素的提取
• 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中， 所以可以用无水乙醇提取色素； • 绿叶中的不同的色素在层析液中的溶解度不同。 溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度 低的随层析液在滤纸上扩散得慢。所以可以用纸 层析法将绿叶中的色素分离。
三、实验器材及试剂
实验材料：菠菜，韭黄，紫甘蓝，青菜； 实验仪器：试管，漏斗，纱布，研钵，剪刀，