蜂胶香皂中黄酮成分的测定

D eterm ina tion of tota l flavone component in propolis2fancy2soap
MA L an2yu
(Beijing Baihua Beep roduct Science & Technology Development L td. , Beijing 100176, China)
1 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ验部分
1. 1 试剂与仪器 无水乙醇 、硝酸铝均为分析纯 ;芦丁标准品使用
溶液 (0. 2 g /L ) ,国家药物检定所 。 M P2120型电子天平 ; 723 型可见分光光度计 ;
ZD 280型电热恒温真空干燥箱 ; DFY型高速组织捣 碎机 , 8 000～12 000 r/m in; DH 24型恒温水浴锅 。 1. 2 测定方法 1. 2. 1 样品处理 用小勺的边缘将蜂胶香皂刮屑 , 称取皂屑约 2 g,精确到 0. 001 g。用 30 mL 无水乙
3 结论
( 1 )本检测方法适用于掺有蜂胶溶液的香皂及 其它日化用品 。经过实践检验 ,该方法符合蜂胶香
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瓶中 ,此为待测试液 。
1. 2. 2 标准曲线的绘制 精确吸取 0. 2 mg / mL
芦丁标准品使用液各 1, 2, 3, 4, 5, 6 mL ,加入用无水
乙醇配制的 A l (NO3 ) 3 溶液 100 g /L 1 mL ,用无水乙 醇定容 50 mL。静置 40 m in,用无水乙醇作参比溶
吸光值 。
利用样品的吸光值在标准曲线上查出对应芦丁
含量的质量 :
黄酮含量
= W
m ×50 ×10 ×1 000
×100%
式中 m ———标准曲线上查出对应芦丁含量的质
量 , mg;
W ———称样量 , g。
2 结果与讨论
2. 1 样品处理 2. 1. 1 整个过程非水状态 皂基溶于水 ,因此整个 样品处理过程都不能有水分 ,否则会产生溶液浑浊 的肥皂水 ,无法比色 。本方法的特点是全程非水状 态 。绘制标准曲线的标准品溶液 、显色剂都是用无 水乙醇专门配制 。 2. 1. 2 萃取时温度 萃取温度不能低于 40 ℃,否 则肥皂的皂基会凝固 ;不能高于 70 ℃,否则萃取剂 乙醇先挥发了 。 2. 1. 3 过滤前 ,萃取的溶液要充分冷却 为了使皂 基析出 ,趁凉过滤可以更好地分离皂基和乙醇层的 黄酮组分 。因为皂基在乙醇中还是有小的溶解度 , 若冷却不充分时 ,会与黄酮成分一起通过滤纸 ,干扰 比色 。 2. 2 掺比溶液问题
第 36卷第 5期 2007年 5月
应 用 化 工 App lied Chem ical Industry
Vol. 36 No. 5 M ay 2007
蜂胶香皂中黄酮成分的测定
马兰宇
(北京百花蜂产品科技发展有限公司 ,北京 100176)
摘 要 :采用分光光度比色法测定蜂胶中的总黄酮含量 。使用无水乙醇萃取蜂胶香皂中的黄酮成分 ,用硝酸铝作 为显色剂 ,在 415 nm 处进行比色 ,与标准曲线相对比进行定量计算 。本方法最低可以测定总黄酮含量在 0. 06%的 蜂胶香皂样品 。 关键词 :蜂胶 ;总黄酮含量 ;分光比色法 中图分类号 : TQ 041 + 7 文献标识码 : A 文章编号 : 1671 - 3206 (2007) 05 - 0503 - 02
于乙醇中 。充分冷却 ,必要时在冰箱里冷却 。滤纸
过滤 ,保留乙醇相 (黄酮类物质 ) 。余渣另加无水乙
醇 ,加热 、冷却 、挤压渣滓 、过滤 ,反复 2～3次 。合并
滤液 ,直至滤渣皂基基本发白 。滤液入冰箱冷却 ,必
要时入冰室短时冷冻 。在充分冰冻冷却后再过滤 ,
除去残余皂基 。滤液用无水乙醇定容于 50 mL容量
无色透明溶液 无色透明溶液 0. 000
无色透明溶液
0. 002
2. 4 加入 KAc对显色的影响 检测 其 它 种 类 的 蜂 胶 制 品 时 , 加 入 显 色 剂
A l(NO3 ) 3 后还要加入 KAc溶液 , 目 的 是 为 黄 酮 显 色创造弱碱性的条件 。但是本方法不使用醋酸钾 。 在多次测定蜂胶香皂时发现 ,加入 KAc溶液 ,会产 生白色沉淀 ,无法比色 。我们采用过离心和滤纸过 滤的方法去除沉淀 。但是过滤清液比色的吸光值折 算成黄酮含量时 ,只有配方理论投入量的 30% ～ 40%。因为 ,蜂胶皂中含有 13 ～17 种成分 (包括阴 阳离子表面活性剂 ) ,可能与 KAc溶液反应 ,产生干 扰 。而不用 KAc溶液 ,只用显色剂 A l (NO3 ) 3 ,并不 影响比色结果 。在无水乙醇的环境下 ,没有 KAc的
3 结论
(1)液可清培养污泥 ,水解酸化池 、氧化沟系统
能够有效地去除亚麻沤制废水中的有机污染物 ,对 COD、TN 及 TP的去除率分别在 90%及 70% 以上 。 因此 ,采用该系统处理亚麻沤制废水是可行的 。
(2)液可清及氧化沟系统联合应用 ,具有以下 优点 : ①采用液可清微生物水处理剂能够促进活性 污泥的生长 ,其含有的专性细菌能有效去除高浓度 有机物及氮磷 ; ②采用氧化沟系统 ,水解酸化池置于 氧化沟前端 ,形成厌氧 、缺氧 、好氧段 ,能够更好地进 行硝化 、反硝化以及聚磷菌的吸磷放磷 ,增强了脱氮 除磷效果 ; ③整个系统结构完整 ,运行成本较低 ,液 可清水微生物处理剂不会引起二次污染 ,是适合现 阶段我国亚麻沤制废水处理的新工艺 。
蜂胶是小蜜蜂采集树脂 、树胶 、树芽后 ,经过自 身的消化腺和蜡腺等腺体分泌物混合酿造而形成的 一种蜂产品 ,柔软而带有粘性的固体胶状物质 ,呈 褐 、灰褐或有青绿色 ,味苦 ,有芳香气味 ,具有明显的 灭菌消炎作用 [ 123 ] 。
天然蜂胶中活性成分主要是黄酮类化合物 、萜 类化合物和有机酸 。黄酮类化合物含量较高 ,约占 蜂胶的 10%左右 。黄酮类化合物具有多方面生理 和药理作用 。由于母核上羟基 、甲氧基 、糖甙元的个 数不同 ,而形成一系列的黄酮醇 、黄酮甙 。已知蜂胶 中黄酮 、双氢黄酮 、黄酮醇等各种黄酮类化合物有 40多种 。
有最大吸收 。在一定浓度范围内 ,其吸光度与黄酮 类物质的含量成正比 。与标准曲线比较可以定量地 测定黄酮类化合物的含量 [ 526 ] 。
蜂胶中黄酮类化合物的含量是衡量蜂胶原料或 蜂胶制品质量的重要指标 。蜂胶制品的附加值很 高 ,在原料收购和制品生产过程中的质量检测显得 非常重要 。蜂胶市场发展很快 ,检测手段和检测方 法相对滞后于新产品的出现 。因此 ,研究特定的检 测方法以适应不同种类的蜂胶制品的质量检验是非 常必要的 。
液 ,在 415 nm 处测定吸光值 。绘制标准曲线或计算
出线性回归方程 。
1. 2. 3 样品的测定 精确吸取待测试液 10 mL ,无
水乙醇定容 ,此为参比溶液 (空白 ) 。精确吸取待测
试液 10 mL ,略加无水乙醇 ,加入 1 mL A l (NO3 ) 3 溶 液 ,无水乙醇定容 。静置 40 m in,在 415 nm 处测定
黄酮类的物质都有相同的母核 。以黄酮 ( 22苯 基色原酮 )为母核而衍生的一类黄色色素 。其中包 括黄酮的同分异构体及其氢化的还原产物 ,即以 C6 2C3 2C6 为基本碳架的一系列化合物 。天然黄酮类 化合物母核上常含有羟基 、甲氧基 、烃氧基 、异戊烯 氧基等取代基 。由于这些助色团的存在 ,使该类化 合物多显黄色 [ 4 ] 。蜂胶中的黄酮化合物溶于乙醇 , 黄酮类化合物的相邻羟基在微碱性的条件下 , 与 A l3 +离子可形成显色的络合物 ,在 415 nm 波长附近
收稿日期 : 2007204202 作者简介 :马兰宇 (1958 - ) ,女 (满族 ) ,北京人 ,北京百花蜂产品科技发展有限公司高级工程师 ,主要从事蜂产品的生产 、
研发 、检测与质量管理 ,具有 ISO9001、ISO17025、HACCP体系审核员资格 。电话 : 13801079261, E2mail: fcp jc@
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应用化工
第 36卷
醇浸泡 ,在 60～70 ℃水浴中加热 ,将黄酮成分萃取
作用 ,也可以有效地定量分析 ,可能是因为肥皂也是 弱碱性 ,对黄酮与 A l3 +的显色也起到同样的弱碱性 作用 。
本方法测定过蜂胶香皂 、蜂胶洗面奶 (包括美 白型 、祛痘型 、祛斑型 ) 、蜂胶洗发液 ,效果良好 。 2. 5 最小检出限与回收率
本方法最小可检出含黄酮 0. 06%的样品 ,平均 回收率为 97. 5% ( n = 4) 。
实验证明 ,皂基与显色剂的反应液在 415 nm 处 无吸收 ,香精与显色剂无反应 ,实验结果见表 1。
表 1 皂基 、香精的干扰性实验 Table 1 In terferen tia l exper im en t for soap tablet and essnce
样品
物态
称样量 / g
无水乙醇萃取液
由于黄酮类物质本身具有颜色 ,未加显色剂时 已经具有本底颜色 [ 4 ] ,即黄酮的样品溶液有背景吸 收 。所以本方法比色所要求的参比溶液与一般方法 的参比溶液不一样 。通常参比溶液是什么试剂都 加 ,就是不加样品溶液 ,而测定蜂胶香皂的参比溶液 则是相反 ,什么试剂都不加 ,只加样品溶液 ,此点操 作中应予以重视 。 2. 3 皂基 、香精的干扰问题
Abstract:An analytical method has been developed for the determ ination of total flavone2genus com2 pounds in p ropolis2fancy2soap by visible light spectrophotom eter. U sing anhydrous ethanol extract flavone2 genus component from p ropolis2fancy2soap , then w ith alum inum nitrate as color reagent. The flavone2genus content is determ ined by visible2spectrophotom eter at 415 nm , and quantificationlly counted comparing w ith standard curve. The m inimum lim it of detection for the method 0. 06%. Key words: p ropolis; flavonoids; visible2spectrophotometer
空白溶液
空白溶液外观
外观
吸光值
比色溶液外观
比色溶液 吸光值
香皂 [皂基 +蜂胶 ] 皂基
黑黄色块状 白色颗粒
2. 002 1. 999
黄色透明溶液 无色透明溶液
浅黄透明溶液 无色透明溶液
0. 035 0. 000
浅黄透明溶液略有白点 无色溶液 ,略有白点
0. 213 0. 007
香精
无色液体
0. 023
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应用化工
第 36卷
图 7 液可清 /氧化沟系统对 TP的去除率 Fig. 7 Effect of ACF 322oxidation ditch system on removal of TP
由图 6、图 7 可知 ,系统对 TP的去除效果一直 很稳定 ,说明氧化沟的好氧 、缺氧 、厌氧段以及液可 清中的磷细菌都对磷的去除有较好的效果 。出水 TP的浓度保持在 2. 5 mg /L 左右 ,对 TP的去除率为 78% ～86%。