麦氏比浊法

细菌浓度的简单确定法：麦氏比浊法

麦氏比浊管是McFarland发明的一种用于微生物比浊的不同浊度的标准浊度管。具体的配制方法是根据硫酸和氯化钡的比例来定的，有表可查，这样不同比例生成的硫酸钡沉淀的浓度不同，且都有定值。

麦氏比浊管的配比如下：

操作方法：

1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌生理盐水(NaCl)，直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

使用技巧：

1、直接用眼睛看(需要经验，误差较大)。

2、找张白纸，打上平行直线，然后看(如图示，利用光在不同浓度液体折射不同)。

注意事项：

1、如果测定的肉汤培养物不澄清，由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)。

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。

编者注：

1、测定好的细菌，最好做一下梯度稀释涂布计数。

2、此浓度是对应的大肠杆菌的浓度，如果是其他细菌，会有一定的差别，但编者做过的几个菌差别都在一个数量级之内，适合于普通实验。

3、此种方法测定的准确性不是很高，如果是对细菌数量要求较精确的，请用紫外分光光度计。

麦氏比浊法麦氏比浊管

麦氏比浊管

【使用方法】：

1、轻摇标准试管。

2、无菌操作将被测定的肉汤培养物加到与标准管相同直径(大小)的无菌试管中。

3、以无菌操作向被测定试管加入无菌蒸馏水，直到浓度与所要求的标准管的浓度相同。

【计算被测培养物试管的浓度】：

1、第2个标准管为3×108细菌/ml的倍数。

2、细菌浓度标准管号×3×108=该管号的细菌/ml。

3、例如：3号管(#3)为9×108细菌/ml。

【制备所要求的浓度，如需要105细菌的浓度】：

1、相当1号管(3×108)的细菌作1：3稀释到108。

2、再作1：1000稀释。

3、108-103=105

【注意事项】：

1、如果测定的肉汤培养物不澄清。

A、由培养物的值减去未接种培养基的值来校正细菌浓度。

B、列: 4号管(肉汤培养物)-1号管(孵育过的未接种的肉汤管)=3号管(校正读数)

2、如果肉汤颜色很深,把未接种试管放在标准管的后面读数即可。