牛血清白蛋白的提取与鉴定

3）染色 将膜条直接浸于盛有氨基黑10B的染料中， 染2分钟取出（别过长），立即浸于漂洗液中 ，分别在漂洗液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各漂洗5分钟， 直至背景漂洗干净为止。 4．观察结果 比较样品与待测液中白蛋白在薄膜上的电泳 结果，看位置是否一致，是否有杂带。
3. 电泳： 1）点样 用两支毛细管分别将标准液及测定液点在同一张醋 酸纤维素薄膜的无光泽面上（轻轻的划好点样线并 作好标记），标准液点一次，测定液在同一个点上 点三次。 1.5cm 标准 粗糙面 学号 待测 （无光泽面）
2）电泳 将点样后的膜条置于电泳槽架上，放置时无光 泽面向下，点样端置于阴极，平衡5分钟，开电源 160伏40分钟，关闭电源后用镊子将膜条取出。
牛血清白蛋白的提取和 鉴定
1.时间： 3h，中途不休息。 2.一组一人，实验报告当堂写 、当堂交。 3.电泳期间，还器材及钥匙到 准备室。
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操作： 3分 A. 实验操作(1分) B. 试剂盘整理有序(1分) C. 实验室环境卫生(1分) 实验报告： 2分 A. 目的和原理(盐析、透析、电泳)(0.5分) B. 操作 (0.5分) C. 结果 (位置、杂带)(0.5分) D. 讨论(位置、杂带)(0.5分) 讨论思路： I. 位置一直或无杂带时，结果说明什么?为什么? II. 位置不一致或有杂带时,对其进行分析,是什么原因?
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【样品】 小牛血清 【操作】 1. 盐析： 取小牛血清0.5毫升+PBS液0.5毫升+饱和硫酸 铵2.3毫升，充分混匀，静止20分钟， 3000rpm离心10分钟。 2. 透析： 取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液 倒入袋内，用线扎紧上口（注意要留有空隙） ，放入装有自来水的小烧杯中透析，要不断振 动，每隔1分钟换1次水，共换水15次。