生化考试的实验思考题

X9 肌糖原的酵解

A）人体和动植物体中糖的存储形式是什么？实验时，为什么可以用淀粉代替糖原？

人体中糖的储存形式为肌糖原与肝糖原，植物体中为淀粉。因肌肉糜中含有可以酵解淀粉与糖原的酶类，最终在无氧条件下分解生成乳酸，参与显色反应。

B）试述糖酵解作用的生理意义？

糖酵解是生物界普遍存在的供能途径，但其释放的能量不多，而且在一般生理情况下，大多数组织有足够的氧以供有氧氧化之需，很少进行糖酵解，因此这一代谢途径供能意义不大，但少数组织，如视网膜、睾丸、肾髓质和红细胞等组织细胞，即使在有氧条件下，仍需从糖酵解获得能量。在某些情况下，糖酵解有特殊的生理意义。例如剧烈运动时，能量需求增加，糖分解加速，此时即使呼吸和循环加快以增加氧的供应量，仍不能满足体内糖完全氧化所需要的能量，这时肌肉处于相对缺氧状态，必须通过糖酵解过程，以补充所需的能量。在剧烈运动后，可见血中乳酸浓度成倍地升高，这是糖酵解加强的结果。又如人们从平原地区进入高原的初期，由于缺氧，组织细胞也往往通过增强糖酵解获得能量。在某些病理情况下，如严重贫血、大量失血、呼吸障碍、肿瘤组织等，组织细胞也需通过糖酵解来获取能量。倘若糖酵解过度，可因乳酸产生过多，而导致酸中毒。

X10 脂肪酸的β-氧化

A）为什么说做好本实验的关键是制备新鲜的肝糜？

新鲜的肝糜中酶的活性高，所以生成丙酮的量才高

如果不新鲜，酶的活性太低了，丙酮的量太低甚至没有，那实验就会失败

B）什么叫做酮体？为什么正常代谢的产生的酮体量很少？在什么情况下血中的酮体含量增高，而尿中也能出现酮体？答：1、乙酰乙酸、β-羟基丁酸及丙酮，三者统称为酮体；2、因为代谢正常的情况下，血糖能够供给人体足够的能量，满足机体的需要。这时就不需要脂肪大量分解来提供能量。酮体的生成就是来自于肝内脂肪酸的分解。脂肪不大量分解，自然没有大量脂肪酸分解成酮体。

3、但若人体血糖量不足，为了维持血糖稳定，就会促进脂肪的分解，生成一定的能量供给人体正常需要。可是大脑无法直接利用脂肪分解得到能量，也就由肝脏合成一部分酮体，酮体进入血液循环，到达大脑进一步分解提供能量。酮体的生成其实主要就是为了在体内葡萄糖缺乏的情况下，提供给一些无法直接利用脂肪等的特殊组织、器官所需要的能量。人在饥饿状态下，酮体产生就会相应增多。

C）为什么测定碘仿反应中剩余的碘可以计算出样品中丙酮的含量？

因为剩余的碘可以用标准硫代硫酸钠来滴定，根据滴定样品与与滴定对照所消耗的硫代硫酸钠体积之差，可以计算由丁酸氧化生成丙酮的量

D）实验中三氯乙酸起什么作用？

为了使蛋白质沉淀下去，使其中的酶失活，不会产生酮体。

X11 血液中转氨酶活力的测定（分光光度法）

A）转氨酶在代谢过程中的重要作用及在临床诊断中的意义？

正常人血清中只含有少量转氨酶，当发生肝炎，心肌梗死等病患时候，血清中转氨酶活力常显著增加，所以在临床诊断上转氨酶活力的测定有重要意义。

B）血清谷丙转氨酶的测定有何注意点？（不会）

在制作标准曲线时，要注意必须加入一定量的底物以抵消a-酮戊二酸产生的消光影响，主要各试剂添加量要准确无误

X13大蒜细胞SOD的提取和分离

A）为什么SOD酶活力不能直接测得？

因为SOD为不稳定自由基，寿命极短，反应过程中不易控制，测定结果也不精确。

B)超氧自由基为什么能对机体活细胞产生危害，SOD酶如何减少超氧自由基的毒害？

自由基是具有未配对价电子的原子或原子团，化学性质非常活泼，是活性氧的一种。植物在逆境胁迫或衰老过程中，细胞内自由基代谢平衡被

破坏而有利于自由基的产生。过剩自由基的毒害之一是引发或加剧膜脂过氧化作用，造成细胞膜系统的损伤，严重时会导致植物细胞死亡。超氧自由基是生物细胞某些生理生化反应常见的中间产物，如果细胞中缺乏清除自由基的酶，机体就会受到各种损伤。SOD则能通过歧化反应清除生物细胞中的超氧自由基（O2－

），生成H2O2和O2，H2O2由过氧化氢酶（CAT）催化生成H2O和O2，从而减少自由对有机体的毒害。

大蒜细胞SOD的纯化-盐析

盐析的机理是什么？

1.一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程；

2.向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析

B）为什么在加入饱和硫酸铵时，一定要摇动，缓慢加入？

因为要防止饱和硫酸铵1磁性加入或搅拌不均匀造成局部过饱和的现象，使盐析达不到预期的饱和度，得不到目的蛋白质。