形态学观察在细菌鉴定中的应用

新桥医院
检验科
形态学观察 在细菌鉴定中的应用
邱 宗 文 2013年5月
资料提供：邱宗文
重庆
图片拍摄：曾祺
幻灯制作：邱宗文 唐朋

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Ø 如痰培养时，往往在平板上长出多种菌落
p长出的菌落都要涂片染色吗？ 否！ 没有必要！
p长出的细菌都需要鉴定及药敏吗？
Ø 那我们该怎么做呢？
p对不能确定的菌先涂片染色观察菌体形态 p主要针对致病菌做鉴定及药敏试验
资料提供：邱宗文
幻灯制作：邱宗文 唐朋
图片拍摄：曾祺

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菌落形态特征
Ø 在适宜环境下是相对稳定的，任何菌都有特定的菌落特征，只是部分 菌落特点仅靠肉眼无法观察和识别 Ø 受培养方法、培养基、培养时间等因素影响 Ø 一般选取培养24～48h内的细菌 Ø 主要是利用肉眼来初步观察
资料提供：邱宗文
幻灯制作：邱宗文 唐朋
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肉眼观察什么呢？
Ø 培养基上菌落特征及生长情况 Ø 血琼脂平板上的溶血 Ø 菌落气味 Ø 菌落色素 Ø 在鉴别培养基上需观察其生长情况是否与预期相一致
资料提供：邱宗文
幻灯制作：邱宗文 唐朋
图片拍摄：曾祺

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菌落观察的意义何在呢？
Ø 熟悉常见菌落形态可提高工作效率 Ø 有助于初步确定可能的致病菌 Ø 对细菌鉴定及药敏具有“导航”作用
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幻灯制作：邱宗文 唐朋
图片拍摄：曾祺

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现以工作中的部分菌落图片与同道一起讨论
1.痰培养 2.咽拭子培养 3.尿培养 4.粪便培养 5.创口分泌物培养 6.生殖道分泌物培养
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幻灯制作：邱宗文 唐朋
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微黄、不透明、光 滑到粗糙、有时粘 液样、中等大小
血平板、巧克力、 营养琼脂上生长， 麦康凯上不生长
患者：男、62岁、慢支炎 自然咳痰、培养24h
资料提供：邱宗文
观察：主要为奈瑟氏菌和少量草链 处理：报告“正常菌群生长”
幻灯制作：邱宗文 唐朋 图片拍摄：曾祺

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灰白色、透明或半透 明、 α-溶血的光滑 小菌落
兼性厌氧、5%-10%CO2 促进生长、营养要求 高，血平板上生长，巧 克力和麦康凯上不生长
患者：男、5岁、急支炎 自然咳痰、培养24h
资料提供：邱宗文
观察：大量草绿色链球菌 处理：报告“正常菌群生长”
图片拍摄：曾祺
幻灯制作：邱宗文 唐朋

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n 奈瑟氏菌和草绿色链球菌都是上呼吸道最主要定植菌
n 小孩时期，草链是上呼吸道最主要定植菌，奈瑟氏菌稍少 n 成年后上呼吸道定植奈瑟氏菌增多 n 因此，观察奈瑟氏菌与草绿色链球菌的比例无意义
资料提供：邱宗文
幻灯制作：邱宗文 唐朋
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菌落开始为白色，2-3日后转 为蓝绿色，日久后变为深绿色、 烟绿色，初为绒状或絮状，随 时间推移变为粉末状
室温培养菌落生长迅速， 45度培养仍生长良好，营 养要求不高，血平板、巧 克力、沙保氏和营养琼脂 上生长，麦康凯上不生长
患者：男、56岁、粒细胞缺乏症 自然咳痰标本、培养48h
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观察：奈瑟氏菌、草链和曲霉菌 处理：报告“曲霉菌生长，建议复查”
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室温培养菌落生长迅速，营 养要求不高，血平板、巧克 力、沙保氏和营养琼脂上生 长，麦康凯上不生长 菌丝体蔓延，菌落疏 松，一般高1cm，成熟后 呈灰色或褐灰色
患者：男、48岁、糖尿病 自然咳痰标本、培养24h
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观察：奈瑟氏菌、草链和毛霉菌 处理：报告“毛霉菌生长，建议复查”
幻灯制作：邱宗文 唐朋 图片拍摄：曾祺

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n 丝状真菌在生活中无处不在，空气、灰尘、水、土壤、物表都存在 n 见丝状真菌生长时，多为污染菌，确定致病菌时需要再次送检复查 n 侵袭性丝状真菌（曲霉菌）感染主要多见于抵抗力极度低下人群 n 在平板上往往长出肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状的菌落
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幻灯制作：邱宗文 唐朋
图片拍摄：曾祺

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血平板上24-48h成乳白 色、凸起、表面光滑、 边缘整齐菌落
25 ℃或37℃均可生长， 营养要求不高，在血平 板、巧克力、营养琼脂 和沙保氏上生长，麦康 凯不生长
患者：男、61岁、肺心病 自然咳痰标本、培养48h
资料提供：邱宗文
观察：大量疑似酵母样菌和少量阳球 处理：鉴定酵母样菌、报告中建议随访
幻灯制作：邱宗文 唐朋 图片拍摄：曾祺

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n 酵母样菌在上呼吸道中普遍定植，年龄越大定植率越高 n 酵母样菌为条件致病菌，很少引起肺部感染，在血中分离价值大 n 痰培养中分离到酵母样菌一般不能作为深部真菌感染的依据 n 肺部真菌感染主要以侵袭性真菌多见，如曲霉菌和隐球菌 n 痰培养见大量纯酵母样菌生长时，最好鉴定到种，然后报告临床随访
资料提供：邱宗文
幻灯制作：邱宗文 唐朋
图片拍摄：曾祺

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血平板上典型菌落呈 金黄色，部分也可呈 灰白色、柠檬色、淡 黄至橙黄色，菌落光 滑、边缘整齐、凸起、 湿润、不透明，周围 有明显的β-溶血环
兼性厌氧，营养要求 不高，血平板、营养 琼脂上生长，在麦康 凯、巧克力平板上不 生长
患者：男、65岁、肺心病 自然咳痰标本、培养48h
资料提供：邱宗文
观察：很纯的β-溶血葡萄球菌 处理：做血浆凝固酶、鉴定及药敏试验
幻灯制作：邱宗文 唐朋 图片拍摄：曾祺