人类免疫缺陷病毒(酶联免疫法)标准操作程序SOP文件
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4,被检样本的OD值>=临界值应判为HIV抗体阳性反应,<临界值为阴性反应.
待测样本的OD值>=临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照"全国HIV检测管理规范"送"HIV确认实验室"进行确认实验.
[质量控制]
为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。
5．用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完毕后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
ABCD医院
HIV实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-39
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
6．每孔加入底物液A.B各50ul,轻拍混匀,置37 C避光显色30分钟.
2．取出HIV抗原包被板,每次试验设空白对照1孔，阴阳对照各2孔.除空白对照孔外,分别加入HIV阴阳对照各50ul，其余孔加入待检血清各50ul。置于37 C温育30分钟。
3.用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完毕后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
4．分别在每孔加入酶标记物50ul（空白孔除外）,轻拍混匀，置于37 C温育30分钟。
[临床意义]
人体受到免疫缺损病毒（HIV）感染后，试验呈阳性反应，如男性同性恋、静脉药瘾者（吸毒者）、血友病患者、艾滋病人的配偶。个别献血员中也有阳性反应的报告。
7．显色完毕后,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀,立即以空白孔调零,置酶标仪450nm波长测定OD值.
[结果判断]
1,阴阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值.
2,若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算.
3,临界值(cut off值)的设定:
cut off值=阳性对照均值X 0.10+阴性对照OD均值
[试剂厂家]
丽珠集团丽珠试剂厂。
[试剂组成]
1．HIV微孔板4．HIV阴阳对照
2．HIV酶标抗原5.底物液A.B
3．浓缩洗涤液6.终止液
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内（六个月）稳定。
[标本的收集与处理]
标本为新鲜无溶血血清或血浆。
[操作步骤]
1．取出试剂盒平衡至室温，将浓缩洗涤液用蒸溜水或去离子水按1：19稀释后备用。
ABCLeabharlann Baidu医院
HIV实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-39
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[原理]
本实验采用双抗原夹心ELISA方法检测血清或血浆中人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体。酶联板用HIV-1+2型抗原包被，待测血清中的抗HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判断有无HIV抗体的存在。
待测样本的OD值>=临界值判为HIV抗体阳性,应重新取样双孔复试,复试阳性者应按照"全国HIV检测管理规范"送"HIV确认实验室"进行确认实验.
[质量控制]
为确保测试结果准确可靠，每批测试均应放置阳性质控血清与被检样品同时测试，用以检查试剂性能。
5．用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完毕后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
ABCD医院
HIV实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-39
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
页码：第2页，共2页
6．每孔加入底物液A.B各50ul,轻拍混匀,置37 C避光显色30分钟.
2．取出HIV抗原包被板,每次试验设空白对照1孔，阴阳对照各2孔.除空白对照孔外,分别加入HIV阴阳对照各50ul，其余孔加入待检血清各50ul。置于37 C温育30分钟。
3.用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完毕后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
4．分别在每孔加入酶标记物50ul（空白孔除外）,轻拍混匀，置于37 C温育30分钟。
[临床意义]
人体受到免疫缺损病毒（HIV）感染后，试验呈阳性反应，如男性同性恋、静脉药瘾者（吸毒者）、血友病患者、艾滋病人的配偶。个别献血员中也有阳性反应的报告。
7．显色完毕后,每孔加入终止液50ul,轻拍混匀,立即以空白孔调零,置酶标仪450nm波长测定OD值.
[结果判断]
1,阴阳性对照和被检样本的OD值减去空白对照OD值即为计算值.
2,若阴性对照OD均值小于0.02按0.02计算.
3,临界值(cut off值)的设定:
cut off值=阳性对照均值X 0.10+阴性对照OD均值
[试剂厂家]
丽珠集团丽珠试剂厂。
[试剂组成]
1．HIV微孔板4．HIV阴阳对照
2．HIV酶标抗原5.底物液A.B
3．浓缩洗涤液6.终止液
[试剂的稳定性与贮存]
试剂自生产日起避光贮存于2-8℃,有效期内（六个月）稳定。
[标本的收集与处理]
标本为新鲜无溶血血清或血浆。
[操作步骤]
1．取出试剂盒平衡至室温，将浓缩洗涤液用蒸溜水或去离子水按1：19稀释后备用。
ABCLeabharlann Baidu医院
HIV实验室
文件编号：
ABCD-SOP-01-39
人类免疫缺陷病毒（HIV）1+2型抗体（ELISA）
版序：ABCD
页码：第1页，共2页
[原理]
本实验采用双抗原夹心ELISA方法检测血清或血浆中人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体。酶联板用HIV-1+2型抗原包被，待测血清中的抗HIV抗体与包被抗原反应，再与酶标HIV-1+2型抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物。加底物（TMB）显色，在酶标仪上测定后根据OD值判断有无HIV抗体的存在。