下肢缺血(血管再生)推广方案

下肢缺血（血管再生）实验方案

下肢缺血试验应用

血管新生是缺血性心血管疾病血流阻塞后改善血流灌注的重要机制。然而,目前临床上尚缺乏一种简单、无创和特异的直接评价血管新生的方法。下肢缺血试验是进行血管新生评价的重要试验。方法是使用大鼠或小鼠予结扎一侧下肢股动脉制备下肢缺血模型,另一侧下肢作为对照组。术后使用激光多普勒血流成像仪对双后肢进行扫描成像，分析后肢血流量。然后每周对双后肢进行扫描成像，分析后肢血流恢复状况。

下肢缺血试验是进行缺血性心血管病与治疗性血管新生研究的重要方法，可以将促血管新生因子注入体内，促进缺血局部血管新生与侧支循环，改善组织的血液供应与功能，进而评价促血管新生因子的作用。促血管新生因子可以是促血管新生药物、蛋白、基因和干细胞治疗。

除心脏血管疾病研究外，还可使用下肢缺血试验评价糖尿病、外周血管疾病、伤口愈合等方面的血管新生研究。

所需设备

MoorLDI2-HIR点扫描激光多普勒血流成像（Gene&I，北京） AMG

小动物麻醉机（Gene&I，北京）

剃毛刀和脱毛膏

试验过程

●将大鼠或小鼠使用麻醉机进行麻醉。

●将后肢使用脱毛膏进行脱毛处理。

●剪开其中一侧后肢皮肤，分离肌肉分离出股动脉。

●使用缝合线在紧贴腹股沟处对股动脉进行结扎。

●缝合伤口，使用激光多普勒扫描仪对双下肢进行血流扫描成像。

●分析缺血侧下肢与正常侧血流灌注量对比。

试验结果

手术后当天，缺血侧肢体相对于正常侧缺血率可达80-90%。

在使用促血管新生因子后，可观察到缺血侧肢体血流恢复过程。

Reference

Aicher A., Heeschen C., Sasaki K., Urbich C., Zeiher A. M., Dimmeler S. 2006

Low-energy shock wave for enhancing recruitment of endothelial progenitor cells: a new modality to increase efficacy of cell therapy in chronic hind limb ischemia.

Circulation, 114 (25), pp 2823-30

Chalothorn D, Zhang H, Clayton J. A, Thomas S. A, Faber J. E, 2005.

Catecholamines augment collateral vessel growth and angiogenesis in hindlimb ischemia.

American Journal of Physiology - Heart and Circulatory Physiology Published 1 August 2005 Vol. 289 no. 2, H947-H959.

Crawford R. S., Albadawi H., Atkins M. D., Jones J. E., Yoo H. J., Conrad M. F., Austen Jr W. G., Watkins M. T. 2010

Postischemic poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) inhibition reduces ischemia reperfusion injury in a hind-limb ischemia model.

Surgery, 148 (1), pp 110 - 118

Tritsaris K., Myren M., Ditlev S. B., Hübschmann M. V., van der Blom I., Hansen A. J., Olsen U. B., Cao R. , Zhang J., Jia T., Wahlberg E., Dissing S., Cao Y. 2007

L-20 is an arteriogenic cytokine that remodels collateral networks and improves functions of ischemic hind limbs.

Proc Natl AcadSci U S A.104 (39), pp 15364-9

Turgeon J., Dussault S., Haddad P., Groleau J., Ménard C, Michaud S. E., Maingrette F., Rivard A. 2010

Probucol and antioxidant vitamins rescue ischemia-induced neovascularization ………. exposed to cigarette smoke: Potential role of endothelial progenitor cells.

Atherosclerosis 208, spp 342–349

吉安得尔下肢缺血国内合作单位

军事医学科学院6所

复旦大学基础医学院

华东师范大学

北京大学医学部

中科院生物物理所

四川大学华西再生医学研究中心

四川医科大学