制剂中几种特殊辅料的含量测定方法

关于制剂中几种特殊辅料含量测定方法的几点建议

现推荐几种特殊辅料的含量测定方法，可供参考，具体如下：

甘露醇

甘露醇是制剂中常用辅料，公司内大量品种使用甘露醇作为辅料。甘露醇分子含有多个羟基，同药物分子之间存在氢键作用，可能会影响药物的溶出，因此准确测定制剂中甘露醇含量对仿制药研发是十分必要的。经过文献调研及本公司孟鲁司特钠咀嚼片和曲美片中甘露醇含量测定结果，表明如下方法可供参考。

1、色谱条件【1】：

色谱柱：HP-5色谱柱（50m×0.32mm×0.52μm）

进样方式：直接进样

进样量：1μl

样品浓度：5mg/ml

进样口温度：300℃

载气种类：高纯氮气

载气流速：1.0ml/ml

柱温：260℃

分流比1:20

检测器：FID检测器

检测器温度：300℃

2、溶液配制：

供试品溶液：将待测样品研细，取细粉10mg，精密称定，置10ml顶空瓶中。直接加入1ml醋酐，再加入1ml吡啶，加盖密闭，振摇均匀，100℃下保温40min。保温完毕后，开盖取适量溶液作为供试品溶液。

对照品溶液：取甘露醇10mg，精密称定，置10ml顶空瓶中。直接加入1ml醋酐，再加入1ml吡啶，加盖密闭，振摇均匀，100℃下保温40min。保温完毕后，开盖取适量溶液作为对照品溶液。

3、测定法

取上述供试品和对照品溶液各1µl分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算供试品中甘露醇的含量。在此条件下甘露醇保留时间约为8.4min。

计算公式：

含量%=A s×W r×S s

A r×S r

×P×100%

式中：Wr：对照品重量，mg

Ar：对照品峰面积 As：供试品峰面积

Ss：供试品稀释倍数 Sr：对照品稀释倍数

P：对照品的含量

4、检验仪器：

对照品：

4、结果与结论

4.1结果：

曲美片中甘露醇含量测定结果

理论含量为文献中给出的投料量或者实际投料量。从测定结果可以看出，实际测定值和理论值十分接近。该方法可以用作制剂中甘露醇含量测定方法。

5、讨论

前期方法开发过程中尝试了顶空色谱法，由于乙酰甘露醇挥发温度较高，无明显色谱峰，所以最终采用了直接进样法。由于采用了直接进样法，色谱柱应尽量选择较粗内径的色谱柱，可以避免异物对色谱柱的堵塞；试验过程中还应注意对进样口和检测器的清洁，防止堵塞和鬼峰出现。

滑石粉

以本公司曲美片中滑石粉的含量测定方法为例，如下：

1、方法依据

曲美片中含有多种成分，其中曲美他嗪、甘露醇、交联聚维酮K30均溶于水，淀粉可以水解后溶解于稀酸中；而硬脂酸镁、滑石粉不溶于稀酸。因此取适量曲美混粉或者片剂在稀酸中充分水解溶解后，不溶物为硬脂酸镁和滑石粉，通过残渣重量可以得到硬脂酸镁和滑石粉的总重量。

2、溶液配制：

供试品溶液：备用。取250ml锥形瓶，加100ml纯化水，再加入20ml浓硫酸，摇匀，作为稀硫酸溶液。取本品粉末或者片剂共计2g，精密称定，置于该锥形瓶中。75℃下保温并搅拌24h使淀粉完全水解。24h后将溶液用0.45μm滤膜抽滤（使用水膜即可，滤膜使用前称重），并用40ml纯化水洗涤滤饼，每次20ml，共2次。将滤膜和滤饼置于烘箱中，70℃下鼓风干燥15min后取出，冷却至室温称重。利用下式计算出滑石粉和硬脂酸镁总含量。

计算公式：

W A−W M

×100%

含量%=

S

式中：W A：滤饼和滤膜干燥后总重，mg

W M：滤膜重量，mg

Ws：供试品重量，mg

理论含量为文献中给出的投料量或者实际投料量。测定结果为滑石粉和硬脂酸镁的总含量，由于硬脂酸镁为常用辅料且常用量为1%，所以直接扣去1%即可得到滑石粉含量。从测定结果可以看出，实际测定值和理论值十分接近。该方法可以用作曲美片中滑石粉含量测定方法。

5、讨论：

样品中滑石粉含量较低，且重量法误差较大，因此样品需求量较大，实际应用时应注意备足供试品量。

微孔滤膜较薄，且材质不耐高温，因此干燥时应在低温下干燥。

十二烷基硫酸钠

1、液质连用测定参数

1.1、色谱条件：

流动相：水相（量取1000ml水，加入0.1ml甲酸、0.1ml氨水，混匀）-乙腈50:50。

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Agilent公司的Poroshell 120 EC-C18，50mm×4.6mm 2.7μm）

流速：1.0ml/min；柱温：40ºC；进样量：5μl

检测器：质谱检测器

1.2、质谱条件：

离子源：ESI-API；电压：3000V

雾化器压力：35 psig；干燥气体温度：350ºC干燥气体流速：12L/min

质量选择器：

MSD1（-）: 扫描离子：265（C12）、293（C14）、121（内标）；诱导解离能：35；增益：1 ；扫描模式：SIM。

MSD2（-）：扫描离子：237、321；诱导解离能：35；增益：1 ；扫描模式：SIM。

备注：扫描离子取决于实验目的，由于SDS的组成复杂，根据需要可以增加扫描的离子，如C10或C16.

2、溶液配制：

内标溶液配制：取苯甲酸约400mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙腈-水（50:50）溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。

刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，精密加入内标溶液1ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液：视情况而定。

精密量取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液质色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算含量。

泊洛沙姆

1、液质连用测定参数

1.1、色谱条件：

色谱柱：TSKgel 2000swxl

流速：0.5ml/min；柱温：30ºC；进样量：50μl

流动相：水相（量取1000ml水，加入0.77g乙酸铵，混匀）-乙腈95:5。

检测器：质谱检测器

1.2、质谱条件：

离子源：ESI-API；电压：3000V

雾化器压力：35 psig；干燥气体温度：350ºC干燥气体流速：12L/min

质量选择器：

MSD1（+）: 扫描离子：133；诱导解离能：250；增益：5 ；扫描模式：SIM。

常量测定也可以在上述液相条件下使用HPLC-ELSD方法，检出能力约40ug/ml。

2、溶液配制：

标准曲线储备液：称取约20mg泊洛沙姆置100ml量瓶中，用水溶解，并定容至刻度，摇匀。

标准曲线溶液：分别吸取0.5ml，1.0ml，2.0ml标准曲线储备液置10ml量瓶中，用水稀释定容，摇匀。也可以使用单点外标。

供试品溶液：视情况而定。

精密量取对照品溶液和供试品溶液各5μl，注入液质色谱仪，记录色谱图，以标准曲线法按峰面积计算含量。

葡甲胺

1、液质连用测定参数

1.1、色谱条件：

色谱柱：HILIC 5um 250*4.6mm

流速：0.6ml/min；柱温：40ºC；进样量：5μl

流动相：水相（量取1000ml水，加入0.1ml甲酸、0.1ml氨水，混匀）-乙腈35:65。

检测器：质谱检测器

1.2、质谱条件：

离子源：ESI-API；电压：3000V

雾化器压力：35 psig；干燥气体温度：350ºC干燥气体流速：12L/min

质量选择器：

MSD1（+）: 扫描离子：196；诱导解离能：70；增益：1 ；扫描模式：SIM。

MSD2（-）：扫描离子：121；诱导解离能：70；增益：1 ；扫描模式：SIM。

2、溶液配制：

稀释剂：乙腈-水（98:2）

内标溶液配制：取苯甲酸约100mg，精密称定，置100ml量瓶中，用乙腈-水（50:50）溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。