金黄色葡萄球菌知识培训
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金黄色葡萄球菌——生长特性
• 金黄色葡萄球菌在肉汤中呈浑浊生长,在胰酪胨大豆肉汤内有时液体澄
清,菌量多时呈浑浊生长。
血平板上金黄色葡萄球菌呈金黄色,有时也为白色,大而突起、圆形、 不透明、表面光滑湿润,周围有透明溶血圈。 Baird-Parker平板上金黄色葡萄球菌圆形突起、直径为2mm-3mm、光滑、 湿润,颜色呈灰色到黑色,边缘淡色,周围为一浑浊带,在其外层有一 透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度。
25g或25ml样品+225mL稀释液 均质
十倍系列稀释
选择3个适宜的连续稀释度的样品均液,接种Baird-Parker平板 36℃±1℃ 45h-48h 计数及血浆凝固酶试验
4 2 . 5 ℃
报告
2 4 ± 2 h
金黄色葡萄球菌MPN法
25g或25ml样品+225mL稀释液 均质
十倍系列稀释 选择3个适宜的连续稀释度的样品均液,各吸取1ml,分别接种于3管胰酪胨大豆肉汤 36℃±1℃ 45h-48h Baird-Parker平板 36℃±1℃ 45h-48h 血浆凝固酶试验
:适用于肉及其制品、奶制品
定 量 方 法
金黄色葡萄球菌定性检验
检样(25g或25ml+225mL7.5%氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤,均质
36℃±1 ℃ 18h-24h(45h-48h) Baird-Parker平板 血平板
36℃±1℃ 18h-24h(45h-48h)
涂片染色
观察溶血
BHI肉汤和营养琼脂斜面 36℃±1℃ 18h-24h 血浆凝固酶试验
致病菌基础知识培训
内容索引
• 金黄色葡萄球菌的生物 学特性 • 金黄色葡萄球菌的培养 特性及生长 • 金黄色葡萄球菌的检测 与鉴定 • 金黄色葡萄球菌的计数
金黄色葡萄球菌的概述
按葡萄球菌的生理化学组成,将葡萄球菌分为金黄色 (Staphylococcus aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)和腐 (S.saprophyticus),其中金葡多为致病性菌,表葡偶尔致病。
金黄色葡萄球菌生化试验
3.生化鉴定
• 过氧化氢酶试验 • 葡萄糖厌氧利用试验 • 甘露醇厌氧利用试验 • 耐热核酸酶试验(辅助
特性
S. aureus
S.epidermidis
Micrococci
过氧化氢酶 凝固酶 耐热核酸酶 厌氧利用 葡萄糖 甘露醇
+ + + + +
+ + -
+ -
金黄色葡萄球菌Baird-Parker平板法
报告
金黄色葡萄球菌生化试验
1.革兰氏染色
对所有的可疑培养物都要进行革兰氏染色。
2.凝固酶试验
方法:从平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌菌落,移种到TSB/BHI肉汤中, 臵35℃培养18-24h。取肉汤培养物0.3mL同0.5mL凝固酶试验兔血浆充分混 合,臵35℃培养,定时观察是否有凝块形成,至少观察6h。 试验中需同时做已知阳性和阴性对照。 结果判定:以内容物完全凝固,使试管倒臵或倾斜时不流动为阳性。部分凝固 的必须进行生化鉴定加以证实。凝固酶试验 凝固酶试验结果判定
在测试片上置入确认反应片 36℃±1℃ 1h-3h
报告
粉红色晕圈菌落计数为金黄色葡萄球菌
查MPN表
报告结果
金黄色葡萄球菌PetrifilmTM纸片测试法
25g或25ml样品源自文库225mL稀释液 均质
十倍系列稀释
选择2-3个连续适宜稀释度的样品均液,各取1ml,分别加入PetrifilmTM纸片 判读
无菌落生长
仅有典型紫红色菌落
紫红色菌落计数为金黄色葡萄球菌
除典型紫红色菌落外其他颜色的菌落
金黄色葡萄球菌是人类化脓性感染中最常见的病原菌。可引起局
部化脓性感染,外科切口及烧伤创面的感染;也可引起肺炎、伪膜性 肠炎、肾盂肾炎、心包炎等多系统的化脓性感染;还可引起败血症、
脓毒血症等全身性感染。葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的
毒素和侵袭性酶。
金黄色葡萄球菌——生物学特性
• • 金黄色葡萄球菌呈球形,直径0.8μm左右,排列成葡萄串状 ,无芽孢, 无荚膜。 革兰氏染色阳性,但衰老、死亡或被白细胞吞噬的菌体,常呈革兰氏阴 性。
金黄色葡萄球菌检验——方法适用性
• • 增菌培养法:适用于检查含有受损伤的金黄色葡萄球菌的加工食品。
定性
直接平板计数法:适用于金黄色葡萄球菌含量较高(不小于10/g(ml)) 的食品。
• MPN法:适用于金黄色葡萄球菌含量较低杂菌含量较高的食品及其原料和
未经处理的含少量金黄色葡萄球菌的食品。 • 金黄色葡萄球菌PetrifilmTM纸片测试法