裸鼠胶质瘤模型
人脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植双荧光模型的建立重点
Ｐｒｏｊｅｃｔｓ ｏｆＸｉａｍｅｎ（２０１３Ｓ０００１）
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脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的、预后较差 的原发性恶性肿瘤，占颅内肿瘤的５０％～６０％，即使 给予传统的手术联合放、化疗的综合治疗，低级别 胶质瘤患者的平均存活时间仅为３～５年，而高级别 胶质瘤为１～２年【”。因此，成熟可靠的动物模型，对 研究胶质瘤的发生发展以及有效的治疗，具有十分 重要的意义。目前国内外学者已经建立了多种胶质 瘤的动物模型［２－４］。其中裸鼠胶质瘤模型是发展较
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维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥疗效的影响
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论著 ・
Ｉ 森医 程２１年１月 ７ 第１期 Ｉ 刍 学工 ０ ０ ２ 第１卷 ２
维拉帕米对裸鼠胶质瘤 Ｕ 模型卡 ２ ５ １
吴 小明 ，仇 有 成 ，王存祖 ２ 欧 阳琦 。 ，黄钱 焕 ，杨伟 现 ，许 慧 中 （江苏 省宜 兴市 人 民 医院 神经外 科 ，江苏 宜 兴 ２４０ ； １２ ０ 江苏 大学 附属 医 院 神 经外 科 ，江苏 镇 江 ２２０ ； １０ １ 江苏 大学 基础 医学 与 医学 技术 学 院 ，江苏 镇 江 ２ ２ １ ； １０ ３
小鼠裸鼠肿瘤动物模型ppt课件
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小鼠肿瘤动物模型和抗肿瘤药物的研究方法
汇报日期
20171214JXD
Mouse model：Powerful research tool
TumorMetabolic diseaseDrug evaluation
四种肿瘤模型
人体肿瘤异种移植性肿瘤模型
移植性肿瘤动物模型
03
二、诱发性肿瘤动物模型
定义：使用致癌因素(Carcinogens)在实验条件下诱发动物发生肿瘤的动物模型。原理：利用外源性致癌因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性，形成肿瘤。
诱发性肿瘤动物模型建立方法
原位诱发致癌物直接与动物靶组织或靶器官接触而诱发该组织或器官发生肿瘤。异位诱发将与致癌物接触后的动物组织或器官埋置于该动物或另一正常动物皮下而 产生的该组织或器官的肿瘤。致癌物致癌物
注射给药
皮内注射：将药液注入表皮与真皮之间。此法多用于免疫、接种、过敏试验等皮下注射：将药液注入真皮之下。
肌内注射：又称肌肉注射，当给动物注射不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的药物时，常采用此种方法。
腹腔注射：腹膜面积大，药物进入腹腔后容易扩散和吸收。
静脉注射：不同动物类型应选择不同的静脉血管。
自发性肿瘤动物模型的缺点
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肿瘤发生情况参差不齐。
01
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难以短时间内获得大量肿瘤材料，耗时长，耗资大。
02
因此，自发性肿瘤很少在抗肿瘤药物的常规筛选中应用。
发生肿瘤的动物肿瘤生长速度差异大，难以评价。
裸小鼠作为移植宿主
白藜芦醇对裸鼠胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用
-543-
● 实验研究 ●
白藜芦醇对裸鼠胶质瘤模型肿瘤生长的抑制作用
胡 森 张 慧 步星耀 冯淼淼 王帮庆 王君毅 杨 斌 杨华超
【摘要】 目的 探讨白藜芦醇（RES）不同途径给药对裸鼠胶质瘤模型肿瘤生长的抑制效果。方法 取 80 只雄性无胸腺裸鼠 （BALB/c-nu；21~27 日龄，体重 10~12 g），采用 U87 细胞建立人裸鼠脑胶质瘤原位移植模型，采用随机数字表法分为 RES 干预组 （造模后 10 d，开始给药，1 次/d，40 mg/kg）和溶剂对照组（造模后 10 d，开始给药，1 次/d，10 mg/g；溶剂为 0.5%羧甲基纤维素钠）， 根据给药途径，RES 干预组又分为 RES 灌胃组和 RES 经鼻组，溶剂对照组又分为溶剂灌胃组和溶剂经鼻组，每组 20 只。经鼻给 药采用经鼻滴入法。采用 Kaplan-Meier 法分析生存曲线；造模后 14、21、28、35 d 测定肿瘤体积；采用 CD31 标记胶质瘤血管内皮 细胞并计算微血管密度（MVD），采用免疫组化方法检测胶质瘤血管内皮生长因子（VEGF）以及 Ki-67 表达，采用 TUNEL 法检测 胶质瘤细胞凋亡。结果 与溶剂对照组相比，RES 干预组裸鼠生存时间明显延长（P<0.05），造模后 28、35 d 肿瘤体积明显缩小 （P<0.05），肿瘤组织 MVD 明显减小（P<0.05），肿瘤组织 VEGF 和 Ki-67 表达水平明显降低（P<0.05），肿瘤细胞凋亡率明显增加 （P<0.05），而且，RES 经鼻给药较灌胃给药作用更明显（P<0.05）。结论 RES 可有效抑制裸鼠胶质瘤模型肿瘤生长，机制可能与 抑制肿瘤血管生成和促进肿瘤细胞凋亡有关。与灌胃给药相比，经鼻给药肿瘤抑制效果更好。
胶质瘤大鼠模型的建立
１ 材料 与方 法
点， 向前 １ｎｌ 矢状缝右旁开 ３５ｌ ｌ用直径 １ ｌ ｌ， ＩＴ ．Ｔ ， ｌ ｎ ｎ ｍ 的牙科 钻 钻 穿颅 骨 ， １ 微 量推 进 器 穿 刺硬 脑 用 ０ 膜 ６ｍｎ ｌ后针尖 回撤 １ｍ 注射 ｃ ｍ， ６细胞悬液。接 种量为 １ｘ１ Ｉ、０ １只。整 个 注 射 过 程 在 ｌ ０／ｚ １ ／ ｌ ， Ｏ
中图分类号 ： ７０ ２４ Ｒ ３ ．６ 文献标志码 ： Ｂ 文章编号 ：０ ２２６ ２ １ ）００ ２ －２ １０ －６ Ｘ（０ ０ ３ － ７０ ０
胶质细胞瘤由于其具有广泛的局部侵袭性的生 长特点 ， 目前缺乏有效的治疗手段 ， 因此建立简单易 行、 稳定可靠的胶质瘤动物模型对研究胶质瘤的发 病机制及治疗方法有重要意义。２０ ０９年 ８ １ ～１ 月， 我们采用立体定位法将胶 质瘤 ｃ ６细胞接种 于 Ｓ Ｄ 大 鼠尾壳核 处 ， 建立 了胶 质 瘤大 鼠模 型 。此 建 模 方
除 ２只外 ， 余脑组织均见肿瘤形成 ， 见肿瘤颅外生 长。肿 未
鼠尾壳核注射 １×１’ ０ 个胶质瘤 Ｃ ６细胞 ， 观察大 鼠生存状 况 ， ２ 于 ２ｄ麻醉后 活体 取脑 ， 制作成病 理切片 ， Ｅ染色 ， Ｈ 免疫组化检测神经胶质纤维酸性蛋白（ Ｆ Ｐ 。结果 ＧＡ ）
瘤周边界线 明显 ， 未见包膜 ， 内可见新生血管。结论 采用立体定位技术 于大 鼠尾壳核注入 ｃ 瘤 ６细胞 的方法建立 的胶质瘤大 鼠模型稳定可靠 、 操作简单 ， 符合恶性胶质细胞瘤生物学特性。 关键词 ： 胶质瘤 ； ６细胞 ； Ｃ 动物模型 ； 鼠 大
１ １ 实验材 料 ．
激反应 情况 ， 期测量 体质量 。 于接种后 ２ 、 鼠 定 ２ｄ 大 麻醉 后用 ４ 多聚 甲醛 左心 室 灌 注 ， 剖 取脑 ， 本 ％ 解 标
动物模型：裸鼠PC-9细胞肿瘤模型
动物模型：裸鼠PC-9细胞肿瘤模型一、嘉美实验裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建方法采用腋窝皮下接种PC-9人肺癌细胞，建立PC-9人肺腺癌细胞裸鼠移植瘤模型并给与药物进行干预，观察药物对肿瘤的作用。
二、裸鼠PC-9细胞肿瘤模型的构建及后续实验操作1、25只BALB c裸鼠，适应性饲养一周后，调整制备好的PC-9人肺腺癌细胞单细胞悬液浓度，用1m 1l无菌注射器吸取细胞悬液，于每裸鼠右侧腋下皮下注射0.2mL细胞悬液(接种细丹包量约为1×x102/ml)，细胞悬液接种于裸鼠的右侧腋下7-10d后，观察成瘤情况，肿瘤仁本积大于100m3后，选取肿瘤大小相近的小鼠按肿瘤体积随机分为4组:(1)对照组，5只；(2)高剂量组，7只:(3)中剂量组，7 )顺铂组，6只。
当天高剂量组、中剂量组、顺铂组开始给药其中，高剂量组连续21天每天灌胃给药，顺铂组每三天腹腔注射给药，齐量5m/e次。
每两天测量荷瘤裸鼠体重和冲瘤体积。
于第22天停止给药病禁食2h，第再次测量肿瘤体积，计算相对肿瘤体积(RTV)，绘制肿瘤生长曲线，毛材当天称量最后一次体重和瘤重计算肿瘤指数完整剥离瘤块，其中一半瘤块组织于 10%福尔马林中固定，备用；另半肿瘤组织存放于液氮中冻存。
血样用109 mmol/L枸櫞酸钠19抗凝，分离血浆。
2、小鼠接种PC-9人肺腺癌细胞后 9天左右，可观察到裸鼠右侧腋下均现黄豆大小瘤块，于当天开始测量肿瘤体积并称重。
于接种第11天时，测量肿瘤生长指数和体重时发现，各组荷瘤裸鼠肿瘤体积均值达到100mm3，于当天开始分组给药在给药过程中发现，顺铂组荷瘤裸鼠的体重下阳夆明显，与对照组相比具有极显著性差异루(P<0.01)高剂量组荷瘤裸鼠的体重于d7、dI 3、d19天时有显著性差异(P~0.05)，其他各组体重与对照组相比均无明显差异。
顺铂组肿瘤体积于d13、d17、dl9、d21 d23时与对照组相比明显减小，并有显著性差 :(P<0.05)，在d15天时有极显著性差쿠(P<0.01)。
裸鼠模型在肿瘤治疗研究中的应用
裸鼠模型在肿瘤治疗研究中的应用近年来，肿瘤治疗研究一直是医学界的热门话题。
而其中一个被广泛应用的模型就是裸鼠模型。
该模型是一种没有免疫系统的小鼠，其所患种类繁多的人类癌症与人体癌症的生理和生化特征高度一致。
因此，裸鼠模型被视为一种可靠的人类癌症模型，在肿瘤治疗研究中得到越来越广泛的应用。
一、裸鼠模型有助于肿瘤药物筛选和剂量的选择裸鼠模型的特点是没有免疫系统，因此可以有效地模拟人类癌症患者对化疗药物的反应。
研究人员可以将不同类型的人类肿瘤细胞种植到裸鼠的体内，然后观察不同药物的疗效以及适应性。
这种方法可以帮助筛选出最有效的化疗药物，并确定最佳的剂量方法，以降低剂量过大或过小的患者药物副作用和治疗效果不佳的风险。
二、裸鼠模型可以用于研究免疫药物的作用机制裸鼠模型的另一个重要特点是它们缺乏免疫系统。
因此，在研究免疫药物的作用机制时，其免疫抑制作用可以被完全消除。
这些免疫药物通常用于治疗肿瘤细胞免疫逃逸的疾病。
研究人员可以在裸鼠体内种植癌细胞，并给予不同的免疫药物处理，以便研究药物在治疗肿瘤免疫逃逸方面的作用和机制，为开发更加有效的肿瘤免疫疗法提供理论基础。
三、裸鼠模型可以模拟人类癌症的药物耐受性药物耐受性是肿瘤治疗中的一个重要问题。
但是直接在人体内进行研究很难获得满意的结果，因为某些药物在实验室中表现出的耐受性可能与实际情况不同。
通过使用裸鼠模型，可以准确地模拟人类癌症的耐受性情况，并研究这些药物的各种机制。
这种方法可以帮助人们更好地了解药物耐受性的机制，促进新药物的开发，改善现有的肿瘤治疗方法。
四、裸鼠模型可以进行肿瘤的转移研究在许多情况下，治疗肿瘤并不仅仅是消灭原发肿瘤，还需要防止肿瘤进行转移。
而裸鼠模型在这个方面有很大的应用潜力，尤其是在研究转移性肿瘤时。
研究人员可以通过种植具有转移潜力的细胞系，观察肿瘤转移的过程和机制，并测试不同的治疗方案，以便开发更加有效的肿瘤转移治疗方法。
五、裸鼠模型可以用于研究基因治疗基因治疗是一种新型的肿瘤治疗方法，其作用机制涉及基因转导、表达、调控和重组等方面。
小鼠裸鼠肿瘤动物模型课件
小鼠裸鼠模型在体内肿瘤药理学研究中的 应用
药物代谢
研究小鼠裸鼠对药物的代谢 和转化，为药物治裸鼠对不同药物治 疗的反应和耐药性。
肿瘤生长及转移
研究小鼠裸鼠肿瘤生长和转 移机制，探索抑制肿瘤发展 的方法。
1 易于培养和繁殖
小鼠裸鼠繁殖速度快，能够满足大规模实验的需求。
2 易于操控
小鼠裸鼠对基因编辑和药物处理的反应性高，便于研究者进行实验操作。
3 相似的生理特征
小鼠裸鼠与人类有许多相似的生理特征，有助于预测药物疗效。
小鼠裸鼠模型的建立方法
1
移植裸鼠
将人体肿瘤细胞或肿瘤组织移植到小鼠裸鼠体内。
2
基因编辑技术
小鼠裸鼠肿瘤动物模型
肿瘤研究中的重要工具，通过建立小鼠裸鼠模型，我们可以深入了解肿瘤的 发展和治疗方法。
常用的实验动物模型
小鼠
被广泛用于基础生物学、药 物研发和疾病模型研究。
裸鼠
因其缺乏皮肤毛发而成为理 想的肿瘤研究动物。
其他动物
包括大鼠、猪、犬等，具有 特定的研究目的和应用场景。
小鼠裸鼠作为肿瘤模型的优点
小鼠裸鼠模型在肿瘤研究中的 局限性
小鼠裸鼠模型无法完全模拟人体内的复杂环境，其它动物模型和体外实验仍 然具有重要意义。
小鼠裸鼠模型未来的发展及前 景
未来，借助基因编辑和体外模型技术的发展，小鼠裸鼠模型将更加准确和可 靠，为肿瘤研究带来更多突破。
利用CRISPR-Cas9等方法改变小鼠裸鼠的基因表达，模拟人类肿瘤。
3
毛发缺失技术
通过遗传或激素处理使小鼠裸鼠丧失毛发，便于观察肿瘤生长。
小鼠裸鼠模型在体外药物筛选中的应用
裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立
裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立是一种重要的疾病模型，它可以为肝癌治疗研究提供有力的实验支持。
本文将对裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立方法、优点、应用以及未来发展进行详细的探讨。
一、裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立方法1.1 细胞培养：选择合适的肝癌细胞系进行体外培养，确保细胞状态正常、细胞活性强。
1.2 细胞检测：检测细胞的纯度、细胞数目、细胞的拓扑形态、基因表达差异等，以保证肝癌细胞的最佳种植状况。
1.3 裸鼠荷瘤：通过注射细胞的方式给裸鼠诱发肝癌，注射前需要消毒裸鼠的皮肤及手术器械，减少致病菌的感染；肝癌细胞的注射部位可以是裸鼠体表组织、皮下或者肌肉内部。
1.4 实验监测：在瘤细胞注入裸鼠后，要检测裸鼠的体温、体重、食欲等生理指标，观察种植瘤的生长状态；待瘤体体积足够大时进行实验，通过静脉注入药物、瘤组织取材等方式进行肝癌治疗药物研究。
二、裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的优点2.1 模型来源稳定：使用人肝癌细胞系进行裸鼠皮下肝癌模型建立，不同于动物体内自然发生的肝癌，因此可以控制稳定来源，有利于肝癌治疗药物的研究。
2.2 生理指标齐全：裸鼠作为模型动物，具有生物学模拟度高、生活习性简单、繁殖周期短等特点，且实验性调节饲养和环境等因素更为容易，因此比较适合进行肝癌相关实验研究。
2.3 操作方便：裸鼠皮下肝癌模型建立起来比较简单，易于进行肝癌治疗药物研究，而且与其他模型动物相比，裸鼠实验后的数据质量也能更好地保证。
三、裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型在肝癌治疗研究中的应用3.1 新药筛选：裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型可以用于新药筛选，通过对不同的治疗手段处理，以期找到最有效的肝癌治疗方式。
3.2 治疗机制研究：通过裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型的建立，开展治疗机制的研究，从生物学角度解析肝癌的治疗机制，为临床诊断和治疗提供科学依据。
3.3 评估药物的毒副作用：裸鼠皮下人肝癌种植瘤模型在肝癌药物毒副作用评估中起着重要作用，有助于肝癌药物研发单位减少不必要的药物开发风险，提高药物研发效率。
裸小鼠脑胶质瘤原位移植瘤模型的建立及磁共振成像研究
裸小鼠脑胶质瘤原位移植瘤模型的建立及磁共振成像研究王舒楠，张伟国，陈金华，马长锁，赵丽(第三军医大学大坪医院野战外科研究所放射科，重庆400042)摘要：目的建立裸鼠脑胶质瘤原位移植瘤模型并进行MR扫描，摸索扫描的最佳参数，探讨1.5T磁共振在检测裸鼠颅内成瘤的可行性，为下一步实验奠定基础。
方法SHG-44细胞传代培养后，用微量注射器吸取肿瘤细胞悬液直接穿刺接种，在肿瘤细胞接种后第15天行1.5T MR扫描，裸鼠麻醉后置于小动物线圈采集图像并利用影像工作站测量体积。
而后取脑组织做病理切片，计算体积后行HE及CD34染色，与MRI图像进行对比分析。
结果除去围手术期死亡2只裸鼠外，剩余的13只裸鼠在MR增强序列图像上均能见到肿瘤，成瘤率达100%，且位置同组织切片相一致。
在MR 图像上测得的肿瘤体积为（29.41±10.95）mm3，组织切片测得的肿瘤体积为(26.57±9.70) mm3，二者无显著性差异（P＞0.05）但具有明显的相关性（r=0.985，P ？）。
肿瘤微血管丰富，且主要集中在肿瘤的边缘。
结论采用微量注射器直接建立裸鼠胶质瘤原位移植瘤模型简单便捷，成瘤率高。
1.5T 磁共振能活体检测裸鼠脑胶质瘤成瘤情况，并能进行一定的功能成像，是动态监测裸鼠胶质瘤发生发展的有效途径。
关键词：裸鼠；胶质瘤；磁共振成像；原位移植Estabilshment of human glioma orthotopic model in nude mice and monitored by 1.5T magnetic resonance imagingWang Shu-nan, Zhang Wei-guo, Chen Jin-hua, Ma Chang-suo, Zhao Li（Department of Radiology, Daping Hospital, The Third Military Medical University, Chongqing 400042, China）Abstract：Objective To establish the model of human glioma orthotopic implantation in nude mice，and investigate 1.5T magnetic resonance in the detection of transplanted tumor. Methods The glioma cell line SHG-44 was cultured in vivo. The glioma cells were injected into nude mice brain using micro-syringe to form glioma. Fifteen days later, nude mice were scaned by 1.5T MR with animal-coil to detect the tumor. Tumor volume was measured in AW4.3 imaging workstation. Then take brain tissue biopsy done with HE staining and CD34 staining. Tumor volnme was measure under microsope to evaluated the relativity with the dates in MR imagings. Results Two nude mice were dead in perioperative, the other thirteen mice survive and be detected tumor in bran by MR scanning with contrast injected. The location in MRI isconsistent withthat in tissue section. Tumor volume is 29.41±10.95mm3measured by MRI and is 26.57±9.70mm3 measured under microsope. There is no significant difference（P＞0.05）but significant correlation（r =0.985）. Conclusion It is easy and convenient using micro-syringe directly to establish the human glioma orthotopic implantation model in nude mice. 1.5T MR can detect the tumor in mouse brain in vivo, and to carry out certain functional imaging. 1.5T MR is an effective way to dynamic monitor the occurrence and development of glioma in nude mice.Key word：Nude mice；Glioma；Orthotopic implantation；Magnetic resonance imaging胶质瘤是脑内最常见、浸润性最强的一种原发性脑肿瘤，临床治疗效果差，病死率很高。
裸鼠成瘤标准
裸鼠成瘤标准
白色小鼠可以作为模型来研究肿瘤，常用实验动物有小鼠，大鼠和兔子。
小鼠肿瘤模型是肿瘤生物学非常重要的研究手段，所以在小鼠瘤模型的建立方面有很多研究。
一般情况下，小鼠瘤模型的制备包括移植法和致瘤剂法两种。
移植法最常使用是小鼠和兔子细胞培养成瘤。
将细胞培养成瘤，然后移植到裸鼠皮下或者腹腔。
致瘤剂法是用致瘤剂，如甲苯胺咪唑（MTT），甲硝唑（MNU），敌敌畏（DMBA）等制备瘤体或者瘤细胞，然后将致瘤物质直接注入裸鼠的体内或者皮下。
拥有肿瘤模型的裸鼠都需要特殊的照顾，特别是在进行实验前，需要确保裸鼠的精神和身体健康，可以接受治疗。
另外，给裸鼠提供正常的饲养环境也非常重要，建立金标准的超净舍，保证裸鼠不受外界紫外线，空气，土壤和食物等致病因素的影响，以维持健康状态。
人U87-MG脑胶质瘤细胞裸鼠原位移植模型的建立
脑内，因此与原位移植瘤在血管生成、浸润性、转移性、瘤细 胞生物活性物质的表达、瘤组织微环境渗透压等许多生物学 行为上存在明显 差 异 ［３－４］。 肿 瘤 的 原 位 移 植 动 物 模 型 与 临 床脑胶质瘤的发生情况最为接近，包括脑胶质瘤发生、发展 的各个环节，从临床模拟性来说，是目前研究脑胶质瘤最为 理想、可靠的肿瘤模型［３，５］。为此，我们应用脑立体定位仪， 将不同数量的人脑胶质瘤细胞 Ｕ８７ＭＧ单细胞悬液接种于 免疫缺陷裸鼠的脑内右侧尾状核区，建立人脑胶质瘤原位移 植裸鼠 模 型。采 用 核 磁 共 振 扫 描 （ｍａｇｎｅｔｉｃｒｅｓｏｎａｎｃｅｉｍａ ｇｉｎｇ，ＭＲＩ）方法，在 不 对 裸 鼠 造 成 伤 害 的 前 提 下，实 现 了 动 态监测造模后裸鼠颅内移植瘤的生长，同时结合 ＨＥ染色和 免疫组化等病理学检查分析结果，确立了造模后成模的最佳 时间。 １ 材料与方法 １．１ 细胞株与实验动物 人脑胶质瘤 Ｕ８７ＭＧ细胞系由西 京医院神经外科教研室惠赠。ＢＡＬＢ／ｃｎｕ／ｎｕ裸鼠 ２４只， ♂，６～８周龄，清 洁 级，购 于 上 海 斯 莱 克 实 验 动 物 有 限 责 任 公司，许可证号：ＦＣＸＫ（沪）２００３０００３，饲养于空军军医大学 实验动物中心［ＳＹＸＫ（军）２０１２００２３］。裸鼠随机分为 ４组， 正常对照组、Ａ组、Ｂ组、Ｃ组，每组 ６只。Ａ、Ｂ、Ｃ组接种细 胞数分别为 １５×１０５ 个、２０×１０５ 个、２５×１０５ 个（悬浮于 无血清 ＤＭＥＭ培养液），分别在接种后 ７、１４、２１、２８ｄ对每组 裸鼠进行核磁共振扫描，并在 ２８ｄ时取对照组鼠 １只、造模 组每组 １只（共 ３只）裸鼠行 ４％多聚甲醛心内灌注并固定， 对获取的全脑 标 本 进 行 切 片，并 进 行 病 理 学 观 察，取 其 心、 肝、脾、肺、肾、脊髓等主要脏器，检查有无转移灶，剩余裸鼠 正常饲养，观察生存期。 １．２ 试 剂 胎 牛 血 清 （西 安 沃 德 生 物 科 技 有 限 公 司）； ＤＭＥＭ高糖培养粉（美国 Ｇｉｂｃｏ公司）；胰蛋白酶（美国 Ｓｉｇｍａ 公司）；钆喷酸 葡 胺 注 射 液 （广 州 康 臣 药 业 有 限 公 司 ）；兔 抗 人胶质纤维酸性蛋白（ｇｌｉａｌｆｉｂｒｉｌｌａｒｙａｃｉｄｉｃｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＡＰ）、 Ｓ１００蛋白多克隆抗体、ＳＡＢＣ试剂盒（武汉博士德公司）。 １．３ 仪器 ＳＷＣＪ２Ｆ超净工作台（苏州安泰空气技术有限 公司）；ＱＰ１６０型二氧化 碳 培 养 箱 （山 东 博 科 生 物 产 业 有 限 公司）；ＡＬＣＨ型动物脑立体定向仪、ＡＬＣＩＰ６００型微量注射 泵、ＡＬＣＣＥＤ９型 动 物 颅 骨 钻 （北 京 吉 安 得 尔 科 技 有 限 公 司）；３．０ＴＭＡＧＮＥＴＯＭ ＴｒｉｏＴｉｍ核磁共振成像系统（德国西 门子公司）；３Ｔ老鼠线圈（上海辰光医疗科技有限公司）；Ｏ ｌｙｍｐｕｓＩＸ７１倒置荧光显微镜（日本奥林巴斯公司）。 １４ 方法 １．４．１ 细胞培养 将人脑胶质瘤细胞 Ｕ８７ＭＧ分装于数只 底面积为 ７５ｃｍ２的培养瓶中，按常规方法培养，即用含 １０％
U87胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型建立
汪柳 旭” 朱 凤 军 廖 建 湘” 段 婧 ” 陈 乾。 宋建 明。
深 圳 市 儿 童 医 院 １）神 经 内科 ２）神 经 外 科 ３）病 理 科 ，广 东 深圳 ５１８０３８
【摘要】 目的 建立 Ｕ８７胶质瘤裸 鼠皮下移植瘤模 型 ，观察 肿瘤温度 变化情况 。方法 将 Ｕ８７胶质瘤 细胞接 种到 Ｂａｌｂ／ｃ 裸 鼠右侧背部靠右后肢皮下处 ，建立 ｌ０只雌 性裸鼠皮 下移植瘤胶质瘤模 型。测量肿 瘤的体积 ，并绘制肿 瘤生长 曲线 。观察神 经 胶质 瘤的生长 ，监测肿瘤 温度的变化情况 。接种第 ３６天处死裸 鼠，取出肿瘤组织观察肿瘤标本 的病理性特 征和 ＧＦＡＰ免疫组 化 的阳性 表达情况 。结果 胶质瘤裸 鼠模 型建 立成 功 。病理学检查 显示 ，肿瘤 细胞符 合胶质 瘤细胞 的形态 学特征 ，ＧＦＡＰ 阳性表 达 。在成瘤初期 ，肿瘤温度 随时间增加而逐渐增加 ，到接种第 １５天 ，肿瘤 温度上 升至最 高 ，在 肿瘤生 长后期 ，肿瘤 温度 随着时 间 增加 而降低。接种 第 ３６天裸 鼠肿 瘤温度与接种第 ６天 裸 鼠肿瘤 温度 相 比较差异 有统 计 学意义 （Ｐ＜ ｏ．０５）。结论 有效 建立 Ｕ８７胶质瘤裸 鼠皮下移植瘤模 型 ，在胶质瘤治疗方 面有广泛的用途 。
【关键词】 神经胶质瘤 ；裸 鼠 ；动物模型 ；红外成像 ；皮 下移植 ；温度 ；胶质纤维酸性蛋 白（ＧＦＡＰ） 【中 图 分 类 号 １ Ｒ－３３２ 【文 献 标 识 码 】 Ａ 【文章 编 号１ １６７３—５１１０（２０１８）０３—０２３９—０４
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ｕ８７ Ｇｌｉｏｍａ ｉｎ ＢＡＬＢ／ｃ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ
可移植性人脑胶质瘤组织裸小鼠脑内移植
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《2024年人绒癌裸鼠原位移植瘤模型、转移瘤模型的构建及二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长的影响》范文
《人绒癌裸鼠原位移植瘤模型、转移瘤模型的构建及二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长的影响》篇一一、引言人绒癌是一种常见的恶性肿瘤，其发病率和死亡率均较高。
为了研究人绒癌的发病机制、治疗方法和药物疗效，建立可靠的动物模型显得尤为重要。
裸鼠因其免疫缺陷，成为研究人绒癌的理想动物模型。
本文旨在构建人绒癌裸鼠原位移植瘤模型及转移瘤模型，并探讨二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长的影响。
二、材料与方法1. 材料人绒癌细胞株、裸鼠、二氢杨梅素等。
2. 方法（1）人绒癌裸鼠原位移植瘤模型的构建选取适当年龄的裸鼠，将人绒癌细胞株注射至裸鼠子宫内，观察肿瘤生长情况。
（2）人绒癌裸鼠转移瘤模型的构建通过特定方法使裸鼠人绒癌细胞发生转移，观察转移瘤的生长情况。
（3）二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长的影响将裸鼠随机分为实验组和对照组，实验组裸鼠给予二氢杨梅素治疗，观察两组裸鼠转移瘤的生长情况。
三、实验结果1. 人绒癌裸鼠原位移植瘤模型的构建结果成功构建了人绒癌裸鼠原位移植瘤模型，肿瘤生长情况与人体内人绒癌生长情况相似。
2. 人绒癌裸鼠转移瘤模型的构建结果通过特定方法使裸鼠人绒癌细胞发生转移，成功构建了人绒癌裸鼠转移瘤模型。
3. 二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长的影响实验组裸鼠给予二氢杨梅素治疗后，转移瘤生长速度明显减缓，与对照组相比具有显著差异。
四、讨论本研究成功构建了人绒癌裸鼠原位移植瘤模型及转移瘤模型，为研究人绒癌的发病机制、治疗方法和药物疗效提供了可靠的动物模型。
同时，本研究还发现二氢杨梅素对裸鼠转移瘤生长具有抑制作用，为临床治疗人绒癌提供了新的思路和方向。
二氢杨梅素作为一种天然产物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
其抗肿瘤机制可能与其抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成等作用有关。
因此，进一步研究二氢杨梅素的抗肿瘤作用及其作用机制，对于开发新型抗肿瘤药物具有重要意义。
五、结论本研究表明，人绒癌裸鼠原位移植瘤模型和转移瘤模型的构建为研究人绒癌提供了可靠的动物模型。
裸鼠的肿瘤移植模型研究
裸鼠的肿瘤移植模型研究肿瘤是一种常见的疾病，也是医学研究的一个重要领域。
随着科学技术的不断发展，人们对肿瘤的认识也在不断深入。
其中，裸鼠的肿瘤移植模型研究是一种常用的实验手段。
一、裸鼠是什么裸鼠是一种没有毛发的实验小动物，通常被用来进行肿瘤移植研究。
这种小动物一般来自人工培育的遗传变异株，因为它没有毛发，所以被称为裸鼠。
这种小动物体型小、活力强，非常适合作为实验对象。
二、肿瘤移植模型的意义肿瘤移植模型是一种通过将人类肿瘤细胞移植到裸鼠体内来模拟肿瘤生长和发展的实验方法。
这种实验方法能够为生物医学研究人员提供宝贵的研究材料，用于发现和开发新的抗肿瘤药物和治疗方法。
同时，肿瘤移植模型还能够为临床医学研究提供重要的参考，帮助医生们更好地了解肿瘤生长和发展的规律，找到控制肿瘤的有效方法。
三、裸鼠肿瘤移植模型的基本步骤1. 建立肿瘤细胞株首先，需要建立一种稳定的肿瘤细胞株。
一般来说，肿瘤细胞株可以从患者的体内或者文献报道中获取，然后通过培养和筛选，筛选出能够稳定生长的肿瘤细胞株。
2. 准备裸鼠裸鼠一般都需要进行体表消毒和饲养管理等操作。
在进行实验前，需要将裸鼠的体表消毒，避免外来细菌对实验结果的影响。
此外，裸鼠的饲养、环境、温度、湿度等也需要进行精心管理，确保实验的准确性和有效性。
3. 移植肿瘤细胞将准备好的肿瘤细胞接种到裸鼠的体内，一般是通过皮下注射或者腹腔注射的方式进行。
移植后，需要观察肿瘤的生长和发展情况，并及时进行处理、剖解和测量等操作。
四、裸鼠肿瘤移植模型的优缺点优点：1. 易于建立：裸鼠的肤色和体毛特征明显，容易观察，建立肿瘤移植模型相对容易。
2. 可控性强：通过各种手段可以有效控制实验的变量，确保实验结果的可靠性和准确性。
3. 结论可靠：通过对裸鼠肿瘤移植模型的研究，可以得到比较可靠的实验结论，从而为后续的研究提供重要参考。
缺点：1. 模拟程度低：由于裸鼠与人体存在较大的生物学差异，因此在某些肿瘤特征的模拟程度上会存在一定的局限性。
立体定向建立裸鼠人脑多形性胶质细胞瘤模型及生长特性研究
立体定向建立裸鼠人脑多形性胶质细胞瘤模型及生长特性研究田复明;蒋宁;窦长武;王宏伟;赵力群;陈波;王晓娟;王凤【摘要】目的：体外原代培养人脑多形性胶质母细胞瘤细胞，应用不同细胞数量接种裸鼠脑内建立颅内胶质瘤实验动物模型，观察其生长特性。
方法：采用酶消化法原代培养4例人脑多形性胶质细胞瘤，分别取生长状态良好的胶质瘤细胞悬液20μL，按1．0×105／10μL，1．0×106个／10μL，1．0×107／10μL立体定向接种于裸鼠脑右侧尾状核区。
在整体、组织和细胞水平观察并记录肿瘤生长情况，于成瘤后第5wk处死荷瘤鼠检测是否存在肿瘤远处转移，同时对肿瘤组织行HE和免疫组织化学染色检测胶质瘤的病理学特征。
结果：细胞悬液接种可成功获得多形性胶质细胞瘤模型，成功率较高，但潜伏期延长，各种接种量的实验组成瘤率均为100％，未见颅外转移病灶，在组织病理学上接近人脑胶质瘤。
结论：多形性胶质细胞瘤细胞接种裸鼠建立脑胶质瘤动物模型，成瘤率高，颅内生长稳定，肿瘤组织病理学及形态学特性与人脑胶质瘤相似，可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。
【期刊名称】《内蒙古医科大学学报》【年(卷),期】2013(000)001【总页数】6页(P6-11)【关键词】多形性胶质母细胞瘤;动物模型;裸鼠【作者】田复明;蒋宁;窦长武;王宏伟;赵力群;陈波;王晓娟;王凤【作者单位】;;;;;;;;【正文语种】中文【中图分类】R739.41胶质瘤是最常见的颅内恶性肿瘤[1～3],其重要特征之一是具有强烈的侵袭性[4],手术很难完全切除,术后放疗可消灭亚临床病灶,防止肿瘤复发,对预后有一定作用[5],但复发率仍高,预后极差。
因此,建立胶质瘤实验动物模型,以进一步了解和研究胶质瘤的发病机制及寻找有效的治疗方法是必要的。
建立胶质瘤动物模型国内外报道较多,但细胞来源、接种动物、部位及接种量报道不一。
本实验原代培养多形性胶质母细胞瘤,采取不同量单细胞悬液接种在裸鼠尾状核,建立脑胶质瘤原位模型,并用形态学及病理学等方法观察,比较各种接种剂量的效果,探讨制备胶质瘤动物模型的可靠方法。
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（1）丁香园总结：
瘤子长不出无非两方面原因，老鼠或者细胞。
关于裸鼠，楼上已有描述，接种部位和接种年龄。
一般来说，左侧前肢靠近心脏，血供会比较丰富，容易生长新血管。
虽然文献都报道在腋窝注射，但如果局部皮下组织致密，会相对容易形成浓聚的小包块，容易达到有效的细胞浓度。
裸鼠周龄不要小于四周，否则动物可能不能耐受，过
早死亡，也不可大于六周，否则免疫力会增强，不容易形成肿瘤。
如果以上都不能成瘤，实验室之前又没有固定protocol，动物可以尝试NOD/SCID。
细胞数量每个细胞株不同而有不同剂量，恶性程度高，有些胶质瘤，4次方就已经足够了，有些难长的，
恐怕7次方都嫌不够。
但一般达到2×10的7次方就不能再往上加，因为细胞悬液已
经达到饱和状态，再往上增加细胞可能在注射时针管会对细胞有物理损伤。
细胞悬液
大概是一个注射点150微升左右。
另外，还可以添加matrigel，理论上可以促进成瘤。
裸鼠种植瘤需注意： 1、肿瘤细胞的状态 2、细胞的数量:每只注射 2X106-107 3、裸鼠的选择：5-8周龄 4、种植部位：血供丰富区域，如腋窝中后部、腹股沟中上部。
（2）具体操作解析：
1、能不能成瘤，首先要考虑你的肿瘤细胞系能否成瘤，其次关键是你的肿瘤细胞数，一般肿瘤细胞存活力还是蛮高的，所以你重点要考虑细胞数的问题，但最高不要超过
1*107
2、接种时间，最好在1小时之内完成。
但在我实际操作过程中，裸鼠的数量又多，1
小时之内根本做不完的，所以你可以预先将细胞放在冰盒里暂为保存。
效果还是不错
的
3、成瘤时间，每个肿瘤细胞不太一样，细胞数合适，一般一周左右应该能出来了；另外，如果你是打皮下，你要考虑是否有打到深层组织，比如肌肉，那即使成瘤了，也
不大好摸出来。