GMP文件 Countstar细胞计数仪操作规程

细胞计数仪操作规程
1、Countstar细胞计数仪简介
1.1 基于经典台盼蓝染色法原理开发。

1.2 采自动优化成像系统，无需人工调焦，摒除人工调焦的误差。

1.3 精确标定死活细胞和校正结团细胞，能快速进行细胞计数、细胞形态和细胞统计图分析。

1.4 样本需求量低，快速：20µl/样本，<20s/样本。

1.5 自动光学对焦、成像并进行数据分析，每个样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。

1.6 测量浓度范围：1×104~3×107/ml。

1.7 直径范围：5-180µm大小的各种原代细胞及传代细胞、干细胞、肿瘤
细胞、血细胞、昆虫细胞、藻类及部分浮游动物。

2、操作过程简介
2.1 打开配套电脑，进入Windows操作系统；
2.2 双击桌面上的Countstar图标，进入Countstar控制中心；
2.3 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮表示仪器已打开；
2.4 设定所测的细胞参数；
2.5 取样。

当样品浓度过大时，用盐水或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；
2.6 染色。

使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数；将细胞悬液充分混匀；
2.7 加样。

移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽20μl；
2.8 插入计数板；
2.9 自动计数结果；
2.10 根据测试结果可适当调整细胞参数以达到最佳测试结果；微调旋钮同一样本可进行多个视野检测，系统自动统计出平均结果。

3、检测结果包括
2.1 细胞图片
2.2 总细胞浓度
2.3 活细胞浓度
2.4 死细胞浓度
2.5 细胞存活率
2.6 细胞平均直径
2.7 细胞增长曲线
2.8 细胞大小柱状图
2.9 细胞平均圆度
2.10 细胞结团率
2.11 细胞结团柱状图（具体操作参见说明书）
4、细胞总浓度的检测
4.1无台盼蓝染色时，Countstar细胞计数仪可以检测细胞浓度、细
胞平均直径、细胞平均圆度和细胞聚团率（绿色圈所示为有效计数细胞）。

4.2 Countstar细胞计数仪可以通过台盼蓝染色检测活细胞浓度、死细胞
浓度和细胞存活率（绿色圈计数为活细胞，黄色圈计数为死细胞）。