家畜配子与胚胎生物工程.
1家畜繁殖学绪论及第一章
第一章 家畜的生殖器官
第一节
公畜的生殖器官 第二节 母畜的生殖器官
第一节
公畜的生殖器官
公畜的பைடு நூலகம்殖器官包括四部分：①性腺：睾丸；
②输精管道，包括附睾、输精管和尿生殖道； ③副性腺，包括精囊腺、前列腺和尿道球腺； ④外生殖器：阴茎。
一、睾丸和阴囊
（一）睾丸的形态、结构与功能
1、睾丸的形态 正常雄性家畜的睾丸（testis） 成对存在，均为长卵圆形。不同种家畜睾丸 的大小、重量有较大差别，猪、绵羊和山羊 的睾丸相对较大。牛、马的左侧睾丸稍大于 右侧。
荷斯坦牛的睾丸
山羊的睾丸
家畜两个睾丸分居于阴囊（scrotum）的
两个腔内。牛、羊睾丸的长轴和地面垂 直，附睾位于睾丸的后外缘，附睾头朝 上、尾朝下；马、驴的睾丸长轴和地面 平行，附睾附着于睾丸的背外缘，头朝 前、尾朝后；猪睾丸的长轴与地面倾斜， 前低后高，附睾位于背外缘，头朝前下 方，尾朝后上方。
三、研究内容
家畜繁殖学由繁殖理论、应用技术和繁 殖管理三部分组成。现已形成雌性学 （therogenology）和雄性学（andrology）。 的所有生理现象、规律和机理，包括配子的发 生、生殖道和性腺的结构与功能、内分泌对生 殖的调节作用、性行为、受精、胚胎发育、妊 娠和分娩的机理、泌乳和仔畜的哺育以及外界 环境因素对生殖过程的影响等。
2、附睾是精子最后成熟场所 由睾丸精细 管生产的精子，刚进入附睾时，颈部常有原生 质滴存在，说明精子尚未发育成熟。精子通过 附睾过程中，原生质滴向后移行。这种形态变 化与附睾的物理及化学的变化有关，它能增加 精子的运动和受精能力。
3、附睾是精子的贮存库 一头成年公牛两侧附 睾聚集的精子数约为700多亿，等于睾丸在3.6d所产 生的精子，其中约有54％贮存于附睾尾。公猪附睾 贮存的精子数为2000亿左右，其中70％在附睾尾。 公羊附睾贮存的精子数在1500亿以上。
高三生物胚胎工程知识点
《高三生物胚胎工程知识点全解析》在高三生物的学习中，胚胎工程是一个重要的知识点板块。
胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。
通过这些技术，可以充分发挥优良母畜的繁殖潜力，为畜牧业生产和医学研究提供有力支持。
一、体内受精和早期胚胎发育1. 精子和卵子的发生（1）精子的发生哺乳动物的精子发生在睾丸的曲细精管内。
从初情期开始，直到生殖机能衰退，精子发生过程包括三个阶段：第一阶段是精原细胞经过数次有丝分裂产生大量的精原细胞，其中部分精原细胞继续分裂成为初级精母细胞；第二阶段是初级精母细胞经过减数分裂形成含有单倍染色体的精子细胞；第三阶段是精子细胞经过变形成为成熟的精子。
（2）卵子的发生卵子发生在卵巢内。
在胎儿时期，卵原细胞进行有丝分裂，演变成初级卵母细胞，并被卵泡细胞包围，形成卵泡。
初情期后，初级卵母细胞继续发育，在排卵前后完成减数第一次分裂，形成一个次级卵母细胞和第一极体。
在精子和卵子结合的过程中，次级卵母细胞完成减数第二次分裂，形成一个成熟的卵子和第二极体。
2. 受精（1）受精场所：输卵管。
（2）受精过程：包括精子获能、顶体反应、透明带反应和卵黄膜封闭作用等阶段。
精子在雌性动物生殖道内经过一段时间的成熟和获能后，才能与卵子结合。
当精子接触到卵子周围的放射冠时，释放顶体酶，溶解放射冠和透明带，形成精子穿越放射冠和透明带的通道。
穿过透明带的精子触及卵黄膜的瞬间，会引起透明带反应，阻止其他精子进入透明带。
随后，精子入卵，卵黄膜立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，这一过程称为卵黄膜封闭作用。
精子入卵后，尾部脱离，原有核膜破裂，形成新的核膜，最后形成雄原核。
同时，卵子完成减数第二次分裂，排出第二极体，形成雌原核。
雌雄原核融合，形成合子，标志着受精过程完成。
3. 早期胚胎发育（1）卵裂期：在透明带内进行的有丝分裂，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加，或略有缩小。
第十二章配子与胚胎生物技术
第十二章配子与胚胎生物技术第八章配子与胚胎生物技术第一节胚胎移植技术一、概述（一）概念（记忆，P253）胚胎移植（embryo transfer，ET）：又称借腹怀胎，受精卵移植。
它是将体内（优秀母畜）、外生产的哺乳动物早期胚胎（一般情况下所移植的不是受精卵，而是发育至多细胞、桑椹胚或胚泡阶段的胚胎），（如果是体外内胚胎用手术或非手术的方法取出，在显微镜性下检出后），移植到同种的生理状态相同的雌性动物生殖道内，使之继续发育为正常个体的生物技术。
提供胚胎的个体——供体（donor）接受胚胎的个体——受体（recipient）超数排卵和胚胎移植通常同时应用，合称超数排卵和胚胎移植（multiple ovulation and embryo transfer，MOET），简称MOET技术（记忆，P209）（二）发展历史（熟悉，P209-211）1、试验研究阶段2、实际应用阶段3、产业化阶段（三）胚胎移植在畜牧业生产上的意义（P256，记忆）1、提高良种母畜繁殖力；2、简化良种引进方法；3、降低种质资源保护利用；4、加速育种进程；5、利于防疫；在养猪业中，为了培育无特异性病原体(SPF)猪群，向封闭群引进新的个体时，作为控制疾病的一种措施，采用ET技术剖腹取仔的方法。
6、促进生殖生理理论与胚胎生物技术的发展二、ET的生理学基础与基本原则（一）生理学原理（书P212，记忆）1、母畜发情后生殖器官的孕向发育母畜发情后数日甚至10余日内，生殖系统的变化相同，即在相同的时期，生理状态一致，子宫内的环境相同。
2、早期胚胎的游离状态游离状态是胚胎采集、保存、培养和体外操作等重要理论基础。
3、子宫对早期胚胎的免疫耐受性即胚胎移植不存在免疫问题。
4、胚胎遗传物质的稳定性胚胎的遗传特性不受受体母畜的影响。
（二）ET遵循的基本原则（P212-213，记忆）1、胚胎移植前后所处环境的同一性（1）供体和受体在分类学上的属于同一物种；（2）胚胎发育阶段与受体发情时间上的一致性；（3）胚胎发育阶段与受体生殖道解剖位置的一致性。
第九章 哺乳动物配子与胚胎生物工程
胚胎移植应具备的条件：
1. 实验室条件—— 环境温度，溶液的酸碱度，渗透压，化学药物的纯度，技术 人员的基本素质，空气洁净，设备齐全，布局合理的实验室才能提高胚胎移 植的效率。 2. 技术条件—— 胚胎移植的每一个过程都需要丰富的经验。因此，开展家畜 胚胎移植生产至少需要临床兽医和胚胎工程技术两类人员。前者负责供体和 受体选择，处理，胚胎采集与移植等兽医临床工作；后者负责溶液准备，检 胚，胚胎等级鉴定，胚胎冷冻和解冻等实验室操作工作。 3. 胚胎来源—— 充足的胚胎供应是实施胚胎移植产业化的前提。目前胚胎的 来源主要是通过超数排卵处理后由供体子宫内采集和体外受精两种方法获得 。
同期发情： 采用外源生殖激素等方法使一群母畜在同一时期内发情 并排卵的技术，称为同期发情； 牛的同期发情 孕激素（皮下埋植法或阴道栓给药）和前列腺素（肌肉 注射）是诱导同期发情最常用的激素； 1. 孕激素阴道栓塞法 2. 孕激素埋植法 3. 前列腺素法
供体超熟排卵：
1. 概念及原理—— 在母畜发情周期的适当时间，注射外源促性腺激素，使卵 巢比自然发情时有更多的卵泡发育并排卵，这种方法叫做超熟排卵，简称超 排；母畜卵巢上约有99%的有腔卵泡发生闭锁而退化，只有1%能发育成熟而 排卵； 2. 超熟排卵方法—— （1）FSH + PG 法 牛和绵羊在发情周期的第 9 ~ 13 天 中的任何一天的时候通过肌肉注射 促卵泡素 （FSH），递减法连续注射 4天 每天间隔 12 小时等量注射 2 次。 在第 5 次注射促卵泡素的同时，肌肉注射 前列腺素 （PG），以溶解黄体。注射后 24 ~ 48 小时内发情。 （2）CIDR + FSH + PG 在发情周期的某一天给供体牛，羊的阴道内放入 CIDR, 计为 0 天，重复第一个过程，在第 7 次肌肉注射 促卵泡素 时取出 CIDR , 还要 注射 PG ，之后的 24 ~ 48 小时内发情。
动物繁殖学第配子与胚胎生物技术PPT课件
超 数 排 卵 处 理（的 母三畜）发 情供后体， 根母据畜育 种的的配需 要种， 应 选 择 优 良 公 畜 的 精 液 ， 在 适 宜 时 间 进 行 人 工 授 精 。 为 了
得到较多的发育正常的胚胎，应使用活率高密度大的精液，而且将授精次数增加到2次或3次，两次间隔8～ 10h。
同时观察卵巢上的排卵情况，计算排卵率。冲洗部位决定于胚胎所处位置，亦即取决于冲洗是在配种后的 第几天进行以及胚胎的运行速度。
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用注射器的磨钝针头刺入子宫角顶端，注入冲洗液，然后从输卵管的伞部 接取冲洗液，这种方式适用于牛、羊、兔等。
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由伞部注入冲洗液，在子宫角上端接取。猪和马的子宫角与输卵管接合部有 一活塞状结构，用第一种方式，冲洗液不易通过，只能采用第二种方式。
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2、母羊
在周期第12天或第13天时，一次肌注（或皮下）PMSG750～1500IU。出现发情 后或配种当日再肌注HCG500～750IU。也可像母牛一样在发情周期中期进行处 理，在注射PMSG之后，隔日注射以PGF2a或类似物。如采用FSH，用量为 10～20mg（或200～300大鼠单位）分3d6次注射之，PGF2a在第5次同时注射 之。
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• 1951年，一、美籍发华展简人史张明觉和澳大利亚学者Austin分别发现了精 子获能（cap acitation）现象，使动物体外受精研究进入了新 纪元。
• 1959年张明觉在世界上首先获得了体外受精的的哺乳动物—试 管兔，推动了体外受精研究工作的开展。
• 1978年首例人类试管婴儿路易斯·布朗（Louise Brown）诞生。
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从子宫角上端注入冲洗液，由基部接取，或者相反。这种方式适合于各种 家畜。
胚胎和配子生物工程
胚胎和配子生物工程的法律问题
法律框架的建立与完善
随着胚胎和配子生物工程技术的不断发展，需要建立和完善相应 的法律法规，以规范相关研究和应用。
知识产权保护
胚胎和配子生物工程涉及的基因、细胞等生物资源的知识产权保护 问题需要得到重视。
跨国合作与法律冲突
跨国合作研究可能涉及不同国家和地区的法律法规，需要解决相应 的法律冲突和协调问题。
胚胎冷冻与复苏技术
总结词
胚胎冷冻与复苏技术是一种保存和恢复早期胚胎的方法，通过低温冷冻和复温的过程，使胚胎进入休眠状态并保 存起来，需要时再复苏进行移植。
详细描述
胚胎冷冻与复苏技术包括冷冻和复温两个步骤。在冷冻过程中，使用冷冻保护剂来降低胚胎细胞的代谢活性，防 止冰晶形成对细胞造成损伤。复温过程中，通过逐渐提高温度使胚胎细胞恢复代谢活性，完成复苏。该技术为胚 胎移植提供了灵活性，使得生育计划更加灵活和可调整。
人工智能与生物工程的融合
人工智能技术将在胚胎和配子生物工程中发挥重要作用， 通过数据分析和机器学习，提高胚胎和配子的筛选、培养 和优化效率。
目前研究存在的问题与挑战
技术伦理与安全性问题
胚胎和配子生物工程涉及人类生命起源和伦理道德问题，需要严格遵守伦理规范，确保技 术的安全性和可靠性。
技术瓶颈与突破
胚胎工程主要包括体外受精、胚胎移植、胚胎冷冻、胚胎克隆、胚胎基因编辑等 技术。
胚胎工程的应用领域
农业领域
01
通过胚胎工程技术，可以生产转基因动物，改良物种，提高家
畜、家禽的产量和抗病能力。
医学领域
02
胚胎工程可用于研究人类发育过程，探索遗传性疾病的发病机
制，以及生产用于细胞治疗和组织工程的胚胎干细胞。
家畜繁殖学课件]第八章配子与胚胎生物工程B
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性别控制技术
性别控制技术是指通过人工方式 控制动物的性别比例，以满足生
产和育种的需要。
性别控制技术可以提高动物的繁 殖效率，优化育种计划，减少资
源浪费。
性别控制技术包括胚胎性别鉴定 、胚胎选择、胚胎移植等步骤， 需要严格的操作规程和质量控制
通过冷冻和复苏的方法保存和恢复早期胚胎 ，延长其保存期限。
胚胎移植技术
将早期胚胎移植到母体子宫内，使其继续发 育并生产健康后代。
胚胎基因编辑技术
利用基因编辑技术对早期胚胎进行遗传改良 ，提高其优良性状。
胚胎移植技术
适应症
操作流程
主要用于繁殖优良品种、濒危动物保护、 医学研究等方面。
包括超数排卵、配种、收集胚胎、检查与 选择、移植等步骤。
影响因素
意义
母体健康状况、激素调节、胚胎质量、操 作技术等都会影响胚胎移植的成功率。
胚胎移植技术在家畜繁殖学中具有重要意 义，能够提高繁殖效率、保护濒危动物和 推动医学研究的发展。
03
CATALOGUE
家畜繁殖新技术与应用
人工授精技术
人工授精技术是指通过人工方 式将精液注入雌性动物生殖道 内，以实现繁殖目的的技术。
遗传资源评价
对家畜遗传资源进行科学的评价，了解其生产性 能、抗病性能和适应性等方面的特点，为育种提 供依据。
遗传资源保护与利用
采取有效措施保护家畜遗传资源的多样性，同时 合理利用遗传资源进行育种创新，提高家畜生产 性能和抗逆性。
家畜繁殖与环境保护
生态养殖
推广生态养殖模式，实现家畜养殖与生态环境的和谐发展 。通过合理规划养殖场地、优化饲料配方和废弃物处理方 式，降低家畜养殖对环境的影响。
家畜繁殖学名词解释
家畜繁殖学名词解释家畜繁殖学（答案仅供参考）3412室一、概念解释：1.睾丸下降：指家畜等哺乳动物雄性个体在出生前后，睾丸从腹腔内经腹股沟管降入阴囊内的生理过程。
2.H-Y抗原：即“组织相容性Y抗原”，亦称“雄性特异性弱组织相容性抗原”。
只存在于雄性脊椎动物的细胞膜表面。
在性腺分化的过程中，H-Y抗原决定睾丸的形成，即该抗原基因的表达是诱导雄性性分化的关键，故H-Y抗原是性腺分化的定向物（定向抗原）。
3.排卵窝：是成年马属动物卵巢的一侧中部的一条横的凹陷（发育成熟的卵泡只能由此处破裂而排出卵子和卵泡液）。
4.GnRH的垂体外作用：在对同一个体长期或大剂量地应用GnRH或其高活性类似物制剂的情况下，该激素直接作用于睾丸、卵巢而引起抑止排卵、延缓胚胎附植、阻碍妊娠甚至性腺萎缩等，表现为抗生育作用。
这种作用与GnRH促进垂体前叶促性腺激素合成和释放的本来的生理作用相反，故也称为GnRH的“异相作用”。
5.适配年龄：指种畜适于开始配种繁殖的年龄。
6.母畜的诱发发情：利用外源性生殖激素使不发情或发情不正常的母畜出现正常发情，也叫催情。
7.同期发情：让一群母畜同步发情8.超数排卵：使母畜在一次发情中超常规地发育更多的卵泡，增加排卵数——提高多胎率、生产用于移植的胚胎9.精子发生：指精子在睾丸内产生的全过程，也叫精子生成。
10.精子发生周期：指精细管上皮细胞出现的精子发生序列，即由A1型精原细胞分裂开始，直至精子细胞变成精子这一过程所需的时间。
11.精细管上皮周期：在曲精细管同一部位或横断面上出现两次相同细胞群的时间间隔。
12.精细管上皮波：精细管上皮波是指在同一时间内生精细胞群沿着曲精细管的纵长排列的状态。
13.射精量：是指公畜一次射出精液的多少，以毫升数表示。
14.精子密度：指单位容积的精液内所含有的精子数目，通常用亿/ml表示。
15.精子活力：指精子运动的能力。
16.精子活率：指在显微镜视野内呈直线前进运动的精子数占精子总数的百分比，但有时也可与“精子活力”通用。
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Introduction
Introduction 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。
introduction哺乳动物胚胎干细胞又称es或ek细胞它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性pluripotent的细胞系
卵裂球分离
克隆
哺 乳 动 物 转 基 因
哺乳动物性别控制技术
胚 胎 性 别 鉴 定
XY
、 精 子 分 离
胚胎干细胞
Introduction 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎 儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。它一方 面具有自我更新的能力，另一方面具有分化潜能。
Introduction 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。 哺乳动物胚胎干细胞又称ES或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性(pluripotent)的细胞系。
胚胎和配子生物工程PPT课件
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牛胚胎冷冻程序示意图
自然发情（妊娠率更高）
一次同期法（PG）（妊娠率较低）
两次同期法（PG）（妊娠率更高）
11天内注射两次PG
发情观察极为重要
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7、受体的同期发情处理
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7.胚胎移植
手术法移植
非手术法移植
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受体移胚
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9、妊娠诊断
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胚胎移植产出的犊牛
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一次移入三枚胚全部成活
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受体母羊与所生羔羊
The end！
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２、超数排卵和人工授精
③为什么在９－１２天开始？ ④为什么要使用ＰＧ？
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ＦＳＨ剂 量
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ＰＧ 剂量
牛超数排卵时间表
时间 第一天 第二天 第三天 第四天 第五天 第六天
早上
２.０
１.５
１.０
０.５
发情
人工授精
下午
２.０
１.５
１.０
０.５
发情
人工授精
四支
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供体超排处理
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供体母畜的配种
必须用优秀的种公畜进行多次配种，一般隔812小时进行一次配种，直到发情结束。 配种前应对种公畜的精液进行质量检查。
可优秀种公畜不足时，可考虑首次采用本交， 以后采用人工授精，也可以全部采用人工授精。
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供体配种
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4.胚胎的收集
林斯特液SOF合成输卵管液
胚胎的检查项目：
1.受精卵整体的形态和体积大小； 2.透明带形状，厚度及损伤程度； 3.发育正常胚胎的卵裂球应该具有整齐的外形，大小一 致，分布均匀而紧密，发育速度与胚龄一致； 4.卵细胞表面颗粒的状态和多少等。
家畜繁殖学复习资料
1家畜繁殖学试题一、概念（20分）1、激素与生殖激素：激素是由动物体内的内分泌腺和某些组织器官的生活细胞所释放的控制生理活动的一类化学活性物质；与生殖功能关系密切的激素叫生殖激素。
2、性成熟与初配年龄：性成熟是指家畜生长发育到一定年龄，生殖器官已基本发育完全，具备了繁殖能力的时期；初配年龄则指实施第一次参加配种的年龄，一般要求体重相当于成年体重的70％时的年龄。
3、发情周期与发情持续期：母畜性成熟后便出现周期性的发情表现，通常将两次发情间隔的时间叫做发情周期（性周期）；从发情开始到发情结束所持续的时间成为发情持续期。
4、黄体与红体：成熟的卵泡破裂排卵后，卵泡膜和卵巢上的血管破裂，血液流入排空的卵泡腔内形成凝块，称为红体；此后，颗粒层细胞增生变大进而形成黄体，黄体细胞产生孕激素。
5、诱导发情与同期发情：诱导发情是指对处于乏情状态的母畜，利用外源激素或某些生理活性物质以及环境条件的刺激，促使乏情母畜卵巢从相对静止状态转变为技能性活跃状态，使母畜正常发情排卵；同期发情则指利用激素或类激素的药物处理母畜，将群体母畜不同进程的发情周期调整为统一进程，是指在预定的时间内集中发情。
6、超数排卵与胚胎移植：利用外源性促性腺激素诱发母畜卵巢的多个卵泡同时发育，并排出具有受精能力的卵子，叫做超数排卵；胚胎移植是指从一头良种母畜的输卵管或子宫内取出早期胚胎，移植到另一头生理状况相同的母畜的输卵管或子宫中，从而产出后代，所以又叫借腹怀胎。
7、冷冻精液与精液平衡：冷冻精液是以液氮（-196C）或干冰（-790C）为冷源，将精液经特殊处理后，保存在超低温下以达到长期保存精液的目的。
在精液冷冻处理时，将稀释后的精液缓慢降温到0－50C，并在此温度下保持0.5－2小时，使精液温度恒定，叫做精液平衡。
8、精子获能与胚泡附植：公畜射出的精液一般不具备受精能力，精子通过母畜生殖道（子宫和输精管）后，在形态和机能上发生一系列的变化，并具有受精能力的生理现象叫做精子获能；胚泡附植是指早期胚泡在子宫内游离一段时间后，随着带状囊胚的不断扩张而固定下来，囊胚的滋养层逐渐与母体子宫内膜发生组织上和生理上的联系，也叫着床或植入。
家畜繁殖学名词解释
家畜繁殖学名词解释家畜繁殖学（答案仅供参考）3412室一、概念解释：1.睾丸下降：指家畜等哺乳动物雄性个体在出生前后，睾丸从腹腔内经腹股沟管降入阴囊内的生理过程。
2.H-Y抗原：即“组织相容性Y抗原”，亦称“雄性特异性弱组织相容性抗原”。
只存在于雄性脊椎动物的细胞膜表面。
在性腺分化的过程中，H-Y抗原决定睾丸的形成，即该抗原基因的表达是诱导雄性性分化的关键，故H-Y 抗原是性腺分化的定向物（定向抗原）。
3.排卵窝：是成年马属动物卵巢的一侧中部的一条横的凹陷（发育成熟的卵泡只能由此处破裂而排出卵子和卵泡液）。
4.GnRH的垂体外作用：在对同一个体长期或大剂量地应用GnRH或其高活性类似物制剂的情况下，该激素直接作用于睾丸、卵巢而引起抑止排卵、延缓胚胎附植、阻碍妊娠甚至性腺萎缩等，表现为抗生育作用。
这种作用与GnRH促进垂体前叶促性腺激素合成和释放的本来的生理作用相反，故也称为GnRH的“异相作用”。
5.适配年龄：指种畜适于开始配种繁殖的年龄。
6.母畜的诱发发情：利用外源性生殖激素使不发情或发情不正常的母畜出现正常发情，也叫催情。
7.同期发情：让一群母畜同步发情8.超数排卵：使母畜在一次发情中超常规地发育更多的卵泡，增加排卵数——提高多胎率、生产用于移植的胚胎9.精子发生：指精子在睾丸内产生的全过程，也叫精子生成。
10.精子发生周期：指精细管上皮细胞出现的精子发生序列，即由A1型精原细胞分裂开始，直至精子细胞变成精子这一过程所需的时间。
11.精细管上皮周期：在曲精细管同一部位或横断面上出现两次相同细胞群的时间间隔。
12.精细管上皮波：精细管上皮波是指在同一时间内生精细胞群沿着曲精细管的纵长排列的状态。
13.射精量：是指公畜一次射出精液的多少，以毫升数表示。
14.精子密度：指单位容积的精液内所含有的精子数目，通常用亿/ml表示。
15.精子活力：指精子运动的能力。
16.精子活率：指在显微镜视野内呈直线前进运动的精子数占精子总数的百分比，但有时也可与“精子活力”通用。
配子与胚胎生物工程技术完整版PPT
第一节 配子与胚胎生物工程概述
配子与胚胎生物工程也称胚胎生物技术或胚 胎工程技术，主要是对动物的卵子、精子和 胚胎在体外条件下进行各种操作，以加速繁 育经济动物，培育优良品种，或挽救濒危动 物使用的一系列工程技术方法。
研究内容
胚胎移植 胚胎冷冻保存 体外受精 动物克隆
诱发单胎动物产双胎 胚胎收集与移植的时间不能超过周期黄体的寿命，因此，胚胎的收集时间不能超过发情配种后第7天，最好是在发情配种后的第5-7天
内进行。 对于不能确定发情周期的受体，可采用间隔10-12天的两次注射法。
研究手段
三、国内外发展概况
1.胚胎移植历史
胚胎移植技术是20世纪畜牧业中继人工授 精技术之后又一次巨大变革，业已成为一项 充分发挥优良母畜繁殖潜力的实用繁殖新技 术。 •1951年，美国诞生第一头胚胎移植犊牛。 •1976年，牛非手术法胚胎移植获得成功。
供体生殖机能应处在较高水平。既无难产、流产 等繁殖病史，也无子宫卵巢疾病，超排处理前应 有两个或两个以上的正常情期。
1.2 受体母畜的选择
✓ 一般选用价格低廉、生产性能比较低的同种母畜，达到配 种年龄和体型；
✓ 要具有良好的健康状态，体型与膘情中上等，初产或经产 青壮年母畜。检疫和疫苗接种与供体相同；
转基因技术 性别控制 胚胎干细胞技术 胚胎嵌合技术
胚胎移植
一、胚胎移植技术概述 二、胚胎移植的意义 三、国内外发展概况 四、胚胎移植的基本原则 五、牛胚胎移植操作步骤
一、胚胎移植技术概述
1.定义
胚胎移植是指将一头良种母畜配种后的早期胚 胎取出（或通过体外受精及其他方式得到体外 生产的胚胎），移植到另一头同种且生理状态 相同的母畜体内，使之继续发育成为新个体的 过程。
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»抗冷冻保护剂 »胚胎冷冻的主要方法
控温冷冻保存 玻璃化冷冻
抗冷冻保护剂 胚胎冷冻所用的保护剂主要分为三类： (1)渗透性的：丙三醇、DMSO、乙二醇、丙二 醇、乙酰胺等； (2)非渗透性的：葡萄糖、聚蔗糖、葡聚糖、牛 血清白蛋白(BSA)、胎牛血清(FCS)、聚乙烯吡 咯烷酮(PVP)等；
✓胚胎移植前后所处环境的同一性 ✓分类学上的相同属性 ✓生理上的一致 ✓解剖部位的一致 ✓胚胎收集的期限 ✓胚胎的质量保证
✓主要指母畜的生理状况。 ✓供体要具较高的育种价值、对超数排卵反应良好。 ✓受体要具有良好的繁殖性能、体型要大。
方法的改进： 1、 PMSG方面 2、 FSH方面 3、 其他方面
➢分离培养腔前卵泡研究已在小鼠、仓鼠、大鼠、兔、猫、 猪和牛均有报道，并以小鼠和牛研究较多，但仅在 小鼠获得后代。
精子的预处理 浮游程序（swim up） 玻璃棉过滤程序 BSA/Percoll 密度梯度 透明质酸的作用 精子洗涤 精子浓度
精子活力的提高 咖啡因 PHE 腺苷及其类似物 血小板激活因子
➢培 养 腔 前 卵 泡 培 养 基 主 要 有 MEM,GMEM,TCMl99 和 Wavmouth MB752/l 培养基等。
➢培养基中添加血清、成熟分裂抑制剂、促性腺激素、类 固醇激素和生长因子等。
➢培养方法有微滴法、琼脂包埋培养法、胶原蛋白铺层培 养法(二维法)和胶原蛋白包埋培养法(三维法)。
卵母细胞的采集和选择
➢ 体外成熟的判定 ➢ 影响卵母细胞体外成熟的因素
卵母细胞的培养
➢ 卵母细胞的体外成熟培养系统 基础培养体系 腔前卵泡体外成熟培养系统
发育阻滞现象 体外培养体系
➢ 合成液培养系统 ➢ 共同培养系统
方法之一：解剖显微镜下观察卵丘细胞是否扩展松散, 扩展好的，一般认为是已成熟的卵母细胞。
胚胎移植的意义从根本上说就是缩短优良母畜的繁殖 周期，增加一次生产后代的数量。因此与其相关的工 作都会用到此项技术，例如家畜育种中对优良畜种的 大量生产、对稀有品种的迅速扩繁等。同时由于家畜 胚胎的可携带性，又使其可以代替活畜进口，由于胚 胎不依赖于母畜的直接接触，这样就可以防止疾病的 传播。
✓母畜发情后生殖器官的孕向发育 ✓早期胚胎的游离状态 ✓胚胎移植与免疫排斥的影响 ✓胚胎的遗传特性
– 胚胎冷冻、移植 – 具体操作
体外受精技术
体外受精
卵母细胞的采集和成熟培养 体外受精过程 精子的处理 受精方法 影响体外受精效果的因素 胚胎培养
克隆与核移植
胚胎分割
胚胎分割
胚胎分割的方法 影响分割胚发育的因素
分割胚的发育
胚胎分割技术的应用
核移植
核移植
• 供体细胞的准备 • 受核细胞的准备和去核
影响卵母细胞体外成熟 的因素
A. 动物的种类不同； B. 卵母细胞类型； C. 卵泡直径与卵母细胞体外成熟能力有关； D. 卵母细胞离体操作的时间和条件； E. 采卵季节有关；
➢基础培养液以合成培养液如TCMl99应用最多。缓冲体系以Hepes 或 碳 酸 氢 盐 缓 冲 系 (Earle’s Salts) 为 好 ， 而 磷 酸 盐 缓 冲 系 (Hank’s) 较差。培养条件是5％CO2、95％空气饱和湿度，多 采用微滴法(100μL, l0～15个卵母细胞) 。
谷胱甘肽 己酮可可碱和茶碱 体外获能处理方法 肝素处理 高离子强度液处理 高pH 值处理 黄嘌呤 咖啡因处理 牛卵泡液 猪卵泡液 子宫液、输卵管液 精子活力激动剂 钙离子载体处理
➢调 整 获 能 精 子 浓 度 ， 制 成 小 滴 ， 覆 盖 石 蜡 油 ， 经 培 养 30 ～ 60min。将体外培养成熟的卵母细胞加入与之共孵育。精 卵共孵育时间与受精体系有关。洗去多余精子和卵丘 细胞，转移至受精卵培养液中继续培养。受精卵标志 是雌、雄原核，排出第二极体，或发育到卵裂期胚胎。
• 去核 • 移核 • 细胞融合
• 活化处理 • 化学激活 • 电激活
• 重组胚移植
转基因动物技术
转基因动物技术
转基因动物技术的发展简史 转基因动物技术的应用与前景 转基因动物技术存在的问题 建立转基因动物的方法 转基因动物的检测性别鉴ຫໍສະໝຸດ 与性别控制性别鉴定与性别控制
• 性别鉴定
•细胞遗传学方法 •H-Y抗原测定法 •SRY-PCR法性别鉴定 • 性别控制
•免疫分离精子法 •用流式细胞分类仪分离精子
本章结束！
胚胎移植(Embryo Transfer，ET)又称受精卵移植，是把 一头雌性动物的早期胚胎从输卵管或子宫内冲洗出来， 移植到另一头雌性动物的输卵管或子宫内，使之继续 发育成新个体的技术。其中提供胚胎的动物称为供体 （Donor），接受和孕育胚胎的动物称为受体(recipient)。
家畜配子与胚胎生物工程
胚胎移植
家畜胚胎移植概论
• 胚胎移植的概念及基本操作过程 • 胚胎移植在畜牧生产上的意义 • 胚胎移植的生理学基础和原则
生理学基础 胚胎移植的基本原则
胚胎移植的技术程序
• 供体母畜和受体母畜的选择 • 超数排卵 • 供体母畜的配种 • 胚胎的收集（手术法、非手术法） • 胚胎的评定(正常胚胎、形态异常胚胎) • 胚胎的保存和培养
➢添加犊牛血清、发情牛血清、胎牛血清、发情山羊血清或牛血白 蛋白(BSA)等。使用浓度5％～10％，BSA浓度3～5mg／mL
➢添加促性腺激素，主要有HCG或PMSG、FSH+LH。添加雌激素对 卵母细胞体外成熟的影响尚存分歧。添加发情牛血清、发情 山羊血清时，主张无激素培养法。
➢基础培养液中添加卵泡液(BFF)、颗粒细胞或中糖卵管上皮细胞利 于卵母细胞体外成熟。
方法之二：是用吸管吹打法或透明质酸酶分解法除去卵 丘细胞，以观察在卵周隙中是否有第一极体，但要 观察第Ⅱ次减数分裂(MⅡ)中期的核，需制片染色。
方法之三：采集的卵母细胞绝大部分与卵丘细胞形成卵 丘卵母细胞复合体。任何方法采集的COC都要求卵 母细胞形态规则，细胞质均匀，外围有多层卵丘细 胞紧密包围(图示1、图示2）。