海带多糖的提取方法综述
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①基金项目:哈尔滨工业大学(威海)校基金(IMJQ10000042;IMJQ10000024)。 作者简介:张慧玲(1982—),女,山东淄博人,滨州市技术学院助理讲师,从事天然产物的开发与研究工作。
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科技创新导报 Science and Technology Innovation Herald
刘轲[4]采用酶解法从海带中提取制备海 带硫酸多糖(LPS),即在海带浆中加入纤维 素 酶 、果 胶 酶 和 蛋 白 酶 , 5 0 ℃ 水 解 4 h , 而 后 升 温至90℃,使酶失活,冷至室温进行过滤,取 滤液加入氯化钙,离心去除海藻酸钙;上清 液加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与 LPS结合沉淀,离心收集CTAB-LPS沉淀物; 加入氯化钙溶液进行盐解,游离出LPS后加 入 乙 醇 使 其 析 出 , 经 离 心 烘 干 得 LPS 。与 水 煮提取法比较,该提取工艺得到的LPS产率 是前者的2 倍。王海仁等把海带放入酶解容 器中均匀加热至30~55℃,加入水解酶中的 至少一种酶(果胶酶或果胶酶和纤维素酶), 其酶的用量为干品海带的0.1%~5%,使其 酶解成液渣混合物,从而得到海带多糖的提 取液。何云海等研究了用戊聚糖复合酶与复 合纤维素酶酶解海带提取岩藻聚糖硫酸酯 的 工 艺 参 数 。结果表明: 用戊聚糖复合酶酶 解海带的最佳酶解参数为酶加量0.06%,温 度40℃,pH3.5,酶解时间30min,对岩藻聚糖 硫酸酯的提取率1.845%,粗提物中总硫酸根 的质量分数0.238%,用复合纤维素酶酶解海 带的最佳酶解参数为酶加量0.208%,温度 50℃,pH4.5,酶解时间50min,对岩藻聚糖硫 酸酯的提取率为1.279%,粗提物中总硫酸根 含 量 为 0 . 2 3 1 % 。该 方 法 不 仅 有 多 糖 的 提 取 效 率高,而且无其他溶剂的加入,不会对多糖 的活性产生影响,但是酶的价格较为昂贵。 1 . 4 超声波辅助提取法
在用水浸泡后的海带水提取液中加入 醇沉淀,沉降澄清后,上清液可用于制取产 品 甘 露 醇 、氯化钾和碘, 而醇凝沉淀物中有 包 括 褐 藻 糖 胶 在 内 的 各 种 有 机 物 。用 乙 醇 沉淀法和十六烷氯化吡啶(CPC)沉淀法可 以 从 醇 凝 沉 淀 物 中 分 离 提 取 褐 藻 糖 胶 。赵 兵[3]等还发明了絮凝沉淀提取海藻多糖的 方法,该方法是将含海藻多糖的浸提料液 置入反应器中,调节反应器内温度为20~60 ℃,pH5~8;在300~1500r/min搅拌速度下, 加入具有活性氨基与羟基的阳离子生物絮 凝剂或溶于水时电离出磺酸根离子的阴离 子型絮凝剂或为它们混合絮凝剂,对含海 藻多糖浸提料液进行絮凝或电场絮凝提 取,从而得到海藻多糖粗产品。 1.3 复合酶法
海带多糖提取的主要方法是酸提取 法 。李 林 等 [39]根 据 海 带 多 糖 中 的 褐 藻 胶 不 溶于稀酸溶液而其钠盐溶于水的性质,以 0 . 1 m o ·l L -1HCl 水 溶 液 从 海 带 粉 末 中 提 取 褐 藻糖胶和褐藻淀粉,而使含量很高的褐藻 胶 留 存 于 滤 渣 中 。酸 提 法 由 于 避 免 了 褐 藻 酸的溶出,因而提取物中褐藻糖胶的含量 较 高 。但 由 于 酸 的 存 在 , 可能会发生褐藻糖 胶 的 部 分 酸 水 解 。所 以 在 提 取 过 程 中 提 取 时间不宜过长,一般以1h为宜,此外该方法 还存在着提取周期长,耗能多的缺点。 1.2 沉淀法
参考文献 [1] 宋晓凯,吴立军.天然药物化学[M].化学
工业出版社,2004:37~51. [2] 邢杰,刘守涛,高君,等.海带多糖的提
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超声波法提取多糖是一种很有希望的 多 糖 提 取 新 方 法 。将 超 声 波 应 用 于 对 中 药 苷类成分的提取中可以提高苷类的提出率
并 缩 短 提 取 时 间 。周 军 明 等 [ 5 ]研 究 了 超 声 波 辅 助 提 取 褐 藻 糖 胶 的 新 工 艺 , 以“ 硫 酸 根 + 多 糖 ”质 量 分 数 作 为 产 品 的 主 要 理 化 指 标, 得到优化的提取工艺:即超声波时间60 m i n 、水 提 时 间 4 h 、水 提 温 度 9 0 ℃ 和 超 声 波 功率8 0 0 W。硫 酸 根 和 多 糖 质 量 分 数 分 别 达 到22.49%和36.97%。超 声 波 法 提 取 海 带 多 糖时, 超 声 时 间 不 宜 过 长 。随 着 处 理 时 间 的 延长,可能是由于超声波具有较强的机械 剪切作用,长时间的作用会使大分子的多 糖断裂,从而在后处理的过程中的损失增 大而影响多糖的提出率。
法 、酸 提 取 法 、超 声 波 微 波 提 取 法 、沉 淀 法 、复 合 酶 法 等 。
关 键 词: 海带多糖 提取 方法
中 图 分 类 号 :TQ1
文 献 标 识 码 :A
文 章 编 号 :1674-098X(2009)08(c)-0008-01
糖类化合物在生物体中的作用一直是 生 化 研 究 的 重 要 内 容 。经 典 的 糖 代 谢 研 究 表明:糖类代谢是生物体一切代谢的基础, 糖类物质是生物体的储能物质,是生物体 构 成 的 基 本 骨 架 [ 1 ]。近 年 来 海 藻 多 糖 因 其 独 特 的 化 学 组 成 、结 构 及 其 广 泛 的 生 物 活 性 日 益 引 起 人 们 的 兴 趣 。其 中 海 带 多 糖 已 成 为目前许多学者的重点研究对象,特别是 海带进行人工养殖后,深入研究开发它的 价值, 被 作 为 当 前 的 研 究 重 点 。海 带 多 糖 具 体 提 取 方 法 主 要 有 水 提 取 法 、酸 提 取 法 、超 声 波 微 波 提 取 法 、沉 淀 法 、复 合 酶 法 等 。现 分述如下。
1 水提取ຫໍສະໝຸດ Baidu 水提法为海带多糖的传统提取方法,
也 是 比 较 重 要 的 一 种 方 法 。具 体 是 先 将 海 带 除 杂 、烘 干 、粉 碎 制 成 海 带 干 粉 , 然 后 将 海带干粉按一定比例加入到蒸馏水中,可 以在室温下冷提,也可以在水浴中热提,还 可 以 先 冷 提 再 热 提 。如 邢 杰 等 [ 2 ]采 用 固 定 因 素法对海带多糖的水提条件进行优化,以 多糖提取率为指标得到最佳工艺条件:提 取 温 度 为 100 ℃ ,提 取 时 间 6h, 加 水 量 9 0 m·l g-1。张 彦 民 等 采 用 单 因 素 分 析 法 对 硫 酸 酯 化多糖的提取工艺条件进行了优化,得出 提 取 时 间 为 2 h 、提 取 温 度 为 9 0 ℃ 、加 水 量 为 干 净 海 藻 质 量 的 2 5 倍 。该 工 艺 多 糖 产 率 达 到1.99%,其 主 要 理 化 指 标“ 硫 酸 根+多糖” 质 量 分 数 为61.26%。水提法可以通过增加 水 量 、提 取 时 间 和 提 取 次 数 来 提 高 得 率,其 缺点是提取液体积过大,增加了分离和纯 化的难度,其优点是避免了褐藻糖胶发生 酸水解的可能性,可保持褐藻糖胶的大分 子结构。 1.1 酸提取法
科技创新导报 2009 NO.24 Science and Technology Innovation Herald 海带多糖的提取方法综述①
研 究 报 告
张慧玲 ( 滨州市滨州技术学院 山东滨州 2 5 6 6 0 3 )
摘 要:现在国内外大多数研究都集中在多糖的药理作用上,而从事海带多糖具体提取工艺研究的却较少,现有的提取方法主要有水提取
2 结语 从海带多糖的提取方法的总结可以知
道,现在对海带多糖的提取方法的研究较 少 , 主 要 的 方 法 有 水 提 取 法 、酸 提 取 法 、超 声 波 微 波 提 取 法 、沉 淀 法 、复 合 酶 法 等 , 要 很好的进行海带多糖的药理学研究,在提 取方法方面我们还要进行更多的研究,以 应用更多更好的方法提取出更为纯净的多 糖。