遗传学实验

巴尔采用一种非常简便的方法，即用女性的口腔粘膜或阴 道粘膜涂片，经染色后在光学显微镜下观察，发现间期细 跑的细胞核内有一个约1.2×0.7微米大小、靠近核膜的浓 缩染色质块，其数目比 x染色体数目少一个，正常女性细 胞有 2 个 x 染色体，而只有一个性染色质，称为女性性染 色质，又叫巴尔小体（巴氏小体）。
实验结果

1. 油镜下可见X小体为一致密的浓染小体。轮廓清晰， 为 1~5um ，常附着于核膜边缘或靠边内测，其形态有三角 形、卵形、扁平形等。 2. 正常女性间期细胞核中X小体比例 30%~50%，男性中 则偶尔可见，且不典型。

思考与练习

1. 统计 X 小体的频率，画2~3 个典型细胞，示X 小体的形 态和所处部位
2. 什么是剂量补偿效应？



3. Barr小体分析技术在人类遗传学工作中有什么用途？
4. 为什么Barr小体一般出现在核膜边缘？ 5. 为什么不是所有的细胞都可观察到X小体？

对于 X 染色体失活的机制。不同物种的剂量补偿方式及机 制等问题进行了广泛。深入地讨论，成了生物学研究的热 点问题。据研究，X染色体失活始于胚胎发育早期，在X染 色体长臂靠近着丝点的一段序列控制 X 染色体的失活，这 段序列成为X染色体失活中心（X inactivation center， XIC ），将这段序列通过易位方式转移到常染色体，也能 引起常染色体失活。
遗传学实验 人类X小体的检测
实验原理
1948年，Barr以猫的神经元为材料，研究长时间刺激后神经元是否产生 细胞学变化。在研究中Bertram观察到核仁附近有一种染色很深的小体， 这种小体一些细胞有而一些细胞无。这一现象引起了Barr的注意。他仔 细查看了实验记录及标本，发现这种小体大多出现在雌猫神经元中，雄 猫神经元中则极少出现，即这种小体与性别有关。 Barr 称这种小体为 “核仁随体”，并推测小体是由两条性染色体的异染色质衍化来的。后 来他以更多的哺乳纲的代表性动物的不同组织做了观察，结果发现这些 动物不同组织的体细胞中，同样显示雌雄二型现象（dimorphism）。观 察X染色质小体数就成了检测X染色体数是否产生变异的便捷方法，利用 这一方法，对各类性畸形、智力缺陷（mental retardation）患者进行 检测。
剂量补偿效应

Leabharlann Baidu



剂量补偿效应指的是XY性别决定的生物中，使性连锁基因 在两种性别中有相等或近似相等的有效剂量的遗传效应。 哺乳动物雌性个体的X染色体失活遵循n-1法则，不论有多 少条染色体，最终只能随机保留一条的活性。剂量补偿有 三种不同的机制： （ 1 ） 哺乳类中，雌性个体的两条 X 染色体中的一条随机 失活，雄性个体的X染色体 保留活性。 （ 2 ） 在果蝇中，雄性 X 染色体上的基因转录活性加倍， 使得其与拥有两条X染色体 的雌性果蝇在基因表达量上达 到一致。 （ 3 ） 秀丽隐杆线虫中两条 X 染色体的表达量均减半，使 得其与一条X染色体的基因转录活性一致。
2. 固定 空气干燥 滴加固定液（95%乙醇：乙醚=1：1或直接用乙醇）固定20~30min，
3. 染色制片 滴加1~2滴改良品红于室温下染色10~20min（勿使干燥），加上 盖片，垫片滤纸用手指轻轻加压即可 4. 镜鉴 低倍镜下计数100个核膜完整，细胞不完整，无核固缩的细胞；并在 高倍或油镜下观察 若使用女性发根细胞，需选用带有毛囊的头发（约2cm长），再加一滴染液加上 盖玻片，乙醇灯上微热，静置5min，后盖一滤纸压片
实验材料

口腔黏膜（男女） 发根细胞（女）
实验器具和药品

器具：普通显微镜、荧光显微镜、恒温水浴锅、载玻片、 盖玻片、镊子、牙签、滤纸、纱布等
药品：95%乙醇、乙醚、改良碱性品红、盐酸喹吖、 Macllvaine缓冲液、石蜡

实验步骤
1. 取材 受检查者用水漱口数次，尽可能除去细菌和食物残渣；用洁净的牙 签从口腔两侧颊部刮去黏膜，第一次刮取物弃去，将第二次、第三次刮取物涂在 干净的载玻片上