石榴皮多酚的提取及其抗肿瘤作用的研究

石榴皮多酚的提取及其抗肿瘤作用的研究

作者：赵宝鑫张艳菲高旭

来源：《健康周刊》2018年第12期

【摘要】石榴（punicagranatum L.）又名若榴、丹若、天浆，为石榴科（Punicaceae）石榴属（Punica L.）植物[1]。是一种药食两用植物。石榴具有多种药理作用，其中石榴皮具有抗氧化、抗衰老、抗癌防癌、抗菌、润肤美容、降血压和预防心脑血管疾病等多种生理和药理活性。在食品、医药和日用化学品等领域显示出巨大的应用价值。本文主要就石榴皮多酚的提取及其对肿瘤的活性的抑制方面进行研究。

【关键字】石榴；多酚提取；抗肿瘤

石榴皮富含多酚类物质，在新鲜皮中的质量分数约为10%～21%[2]是石榴皮抑制肿瘤活性的的主要成分，主要含有：没食子酸（gallicacid）、石榴皮亭A（granatin A）、石榴皮亭B （granatinB）、鞣云实精（corilagin）、鞣花酸（ellagic acid）、安石榴林（punicalin）、安石榴苷（punicalagin）、木麻黄宁（casuarinin）、英国栎鞣花酸[pedunculagin（2，3，4，6-bis- （S）-HHDP-G-glucose）]、特里马素E（tellimagrandin）、没食子酰双内酯（gallagyldilatone）。多酚独特的化学结构赋予了多酚独特的生理活性。

1 石榴皮多酚的提取方法

1.1 酶解法

酶技术是一种新型、高效绿色提取技术，具有快速，高效，反应条件温和，专一性强等诸多优点，已越来越广泛地应用于食品、药品及动植物细胞有效成分的提取。王华斌[2]等利用酶解法分解石榴皮细胞间质的果胶质，使果胶完全分解成小分子物质，提取最适条件：纤维素酶和果胶酶的复合酶（C∶P=2∶1）质量浓度0.25mg/mL，酶解时间150min，酶解温度50℃，pH6.0。

1.2 超声提取法

赵艳红等将新鲜石榴手工去皮，在40℃下鼓风干燥40h，用万能粉碎机粉碎50s（颗粒粒度：60～120目），将石榴皮粉末置于棕色瓶中，在低温、干燥、避光条件下保存。称取一定量石榴皮粉置于锥形瓶中，按料液比为1：20（m/V）加入60%的乙醇溶液，置于超声波清洗器中，超声功率为90W，室温下超声提取25min过滤，滤液经4000r/min离心20min，40℃下真空旋转蒸发回收乙醇后，冷干燥得石榴皮多酚[3]。

1.3 微波浸提提取

冯丽等将微波技术应用于植物原料的活性成分的提取，可以促进植物细胞破壁，可有效提高收率，且具有操作简便、短时高效、节能等优点[4]。

1.4 有机溶剂萃取法

有机溶剂萃取法是一种传统的并且应用非常普遍的方法，它的萃取原理为分配系数不同的各种组分可以在两相有机溶剂中被分开，从而萃取出石榴皮多酚[5]。

2 石榴皮多酚及其主要活性物质的抗肿瘤机制

2.1 诱导调亡作用

无限制地生长繁殖是肿瘤细胞的基本特征，其主要原因是肿瘤细胞的增殖紊乱和凋亡机制发生障碍，因此，通过诱导细胞发生凋亡并阻滞细胞周期抑制肿瘤细胞无限增殖的一个有效机制。细胞凋亡又称程序性细胞死亡，是一种特殊的细胞死亡类型，常通过多基因共同参与调控引起，目前己知的细胞凋亡机制主要涉及三条通路，即线粒体通路、死亡受体通路和内质网通路。

2.2 抑制肿瘤新生血管形成

新生血管形成是血管内皮增生、延伸继而形成新血管的过程，是机体许多生理活动所必需的，其形成受到严格的调控，在机体正常的情况下保持着规律的生长与分化。但在肿瘤发生时，由于新生血管的形成能为肿瘤组织生长提供充足丰富的血液和养料，此时血管形成会变得不受控制，因此，通过抑制或阻断肿瘤新生血管的形成来阻止肿瘤的生长或使肿瘤细胞调亡，是抗肿瘤的又一个重要机制。

2.3 抑制肿瘤细胞侵袭

恶性肿瘤的一个重要特征就是肿瘤细胞很容易从原发部位转移至其他部位继续生长，而肿瘤细胞的转移和形成新病灶都与其对局部组织的攻击密切相关。石榴皮多酚通过抑制肿瘤细胞的转移，达到抑制肿瘤细胞侵袭的效果。

2.4 诱导肿瘤细胞分化

肿瘤细胞的分化程度代表着其恶性程度，一般恶性肿瘤分化程度较低，因而通过一些中药材或植物的活性成分，诱导肿瘤细胞分化为正常或接近正常细胞，也可有效地发挥其抗肿瘤活性[6]。由此可知，石榴皮多酚可通过诱导肿瘤细胞分化而起到有效的抗肿瘤活性。

2.5 选择性阻断信号转导通路

细胞信号转导在细胞的生长、分裂、分化和死亡过程中都起着重要作用，随着对肿瘤研究的深入，人们已经认识到肿瘤发生发展的本质是细胞信号转导通路失调，导致细胞无限増值，石榴皮多酚通过调节信号通路从而抑制癌细化增殖[7]

3 石榴皮抗肿瘤成效研究

3.1 宫颈癌细胞

杨滨等人研究石榴皮多酚的提取及其对人宫颈癌HeLa细胞的作用。方法利用浸提法、微波法和索氏回流法对石榴皮多酚进行分离提取。采用MTT和Transwell方法探讨石榴皮多酚提物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的影响。证明石榴皮多酚粗提物HeLa细胞的增殖和侵袭具有很强的抑制作用，抑制率随石榴皮多酚粗提物浓度增大而增强。

3.2 人体肝癌细胞

李佳采用细胞体外试验，选取处于对数期生长且状态良好的人巧癌HepG2细胞作为试验对象，证明石榴皮多酚具有明显的抗肿瘤活性，且呈现剂量依赖效应。MTT结果显示，石榴皮多酚对人肝癌细胞HepG2有明显的生长抑制作用，染色结果显示，石榴多酚能使HepG2细胞数量明显减少，染色质固缩，细胞严重形变；流式细胞仪分析结果显示，石檔皮多酚能将细胞的周期阻滞在S期，早期调亡细胞数量显著增多。由此可知，石榴皮多酚对HepG2细胞的生长有显著的增殖抑制作用，其作用是通过阻滞细胞周期和进细胞调亡实现的。

参考文献

[1]李志洲.微波辅助提取石榴叶中多酚类物质的工艺[J].食品与机械，2009，25（4），72-75.

[2]王华斌，王珊，傅力.酶法提取石榴皮多酚工艺研究[J].中国食品学报，2012，12（6），56-65

[3]赵艳红，李建科.响应曲面法建立超声波辅助提取石榴皮多酚数学模型[J].农产品加工，2009（3）：126-131.

[4]冯丽，宋曙辉，赵霖.植物多酚种类及其生理功能的研究进展[J].江西农业学报，2007，19（10）：105-107.

[5]李国秀.石榴多酚类物质的分离鉴定和抗氧化活性研究.[硕士学位论文]，西安师范大学，2008.

[6]罗良浩，孙忠义，管维.中药诱导肿瘤细胞分化研究的现状及展望[J]，中国中西医结合杂志，1999，19（6）：380-382.