实验,绿叶中色素的提取和分离.ppt.ppt

提示：新鲜绿色的叶片中色素含量高，从而使滤液
中色素含量较高，实验效果明显。 2.为什么研磨时要迅速？为什么研磨时要加入少量 的CaCO3和SiO2？ 提示：(1)叶绿素不稳定，易被破坏，因此研磨要迅
速、充分，以保证提取较多的色素。
(2)二氧化硅破坏细胞结构，使研磨充分。 (3)碳酸钙可防止研磨过程中色素被破坏。
技能训练 1．(2012· 上海卷)下图表示叶绿体色素提取分离实验中 纸层析的结果，据图判断用作实验材料的叶片颜色为 ( ) A．红色 C．绿色 B．黄色 D．紫色
解析：本题主要考查叶绿体色素提取和分离实验及滤 纸条上各色素带的位置，粗细(含量)、颜色等方面的相关 知识。在叶绿体色素提取和分离实验中，滤纸条上的四条 色素带距点样处的距离由近及远分别是：叶绿素b、叶绿素 a、叶黄素、胡萝卜素，由图可知，叶绿素含量比类胡萝卜 素含量少，用作实验材料的叶片应呈黄色。B选项正确。
答案：B
2．(2012· 海南卷)关于叶绿体色素的叙述，错误的是 ( ) A．叶绿素a和b主要吸收红光和蓝紫光 B．绿叶中叶绿素和类胡萝卜素含量不同 C．利用纸层析法可分离4种叶绿体色素 D．乙醇提取的叶绿体色素不能吸收光能
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解析：本题主要考查叶绿体色素的种类、含量、吸收 光的种类等方面的知识。叶绿素a、叶绿素b主要吸收红光 和蓝紫光。绿叶中叶绿素约占3/4，类胡萝卜素约占1/4。利 用层析液可分离叶绿体色素，提取的叶绿体色素仍可吸收 光能，但叶绿体结构被破坏，导致完整的光合作用不能进 行。
画滤液细线：用毛细吸管吸取少量的滤液，沿铅笔 线均匀地画一条细线，待滤液干后， 再画一两次 分离色素：将适量的层析液倒入试管中，装置如图 所示
滤液细线 层析液
观察结果：滤纸条上呈现四条颜色、宽度不同 的色素带，如图所示
橙黄色 叶黄素 叶绿素a 最多
黄绿色
1.为什么需要选用新鲜绿色的叶片做实验材料？
色 (4) 迅速、充分研磨 素 盛放滤液的试管管口 (5) 加棉塞
过程
注意事项
操作目的 使层析液在滤纸上快速扩散
(1) 滤纸预先干燥处理 分
离 (2) 滤液细线要直、细、匀 使分离出的色素带平整不重叠 色 滤液细线干燥后再画一两 使分离出的色素带清晰分明 素 (3) 次 (4) 滤液细线不触及层析液 防止色素直接溶解到层析液中
实
验
绿叶中色素的提取和分离
【实验原理】 1.提取：绿叶中的色素溶于有机溶剂无水
乙醇而不溶于水，可用无水乙醇提取色素。
2.分离：各种色素在层析液中溶解度不同，
溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快，
反之则慢，从而使各种色素相互分离。
【实验步骤】
提取色素：称取5 g绿叶，剪碎，放入研钵中，加入 少量二氧化硅、碳酸钙和10mL无水乙醇 →研磨→过滤→收集到试管内并塞严试 管口 制备滤纸条：将干燥的定性滤纸剪成略小于试管长 与直径的滤纸条，将滤纸条一端剪去 两角，在距离剪角一端1 cm处用铅笔 画一条细的横线
素带，使实验失败。
7.滤纸条上色素带宽窄不同的原因有哪些？ 提示：不同种类的色素在绿叶中的含量不同，含量多 的在滤纸条上呈现的色素带宽，反之色素带窄。
实验中的注意事项及操作目的归纳 3 ．实验中的注意事项及操作目的归纳
过程 注意事项 操作目的 使滤液中色素含量高 溶解色素 研磨充分和保护色素 防止乙醇挥发，充分溶解 色素 防止乙醇挥发和色素氧化 (1) 选新鲜绿色的叶片 提 取 (2) 研磨时加无水乙醇 (3) 加少量SiO2和CaCO3
3.色素提取液呈现淡绿色的原因可能有 哪些？ 提示：(1)叶片颜色太浅。(2)绿叶不新
鲜。(3)研磨不充分。(4)未加碳酸钙或
加入量太少。(5)加入无水乙醇量太多。
(6)研磨时间过长，部分叶绿素被破坏。
4.为什么在制作滤纸条时，需将一端的两
个角剪掉？
提示：由于液面的不同位置表面张力不同，
纸条接近液面时，其边缘表面的张力较大，
答案：D
3．(2011· 江苏卷)某研究组获得了水稻的叶黄素缺失突 变体。将其叶片进行了红光照射光吸收测定和色素层析条 带分析(从上至下)，与正常叶片相比，实验结果是( A．光吸收差异显著，色素带缺第2条 B．光吸收差异不显著，色素带缺第2条 C．光吸收差异显著，色素带缺第3条 D．光吸收差异不显著，色素带缺第3条 )
解析：叶黄素吸收蓝紫光，在层析条带上是第2条。
答案：B
4．为了研究光合作用，生物小组的同学把菠菜叶磨 碎，分离出细胞质基质和全部叶绿体。然后又把部分叶绿 体磨碎分离出叶绿素和叶绿体基质，分别装在四支试管 内，并进行光照。问哪一支试管能检测到光合作用的光反 应过程( )
解析：本题通过实验来研究光反应的场所。叶绿体是 植物进行光合作用的场所。光合作用光反应过程中，H2O 光解，光能转换成活跃的化学能储存在ATP和[H]中，都是 在类囊体薄膜上进行的。类囊体薄膜上有进行光反应所需 要的各种色素和酶，故B试管能检测到光反应过程，A试管 则不能。C试管中缺少光反应所需的色素和酶，D试管中缺 少光反应所需的酶。
答案：B
5．(2013· 黑龙江牡丹江一中期中)如图是新鲜绿叶的四 种光合色素在滤纸上分离的情况，以下说法正确的是 ( )
A．提取色素时加入碳酸钙是为了防止滤液挥发 B．水稻在收获时节，叶片中色素量的变化是(甲＋乙) ＜(丙＋丁) C．四种色素都能溶解在层析液中，乙色素的溶解度 最大 D．四种色素中，丙和丁主要吸收红光
层析液沿滤纸边缘扩散过快，从而导致色 素带分离不整齐的现象。故需将插入层析 液的滤纸条一端剪去两个角。
5.为什么滤液细线要重复画，且线要细、直？ 提示：重复画线是为了增加色素的浓度，使分离出的
色素带清晰分明。画线细、直是为了防止色素带之间
出现重叠。 6.层析时，为什么不能让滤液细线触及层析液？ 提示：滤纸条上的滤液细线触及(或没入)层析液，会 使滤液中的色素溶解于层析液中，滤纸条上得不到色
解析：本题考查对绿叶中色素的提取和分离实验的理 解。根据图示中不同色素的扩散距离可以判断出甲为叶绿 素b，乙为叶绿素a，丙为叶黄素，丁为胡萝卜素。提取色 素时加入碳酸钙的目的是保护色素，防止色素被破坏；在 层析液中溶解度最大的色素是胡萝卜素；叶黄素和胡萝卜 素主要吸收蓝紫光。