细菌对抗菌药物的敏感试验(实验)
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5.质量控制
采用标准菌株与测试菌在同一条件下做药敏试验。 标准菌株的抑菌圈应落在预期范围内。如果超出该范围, 则不应发出报告,及时检查原因,予以纠正。
ATCC25923 金黄色葡萄球菌 ATCC25922 大肠埃希菌 ATCC27853 铜绿假单胞菌 ATCC29212 或 33186 粪肠球菌
金黄色葡萄球菌抗菌药物敏感性试验结果判断
无菌棉签 涂布
MH琼脂表面
室温 5min
贴含药纸片 35℃ 观察 16~18h 结果
操作注意事项:
菌液应在15分钟内接种完毕 接种后,平板放置时间不要超过5min 注意纸片距离
>15mm >24mm
3.结果解释 测量抑菌圈直径,参照CLSI的标准解释结果。
20mm
4.影响纸片法药敏结果的因素 ①培养基质量 成分、pH、深度、硬度和表面 湿度等。 ②药敏纸片的质量 含药量和保存方式。 ③接种菌量 ④操作质量 接种后贴药片的时间;培养温度 和时间;抑菌圈测量工具的精度
大肠埃希菌抗菌药物敏感性试验结果判断
抗菌药物敏感性试验
成都医1.掌握纸片扩散法(K-B法)原理、操作 方法、结果的判读及其临床意义。
2.掌握纸片扩散法的质量控制。
实验内容 纸片琼脂扩散法(K-B法)
实验器材
1. 菌种: 金黄色葡萄球菌ATCC25923、 大肠埃希菌ATCC25922
(幼龄菌,1.5×108/ml) 2. 培养基:水解酪蛋白琼脂(MH琼脂)平板,1个/人 3. 抗菌纸片:青霉素(PEN)、红霉素(ERY)、庆大
霉素(GEN) 4. 其它:无菌生理盐水、无菌棉签、镊子、 接种环、
刻度尺(自带)、0.5 麦氏比浊管(相当于 1.5×108CFU/ml)
1.原理
抑菌圈的大小反映测试 菌对测定药物的敏感性, 并与该药对测试菌的最 低抑菌浓度(MIC)呈负 相关,即抑菌圈越大, MIC越小。
2.方法
待检菌液