体外蛋白非酶糖基化实验规范
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3)阳性药对照：精密称取盐酸氨基胍，加入磷酸缓冲液5 ml使盐酸氨基胍的浓度达到0.05 mmol/ml，再加入牛血清白蛋白20 mg和葡萄糖90.1 mg，震荡均匀，作为阳性对照（平行三次）。
4)阳性药空白：精密称取盐酸氨基胍，加入磷酸缓冲液5 ml使盐酸氨基胍的浓度达到0.05 mmol/ml，再加入牛血清白蛋白20 mg，震荡均匀，作为阳性空白（平行三次）。
精密称取供试品1、2、3、4适量，分别用磷酸盐缓冲液配置成浓度为40、20、10、5 μg/ml的溶液。
3.实验方法
1)样品：精密吸取上述不同浓度供试品溶液各5 ml，分别加入牛血清白蛋白20 mg和葡萄糖90.1 mg，震荡均匀，作为供试品（平行三次）。
2)样品空白：精密吸取上述不同浓度供试品溶液各5 ml，分别加入牛血清白蛋白20 mg，震荡均匀，作为供试品空白（平行三次）。
5)阴性对照：精密称取牛血清白蛋白20 mg和葡萄糖90.1 mg，加入磷酸缓冲液5 ml，震荡均匀，作为阴性对照（平行三次）。
6)缺糖阴性对照：精密称取牛血清白蛋白20 mg，加入磷酸缓冲液5 ml，震荡均匀，作为缺糖阴性对照（平行三次）。
7)将上述各待测样品放置于恒温恒湿培养箱中，在37oC下孵育7天。
技术名称
体外糖基化终产物抑制剂筛选模型的建立
关键词
体外糖基化终产物抑制活性实验方法条件阳性药重现性
目的、背景知识和原理
体外糖基化终产物抑制活性实验的方法及条件
药品和试剂
D-葡萄糖;盐酸氨基胍；叠氮钠；牛血清白蛋白；磷酸二氢钾；氢氧化钠
仪器设备与材料
比色管；恒温水浴锅；恒温恒湿培养器；GA-245电子天平；荧光分光光度仪
主要参考文献
王雅娟,钱之玉,沈祥春.西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用[J].中草药,2005,36(8):1202-1205.
蒋斌,吴秋燕,江国荣.氨基胍、槲皮素等对体外蛋白质非酶糖基化的影响[J].福建中医学院报,2004,14(4):40-42.
蒋斌,吴秋燕,江国荣.槲皮素对体外糖基化终产物生产的影响[J].抗感染药学,2005,2(2):74-76.
检测：七日后取出各样品，用荧光分光光度仪对其进行检测，荧光激发/发射波长为370/440 nm，记录荧光吸收值。
实验评价
抑制率%=100*[1—(样品—样品空白)/ (阴性对照–缺糖阴性对照)]
实验结果
将样品的抑制率与阳性对照组抑制率比较，评价样品对糖基化反应的抑制效果。
注意事项
样品浓度需要每次摸索
实ห้องสมุดไป่ตู้对象
青钱柳提取物粗品及其化合物
实验环境
室温
操作步骤
1.试剂制备：
磷酸盐缓冲液（NaN33 mmol/L，PH=7.4）：精密称取KH2PO4 6.8009 g，加入395 ml的0.1 mol/L NaOH溶液，用蒸馏水定容至1000 ml，再加入0.1917 g的NaN3，混合均匀。
2.供试品制备：
4)阳性药空白：精密称取盐酸氨基胍，加入磷酸缓冲液5 ml使盐酸氨基胍的浓度达到0.05 mmol/ml，再加入牛血清白蛋白20 mg，震荡均匀，作为阳性空白（平行三次）。
精密称取供试品1、2、3、4适量，分别用磷酸盐缓冲液配置成浓度为40、20、10、5 μg/ml的溶液。
3.实验方法
1)样品：精密吸取上述不同浓度供试品溶液各5 ml，分别加入牛血清白蛋白20 mg和葡萄糖90.1 mg，震荡均匀，作为供试品（平行三次）。
2)样品空白：精密吸取上述不同浓度供试品溶液各5 ml，分别加入牛血清白蛋白20 mg，震荡均匀，作为供试品空白（平行三次）。
5)阴性对照：精密称取牛血清白蛋白20 mg和葡萄糖90.1 mg，加入磷酸缓冲液5 ml，震荡均匀，作为阴性对照（平行三次）。
6)缺糖阴性对照：精密称取牛血清白蛋白20 mg，加入磷酸缓冲液5 ml，震荡均匀，作为缺糖阴性对照（平行三次）。
7)将上述各待测样品放置于恒温恒湿培养箱中，在37oC下孵育7天。
技术名称
体外糖基化终产物抑制剂筛选模型的建立
关键词
体外糖基化终产物抑制活性实验方法条件阳性药重现性
目的、背景知识和原理
体外糖基化终产物抑制活性实验的方法及条件
药品和试剂
D-葡萄糖;盐酸氨基胍；叠氮钠；牛血清白蛋白；磷酸二氢钾；氢氧化钠
仪器设备与材料
比色管；恒温水浴锅；恒温恒湿培养器；GA-245电子天平；荧光分光光度仪
主要参考文献
王雅娟,钱之玉,沈祥春.西红花酸对体外蛋白质非酶糖基化的抑制作用[J].中草药,2005,36(8):1202-1205.
蒋斌,吴秋燕,江国荣.氨基胍、槲皮素等对体外蛋白质非酶糖基化的影响[J].福建中医学院报,2004,14(4):40-42.
蒋斌,吴秋燕,江国荣.槲皮素对体外糖基化终产物生产的影响[J].抗感染药学,2005,2(2):74-76.
检测：七日后取出各样品，用荧光分光光度仪对其进行检测，荧光激发/发射波长为370/440 nm，记录荧光吸收值。
实验评价
抑制率%=100*[1—(样品—样品空白)/ (阴性对照–缺糖阴性对照)]
实验结果
将样品的抑制率与阳性对照组抑制率比较，评价样品对糖基化反应的抑制效果。
注意事项
样品浓度需要每次摸索
实ห้องสมุดไป่ตู้对象
青钱柳提取物粗品及其化合物
实验环境
室温
操作步骤
1.试剂制备：
磷酸盐缓冲液（NaN33 mmol/L，PH=7.4）：精密称取KH2PO4 6.8009 g，加入395 ml的0.1 mol/L NaOH溶液，用蒸馏水定容至1000 ml，再加入0.1917 g的NaN3，混合均匀。
2.供试品制备：