14教案-紫外可见分光光度法测定蒽

常州工程职业技术学院
《仪器分析》教案 紫外­可见分光光度法 单元技能训练 5­紫外分光光度法测蒽醌的含量
复习提问
n 可见分光光度法中如何进行定量分析呢？紫外分光光度法的定义是什么？
课程引入
n 如果未知试样在可见区无吸收，那么如何用实验的手段进行测试？护肤品中的 防晒霜为什么可以防晒？
因为防晒霜可以防紫外线，其原理主要是吸收或反射空气中的紫外线。
含量即可。
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实验内容及操作步骤
1、配制蒽醌标准溶液 2、绘制吸收曲线 3、绘制蒽醌工作曲线 4、测定蒽醌试样中蒽醌含量
总结：
本次课重点讲解紫外光谱测定蒽醌含量的原理和方法。在杂质存在下，工作波长的 选择规律。
思考题
实验为什么要使用甲醇作参比？ 为什么紫外分光光度计定量测定中没有加显色剂？
实验原理
蒽醌分子产生 π→π*跃迁和 n→π*跃迁。蒽醌在 λ251 处有强吸收，其 ε=45820，在 λ323 处还有一中强吸收，其 ε=4700。紫外吸收定量测定与可见分光光度法相同。考虑到工业
品中存在邻苯二甲酸酐的干扰，测定波长一般选定 323nm。
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在一定波长和一定比色皿厚度下，绘制工作曲线，由工作曲线找出未知试样中蒽醌
三、仪器和工具
紫外­可见分光光度计；石英比色皿；50mL 比色管；
四、实验内容与操作步骤
1、配制蒽醌标准溶液
2、仪器准备
3、绘制吸收曲线选择测量波长
4、工作曲线的绘制及蒽醌含量的测定
五、数据记录与处理
1、原始记录
分析者：
班级：
学号：
仪器条件
仪器名称：
仪器型号：
标准溶液浓度：
分析日期：
仪器编号： 工作波长：
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参比溶液：
吸收池材料与规格（cm）： 吸收曲线的绘制
波长/nm 吸光度 A 波长/nm 吸光度 A 波长/nm 吸光度 A 结论：
蒽醌标准曲线的绘制
标准溶液稀释体积/mL：
编号
1#
2#
3#
4#
蒽醌标液加入体积/mL
蒽醌标液浓度(μg/mL)
吸光度 A
斜率 b
截矩 a
相关系数 g
粗品中蒽醌含量的测定
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单元技能训练 5-紫外分光光度法测定蒽醌的含量
班级：
姓名：
学号：
一、实验目的
学习紫外光谱法测定蒽醌含量的原理和方法。 干扰物质存在时，如何选择测量波长。
二、实验原理
由于蒽醌分子在 251nm 和 323nm 处存在强吸收，但是蒽醌工业品中存在邻苯二甲酸酐 的干扰。定量测定时的波长选择为 323nm。
紫外与可见分光光度法的比较
紫外分光光度法 n 定义：基于物质对紫外光的选择性吸收来进行分析测试的方法。 n 产生原因：分子中价电子能级的跃迁产生的。 n 工作波长区域：200-400nm；400-780nm n 吸收池：石英与玻璃 n 测量条件
如何测蒽醌的含量
n 分析仪器：紫外可见分光光度计； n 分析方法：工作曲线法 n 分析条件：工作波长、参比溶液
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试样溶液移取体积/mL：
试样溶液稀释体积/mL：
编号
5#
6#
7#
8#
吸光度 A 粗品中蒽醌的含量
/(μg/mL) 铁含量平均值/(μg/mL)
相对平均偏差/%
2、数据处理及曲线绘制
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六、结论 七、思考题
1、本实验中为什么要使用甲醇作参比？ 为了消除溶剂对吸光度的影响，选择甲醇作为参比。 2、为什么紫外分光光度计定量测定中没有加显色剂？ 紫外分光光度法在紫外区 200nm­380nm 进行检测，不需要通过外加显色剂使其在可见 区域中测定。