免疫比浊法
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免疫比浊法的特点:
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实验原理
优点
稳定性好,敏感性高(达ng/L)、精确度高,干扰因素少,结果判断更加客观、 准确。
快速、简便,结果回报时间短,便于及时将各种信息向临床反馈,又可节约 大量人力物力,利于大批量样品的处理。
能更好地避免标本之间的污染及标本对人的污染。
可利用多道计数器、测光仪,同一份样品同时测定几十种和临床有关的分析 项目,血清用量少,具有明显的应用优势。
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实验原理
聚乙二醇即PEG是中性、无毒且具有独特理化性质和良 好的生物相溶性的高分子聚合物,聚乙二醇具有高度的亲水 性,在水溶液中有较大的水动力学体积,并且没有免疫原性。
在免疫反应中,为增强抗原抗体反应常使用增聚剂,如34%的聚乙二醇等,利用其破坏抗原抗体的水化层,促进其靠 近反应,但如浓度不适合,高了会影响其它溶质或产生非特 异性聚集影响结果。
1.免疫球蛋白A,M,G(IgA, IgM, IgG)测定试剂 2.免疫球蛋白A,M,G (IgA, IgM, IgG)校准品,蒸馏水, 血清样本 3.微量加样枪、试管 4.分光光度仪、水浴箱
. 实验方法
空白管
+蒸馏水 (10mL)
校准管 +IgX试剂 37℃ (1mL) 5min
+校准品 (10mL)
混匀
37℃,10min OD340
样本管
+样品血清 (10mL)
结果计算方法:
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实验结果
样本管吸光度
Ig浓度(g/L)=
× Ig校准浓度(g/L)
校准管吸光度
IgA:1.72 g/L IgG:9.77 g/L IgM:1.37g/L
实验 免疫比浊法检 测免疫球蛋白
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免疫系
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1
实验原理
2
材料和方法
3
实验结果
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实验原理
免疫球蛋白(Ig)是指一类具有抗体样结构或具有抗体活性 的球蛋白,能与诱导其产生的抗原发生特异性结合,是体液免 疫应答的主要效应分子。免疫球蛋白水平增高常见于各种慢性 细菌感染,如慢性骨髓炎、慢性肺脓肿等。在多种自身免疫病、 肝脏疾病患者中可有IgG、IgA、IgM升高:在系统性红斑狼疮 患者中以IgG、IgA或IgG 、IgM升高较多见;在类风湿关节炎 中则以IgM升高为主。免疫球蛋白水平降低多见于先天性体液 免疫缺乏病、肾病综合症、吸收不良综合症、淋巴瘤、放射损 伤和免疫抑制剂治疗后等情况。
免疫比浊法的特点:
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实验原理
缺点
当抗体或抗原大量过剩时,出现可溶性的复合物,造成误差。
应维持反应管中的抗体蛋白量始终过剩,此值要预先测定。
受血脂浓度影响。脂蛋白的小颗粒可形成浊度,造成假性升ຫໍສະໝຸດ Baidu。
少量小抗原抗体复合物极难形成浊度,除非放置较长时间 。
如要形成较大的的复合物,抗原抗体量应较大。
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实验材料
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实验原理
血浆蛋白分析技术经历了: 试管沉淀反应、琼脂凝胶的扩散实验发展到现代免疫 分析技术,其中很重要得一类就是免疫比浊法。
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实验原理
抗体(Ab)与可溶性抗原(Ag)反应,形成一定结构的免疫 复合物,在PEG作用下,成为悬浮于反应溶液中的微粒,使样品浊 度发生变化。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质, 当一定波长光线通过浊度发生变化的反应混合物时,由于被不溶性 免疫复合物吸收而减弱,故在一定范围内吸光度与免疫复合物量呈 正相关。当抗体浓度固定时,样品的浊度与其中所含抗原量成正比。