实验 苯芴酮比色法测定食品中的锡含量

实验六罐头食品中锡含量的测定——苯芴酮比色法

(本法参照GB/T 5009·16-2003)――蘑菇罐头

一、原理

在强酸条件下，使食品中的C、H、O、S等非欲测组分完全氧化，并以气（汽）态逸出，重金属元素形成高价态的离子以游离状态存在于消化液中。

样品经消化后，在弱酸介质中四价锡离子与苯芴酮生成微溶性橙红色络合物，在保护性胶体存在下，溶解的橙红色络合物的浓度与锡的含量成正比（即反应液颜色的深浅与锡的含量成正比），因而可用比色法测定。

加入抗坏血酸（Vc），酒石酸作为掩蔽剂，可消除铁的干扰。

显色反应式：

二、样品、试剂和仪器

（一）样品品名：

厂家：

（二）试剂

1．消化试剂：浓硫酸浓硝酸

2．10％酒石酸溶液。每组配40ml50ml/2组

3．1％抗坏血酸溶液，临用时配制。每二组配50ml

4．0.5％动物胶溶液，临用时配制。每二组配40ml。配制动物胶溶液，应加热搅拌，防止糊底。

5．酚酞指示液：1％乙醇溶液。

6．1:1氨水。

7．1:9硫酸：量取10ml硫酸，倒入90ml水内，混匀。每二组配200ml

8．0.01％苯芴酮溶液:称取0.010g苯芴酮(1,3,7-三羟基-9-苯基蒽醌)加少量甲醇及1:9硫酸数滴溶解，以甲醇稀释至100ml。

9．锡标准溶液: 精密称取0.1000g金属锡（99.99％），置于小烧杯中，加10ml硫酸,盖以表面皿，加热至锡完全溶解，移去表面皿，继续加热至发生浓白烟，冷却，慢慢加50ml 水,移入100ml容量瓶中，用1:9硫酸多次洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，并稀释至刻度，混匀。此溶液每毫升相当于1mg锡。

10．锡标准使用液: 吸取10.0ml锡标准溶液，置于100ml容量瓶中，以1:9硫酸稀释至刻度，混匀。如此再次稀释至每毫升相当于10μg锡。（已配完，公用）

（三）仪器分光光度计。

三、测定步骤

1．试样消化

称取5.00～10.00g捣碎试样于小烧杯中，用10ml硝酸将样品移入250～500mL凯氏烧瓶中，加数粒玻璃珠，放置片刻后，小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿管壁加入5～10mL 硫酸，再加热，至瓶中液体开始变成棕色时，将10ml硝酸不断加入，至有机物分解完全。加大火力，至产生白烟，待瓶口白烟冒净后，瓶内液体再产生白烟为消化完全，该溶液应澄清透明或微带黄色，放冷。加20mL水煮沸，除去残余的硝酸至产生白烟为止，如此处理两次，放冷。

将冷后的溶液移入100mL容量瓶中，用水洗涤烧瓶，洗液并入容量瓶中，放冷，定容，

混匀。按同法做一试剂空白。

2．试样预处理及标准曲线制备

准确吸取1.00mL～5.00mL 试样消化液和同量的试剂空白溶液，分别置于25mL 比色管中。

准确吸取0.0, 0.20, 0.40, 0.60, 0.80, l.00mL 锡标准使用液（相当0.0, 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0μg锡），分别置于25mL 比色管中。

3．测定

于上述各管中各加入0.5mL10%酒石酸溶液及1滴酚酞指示剂，混匀，各加1:1氨水中和至淡红色，加3mL1:9硫酸，1mL 0.5%动物胶溶液及2.5mL1%抗坏血酸溶液，再加水至25mL，混匀，再各加2mL0.01%苯芴酮溶液，混匀，1小时后，用2cm比色皿，以零管调零，于波长490nm处测量吸光度。

先以锡标准液的含量(μg)为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，然后从标准曲线上查出消化液和空白液的锡含量。

四、计算

x =

) (12

21

100

1000 A A

m V V

-⨯

⨯⨯

x——样品中锡含量mg/kg(mg/L)

A1——测定用消化液中锡含量μg

A2——空白液中锡含量μg

m——样品质量g（体积mL）

V1——消化液的总体积mL

V2——测定用消化液的体积mL

计算结果保留三位有效数字。

精密度：在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。

五、说明及注意事项：

（1）在PH为1左右的酸性介质中，锡与苯芴酮反应生成一种微溶的络合物，锡的浓度低时，络合物以溶胶的形式存在于溶液中，在有动物胶存在下，此红色胶体能长时间稳定，可用于比色测定。由于显色反应比较缓慢，故应放置一段时间后比色。天冷时可置于37 ℃恒温箱中30min后比色。

（2）反应液的PH值对呈色影响较大，所以标准液和样品液都先用氨水调至中性后再加其他试剂，以使PH一致。

（3）抗坏血酸用于掩蔽铁离子的干扰，其溶液不稳定，需临用时现配。

（4）也可以用原子吸收光谱法测定锡的含量，锡的吸收波长为224.6nm

本标准适用于各类食品中锡的测定。

本方法检出限：苯芴酮比色法为2mg/kg；氢化物原子荧光光谱法检出限:0. 23ng/mL，标准曲线线性范围：0ng/mL～200ng/mL。

实验主要参考文献

中华人民共和国国家标准，《食品卫生检验方法理化部分（一）》，北京：中国国家标准出版，2004