槐定碱对小鼠免疫器官的影响

瞄一曩
Ａ： 阴性 对 照组 ； ５一Ｆ Ｂ： ｕ组 ； Ｓ Ｉ 组 Ｃ：Ｒ Ｈ 图 ４ 各 组肝 脏 病 理 结 果 （ Ｅ， ２ ０ Ｈ ×０）
异有显著性 （ ０ ０ ） 与对 照组 、Ｒ Ｐ＜ ． １ ， Ｓ ＩＨ组 、 Ｒ ＳＩ Ｌ组 比较差异无显著性（ ００ ） Ｐ＞ ．５ 。提示槐定 碱可 以拮 抗
广东医学 ２１年２ ０１ 月第３ 卷第３ Ｇ ａｇｏｇ ｅｉｌｏｒａ ｅ． ０１ Ｖ１ ， ： ２ 期 ｕｎ ｎ Ｍ ｄ ａＪｕｎｌ ｂ ２１， ｏ ！兰 ｄ ｃ Ｆ ．
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３ ０１ ・
槐 定 碱对 小 鼠免疫 器 官 的影 响
梁磊 ，季 波 ，王晓 燕 ，张绪 慧 ，邓虹
黼■
３ 讨 论
本实验 中我们也 发现 ， ５一Ｆ ｕ对 小 鼠有 严重 的免 疫抑 制作用 ， 现为导致 小鼠胸腺指 数和脾脏 指数显 表 著下 降， 病理切片显 示免疫 器官胸 腺 、 脾脏严 重萎 缩 ；
％与阴性 对照组 比较 Ｐ＜Ｏ０ ；▲与 ５一Ｆ ．１ Ｕ组 比较 Ｐ＜ ． ｌ ＃ Ｏ Ｏ ； 与 合用组 比较 Ｐ＜ ． １ ０ ０
温 度 ２ ２ ℃ ， 对 湿 度 ４ ％ ～７ ％ 。 自 由饮 水 、 ０～ ５ 相 ０ ０ 进
食普通 饲料 。鼠笼垫料 与饮水壶定 时换 洗 ， 保持清 洁。
受 试 前 随 机 分 为 槐 定 碱 高 剂 量 （ Ｒ 组 、 定 碱 低 Ｓ ＩＨ） 槐
一
剂量（ Ｒ ） 、 Ｓ Ｉ 组 氟尿 嘧 啶（ Ｌ ５一Ｆ 组 、 ｕ） 槐定 碱 ＋氟 尿 嘧啶合 用组 和生理 盐水 阴性对 照组 ， 每组 １ ０只 ， 雌雄 各半 ， 腔 注 射 给 药 ， 续 ２周 。剂 量 ： 腹 连 ５一Ｆ Ｕ组 为 ３ ｇ ｋ ； ０ｍ ／ ｇ合用组为 Ｓ Ｉ ０ｍ （ ｇ・ ） ＋５一Ｆ ０ Ｒ ｓ ｋ ｄ ２ ／ ｕ ３
增加 ， 阴 性 对 照 组 小 鼠 比较 差 异 无 显 著 性 （ ＞ 与 Ｐ
海 医疗 器 械 制 造 公 司 ） 针 头 式 滤 器 （ 国 Ｇ ｌａ ； 美 ｅ ｎ公 ｍ 司）Ａ ； Ｂ一１０型 电子 天平 （ 国 Ｄ ｎｅ 公 司 ） 槐 定 碱 ６ 美 ｅｖｒ ； （ 宁夏 盐 池 县 医 药 公 司 提 供 ， 号 ： ８ １０ 纯 度 ＞ 批 ００ ２ ，
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３２ ０．
参 垦兰 ｌ 年２ 第３ 卷第３ Ｇ ａｇｏｇ ｅｉｌｏｒａ ｅ．Ｏｌ Ｖ１３， ｏ３ １ 月 ２ 期 ｕｎｄｎ ｄａＪｕｎｌ ｂ ２ｌ， ｏ ２ Ｎ． Ｍ ｃ Ｆ ．
照组 比较 ， ｕ组小 鼠胸腺 、 ５一Ｆ 脾脏 明显萎 缩 ， 重量 减 小， 其胸 腺、 脏指 数 均 显著 降 低 （ ０ ０ ） Ｓ Ｉ 脾 Ｐ＜ ． １ ： Ｒ Ｈ 组 、Ｒ ＳＩ Ｌ组小 鼠胸腺 、 脏外观 基本正 常 ， 脾 胸腺 指数 、 脾脏指 数 与 阴 性对 照组 比较 均 差 异 无 显 著性 （ Ｐ＞
等 报 道 Ｓ Ｉ Ｒ 可抑 制 正 常小 鼠腹 腔 巨 噬 细 胞 （ ） Ｍ 功
鼠胸腺皮质变薄 ， 巴细胞 数 目显 著减少 ， 淋 分布松 散 ， 胸腺小体易见 ； 髓质 内组织细胞 和纤维 细胞增 生明显 ； 脾脏萎缩 ， 脾小体 体积变 小 ， 巴细胞数 目减少 ， 血 淋 脾 窦弥漫充血 。见 图 ２— 。肝脏及 肾脏 Ｈ ３ Ｅ染色结 果 ， 对照组肝脏结构 正常 ， 细胞体 积大 ， 质丰 富、 肝 胞 嗜酸
１２ 受 试 动 物 与 分 组 ． Ｓ Ｆ级 昆 明 种 小 鼠 ５ Ｐ ０只 ， 雌
合用组小 鼠活动 减少 ， 重增 长缓慢 ， 与 Ｓ Ｉ 体 但 Ｒ Ｈ组 、
ＳＩ Ｒ Ｌ组 比较 差 异 有 显 著 性 （ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。见 图 １ 。
雄各半 ， 体重 ｌ ２ ， ８～ ２ｇ 同性别小 鼠之间的体重相 差不 超过 ３ｇ 由南 方医科 大学实验动物 中心提供 。饲养 室 ，
ｍ ／ ｇ Ｓ Ｉ 组 为 ２ ｇ ｋ ；Ｒ ｇ ｋ ；Ｒ Ｈ ５ｍ ／ ｇ Ｓ Ｉ Ｌ组 为 １ ｓｋ ； ５ｍ ／ ｇ 阴 性 对 照组 注 射 等 量 生 理 盐 水 。
１ｉ ｛ 暖
蛙
１３ 实验方法 ．
实验期 间每天称 体重调节 给药剂量 。
与 阴 性 对 照 组 比 较 Ｐ ＜０ ０ ；△ 与 ５一Ｆ 组 比 较 Ｐ ＜０ 叭 ； ．１ Ｕ ．
【 摘要 】 目的
观察槐定碱 （ Ｒ ） 昆明小鼠免疫 器官的影响。方法 将 ５ Ｓ Ｉ对 ０只 昆明小鼠分为槐定碱 高剂量
（ Ｒ 组 、 定 碱 低 剂 量 （ Ｒ ） 、 尿 嘧 啶 （ Ｆ 组 、 定碱 ＋氟 尿 嘧 啶 合 用 组 和 生 理 盐 水 阴性 对 照 组 ， ＳＩ Ｈ） 槐 ＳＩ 组 氟 Ｌ ５一 Ｕ） 槐 腹
１ 材 料 与 方 法
数 ］脏器指数 ＝ ： 脏器重量 （ ｇ ／ 重 （ ） ｍ ）体 ｇ 。剥取小 鼠
肝脏 、 肾脏 ， 去离子水洗涤后用滤纸 吸干 ， 与胸腺 、 脾脏
分别使用 ４ ％多聚甲醛 固定 ， 常规 Ｈ Ｅ染 色观察 。 １４ 统计 学方法 采用 Ｓ Ｓ ３ ０统计 软件 ， ． Ｐ Ｓ１． 多组 问 比较采用单 因素方差分析 ， 间两两 比较采用 Ｌ Ｄ法 ， 组 Ｓ
００ ） ． ５ 。５一 ｕ组小 鼠精神萎 靡 、 Ｆ 活动 减少 ， 重增 长 体 缓慢甚至减轻 ， 对照组 和不 同剂量 的 Ｓ Ｉ 比较 均 与 Ｒ组 差异有显著 性 （ ０ ０ ） 个 别小 鼠 出现 血性 腹 泻 。 Ｐ＜ ． ５ ，
９ ％） 氟尿嘧啶注射 液 （ ８ ； ５～Ｆ （ Ｕ） 南通 精华 制药有 限 公 司， 批号 ：７ ８６ ； ０ ０ ２ ） 其他试 剂均为 国产分析纯。
００ ） ．５ 。合用组小 鼠的胸腺 和脾脏 指数与 阴性对 照组 比较显著降低（ ０Ｏ ） 胸腺指数 与 Ｓ Ｉ Ｐ＜ ． １ ， Ｒ Ｈ组 、Ｒ ＳＩ Ｌ 组 比较显著降低 （ ０ ０ ） 但 与 ５一Ｆ Ｐ＜ ． １ ， Ｕ组 比较仍 差 异有显著性 （ ０ ０ ） 脾脏指数 与 ５一Ｆ Ｐ＜ ． １ ； Ｕ组 比较 差
末次称 重 给药后 １ｈ处死小 鼠， 剥取 胸腺 、 脾脏 ， 去离 子水洗涤后用滤纸吸干 ， 称重 ， 按下列公式计算 脏器指
｝ 合 用 组 比较 Ｐ ＜ ． １ ｝ 与 ０ Ｏ 图 １ 各 组 小 鼠体 重 观 察 曲 线
２２ 各组胸腺 、 ． 脾脏指数的 比较
｝广州市科技计划项 目（ 编号 ：０６ ３一Ｅ ０ １— ） ２０ Ｚ ５５ ２
△通信 作者 。教授 ， 士研 究生 导师 ； ｍ ｉ ｄｎｈｎｚｕ １６ｃｒ 博 Ｅ— ａｌ ｅｇｏｇｈ ＠ ２ ．ｏ ： ｎ
各组胸腺 指数 比较
差异有显著性 （ Ｆ来自百度文库１．９ ， ０ ０ ０ ， ３ １４ Ｐ＝ ．０ ） 各组脾 脏指数
比较 差 异 有 显 著 性 （ ９ ８ ５ Ｐ＝ ．０ ） 与 阴 性 对 Ｆ： ．５ ， ０ ００ 。
５一 Ｕ对脾脏 的免疫抑制 ， Ｆ 使脾脏 指数增加 。见表 １ 。
表 １ 各 组 胸 腺 、 脏 指数 的 比较 （ ４ ） ｇ ｇ 脾 － ｍ ／
Ａ： 阴性 对 照组 ； ５一Ｆ Ｂ： Ｕ组 ； Ｓ Ｉ 组 Ｃ：Ｒ Ｈ 图 ５ 各 组 肾脏 病 理 结 果 （ Ｅ。 ２ ０ Ｈ ×０）
腔注射给 药２周。计算不 同组别 小鼠的胸腺指数 、 脾脏 指数 ， 进行胸腺 、 脾脏 、 肝脏 、 肾脏的病理组织 学观察 。结果
不 同 剂 量槐 定碱 组 小 鼠 的 胸腺 、 脏 指 数 与 阴性 对 照 组 比较 均 无 显 著 性 差 异 （ ０ ０ ）５一Ｆ 组 小 鼠胸 腺 和 脾 Ｐ＞ ． ５ ； Ｕ 脾脏 指数 与 阴性 对 照 组 比 较 显 著 降 低 （ ＜００ ） 合 用 组 小 鼠 的 胸 腺 指 数 与 阴 性 对 照 组 相 比 显 著 降 低 （ ＜ Ｐ ．１ ； Ｐ ０Ｏ ）胸 腺 指 数 与 Ｓ Ｉ 及 Ｓ Ｉ ．１ 。 Ｒ Ｈ Ｒ Ｌ组 比较 均 有 显 著 性 差 异 （ ０ ０ ） 脾 脏 指 数 与 ５一Ｆ 组 比较 有 显 著 性 差 异 Ｐ＜ ． １ ， Ｕ （ Ｐ＜００ ） 与 不 同剂 量 的槐 定碱 组 比较 无 显 著 性 差 异 （ ＞ ．５ 。 结 论 ．１ ， Ｐ ００ ）
同时 ， ５一Ｆ Ｕ还导致 动物 松毛 ， 神不振 ， 精 食欲减退、 体
重增长缓慢 ， 的甚 至减 轻 ， 别 小 鼠还 出现 血性 腹 有 个
泻 。 与 ５一 Ｕ组 比较 ，Ｒ 组 这 两 项 指 标 与 阴 性 对 照 Ｆ ＳＩ
２ ３ 各 组 胸 腺 、 脏 、 及 肾病 理 观 察 结 果 阴性 对 ． 脾 肝
方 差 不 齐 的采 用 Ｔｍ ａｅ Ｓ ２法 。 ａ ｈｎ ’ Ｔ
２ 结 果
船
２ １ 各 组 小 鼠 体 重 观 察 曲 线 阴性 对 照 组 小 鼠 腹 腔 ．
１１ 主要仪器设备和 药物 ．
一 次性 １ｍ Ｌ注射器 （ 上
注射生理盐 水 ， 鼠体 重 逐渐 增 加 ， 小 活动 正 常 ；Ｒ Ｓ ＩＨ 组与 Ｓ Ｉ Ｒ Ｌ组 小 鼠 注 射 药 物 后 半 小 时 ， 鼠 均 活 动 减 小 少， 随后 出现兴奋 不安 ， 半小 时 内恢 复正常 ， 体重 逐渐
水 正 常 ， 重 增 加 。 同 时 我们 发 现 ， 体 随着 Ｓ Ｉ 药 浓 度 Ｒ 给
脾脏结构清楚 ， 没有 明显 的萎缩 和破坏 。５一Ｆ ｕ组 小
的增 加和给药 时间 的延 长 ， 胸腺指数 和脾脏指 数没有 增加 ， 明 Ｓ Ｉ 小鼠的免疫力没有增 强作 用 ， 说 Ｒ对 与研究 报道 结果一致 。 不过 ， 目前对 Ｓ Ｉ Ｒ 免疫功能 的影 响报道 尚不一致 ， 有些 实验结 果 提示 Ｓ Ｉ 有免 疫 增强 作 用。黎雪 如 Ｒ 具
制作 用 ， 以拮 抗 ５一 Ｕ 对 脾 脏 的 免 疫 抑 制 。 可 Ｆ
Ｓ Ｉ 昆 明 小 鼠 的 免 疫 功 能 无 明 显 抑 Ｒ 对
【 关键词 】 槐定碱 ；苦豆子 ； 免疫 器官
中药苦豆 子 （ｏｈｒ ａ ｐｃｒｉ ｓ ） ｓｐ ｏ ｌ ｅｕａ ｅ 是豆科 槐属 ａ ｏ ｄ Ｌ 多年生草本植 物 ， 主要 含生物 碱 。我们 对其 中的 ５种 生物碱 进 行 了抗 结 肠 癌 的作 用 筛 选 …， 现 槐 定 碱 发 （Ｒ ） Ｓ Ｉ 对结肠腺癌细胞 株 Ｓ ２ Ｗ６０的增殖显著抑制并诱 导细胞凋亡 。 目前临床上应用 的治疗恶性肿瘤 的化疗 药物在杀伤肿瘤细胞 的同时也对机体免疫功 能全 面抑 制 Ｅ 。Ｓ Ｉ 内外 抑制 结 肠 癌 的效 果 已经 逐 步 被 证 ２ Ｒ体 ］ 实 ， 本实验 旨在观察其对小 鼠免疫系统的作用 。
照组胸腺结构正常 ， 上皮细胞 团和淋 巴细胞 ， 有 可见胸 腺小体 ； 脾小体结 构清晰 ， 可见 中央动脉 ， 巴细胞 数 淋
目较 多 。与 阴 性 对 照 组 相 比 ，Ｒ 处 理 组 小 鼠胸 腺 和 ＳＩ
组 比较差异均 无显著性 ， 病理切 片显 示这两种 免疫器 官基 本正常 ； 给药后半小时小 鼠状态恢 复如常 ， 饮食饮
－ 州 军 区广 州 总 医 院 药 剂科 （ 州 ５０ １ ） 南 方 医 科 大 学 南 方 医 院病 理 科 （ 州 ５ ０ １ ） 广 东 省 第 二 人 民 广 广 １０ ０ ； 广 １５ ５ ； 医 院 肿 瘤 二 科 （ 州 ５ ０ １ ） 南 方 医 科 大 学 中医 药 学 院 （ 州 ５ ０ １ ） 广 １３ ７ ； 广 １５ ５