内皮祖细胞鉴定方法

大鼠骨髓EPC的鉴定：①EPC培养约2周后达到80% ～90%融合，以0.25 %胰酶+0.01%EDTA消化，传代至24孔板中，待细胞贴壁完全后用Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双荧光染色鉴定。

细胞在含Dil-ac-LDL(10μg/mL)的培养液中避光孵育10 h，然后以2% 的中性甲醛固定10min，PBS液漂洗后再加FITC-UEA-1(10μg/mL)避光孵育1 h。

PBS液漂洗后在荧光显微镜下观察，显示红色荧光的为ac-LDL阳性细胞，显示绿色荧光的为UEA-1阳性细胞，显示双荧光阳性(黄色)的细胞被认为是EPC，随机计数10个非重叠视野，计算双阳性细胞比例。

同时以大鼠主动脉内皮细胞为阳性对照，大鼠主动脉平滑肌细胞为阴性对照。

2、流式细胞仪检测细胞表型。

取培养14天的EPC细胞1×10的6次方进行流式细胞仪检测，分别检测CD34+、CD133+、vWF+、Flk-1+细胞所占的比例。

需要一定数量培养EPC过程中EPC的显微镜下照片。