海洋生物技术—海洋动物细胞培养定稿
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传代培养：把原代培养增殖的细胞定期用
胰蛋白酶把细胞从瓶壁上脱离出来，配制 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中培养，这称为传代培养。
细胞株：原代细胞和50代前的传代细胞叫做
细胞株。
细胞系：50代后，遗传物质发生了改变，
并且有癌变的特点，无限传下去的传代 细胞。
细胞株
细胞系
细胞悬浮液 10代细胞
在对鱼类组织进行细胞培养时，要根据不同种类 的鱼选择适合其生长的培养基。在培养海水鱼类 细胞时，要在培养基中加入适当量的NaCl （1.5%），以维持渗透压（4ⅹ105Pa），但是 NaCl的浓度不能太高，太高会不利于细胞生长。
M199培养基：本培养基最初专用于鸡成纤维细胞 的的营养研究。如今，M199培养基广泛用于非转 化细胞、疫苗和病毒的研究以及上皮细胞的原代 培养。
合成培养基的种类虽多，但一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、 无机盐和一些其它辅助性成分。 (1)氨基酸 必需氨基酸是动物细胞本身不能合成的，因此，在制备培 养基时需加入必需氨基酸，另外还需要半胱氨酸和酪氨酸。而且由于 细胞系不同，对各种氨基酸的需要也不同。有时也加入其他非必需氨 基酸，氨基酸浓度常常限制可得到的最大细胞密度，其平衡可影响细 胞存活的生长速率。在细胞培养中，大多数细胞需要谷氨酰胺作为能 源和碳源。(氨基酸为L型) (2)维生素 Eagle基本培养基中只含B族维生素，其他维生素都靠从血 清中取得。血清浓度降低时，对其他维生素的需求更加明显，但也有 些情况，即使血清存在，它们也必不可少。维生素限制可从细胞存活 和生长速率看出，而不是以最大细胞密度为指标。 (3)碳水化合物 碳水化合物是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白 质和核酸的成分，主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸 钠等。
原代培养
50代细胞
传代培养
动物细胞培养的应用
1）生产有价值的蛋白质生物制品；如病毒 疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
2）为治疗和预防疾病提供理论依据 （如为皮肤大面积烧伤的病人培养可供移 植皮肤）
3）用于检测有毒物质
2. 鱼类细胞培养的方法与技术
2.1鱼类细胞培养基的选择 主要是合成培养基，常用的有以下几种：Eagles MEM、Leibowitz L-15、M199和M1640。 Eagles MEM适用于多种细胞的生长培养，如 CCO、AS、CHSE-214、RTG-2等，还可以通过 在其中添加或减少某些成分用于特殊研究的细胞 培养，是一些海水鱼类细胞系培养常用的培养基； M199所含的营养成分丰富而且全面，可以在细胞 培养中用作维持液，可以使一些细胞的存活时间 达到33天，是一些淡水鱼类细胞系常用的培养基；
货号
L0325
产品名称/描述
M199培养基,含Hanks' Salts,不含L-Glutamine
L0330 L0331 L0356 L0355 L0360
M199培养基,含Hanks' Salts,含L-Glutamine M199培养基,含Hanks' Salts,含L-Glutamine,含25mM Hepes M199培养基,含Earles' Salts,不含L-Glutamine M199培养基,含Earle's Mod. Salts,含L-Glutamine,含1.25g/L碳酸氢钠 M199培养基,含Earle's Salts,含L-Glutamine,含25mM Hepes
细胞工程的核心技术：细胞培养与繁殖 目的：获得新性状、新个体、新物质
2 细胞工程的研究范畴
•动物细胞与组织培养 •植物细胞与组织培养 •细胞融合 •细胞核移植 •染色体工程 •胚胎工程 •干细胞与组织工程 •转基因生物与生物反应器
3 动物细胞工程
常用的技术手段： 包括动物细胞培养、动物细胞融合、单
P0420 M199培养基,含Earle's Salts,含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,干粉
P0425
M199培养基,含Earles' Salts,含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,含25mM Hepes,干粉
P0410 M199培养基,含Hanks' Salts,不含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,干粉
植物体细胞具有全能性
1．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别 在于：[ ]
A．培养基不同；
B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能 培养成植株。
动物细胞培养技术的发展
或动物胚胎
原 代 培 养
分散成单个细 胞
一定浓度的细 胞悬浮液
第二章 海洋动物细胞培养
一、 细胞工程与动物细胞培养 二、 海洋动物细胞培养（以鱼类细胞培养为
例，海洋无脊椎动物细胞培养自学 三、鱼类细胞培养的应用
一、细胞工程与细胞培养
1 细胞工程的定义
细胞工程 (cell engineering)是以细胞生物学和分子生物 学为基础理论，采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或 技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有新的 性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物，并发展有关 理论和技术方法的学科。
动物胚胎或 幼龄动物的 器官、组织
胰蛋白酶
制成
剪碎 单个细胞 加培养液
细胞悬浮液 原代培养
传代培养
遗传物质改变
细胞株 传代培养
Baidu Nhomakorabea
细胞系
原代培养：将组织取出来后，先用胰蛋白
酶等处理使组织分散成单个细胞，然后配 制成一定浓度的细胞悬浮液，再将悬浮液 放入培养瓶中，这个过程称为原代培养。 (第1代~第10代以内)
克隆抗体、胚胎移植、核移植等 。 动物细胞培养是其他细胞工程技术的基
础。
动植物、微生物细胞的培养特征
植物
分化成熟的植物细胞体，仍有可能发育成完整植株。
动物
随着分化的演进，分化成熟细胞逐渐丧失其分化潜能,不 能发育成为完整的动物个体。 实验证明，囊胚阶段的细胞乃至成熟的体细胞，保持着 全套基因组的细胞核仍具有全能性——可能发育成完整个 体。 细胞质中有着决定细胞分化全能性的物质，称为分化决 定子。决定动物细胞全能性的关键在于细胞质。
规格
500 ml 500 ml 500 ml 500 ml 500 ml 500 ml For 1 L For 5 L For 10 L For 1 L For 5 L For 10 L For 1 L For 5 L For 10 L
单价
300.00 320.00 430.00 300.00 320.00 430.00 70.00 250.00 440.00 70.00 250.00 440.00 70.00 250.00 440.00
胰蛋白酶把细胞从瓶壁上脱离出来，配制 悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶 中培养，这称为传代培养。
细胞株：原代细胞和50代前的传代细胞叫做
细胞株。
细胞系：50代后，遗传物质发生了改变，
并且有癌变的特点，无限传下去的传代 细胞。
细胞株
细胞系
细胞悬浮液 10代细胞
在对鱼类组织进行细胞培养时，要根据不同种类 的鱼选择适合其生长的培养基。在培养海水鱼类 细胞时，要在培养基中加入适当量的NaCl （1.5%），以维持渗透压（4ⅹ105Pa），但是 NaCl的浓度不能太高，太高会不利于细胞生长。
M199培养基：本培养基最初专用于鸡成纤维细胞 的的营养研究。如今，M199培养基广泛用于非转 化细胞、疫苗和病毒的研究以及上皮细胞的原代 培养。
合成培养基的种类虽多，但一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、 无机盐和一些其它辅助性成分。 (1)氨基酸 必需氨基酸是动物细胞本身不能合成的，因此，在制备培 养基时需加入必需氨基酸，另外还需要半胱氨酸和酪氨酸。而且由于 细胞系不同，对各种氨基酸的需要也不同。有时也加入其他非必需氨 基酸，氨基酸浓度常常限制可得到的最大细胞密度，其平衡可影响细 胞存活的生长速率。在细胞培养中，大多数细胞需要谷氨酰胺作为能 源和碳源。(氨基酸为L型) (2)维生素 Eagle基本培养基中只含B族维生素，其他维生素都靠从血 清中取得。血清浓度降低时，对其他维生素的需求更加明显，但也有 些情况，即使血清存在，它们也必不可少。维生素限制可从细胞存活 和生长速率看出，而不是以最大细胞密度为指标。 (3)碳水化合物 碳水化合物是细胞生命的能量来源，有的是合成蛋白 质和核酸的成分，主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖、丙酮酸钠和醋酸 钠等。
原代培养
50代细胞
传代培养
动物细胞培养的应用
1）生产有价值的蛋白质生物制品；如病毒 疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
2）为治疗和预防疾病提供理论依据 （如为皮肤大面积烧伤的病人培养可供移 植皮肤）
3）用于检测有毒物质
2. 鱼类细胞培养的方法与技术
2.1鱼类细胞培养基的选择 主要是合成培养基，常用的有以下几种：Eagles MEM、Leibowitz L-15、M199和M1640。 Eagles MEM适用于多种细胞的生长培养，如 CCO、AS、CHSE-214、RTG-2等，还可以通过 在其中添加或减少某些成分用于特殊研究的细胞 培养，是一些海水鱼类细胞系培养常用的培养基； M199所含的营养成分丰富而且全面，可以在细胞 培养中用作维持液，可以使一些细胞的存活时间 达到33天，是一些淡水鱼类细胞系常用的培养基；
货号
L0325
产品名称/描述
M199培养基,含Hanks' Salts,不含L-Glutamine
L0330 L0331 L0356 L0355 L0360
M199培养基,含Hanks' Salts,含L-Glutamine M199培养基,含Hanks' Salts,含L-Glutamine,含25mM Hepes M199培养基,含Earles' Salts,不含L-Glutamine M199培养基,含Earle's Mod. Salts,含L-Glutamine,含1.25g/L碳酸氢钠 M199培养基,含Earle's Salts,含L-Glutamine,含25mM Hepes
细胞工程的核心技术：细胞培养与繁殖 目的：获得新性状、新个体、新物质
2 细胞工程的研究范畴
•动物细胞与组织培养 •植物细胞与组织培养 •细胞融合 •细胞核移植 •染色体工程 •胚胎工程 •干细胞与组织工程 •转基因生物与生物反应器
3 动物细胞工程
常用的技术手段： 包括动物细胞培养、动物细胞融合、单
P0420 M199培养基,含Earle's Salts,含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,干粉
P0425
M199培养基,含Earles' Salts,含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,含25mM Hepes,干粉
P0410 M199培养基,含Hanks' Salts,不含L-Glutamine,不含碳酸氢钠,干粉
植物体细胞具有全能性
1．动物细胞培养与植物组织培养的重要区别 在于：[ ]
A．培养基不同；
B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；
C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；
D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能 培养成植株。
动物细胞培养技术的发展
或动物胚胎
原 代 培 养
分散成单个细 胞
一定浓度的细 胞悬浮液
第二章 海洋动物细胞培养
一、 细胞工程与动物细胞培养 二、 海洋动物细胞培养（以鱼类细胞培养为
例，海洋无脊椎动物细胞培养自学 三、鱼类细胞培养的应用
一、细胞工程与细胞培养
1 细胞工程的定义
细胞工程 (cell engineering)是以细胞生物学和分子生物 学为基础理论，采用原生质体、细胞或组织培养等试验方法或 技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有新的 性状的细胞系或生物体以及生物的次生代谢产物，并发展有关 理论和技术方法的学科。
动物胚胎或 幼龄动物的 器官、组织
胰蛋白酶
制成
剪碎 单个细胞 加培养液
细胞悬浮液 原代培养
传代培养
遗传物质改变
细胞株 传代培养
Baidu Nhomakorabea
细胞系
原代培养：将组织取出来后，先用胰蛋白
酶等处理使组织分散成单个细胞，然后配 制成一定浓度的细胞悬浮液，再将悬浮液 放入培养瓶中，这个过程称为原代培养。 (第1代~第10代以内)
克隆抗体、胚胎移植、核移植等 。 动物细胞培养是其他细胞工程技术的基
础。
动植物、微生物细胞的培养特征
植物
分化成熟的植物细胞体，仍有可能发育成完整植株。
动物
随着分化的演进，分化成熟细胞逐渐丧失其分化潜能,不 能发育成为完整的动物个体。 实验证明，囊胚阶段的细胞乃至成熟的体细胞，保持着 全套基因组的细胞核仍具有全能性——可能发育成完整个 体。 细胞质中有着决定细胞分化全能性的物质，称为分化决 定子。决定动物细胞全能性的关键在于细胞质。
规格
500 ml 500 ml 500 ml 500 ml 500 ml 500 ml For 1 L For 5 L For 10 L For 1 L For 5 L For 10 L For 1 L For 5 L For 10 L
单价
300.00 320.00 430.00 300.00 320.00 430.00 70.00 250.00 440.00 70.00 250.00 440.00 70.00 250.00 440.00