玫瑰精油的化学成分及其抗菌活性_李玉杰

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摘 要 通过水蒸汽同步 蒸馏法提取玫瑰精油, 采用 GC-M S方法 分析了 玫瑰精 油的化 学组成, 共鉴 定出其 中 14 个化学成分并测 定其相对含量, 占总含量的 95. 25% 。香茅醇为玫瑰精油的主要成分, 相对含量为 90. 37% 。体外 抑菌实验表明, 玫瑰精油除对黑曲霉没有抗菌活性 外, 对 其它 7种 供试菌 均具有 不同程 度的抑制 作用, 其中 对表 皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的最小抑 菌浓度 ( M IC) 为 0. 063% ( v / v), 对枯 草芽孢杆 菌、变形杆 菌和 白色念珠菌的最 小抑菌浓度 ( M IC) 为 0. 125% ( v /v), 而 对绿脓杆 菌 ( P seudom onas aerug inosa ) 的抗菌 活性相 对较 弱, M IC为 0. 5% ( v / v)。抑菌直径结果也表明了玫瑰精油 除对黑曲霉、绿脓 杆菌的抗菌 活性较 弱外, 对其它 6种 菌株的抑菌直径 都大于 8. 5 mm。考察了玫瑰精油对 3种敏感菌株包括金黄色葡萄球菌 (革兰 氏阳性菌 )、大 肠杆 菌 (革兰氏阴性菌 )和白色念珠菌 ( 真菌 )的杀菌动态过程, 为玫瑰精油的应用提供了理论依据。 关键词 玫瑰精 油; 成分; 抗菌活性 中图分类号: TQ651+ . 2 文献标志码: A 文章编号: 1673- 5102( 2009) 04- 0488- 04
质谱条件: 离子源为 EI源, 电子能量 70 eV, 离子 源温度 230e , 四极杆 150e , 扫描范围 30~ 500 amu。
经谱库检索并与保留时间相结合鉴定精油各 组分峰, 并对色谱峰用面积归一化法进行定量, 计 算各组分的相对含量。 2. 4 抗菌活性实验 2. 4. 1 琼脂扩散法
Abstract T he rose essent ia l o il w as extracted using simu ltaneous steam dist illation, and the chem ical com pos-i t ion w as ana lyzed by GC-M S, w hich identified a total of 14 chem ica l com ponents and the to ta l content w as 95. 25% . C itrone llo l is the m a in component o f the essent ial o i,l the re lative content w as 90. 37% . Antim icrob ial act iv ity show ed that rose essent ia l o il possessed different excent ant im icrobia l activity to seven kinds o f bacteria except for A spergillu s niger, in w h ich, the M IC va lues of rose essential o il against S taphy lococcus ep id erm id is, S taphy lococcus aureus and E scherich ia coli w ere all 0. 063% v / v, the M IC values of rose essent ia l o il againstBacillus subtilis, P roteus vulgaris and Candida albicans w ere all 0. 125% v /v, how ever, the antibacterial act iv ity of the essent ia l o il against P seudom onas aeruginosa was re lat ively w eak, M IC w as 0. 500% v / v. T he resu lts o f inh ib-i t ion d iam eters a lso show ed that inh ib ition diam eters o f rose essen tial o il against six strains w ere higher than 8. 5mm except forA. niger and P. aeruginosa. The bacteric ida l dynam ic studies of rose essential o il against three-sensitive stra ins inc lud ing S. aureus( gram-positive bacteria), E. coli ( g ram-negative bacteria) and C. albicans ( fung i) w ere investigated, w hich prov ides a theoret ical basis for the app licat ion of rose essential o i.l K ey w ord s Rose essential oi;l C omposition; Ant im icrobia l activ ity
气相色谱条件: 色谱柱 DB-5( 30 m @ 0. 25 mm @ 0. 25 Lm ) , 进 样 口 温 度 260e , 柱 温 60e ~ 220e 。升温程序: 起始温度 60e , 以 15e /m in升 温至 160e , 再 以 5e /m in 升温 至 250e , 维持 2 m in。汽化室温度 250e , 气质接口温度 280e 。进 样量 1 LL, 分 流 比 30 B1; 载 气 为 氦 气, 纯 度 99199% , 流速 1. 2 mL# m in- 1。
抑菌直径的测定采用琼脂扩散法 [ 10, 11] 。用无 菌棉签蘸取 108 cfu# m L- 1的试验菌悬液, 在营养 琼脂平板表面均匀涂抹 3次, 然后绕平板边缘涂抹 一周, 盖好表面皿, 4e 冰箱保存 5 m in, 滤纸片 (用 打孔器将 滤纸制成直径 为 6. 0 mm 的小圆纸 片 ) 160e 干热灭菌 2 h, 平放于无菌平皿内, 每片滴加 5 LL 的玫瑰精油, 室温自然晾干, 用无菌镊子取样 片轻轻贴放于平板表面, 每个平板贴 2片试验样片, 1片无菌生理盐水对照片。放于培养箱内培养, 黑 曲霉在 28e 温度下培养 5 d, 其它菌株均在 37e 培 养 24 h。测量抑菌圈直径大小, 实验重复 3次。 2. 4. 2 微量肉汤稀释法
基金项目: 黑龙江省杰出青年基金 ( JC 200704) , 教育部科学技术研究重点项目 ( 108049 ) 第一作者简介: 李玉杰 ( 1966) ) , 女, 副教授, 主要从事生物制药。 * 通讯作者 收稿日期: 2009- 03- 10
4期
李玉杰等: 玫瑰精油的化学成分及其抗菌活性
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Chem ical Composition and Antim icrobial A ctivity of the E ssential O il from R osa rugosa Thunb.
L I Y u-J ie1 L IU X iao-L ei2, 3 L IU X ia2, 3 WU N an2, 3 PENG X iao2, 3 L IANG Lu2, 3 FU Y u- Jie2, 3*
1 仪器和材料
1. 1 主要仪器 DL2CJ22N 超净工 作台, LDZX240B Ñ 立 式自
动电热压 力蒸汽 灭菌器, DPX-9082B-Z 恒温 培养 箱, 英国 VG p latform Ò气质联用仪。 1. 2 实验材料与试剂
牛肉膏、蛋白胨、琼脂等皆为生化试剂。其它 试剂均为分析纯试剂。 1. 3 玫瑰的来源
( 1. Jilin A gr icultural Science and T echno logy College, Jilin 132101) ( 2. K ey L aboratory of Forest P lant E co logy, N ortheast F orestry U n iversity, H arb in 150040) ( 3. Eng ineer ing R esearch C enter o f Fo rest B io-prepara tion, M in istry of Educa tion, N ortheast F orestry U n iversity, H arb in 150040)
植物研究 2009, 29( 4): 488~ 491 Bu lletin of Botan ical R esearch
玫瑰精油的化学成分及其抗菌活性
李玉杰 1 刘晓蕾 2, 3 刘 霞 2, 3 吴 楠2, 3 彭 霄 2, 3 梁 璐 2, 3 付玉杰 2, 3*
( 1. 吉林农业科技 学院, 吉林 132101) ( 2. 东北林业大学 森林植物生态学教育部重点实验室, 哈尔滨 ( 3. 东北林业大学 林业生物制剂教育部工程研究中心, 哈尔滨
5 d外, 其余菌种均于营养琼脂培养基在 37e 培养 24 h[ 6] 。
2 试验方法
2. 1 菌悬液的制备 [ 7 ] 将上述供试菌种用适宜的培养基斜面活化后, 用
液体培养基制成含菌量约为 105 cfu# mL- 1菌悬液。 2. 2 精油提取与含量测定
采用水蒸气同步蒸馏法提取精油。玫瑰花碾 碎后加水沸蒸回流 3 h。所得精油用无水硫酸钠脱 水, 过滤后量取体积。取适量精油用正己烷溶解稀 释为体积分数 0. 1% 用于气质联用分析。样品测 定前置于 - 25e 下密封贮存 [ 8] 。 2. 3 GC-M S分析方法 [ 9 ]
玫瑰 ( Ro sa rugosa T hunb. )为蔷薇科蔷薇属植 物, 直立落叶灌木, 常见的玫瑰品种有紫玫瑰、红玫 瑰、白玫瑰、杂交玫瑰等 [ 1] 。玫瑰具有柔和、纯正、 丰满、甜醇的特有香气。从玫瑰中提取的玫瑰油是 最古老的香精油之一, 受到人们的普遍喜爱, 在我 国已有二千多年的玫瑰栽培历史。玫瑰鲜花不仅 作为观赏植物可美化环境, 而且也是酿造玫瑰酒、 玫瑰酱、食用、药用和熏制茶叶等的原料。玫瑰具 有理气、活血、美容养颜、收敛等作用, 主治月经不 调、跌打损伤、肝气胃痛, 乳臃肿痛等症, 主要可用 于软饮料、糖果、冰淇淋、调味 料、保健食 品中 [ 2] , 玫瑰精油也是一种高品质的香料, 可调配多种花香 型香精, 用于日用化妆品、香皂等产品, 利用玫瑰精 油调香, 生产食用香精亦日益成为精细化工工业的 重要工艺手段 之一 [ 3 ] 。玫瑰精油 还具有抗 焦虑、 抗冲突等作用 [ 4, 5] , 并由于其 低毒、无副 作用 [ 5] 而 被广泛使用。但玫瑰精油抗菌活性目前国内未见 文献报道, 本研究通过玫瑰精油对 8种菌株的抑菌 直径、M IC、MBC的测定以及杀菌动态研究, 揭示了 玫瑰精油具有很好的抗菌活性, 为玫瑰精油作为细 菌感染性疾病的选择性用药, 同时也为玫瑰精油的 综合开发利用提供了科学依据。
玫瑰购自哈尔滨市动力区花卉市场。 1. 4 菌种及培养条件
表皮葡萄球菌 ( S taphy lococcus ep iderm id is, 缩写 为 S. e, 以下同 ) 、金黄色葡萄 球菌 ( Staphy lococcus aureus, S. a) 和 枯草芽 孢杆菌 ( Bacillus subtilis, B. s) , 大 肠 杆 菌 ( E scherichia coli, E. c ) 绿 脓 杆 菌 ( P seudom onas aerug inosa, P. a)、变形 杆菌 ( P ro teus vulgaris, P. v) 、白色念珠菌 ( Cand ida albicans, C. a) 和黑曲霉 ( A spergillus nigar, A. n) 均购自于黑龙江 省微生物研究所。前 3种为革兰氏阳性菌, 大肠 杆菌、绿脓杆菌和变形杆菌为革兰氏阴性菌, 后 2 种为真菌。除黑曲霉需用察氏培养基于 28e 培养