第十章 分枝杆菌属、放线菌属与诺卡菌属

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③疾病类型：（两型、两类） 瘤型（细胞免疫缺损，传染性强）； 结核样型（细胞免疫正常，传染性小）； 界线类 未定类
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病人的细胞免疫功 能低下或免疫抑制 ，故麻风分枝杆菌 能在体内繁殖，病 人血清中自身抗体 含量高，免疫复合 物沉积，形成结节 型红斑或疣状结节 ，面部结节融合可 呈“狮面”状。
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罗氏培养基上的 菌落特征（4周）
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结核杆菌培养
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• (三)抵抗力（四不怕）
• • • • 对干燥的抵抗力特别强 耐酸碱、耐化学消毒剂 对碱性染料有抵抗力 对青霉素等抗生素耐药
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• (三)抵抗力（四怕）
• • • • 对乙醇敏感 对湿热敏感 对紫外线敏感 对抗痨药敏感(链霉素、异烟肼、利福平等)，易 耐药。
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• 2.原发后感染（继发感染）： 多发生于成年人:已有免疫力
病灶多局限(多见于肺尖)
干酪样坏死物液化随痰排出，传染性强
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• 三、免疫性与超敏反应 • (一)免疫性： • 结核杆菌是胞内感染菌，其免疫主要是以T细胞为主 的细胞免疫，抗体只能对胞外细菌起作用。 • 结核的免疫属于感染免疫(infection immunity)， 又称有菌免疫。
• (一)致病物质
• 不产生内、外毒素，无侵袭性酶。其致病性可能与 细菌在组织细胞内大量繁殖引起的炎症，菌体成分和代 谢物质的毒性以及机体对菌体成分产生的免疫损伤有关。 • 与致病性有关的致病物质是菌体成分： 脂质 蛋白质 荚膜
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• 1.脂质： • 磷脂：促进单核细胞增生，形成结核结节和干酪 样坏死 • 索状因子：损伤线粒体，影响细胞呼吸，引起慢 性肉芽肿 • 蜡质D：佐剂作用，激发机体产生IV型超敏反应 • 硫酸脑苷脂：抑制吞噬体和溶酶体融合，延长细 菌在吞噬细胞中的存活时间。
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• 结核菌素试验主要用于： 1.选择接种卡介苗对象及接种后免疫效果的测定； 2.作为婴幼儿（未接种BCG）结核病诊断的参考； 3.测定肿瘤患者等细胞免疫功能（转阴）； 4.对未接种卡介苗人群作流行病学调查。
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• 四、微生物学检查 • (一)标本采集： • 根据感染部位采集标本。 • 痰、尿、脑脊液等
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• 2.蛋白质： • 最主要的是结核菌素。 • 本身没有毒性，但是与蜡质D结合，可以诱发迟发 型超敏反应。 • 3.荚膜： 抗吞噬； 黏附； 阻止药物和化学物质透入菌体内
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• (二)所致疾病 • 感染方式： 通过呼吸道、消化道和受损伤的皮肤等多途径感 染。 • 所致疾病： 可引起多种组织和器官的结核病。 以肺结核最多见。
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• • • • • •
（二）致病性与免疫性 主要分布于土壤中，不属于人体正常菌群。 外源性感染——化脓性感染（免疫功能低下者 特点：化脓、坏死、结节、瘘管。 对人致病诺卡氏菌属 主要有三种： 星形、豚鼠、巴西诺卡氏菌
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• （三）微生物学检查及防治原则 • 标本脓、痰 ，涂片、压片可见有革兰阳性和部分 抗酸性分枝菌丝 • 治疗：清创、磺胺药物。
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• 一、生物学性状 • （一）形态与染色： • 细长略带弯曲的杆菌，可见到分枝状，无鞭毛和芽 胞，有荚膜。 • 革兰染色阳性，但不易着色。 • 抗酸染色阳性（背景呈蓝色，菌体呈红色）显微镜 下常堆积成团、成束。 • 荧光染料金胺“O”染色，在荧光显微镜下菌体呈橘 黄色。
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抗酸染色
荧光金胺染色
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• 四、防治 • 麻风病目前尚无特异性预防方法。 • 该病防治主要依靠普查和对密切接触者定期检查。 早期发现病例，早期隔离治疗。 • 治疗药物主要有砜类、利福平、氯苯吩嗪及丙硫异 烟胺。
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第三节 放线菌属和诺卡菌属
• 厌氧性的放线菌属 • 需氧性的诺卡菌属
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• 一、放线菌属 • 放线菌是一类呈分枝状生长的原核细胞型微生物。 因其菌落呈放射状，故称为放线菌。
第十章 分枝杆菌属、放线菌属与诺卡菌属
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概述
一类细长或略弯曲、有时呈分枝状或丝状杆菌。
细胞壁含有大量的脂质，主要是分枝菌酸，一般不易着色， 经加温或延长染色时间着色后，可抵抗盐酸和酒精的脱色作用， 因而又称抗酸性杆菌。无鞭毛，无芽孢，无荚膜；革兰氏染色
阳性，对人、畜致病的分枝杆菌营养要求较特殊，在人工培养 基上生长缓慢。
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• 结核分枝杆菌诱导机体产生免疫和超敏反应的物 质不同 细胞免疫：核糖体RNA（rRNA）
超敏反应：结核菌素蛋白和蜡质D
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• (三)结核菌素试验： • 是应用结核菌素来测定机体对结核杆菌是否有细 胞免疫力及引起超敏反应的一种皮肤试验。
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• 结核菌素试剂： 1.旧结核菌素（old tuberculin,OT）。 系将结核分枝杆菌接种于甘油肉汤培养基，培养 4～8周后加热浓缩过滤制成。稀释2 000倍，每 0.1ml含5单位。 2.纯蛋白衍化物（purified protein derivative,PPD）： 人结核分枝杆菌制成的PPD-C和卡介苗制成的 BCG-PPD。每0.1ml含5单位。 目前常用后者。
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• 人类对麻风分枝杆菌产生细胞免疫，麻风患者有 不同程度的免疫功能缺陷，尤其是细胞免疫功能。 • 据调查统计95％以上的成人对麻风病有免疫力。
• 世界上曾有20多人自愿把麻风病杆菌接种到自己身上，经观察都没有 发生麻风病。证明麻风病发病率很低，并不可怕。
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• 三、微生物学检查 • 1.涂片检查：仍是目前主要的诊断方法。从患者 眶上、颚下、下颌、耳廓及鼻腔粘膜等处采集标 本，即消毒后切开表皮，深达真皮，用刀刮取组 织液作涂片，火焰固定，抗酸染色镜检。 • 2.活体组织切片：抗酸染色及病理检查。
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（三）微生物学检查 • 脓汁中可查见硫磺样颗粒(放线菌在病变部位形成 的菌落) ，将颗粒压片、镜检，可见放射状排列 的菌丝。 • 厌氧培养，37℃，培养2周以上。
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硫磺颗粒
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• 防治原则，病灶清创，大剂量青霉素较长时间治疗。 亦可用磺胺、红霉素、林可霉素等治疗。
（四）防治原则
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• 二、诺卡菌属 • （一）生物学形状 • G+丝状菌（末端不膨大），弱抗酸性。
种类：结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。致
病菌主要是结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌。
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第一节 结核分枝杆菌(M.tuberculosis)
俗称结核杆菌，本菌可侵犯全身各组织器官，但以肺 部感染最多见。
1882年由德国细菌学家柯赫发现并证明是结核病 的病原菌。
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• 世界防治结核病日：每年的3月24日。
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• （二）免疫与超敏反应： • 保护与超敏反应是“同时发生”、“伴随存在” 的，二者均为T细胞介导的结果 • 郭霍现象（Koch phenomenon） 初次感染时局部溃烂，附近淋巴结肿大，表现 为原发感染。 再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体 已有一定免疫力 但再感染时溃疡发生快，说明在产生免疫的同 时有超敏反应的参与
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临床症状：
• 全身结核中毒症状:
午后低热、乏力、夜间盗汗、消瘦、食欲不振、 妇女月经失调或闭经 • 呼吸系统症状: 咳嗽、咳痰、咯血、气短、胸痛
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• 肺部感染： 原发感染（多发生于儿童） 肺结核 原发后感染（多见于成年人）
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• 1.原发感染： 儿童多见 原发灶（肺泡渗出性炎症）
原发综合症
• 俗称麻风杆菌，引起麻风，是一种慢性传染病。 • 流行广泛，主要分布在亚、非和拉丁美洲。
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• 一、生物学特性 • 1.形态与染色： • 抗酸染色阳性，与结核分枝杆菌相似，但较结核分 枝杆菌短而粗，呈束状或成团排列，无特殊结构。 • 麻风分枝杆菌是一种典型胞内菌 –麻风细胞
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麻风分枝杆菌的抗酸染色
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（二）致病性与免疫性 • 放线菌广泛分布于自然界，主要存在于土壤中。 大多数放线菌是需氧性腐生菌，只有少数为寄生 菌，可使人和动植物致病。
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• 对人致病的主要是衣氏放线菌，它是正常人口腔等腔 道的正常菌群，在拔牙、菌群失调时引起内源性感染， 导致软组织的慢性化脓性炎症。 • 免疫：细胞免疫
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（一）生物学特性 • 放线菌具有菌丝和孢子结构。 • G+、非抗酸性丝状菌 • 培养困难，厌氧或微需氧
–硫磺样颗粒（菌落） –压片或组织切片，显微镜下可见颗粒呈菊花 状
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放线菌
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• 放线菌是抗生素主要产生菌，迄今报道8000多种抗生素 中，约80％是由放线菌产生的。 • 此外，放线菌还可用于制造维生素、酶制剂（蛋白酶、 淀粉酶、纤维素酶等）及有机酸等。 • 故放线菌与人类有密切关系，在医药工业上有重要意义。
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• (三)分离培养 • 8周出现抗酸阳性 • 阴性需继续培养至12周才可报告。
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• (四)动物试验 • 常用豚鼠 • 将集菌后的材料注射于豚鼠腹股沟皮下，3～4周 后若局部淋巴结肿大，结核菌素试验阳转，即可 进行解剖 • 观察肺、肝、淋巴结等器官有无结核病变，并作 形态、培养等检查
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豚鼠
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• • • • •
实验方法与意义： PPD5个单位 前臂屈侧皮内注射 48～72h后红、肿、硬结＞5mm者为阳性。 ≥15mm为强阳性，对临床诊断有意义。 阴性反应
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• • • •
结果分析： 阳性：感染过结核杆菌或卡介苗接种成功 强阳性：表明可能有活动性结核杆菌 阴性：未感染过结核杆菌或免疫力低下者
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• (四)变异性
• 结核分枝杆菌可发生形态、菌落、毒 力、免疫原性和耐药性等变异。 • 卡介苗（BCG）就是Calmette和 Guerin 2人（1908）将牛结核分枝杆 菌在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基 中经13年230次传代而获得的减毒活疫 苗株，现广泛用于预防接种。
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• 二、致病性
淋巴管炎
肺门淋巴结 （哑铃形阴影）
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• 转归 • 机体的免疫力增强： 大多可经纤维化和钙化而自愈。病灶内常有细菌 潜伏，刺激机体产生免疫，也可成为结核复发、 内源性感染的来源。 • 机体免疫力低下： 粟粒性肺结核；侵犯各处淋巴结、骨、关节、肾 及脑膜等部位，引起相应的结核病，全身性粟粒 性结核。
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• 2.动物接种： • 因体外人工培养尚未成功，目前可用动物接种， 进行细菌鉴定、药物筛选及治疗方法等各种研究。 • 犰狳对本菌高度易感，皮内、皮下或静脉接种后， 有40％于15个月发生进行性播散病变。
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犰狳
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• • • • •
二、致病性与免疫性 人类是唯一宿主，也是唯一传染源。 致病性 ①途径：破损皮肤黏膜、呼吸道、接触等； ②潜伏期：一般6个月～5年，长者可达20年。
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• (五)PCR快速诊断 • 多聚酶链反应（PCR）扩增技术应用于结核分枝杆 菌DNA鉴定，每ml中只需含几个细菌即可获得阳性， 且12d得出结果。 • 操作中需注意实验器材的污染问题，以免出现假 阳性。
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• 五、防治原则 • （一）预防： BCG预防结核最有效的措施 新生儿和结核菌素试验阴性的儿童接种卡介苗
• (二)培养特性 • 结核杆菌营养要求较高，必须在含有血清、卵黄、 甘油、马铃薯以及无机盐类的特殊培养基(如罗氏 培养基)上才能生长。 • 专性需氧，最适 pH6.5～6.8，本菌生长缓慢，一 般需2～4周才能长出菌落。 • 菌落呈干燥颗粒状、结节或花菜状，不透明，乳白 色或米黄色，表面粗糙，形似菜花。
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• （二）治疗： • 治疗原则：早期发现、早期治疗、联合用药彻底 治疗。 • 联合用药可减少耐药性的产生 • 抗结核药物可分为两类： 第一线药物：异烟肼、利福平、链霉素、 吡嗪酰胺、乙胺丁醇。 第二线药物：对氨基水杨酸、卡那霉素、卷曲霉 素、氧氟沙星、环丙沙星、乙硫异烟肼。
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第二节 麻风分枝杆菌 (M.leprae)
பைடு நூலகம்
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• • • •
(二)直接涂片检查 标本直接或浓缩集菌后涂片抗酸染色。 结果报告：“找到或未找到抗酸性杆菌” 不能报告“找到结核分枝杆菌”
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• • • •
浓缩集菌： 先集菌后检查，可提高检出率 脑脊液和胸、腹水可直接离心沉淀集菌 痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本需经4% NaOH处理后离心沉淀