魔鬼在于细节—CRISPR发展简史(此文很长,笔者多年拜读文献有感)

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基因编辑技术的发展历程

基因编辑技术的发展历程

基因编辑技术的发展历程Introduction科学家们在探索人体生物的基础和原因的过程中,基因编辑技术是一个重要的研究领域。

基因编辑技术通过改变DNA顺序来修改或替代一个组织或生物的遗传编码,从而影响其性状,为人类创造出重大疾病治疗方法,产生了革命性的技术突破。

I.世纪之交的早期基因编辑研究早在20世纪90年代,重组DNA技术已经开始被用于修饰基因序列,然而,直到2003年以前,基因编辑技术还未被广泛研究。

在2003年之后的一段时间里,科学家开始对基因编辑技术进行了广泛的探索和研究。

II. CRISPR技术的发现和应用在2012年的时候,CRISPR技术被首次发现,这一技术可以帮助科学家实现非常精确的基因编辑。

这个技术具有一些重要特性,比如易于使用和成本较低等特点。

在之后的几年里,科学家们利用CRISPR技术,成功实现了针对人类基因的编辑,并且使用CRISPR还实现了人类胚胎中基因编辑的颠覆性发现。

III. 基因编辑技术在治疗中的应用随着基因编辑技术不断的进化,研究人员开始探索利用这种技术来治疗一些致命的疾病,比如癌症、糖尿病、神经退行性疾病和心脏问题等。

研究人员使用基因编辑技术,成功地启动了一些临床试验,这些研究将有可能会为治疗一些疾病提供新的希望。

IV. 安全、道德和管制问题的讨论基因编辑技术的使用引发了一系列的安全、道德和管制问题的讨论。

人们开始提出一些问题,比如是否应该允许基因组编辑出现。

在许多区域里,为了确保安全性和保护道德准则,对基因编辑的使用进行了无数次的讨论和辩论。

V. 基因编辑技术的未来基因编辑技术的未来在很大程度上取决于它的技术进展。

虽然该技术已经进步了很多,但仍然有许多限制和未知因素,这些因素需要不断地研究才能得出优良的疾病治疗方案。

无论如何,这项技术不可避免地将在医学、农业和其他一些领域里继续发挥作用,为人们提供绝佳的服务。

基因编辑技术CRISPR

基因编辑技术CRISPR

基因编辑技术CRISPR基因编辑技术CRISPR(CRISPR-Cas9)是一种革命性的基因编辑工具,它在生物学和医学领域引起了巨大的轰动。

CRISPR技术的出现,为科学家们提供了一种高效、精准、便捷的基因编辑方法,极大地推动了基因研究和基因治疗领域的发展。

本文将从CRISPR技术的原理、应用领域、优势和挑战等方面进行探讨。

首先,我们来了解一下CRISPR技术的原理。

CRISPR是“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”的缩写,意为“簇状规律间隔短回文重复序列”。

CRISPR技术最初是从细菌的免疫系统中发现的一种天然防御机制,细菌利用CRISPR系统来抵御病毒入侵。

而后科学家们发现,通过改造CRISPR系统中的Cas蛋白,可以实现对特定基因的精准编辑。

CRISPR-Cas9系统由两部分组成,一部分是CRISPR序列,另一部分是Cas9蛋白。

CRISPR序列可以通过设计特定的引导RNA与Cas9蛋白结合,形成一种“剪刀”,精准地切割目标基因的特定位置,从而实现基因的修饰、插入或删除。

基因编辑技术CRISPR在各个领域都有着广泛的应用。

在基础科学研究领域,CRISPR技术被广泛应用于模拟疾病模型、研究基因功能等方面。

通过CRISPR技术,科学家们可以精准地编辑细胞或生物体中的特定基因,从而揭示基因与生理过程之间的关系。

在农业领域,CRISPR技术被用于改良作物品种,提高作物的产量、抗病性和适应性。

通过编辑作物基因,可以使作物具有更好的抗逆性和品质,为粮食生产提供新的途径。

在医学领域,CRISPR技术被应用于基因治疗、疾病诊断和药物研发等方面。

通过CRISPR技术,科学家们可以修复患者体内存在的基因缺陷,治疗一些遗传性疾病,为个性化医疗提供可能。

相比传统的基因编辑技术,CRISPR具有许多优势。

首先,CRISPR技术操作简单,成本低廉,不需要复杂的设备和技术条件,普及性强。

CRISPR技术的进展与未来展望

CRISPR技术的进展与未来展望

CRISPR技术的进展与未来展望近年来,CRISPR技术成为了生命科学领域的热点话题。

CRISPR是一种基因编辑技术,能够精确地改变DNA序列。

它的诞生标志着生命科学领域的一个巨大飞跃,对疾病治疗、新药开发等有着深远的影响。

本文将探讨CRISPR技术的进展与未来展望。

一、CRISPR技术的背景CRISPR技术源于自然界中细菌免疫系统的一种特殊机制,可将外来病毒基因特异性地剪切并摧毁。

如何将这一机制应用到人类基因领域,则是CRISPR首要面临的问题。

许多科学家在CRISPR上投入了大量时间和精力,致力于寻找新的方法和实践,以便能更好地应用CRISPR技术。

人们解锁了生命科学的新奥秘,启动了新的基因编辑革命的源头。

二、CRISPR技术的进展CRISPR技术的进展无处不在。

截至目前,全球已经有超过50个国家和地区的400多家学术机构和企业,开展了与CRISPR相关的科研工作。

下面,将从四个方面进行具体阐述。

1、基因诊断CRISPR技术可用于诊断基因突变等人类基因缺陷。

科研人员可以通过不到10美元的成本检测千兆碱基,并对其进行编辑。

CRISPR技术在基因诊断领域可谓是一个巨大的进展,有望缩短疾病的初期诊断时间。

2、基因治疗基因治疗是指通过基因编辑技术,对特定基因进行修正或加工,从而治疗一系列人类疾病。

CRISPR技术的出现使得基因治疗成为可能。

一些重大的疾病,比如癌症,可以被CRISPR技术治愈。

3、农业科技CRISPR技术在农业科技领域也有着有捷径的应用。

通过改变植物的基因,可以使其生长更快更健康,从而提高农业产量。

这对解决全球日趋严重的食品短缺问题是非常重要的。

4、新药开发新药的开发需要花费巨额的时间和成本。

CRISPR技术的出现为新药的开发带来了新的思考方式。

CRISPR技术可以帮助科学家更好地理解疾病发病机理,从而研发出更安全有效的药物。

三、CRISPR技术的未来展望CRISPR技术创造了一种全新的生命科学生态系统。

CRISPR简述

CRISPR简述

CRISPR简述1、CRISPR 研究历史1987 年,日本课题组Ishino Y等在K12 大肠杆菌的碱性磷酸酶基因附近发现串联间隔重复序列,随后的研究发现这种间隔重复序列广泛存在于细菌和古细菌的基因组中,2002 年,Jansen等将其将其正式命名为clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR).2007 年,Barrangou 等首次发现并证明细菌可能利用CRSPR 系统对抵抗噬菌体入侵.2008 年,Marraffini 等又发现细菌CRISPR 系统能阻止外源质粒的转移。

2013 年初,CRISPR/Cas9介导的基因组定点编辑技术出现。

2、CRISPR的分布与分类已测序的接近90%的古细菌和40%的细菌的基因组或是质粒中至少存在一个CRISPR 基因座。

根据Cas 基因核心元件序列的不同, CRISPR/Cas 免疫系统被分为3 种类型:Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。

Ⅰ型和Ⅲ型CRISPR/Cas 免疫系统需要多个Cas 蛋白形成复合体切割DNA 双链, 而Ⅱ型CRISPR/Cas 免疫系统只需要一个Cas9 蛋白来切割DNA 双链,目前Ⅱ型系统是被改造的最为成功的人工核酸酶。

3、CRISPR 位点结构CRISPR系统通常包括: 由不连续的重复序列(repeats,R) 与长度相似的间区序列( spacers,S) 间隔排列而成的CRISPR 簇,前导序列( Leader,L) 以及一系列CRISPR 相关蛋白基因(cas) 。

前导区一般是处于CRISPR位点上游由300bp~500bp 碱基组成的一个AT 富集的区域。

这个区域一般来说在种内是比较保守的但在种间却有显著的差异。

重复序列一般由23bp-50bp的碱基组成, 其平均长度在31bp左右。

间区由17bp-84bp 碱基组成平均长度在36bp左右。

4、CRISPR/Cas 作用机制对于CRISPR/Cas 的作用机理可以分为三个阶段来理解,第一是CRISPR 的高度可变的间隔区的获得,第二是CRIPSR 基因座的表达(包括转录和转录后的成熟加工),第三是CRISPR/Cas 系统活性的发挥或者是对外源遗传物质的干扰。

CRISPRCas9:基因编辑的历史与发展

CRISPRCas9:基因编辑的历史与发展

CRISPRCas9:基因编辑的历史与发展CRISPR/Cas系统是细菌和古菌特有的一种天然防御系统,用于抵抗病毒或外源性质粒的侵害。

当外源基因入侵时,该防御系统的CRISPR 序列会表达与入侵基因组序列相识别的RNA,然后CRISPR 相关酶(Cas)在序列识别处切割外源基因组DNA,从而达到防御目的。

根据Cas蛋白的特点,可将CRISPR/Cas系统分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。

Ⅰ型和Ⅲ型系统需要借助复杂的蛋白复合体发挥作用,Ⅱ型系统仅借助Cas9蛋白和sgRNA即可对靶目标进行编辑,结构简单,操作容易,因此目前主要使用Ⅱ型CRISPR/Cas9 系统。

CRISPR/Cas自诞生以来,迅速发展,已经成为生命科学领域最耀眼、最有前景的技术。

尤其是近两年,在全世界科学家的共同努力下,CRISPR/Cas相关新进展新突破不断涌现。

一、基因编辑技术的发展史基因编辑可以分为三代,第一代:ZFN;第二代:TELEN;第三代:CRISPR/Cas。

这三个基因编辑技术都利用了DNA修复机制,所以我们先来了解一下DNA修复机制(图1)。

图1-NHEJ修复(左),HDR修复(右)NHEJ(Non-homologous end joining)非同源性末端接合NHEJ修复机制不需要任何模版,修复蛋白直接将双股裂断的DNA末端彼此拉近,在DNA连接酶的帮助下重新接合(图1)。

HDR(Homology directed repair)同源重组修复当细胞核内存在与损伤DNA同源的DNA片段时,HDR才能发生。

NHEJ的机制简单又不依靠模版,因而NHEJ的活性相对于HDR 高出许多。

但NHEJ修复出错的概率较高,容易造成移码突变等,基因编辑正是利用了这一点(图1)。

1.ZFN的识别切割机制融合锌指模块和FokI切割结构域形成ZFN ;以二聚体的形式靶向切割每个锌指结构;特异识别3个碱基;组装多个锌指结构(识别12-18bp)形成的ZFN对可特异切割基因组靶点(图2)。

基因编辑技术CRISPR的突破与发展

基因编辑技术CRISPR的突破与发展

基因编辑技术CRISPR的突破与发展在过去的几十年里,生物技术的发展让科学家们对基因编辑技术充满了希望。

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种基因编辑工具,它的价值在于它让我们得以更加精确、快捷地对基因进行编辑。

自从2012年科学家发现CRISPR后,CRISPR技术便成为了生命科学中非常热门的话题。

本文将深入探讨CRISPR技术的突破和发展。

1. CRISPR的原理CRISPR是一种基因编辑技术,它能够精确地更改或切除基因。

CRISPR技术利用CRISPR-Cas9复合物,这种复合物包含了一个叫做Cas9的酶和一条RNA,这条RNA可以识别和与DNA上的特定序列配对。

当RNA和DNA配对后,Cas9酶就会在这个位置上切断DNA,从而实现对基因的编辑。

2. CRISPR的突破CRISPR技术的突破主要在于它的高效性、精准度和可控性。

首先,CRISPR技术的高效性使得科学家们可以在短时间内快速地更改大量基因。

这让CRISPR成为了生物技术领域中的一股强大势力。

其次,CRISPR技术的精准度非常高,这让科学家们可以更加准确地编辑目标基因,从而得到更加精确的结果。

最后,CRISPR技术的可控性也非常重要。

科学家们可以利用CRISPR技术来控制基因组中的多个环节,这里所说的环节包括转录、翻译和miRNA制造等。

3. CRISPR在医学方面的应用基因编辑技术对于医学领域的发展是非常有益的。

CRISPR技术通过编辑人类基因,可以治疗一些遗传病,比如丙肝病毒感染、糖尿病等疾病,这些疾病目前还没有治愈的方法。

同时,CRISPR技术还可以用于癌症的治疗。

基因编辑技术使得癌症治疗变得更加个性化且有效。

另外,CRISPR技术还可以在生殖领域使用,帮助夫妇解决一些不孕不育的问题。

4. CRISPR的未来展望CRISPR技术可以被认为是生命科学领域的新奇和革命性技术。

CRISPR基因编辑技术的发展及其应用

CRISPR基因编辑技术的发展及其应用

CRISPR基因编辑技术的发展及其应用随着科技的不断进步,CRISPR基因编辑技术已经成为了当今科学领域最重要的技术之一。

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种通过CRISPR-Cas系统实现精确切割DNA的技术,它可以实现人工修改基因,制造与改良生命体,对疾病进行剖析及治疗等多种应用。

CRISPR基因编辑技术的发展历程CRISPR核酸干扰系统最早是由瑞典乌普萨拉大学的Jennifer Doudna和美国加州大学伯克利分校的Emmanuelle Charpentier两位科学家于2012年发明的。

这项技术之后不断得以提高完善,引起了全球科学家的高度关注。

2015年,CRISPR-Cas9基因编辑技术作为《科学》杂志的年度重大突破并获得了诺贝尔奖的提名。

极高的关注度,使得CRISPR 技术得到了广泛的应用并不断发展。

现如今,CRISPR技术在基因研究领域得到了广泛应用,对人类的健康与未来发展将起到越来越重要的作用。

CRISPR基因编辑技术的应用1. 治疗人类疾病。

CRISPR-Cas9技术为治疗一些传染病、遗传病和癌症等疾病提供了新的解决方案。

相比传统医疗,CRISPR基因编辑技术不仅可以精准、快速地找到基因的问题,更能通过定制药物针对一些特定的基因突变进行治疗。

2. 农业领域的改良。

CRISPR技术可以用于设计更均匀、健康和耐旱的植物,帮助提高农作物的产量。

此外,还可以通过调制部分基因使得食品更加优秀、更健康。

3. 基因研究的新突破。

CRISPR基因编辑技术不仅可以揭示基因的遗传与动力学和机制,还可以通过精确定位的方式清晰展示出基因的分离和功能。

CRISPR技术的优势相比传统的基因治疗技术,CRISPR基因编辑技术具有以下优点:1. 更加高效。

CRISPR技术是一种非常精确的技术,能够在很短的时间内完成基因编辑,精度可以达到90%以上。

CRISPR基因编辑技术的发展与未来方向

CRISPR基因编辑技术的发展与未来方向

CRISPR基因编辑技术的发展与未来方向CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)系统是一种基因编辑技术,可通过切掉不需要的基因序列然后插入新的序列来修改细胞基因组。

该技术的发明者被授予了2018年的诺贝尔化学奖,其重大贡献是使基因编辑变得更加简洁、直接和高效,有望在医学领域产生革命性影响。

本文将介绍CRISPR技术的背景、发展历程和应用前景,分析这一技术所面临的挑战和未来发展方向。

一、CRISPR技术的背景和发展历程CRISPR系统是一种细菌天然的免疫系统,由CRISPR序列和Cas蛋白组成。

CRISPR序列是由短重复序列和间隔序列组成的一种特殊的DNA序列,类似于免疫记忆系统。

细菌在面对病毒感染时,将病毒DNA切割并保存在CRISPR序列中,以便以后抵抗相似病毒感染。

这使得CRISPR/Cas系统在生物学领域具有巨大的潜力,因为它提供了一种可以定向切割和编辑基因组的方式。

CRISPR技术的发展历程可以追溯到1987年,当时位于日本的研究团队首次发现了CRISPR系统。

2007年,慕尼黑工业大学的研究员Sylvia Spengler成功提取了CRISPR序列中的RNA,并与微生物遗传学家Emmanuelle Charpentier合作,探究了这种RNA 的功能。

2011年,Emmanuelle Charpentier和Jenniffer Doudna在Nature上发表了一篇名为“CRISPR-Cas:一种基于RNA导引的细菌免疫系统”的文章,揭示了CRISPR/Cas系统的本质和作用。

此后,有很多科学家和公司开始发展CRISPR技术,并应用于不同的生物领域。

2018年,Emmanuelle Charpentier和Jennifer Doudna 因CRISPR技术的发明被授予了诺贝尔化学奖。

二、CRISPR技术的应用前景CRISPR技术拥有令人兴奋的应用前景,可以用于精准医疗、农业生产和环境修复等领域。

基因编辑技术CRISPR

基因编辑技术CRISPR

基因编辑技术CRISPR在21世纪的科学舞台上,一个名为CRISPR的基因编辑技术如同一颗耀眼的新星迅速升起,它不仅为生物学研究带来了革命性的突破,更在医学、农业等领域展现出广泛的应用潜力。

本文旨在深入探讨CRISPR技术的原理、发展及其对未来的影响。

CRISPR技术的基本原理CRISPR,全称为“Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats”,即规律成簇的短回文重复序列,是一种源自细菌的自然防御系统。

科学家们发现,通过改造这一系统,可以精确地定位并编辑生物体内的特定基因序列。

CRISPR系统的核心是指导RNA(gRNA)和Cas蛋白。

gRNA能够识别目标DNA序列并与之结合,而Cas蛋白则负责切割DNA。

一旦目标DNA被切割,细胞会试图修复这一损伤,但在修复过程中可能会引入错误,从而实现对基因的编辑。

CRISPR技术的发展与应用自2012年首次应用于哺乳动物细胞以来,CRISPR技术经历了飞速的发展。

它不仅简化了基因编辑的流程,降低了成本,还提高了编辑的准确性和效率。

在医学领域,CRISPR技术被用于研究遗传疾病的治疗,如通过编辑致病基因来治疗某些类型的遗传性失明和血液疾病。

此外,它还在癌症治疗、免疫疗法等方面展现出巨大潜力。

在农业方面,通过CRISPR技术改良作物,可以提高作物的抗病性和产量,同时减少农药的使用,对环境保护也大有裨益。

CRISPR技术的挑战与未来尽管CRISPR技术充满希望,但它也面临着伦理和安全上的挑战。

如何确保技术的安全性、避免滥用以及如何处理由此引发的社会伦理问题,都是亟待解决的难题。

未来,随着研究的深入和技术的完善,CRISPR有望在更多领域发挥其独特的优势。

同时,全球科学家和政策制定者需要共同努力,建立相应的规范和监管机制,确保这项技术的健康和可持续发展。

结语CRISPR技术作为一种革命性的基因编辑工具,正引领着生命科学进入一个全新的时代。

基因编辑技术CRISPR的进展与挑战

基因编辑技术CRISPR的进展与挑战

基因编辑技术CRISPR的进展与挑战基因编辑技术 CRISPR的进展与挑战近年来,基因编辑技术CRISPR在生物领域引起了巨大的关注。

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种发现于细菌体系中的基因编辑技术,其独特的编辑方式引起了科学家们的兴趣。

随着研究的深入,CRISPR的应用领域越来越广泛,但同时也面临着一些挑战和争议。

本文将介绍CRISPR技术的发展历程、应用范围以及相关的伦理问题等方面。

一、CRISPR技术的发展历程CRISPR技术早在20世纪80年代便有人开始进行相关的研究,但直到21世纪初,这项技术才被正式命名。

随着技术的逐步成熟,CRISPR在生物界中利用基因编辑成为焦点话题。

最早的CRISPR技术主要是基于受到病毒感染的细菌中发现的受体和酶的相结合,使用Cas9基因切割和编辑特定的序列。

2015年,科学家对CRISPR时新的一种研究方法(Cas13等)的研究成果更是给CRISPR技术顶赌了崭新的局面。

1.医学领域CRISPR的应用极其广泛,一个很好的案例就是应用于医学领域。

CRISPR细胞编辑技术可以用于治疗一系列与基因相关的疾病,包括帕金森氏症、白化病等严重疾病。

CRISPR技术还可以通过临床试验来定位人体中不好的基因并进行修复,从而减少疾病的发生。

例如,将CRISPR技术应用于对乳腺癌细胞进行基因疗法治疗,能够抑制肿瘤生长,减少化疗剂的多余损伤。

2.农业领域除了医学领域,CRISPR技术的应用还可延伸至农业领域。

借助于该项新的基因编辑技术,我们能够提高食物的产量,改进其品质,减少对外部环境的脆弱度。

CRISPR技术在植物基因编辑方面的应用尤为显著,它在不改变食品味道和品质的前提下,使得新的品种具有明显的生长优势,扩大了丰收的规模和深度,可促进食品科技的进步和生产的持续性。

随着对CRISPR的应用研究的不断深入,也出现了一些潜在的风险和挑战。

基因编辑技术CRISPR介绍

基因编辑技术CRISPR介绍

基因编辑技术CRISPR介绍基因编辑技术近年来在生物医学领域引起了巨大的关注和研究热潮。

尤其是CRISPR-Cas9系统的出现,使得科学家们得以精确、高效地进行基因组编辑。

这项技术不仅为基础研究提供了新手段,还在农业生物技术、医药开发以及治疗遗传病等方面展现出光明的应用前景。

本文将深入探讨CRISPR技术的原理、发展历程、应用实例以及面临的挑战。

CRISPR技术基本原理CRISPR(Clustered Regularly Interspaced ShortPalindromic Repeats)是一种在细菌免疫体系中发现的特征结构,它使细菌能够识别并抵御病毒入侵。

CRISPR系统通常与Cas(CRISPR-associated)蛋白结合,共同形成一种强大的基因组编辑工具。

CRISPR/Cas9系统的工作原理可分为几个步骤:导向RNA的设计科学家首先设计一段与目标DNA序列互补的导向RNA(gRNA)。

这一过程至关重要,因为gRNA决定了Cas9蛋白能够切割的具体位置。

Cas9蛋白活化导向RNA与Cas9蛋白结合,形成一个功能复合体。

当该复合体进入细胞后,gRNA会引导Cas9蛋白定位到特定的DNA序列。

DNA双链切割当Cas9定位到特定DNA序列后,它会切割该位点,形成一个双链断裂。

这一过程在遗传操作中是非常关键的一步。

DNA修复细胞会通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)机制修复这些断裂。

在修复过程中,科学家可以插入、删除或替换特定的DNA序列,以实现基因编辑的目的。

CRISPR技术的发展历程CRISPR技术虽然发展较快,但其起源可以追溯到数十年前。

最早的CRISPR系统是在1987年由日本科学家横山隆一首次发现。

但直到2012年,Jennifer Doudna和Emmanuelle Charpentier利用该系统成功实现了在体外对DNA进行精确编辑,标志着CRISPR-Cas9时代的来临。

CRISPR技术:基因编辑的里程碑突破

CRISPR技术:基因编辑的里程碑突破

CRISPR技术:基因编辑的里程碑突破在探索生命奥秘的科学征途上,基因编辑技术尤其是CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)的发展无疑是一块里程碑。

近年来,这一领域取得的科学进展不仅令科研界瞩目,更让整个人类对遗传病治疗、物种改良乃至人类自身未来的想象空间大大扩展。

CRISPR技术的基本原理源于细菌的一种天然免疫机制,它们通过CRISPR序列存储病毒DNA片段,当同样病毒再次入侵时,能够快速识别并剪切掉这些外来基因。

科学家们借鉴这一原理,开发出可以精确定位和修改真核生物基因组特定位点的技术。

与传统的基因工程技术相比,CRISPR操作简便、成本低廉且效率高,被誉为“基因剪刀”。

随着研究的深入,CRISPR技术不断升级和完善。

从最初的CRISPR-Cas9系统到现在多种变体的出现,如高保真Cas9变体和Cas12、Cas13、Cas14等新系统的发现,使得基因编辑工具箱更加丰富多样。

这些新型Cas蛋白拓展了CRISPR技术的应用范围,提高了编辑的精准度和选择性,降低了脱靶效应。

除了基础研究,CRISPR技术在临床应用方面也取得了显著成就。

针对一些遗传性疾病,如镰状细胞贫血、地中海贫血等,CRISPR已经开展了早期的临床试验。

科学家们正尝试通过修正患者体内的错误基因来治疗这些疾病,尽管还面临着伦理和技术上的诸多挑战,但初步成果令人鼓舞。

在农业领域,CRISPR技术被用来培育新的作物品种,提高作物的抗病虫害能力和适应性。

例如,通过编辑水稻的某些关键基因,可以使其具有更强的抗旱性或更高的产量。

同样,在动物育种中,CRISPR也展现出巨大的潜力,科学家已成功利用该技术改良牲畜的一些性状,这对于提高食品安全和可持续性具有重要意义。

当然,CRISPR技术的发展也引发了关于伦理和社会影响的广泛讨论。

如何平衡技术进步与伦理道德的边界,如何确保这项技术惠及而非伤害人类社会,是我们必须面对的问题。

CRISPR技术的发展历程及其应用前景

CRISPR技术的发展历程及其应用前景

CRISPR技术的发展历程及其应用前景人类基因计划的完成引发了科学技术的革命,越来越多的科学家开始思考如何将基因组编辑技术应用于实际。

CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种在细菌免疫系统中发现的DNA序列,可以被人工复制和重新搭建,修改目标基因组。

CRISPR技术的发展历程及其应用前景备受关注。

一、CRISPR技术的历史2002年,西班牙研究人员Francisco Mojica发现了一种存在于细菌中的神奇DNA序列,这个DNA序列有一种特殊的能力——它可以存储病毒攻击的记忆,并在将来的攻击中保护细菌免于病毒侵袭。

研究人员将这种DNA序列命名为CRISPR。

2007年,法国研究人员Emmanuelle Charpentier开始研究CRISPR的机制,她和美国研究人员Jennifer Doudna一起发现了细菌抵御病毒侵袭的能力便是一种基于CRISPR的“基因剪刀”。

2012年,研究人员成功地将脱氧核糖核酸(DNA)'修剪'为CRISPR段与特定DNA梯度的DNA评估。

这个过程被称为“CRISPR基因组编辑”,并且以巨大的速度在全球范围内被广泛采用,而科学家也赢得了年度突破奖和洛克菲勒综合癌症中心的一份重要奖项。

二、CRISPR的应用领域1、医学CRISPR技术的应用最为广泛的领域便是基因治疗和癌症研究。

如在2014年,美国密歇根州立大学研究团队利用CRISPR技术对乳腺癌的晚期肿瘤进行了治疗,成功地使肿瘤体积缩小了50%。

这项研究意味着所有类型的癌症治疗可能都潜伏着发展的可能性,在未来被治愈的故事为数不多的患者中,这项研究将为他们掀起崭新的希望。

2、农业高产量的作物、高效的养殖业、恢复生态平衡等方面都需要CRISPR技术。

CRISPR作为一种基因编辑技术,可以改变特定物种的表现形态、表达模式和发育特征等,因此CRISPR已经被广泛应用到改进植物品种、获得更好的产量和提高作物对环境变化的抵抗力等方面。

基因编辑技术CRISPR的原理和进展

基因编辑技术CRISPR的原理和进展

基因编辑技术CRISPR的原理和进展CRISPR基因编辑技术:原理与进展随着人类社会的不断发展,科学技术也不断进步,生物学领域的一些新技术将为人类带来巨大的福祉。

CRISPR基因编辑技术就是其中之一,它被誉为“基因编辑的黄金时代”,在通过改变个体基因的方法方面迈出了巨大一步。

本文将主要介绍CRISPR基因编辑技术的原理及其发展的前景。

一、CRISPR基因编辑技术的原理CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一种吸收外源DNA到自身DNA以提高免疫反应能力的天然防御机制。

它是一种抵抗细菌病毒感染的机制,通过复制病毒RNA序列、嵌入到特定的DNA序列CRISPR-DNA中,同时与“Cas蛋白”一起,将嵌入序列的RNA与病毒RNA序列比对,最后引发病毒RNA的降解。

基于这种机制,科学家发现了CRISPR-Cas系统可以用来编辑细菌和真核生物的基因。

CRISPR-Cas9是其中最常用的一种版本,它由“Cas9”蛋白质和“gRNA”组成。

gRNA是人工合成的一段RNA序列,与目标基因中一个特定序列互补,这个序列通常是在蛋白质编码区中下游的一段DNA,即为PAM序列。

Cas9蛋白是一种”核酸酶“,具有精确切割基因组DNA双链的功能。

在CRISPR-Cas9工作原理中,gRNA与Cas9相结合,找到目标基因,并在PAM序列切断目标基因的DNA链。

细胞再利用其自身的DNA修复能力修复切断的DNA片段,从而实现对目标基因的精确编辑。

二、CRISPR基因编辑技术的进展CRISPR基因编辑技术在生物学的应用上有很多潜力,比如在生产环节中的农业、饲料工业等方面。

同时,CrISPR也在医学研究上得到了广泛的应用,治疗人类一些难以根治的疾病。

e.g.:1. 建立针对癌症的基因治疗- 通过CRISPR技术可以改变癌细胞的基因序列,从而遏制癌细胞的恶性生长。

基因编辑技术CRISPR介绍

基因编辑技术CRISPR介绍

基因编辑技术CRISPR介绍基因编辑技术是一种革命性的生物技术,可以精准地修改生物体的基因组,对于基因疾病的治疗、农业育种、生物学研究等领域具有重要意义。

其中,CRISPR-Cas9系统作为一种高效、简便且精准的基因编辑工具,受到了广泛关注和应用。

本文将介绍基因编辑技术CRISPR的原理、应用和未来发展方向。

一、CRISPR的原理CRISPR是Clustered Regularly Interspaced ShortPalindromic Repeats的缩写,即“簇状规律间隔短回文重复序列”。

CRISPR-Cas9系统是一种天然存在于细菌和古细菌中的免疫系统,用于抵御病毒侵袭。

通过对CRISPR-Cas9系统的改造和利用,科学家们成功将其应用于基因编辑领域。

CRISPR-Cas9系统主要由两部分组成:CRISPR RNA(crRNA)和Cas9蛋白。

crRNA是一种短RNA序列,可以与目标基因的特定序列互补配对,指导Cas9蛋白精准地切割DNA链。

Cas9蛋白则具有内切酶活性,能够在目标基因的特定位置引发双链断裂。

在细胞修复过程中,可以通过非同源末端连接或同源重组等机制实现基因组的修复和编辑。

二、CRISPR的应用1. 基因治疗:CRISPR技术可以用于治疗遗传疾病,例如囊性纤维化、遗传性失明等。

科学家们可以通过CRISPR-Cas9系统修复患者基因组中的突变位点,恢复正常基因功能,从而治愈疾病。

2. 农业育种:CRISPR技术可以用于改良作物品种,提高作物的产量、抗病性和适应性。

通过精准编辑作物基因组中的关键基因,可以培育出更具优势的农作物品种,为粮食生产提供新的途径。

3. 生物学研究:CRISPR技术在生物学研究中有着广泛的应用。

科学家们可以利用CRISPR-Cas9系统对细胞中的特定基因进行靶向编辑,研究基因在生物体内的功能和调控机制,探索生命的奥秘。

三、CRISPR的未来发展方向随着基因编辑技术的不断发展,CRISPR在未来有着广阔的应用前景。

基因编辑技术发展历史

基因编辑技术发展历史

基因编辑技术发展历史1. 基因编辑的起源基因编辑这项技术,听起来有点科幻,对吧?但是,它的历史其实并没有那么遥远。

最早可以追溯到上世纪70年代,当时科学家们开始探索DNA的奥秘。

想象一下,那时的实验室里,一群身穿白大褂的科学家,手忙脚乱地对着试管和显微镜,简直像是拍科幻片。

这个时候,科学家们发现了一种叫做限制性酶的东西,这东西就像是DNA的剪刀,能在特定的位置剪断DNA链。

于是,基因编辑的种子就这样悄悄种下了。

1.1 CRISPR的崛起时间到了2012年,事情开始变得更有趣。

科学家们偶然发现了一种叫做CRISPR的系统,哇,这可真是个大新闻!CRISPR可以说是大自然给我们开的一扇窗,简单而又强大。

它就像是一个聪明的拼图师,能精准地把想要的基因插入或删除,效果杠杠的。

想要改进农作物,抵御病虫害?没问题!想要治疗遗传疾病?也能搞定!这时候,大家开始意识到基因编辑的潜力,兴奋得像孩子过年一样。

1.2 技术的飞速发展接下来的几年里,基因编辑技术突飞猛进,各种工具和方法层出不穷。

研究者们纷纷投入到这场“基因革命”中。

有的人甚至开始幻想未来:孩子生下来就能选择眼睛颜色,或者运动天赋,简直是梦想成真。

可别小看这项技术,它不仅在医学上大显身手,在农业、环境保护等方面也都有着极大的应用潜力。

2. 应用与挑战不过,技术飞速发展固然好,但随之而来的伦理问题也让人捏了一把汗。

想象一下,如果基因编辑技术被滥用,那可就麻烦了。

大家开始讨论:到底什么才是合理的应用?比如,增强人的智力和体能,这听起来不错,但万一弄巧成拗,搞成了基因歧视,那可就糟糕了。

像是“棋逢对手”,科学家和伦理学家们开始争论,甚至有时候还掀起一阵激烈的舌战。

2.1 治疗与风险在医学上,基因编辑带来了许多希望,比如针对一些遗传病的治疗。

可是,谁也不能保证这技术绝对安全。

试想一下,若在治疗过程中出现意外,那后果可不是闹着玩的。

科学家们也明白这一点,因此他们一直在努力进行更深入的研究,力求让这项技术既安全又有效。

CRISPR基因编辑技术的发展与应用

CRISPR基因编辑技术的发展与应用

CRISPR基因编辑技术的发展与应用引言随着科学技术的日益进步,基因编辑技术也逐渐成为创新医疗领域中备受瞩目的重要领域之一。

其中,CRISPR基因编辑技术以其高效、低成本和广泛应用的特点,在短时间内迅速崭露头角。

本文将介绍CRISPR基因编辑技术的历史背景、原理、发展过程以及当前的应用情况。

I. CRISPR基因编辑技术的历史背景CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)最初被发现于细菌和古菌中,并被认为是一种免疫系统来抵御外来DNA入侵。

2012年,美国麻省理工学院和哈佛大学联合团队首次利用CRISPR系统实现了在人类细胞中进行精确的基因编辑。

这项突破性工作开辟了人类在遗传学领域实施精准治疗的全新途径。

II. CRISPR基因编辑技术的原理与方法CRISPR-Cas9系统由两部分组成:Cas9蛋白质和特定的单导RNA(sgRNA)。

Cas9蛋白质具有端粘性内切酶活性,而sgRNA则通过与目标DNA序列部分互补来确定编辑的靶位点。

一旦CRISPR系统被送入细胞,Cas9将与sgRNA结合并形成复合物,找到和结合在相应位点上的目标DNA,并通过Cas9的内切作用对其进行裁剪。

随后,细胞自身修复机制介入并通过非同源末端连接或同源重组等方式修复切割部位。

III. CRISPR基因编辑技术的发展过程自CRISPR-Cas9技术问世以来,科学家们积极探索其在基因编辑领域的潜力和应用范围。

迅速紧随其后的是一系列关键性改进,例如使用更小、更简化的启动子来驱动CRISPR系统、开发新型载体提高递送效率,并通过对Cas9蛋白质进行突变以减少非特异性切割等策略。

这些改进不仅使得CRISPR系统更加灵活可控,还提高了编辑效率和安全性。

IV. CRISPR基因编辑技术的现有应用1. 疾病治疗CRISPR基因编辑技术在疾病治疗方面具有巨大潜力。

CRISPR基因编辑技术的发展历程与未来展望

CRISPR基因编辑技术的发展历程与未来展望

CRISPR基因编辑技术的发展历程与未来展望在人类历史的长河中,人们对基因的探索从未间断。

几百年前的人们对基因并没有太多了解,他们所能看到的只是基因带给我们的一些生理或行为特征。

因此,人类对基因的认知和了解也需要勇气和耐心,并且是一个不断发展和深化的过程。

正是在这样的背景下,CRISPR基因编辑技术就应运而生,并在过去的几年里得到了迅猛的发展。

本文将重点围绕CRISPR技术的历程与未来展望展开论述。

一、CRISPR技术的发现历程CRISPR,即Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats, 是一种源自细菌的基因组免疫系统,早在1970年代中期就被发现了。

但是,直至2012年,CRISPR才迅速发展为基因编辑领域最具潜力的工具之一。

2012年夏天,Emmanuelle Charpentier和Jennifer Doudna两位女性科学家共同发表了一篇研究论文,题为《A programmable dual-RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity》。

这篇论文详细地描述了一种新型的基因编辑技术:CRISPR-Cas9,这种技术牵涉到两个主要组件:Cas9蛋白质和RNA获向分子。

那么这两个组件是如何协同工作的呢?简单来说,RNA获向分子会定向识别特定的DNA序列,然后通过桥接Cas9蛋白质与该目标序列,从而让Cas9蛋白质对目标序列进行切割。

这种方式可以通过修改RNA获向分子的序列来改变基因的DNA顺序,从而实现对基因的编辑。

这篇论文的发表引起了全球的轰动,相信科学史上也会记载下这个不可多得的时刻。

这项技术的可塑性和精度使其成为基因编辑的瑰宝。

而这也被认为是谷歌在2013年选择Doudna教授作为“谷歌学者”奖一项基础研究的原因之一。

二、CRISPR技术的应用领域自从CRISPR技术被发现后,科学家们就开始探索其不同的应用领域。

初二生物基因编辑技术发展历程

初二生物基因编辑技术发展历程

初二生物基因编辑技术发展历程基因编辑技术是一种能够改变生物体遗传信息的革命性技术。

通过精确修饰生物体的基因组,基因编辑技术有望治愈遗传性疾病、提高农作物产量以及解决许多其他生物学问题。

本文将探讨初二生物基因编辑技术的发展历程。

一、发现基因编辑技术的奠基基因编辑技术的奠基可以追溯到1990年代。

科学家发现了CRISPR-Cas9系统,这是一种在细菌中起到免疫功能的基因编辑工具。

CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)是一类短重复序列,而Cas9则是一种能够剪接DNA的酶。

科学家们意识到这个系统的潜力,开始探索将其用于动物和植物的基因编辑。

二、CRISPR-Cas9技术的应用广泛化随着科学家们的不断研究和改进,CRISPR-Cas9技术在基因编辑领域的应用逐渐广泛化。

科学家们发现,通过将Cas9酶与一段特定的RNA序列结合,可以精确地定位到基因组中的特定位置,并进行精确的DNA修饰。

这种技术使得基因编辑过程更加简单和高效。

三、基因编辑技术在遗传疾病治疗中的应用基因编辑技术为遗传性疾病的治疗带来了新的希望。

通过CRISPR-Cas9技术,科学家们可以准确地修复基因组中的突变,从而治愈某些遗传性疾病。

此外,基因编辑技术还可以用来研究疾病的发生机制,为疾病的治疗方法提供新的思路和途径。

四、基因编辑技术在农作物改良中的应用基因编辑技术也被广泛地用于农作物的改良。

通过编辑农作物的基因组,科学家们可以使其具有更好的抗病性、耐旱性和耐盐性等特性。

这样可以提高农作物的产量和质量,从而解决全球粮食安全问题。

五、伦理和安全问题然而,随着基因编辑技术的发展,也带来了一些伦理和安全问题。

在人类基因编辑领域,科学家们必须面对伦理和法律的考虑,确保技术的安全性和可行性。

此外,对于农作物基因编辑技术的使用,也要注意环境和食品安全等问题,避免不良影响。

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魔鬼在于细节—CRISPR发展简史(此文很长,笔者多年拜读文献有感)订阅号APExBIO美国时间2018年9月10日,美国联邦巡回上诉法院(CAFC)发布了一项重磅裁定,维持美国专利审判与上诉委员会(PTAB)的判决,将CRISPR基因组编辑专利授予隶属于哈佛大学与麻省理工学院的Broad 研究所。

美国专利及商标局宣布Broad研究所继续保有2014年获批的CRISPR-Cas9应用专利。

2017年2月15日,PTAB曾作出关键裁决,将CRISPR-Cas9基因编辑专利判定给张锋及Broad 研究所。

这意味着这项革命性的基因编辑工具的专利之争基本上尘埃落定。

自2012年CRISPR基因编辑技术横空出世以来,各路科研“豪杰”争相应用和发展该技术。

随着CRISPR系统趋于成熟,这一技术不再是简单的学术共享,谁拥有革命性基因编辑技术专利权的战争也出现了。

打官司的两方是美国加州大学伯克利分校生物学家Jennifer Doudna团队和美国哈佛大学-麻省理工学院Broad 研究所张锋团队。

CRISPR诞生将近6年,其中的发展过程曲曲折折。

虽然这项判决再次将Jennifer Doudna团队打入寒冬,但我们心里都清楚CRISPR基因编辑系统发展到今时今日所带来的影响,绝非是一个团队的功劳。

每个团队的表现都不可否认,都值得我们尊敬!让我们回顾一下长达6年的CRISPR发展简史!CRISPR演义自从CRISPR第一次被证明可以编辑细胞Genomic DNA以来一晃已经快6年了,笔者有幸在这个技术刚出来时就开始追踪和利用,受益匪浅,尤其是得益于张锋实验室的无私贡献,他们把各种最新的质粒几乎是第一时间免费放到Addgene供学术界使用。

2013到2015这两年,笔者几乎每一篇CRISPR文章都拜读了,随着时间的流逝,很多细节都不记得了,于是决定重新精读这批经典老文章。

随着时间的沉淀,返回去重读时,总是有很多事后诸葛亮的意见。

于是兴之所至,决定把自己的心得体会记下来,以免时间长了又遗忘了。

西方有句谚语:魔鬼在于细节,对于生物学研究尤其如此。

因此我的随笔都是纠结于细节,希望从细枝末节中看出一些端倪,加上自己的合理想象,猜测那些文章作者背后的想法。

事先声明,笔者不认识任何一个做CRISPR的大牛,不知道他们的任何八卦,所以这些想法都是猜测,算不得数,正所谓演义而已。

万一不幸被我猜中,也不担负任何泄密之责。

笔者不打算讲CRISPR在细菌里是怎么被发现的,以及一些牛人们是怎么根据DNA序列的相似性而猜出其作用机制的。

只从2012年8月Doudna和Charpentier的Science 文章开始谈起(这篇文章其实当年6月份就上线了)。

Science. 2012 Aug 17. PMID: 22745249.西方科学的精髓就是还原法,对于我们不了解的东西,对它们敲敲打打,拆下一个零件看看发生了什么;再多加一个零件,看看又发生了什么。

然后以此来想象一下它们是怎么工作的。

这就是生物学里的著名的”Loss of Function”和”Gain of Function”。

在这里,笔者就不再扯那些遗传学里的东西了,比如什么筛选突变基因之类的。

只是想说由于CRISPR的出现,使得Loss of function和Gain of Function在哺乳动物里的研究变成非常容易的东西。

书归正传。

在介绍这篇文章之前,先介绍几个名词。

crRNA, tracrRNA , sgRNA 和PAM。

还别说,前面这俩词,我这个记性不好的人以前是经常忘掉都指的是什么东西。

CRISPR RNA (crRNA):指的是一个含有42个碱基的小RNA,它的5’是20个可以和目标DNA配对的碱基,所以是可变的;它的3’是22个不变的碱基,术语叫”repeat”。

之所以叫”repeat”,大概是因为它在细菌DNA里重复很多次的原因。

trans-activating crRNA (tracrRNA):指的是一个大概含有87个碱基的小RNA,它的5’可以和crRNA的3’ “repeat”配对,术语叫做”anti-repeat”,除此之外,其它部分可以形成hairpin样的二级结构。

这俩RNA结合在一起后可以与Cas9结合,然后通过那20个可变的RNA识别含有PAM的genomic DNA。

因为现在最常用的是Cas9,而CRISPR有很多不同的亚类,所以为了不混淆,通常都是写为CRISPR-Cas9。

Single guide RNA (sgRNA):就是通过4个RNA碱基把crRNA和tracrRNA连接起来成为一个RNA。

Doudna和Charpentier率先创造,在in vitro证明可以工作,然后George Church组把它发扬光大,张锋组也笑纳之,并且开发出了另一个可以做CRISPR activation的牛逼东西。

此乃后话,暂且不表。

Protospacer Adjacent Motif (PAM):所谓的protospacer就是指那20个可以被识别的DNA序列,它的后面必须带几个比较特别的碱基,这几个碱基就是PAM。

对于Cas9来说就是NGG。

Cas9上有一个domain可以识别这个PAM,因为不同的Cas protein识别的PAM不同,所以这个domain在不同的Cas里不保守。

这篇Science文章如何牛逼咱就不提了,因为它会拿炸药奖的。

在这里我只讲那些细枝末节和事后诸葛亮的东西。

因为这篇文章发表之后半年多,张锋实验室和George Church实验室就率先在哺乳动物细胞里实现了基因编辑,发了两篇Science。

而Doudna晚了一小步,做的结果又不是特别漂亮,发了ELife。

还有一个陪跑的, MGH的Keith Joung在斑马鱼里实现了基因编辑。

那么Doudna有没有可能率先发表哺乳动物细胞编辑的文章呢?完全可以。

她们其实已经手握所有的东西,可惜要么是没有想到,要么是想偏了,竟然放着自己的特长不用,而用质粒来做。

这个呆会儿再说。

现在先说说张锋和George Church的两篇文章。

很明显,George Church组是在Doudna 和Charpentier的文章的启发下做的,为此他们用了两个牛人一起做,共同贡献第一作者;张锋组也是俩共同贡献第一作者,而Doudna组只有Jinek一个第一作者,加上其他打酱油的(这下明白Doudna组为什么被scoop了吧,我还怀疑她们发了Science后有些懈怠,度假去了)。

George Church组的开篇介绍就是他们看到了Doudna和Charpentier的文章,所以他们要做哺乳动物细胞编辑。

而且采用了Doudna和Charpentier率先使用的chimeric gRNA (就是把crRNA and tracrRNA通过4个碱基连接成一个,现在叫sgRNA),幸运的是Church 组用了original tracrRNA sequence,而没有采用Doudna和Charpentier试验过的短一点的tracrRNA。

很不幸,Doudna组试验了自己在in vitro测试过可以工作的短的tracrRNA,当然她们也试了长的,估计因为是用的guide RNA 的效率不好,没有看到显著差别,都很差。

就因为这个,Doudna在她们后来发表的Cas9 structure的Science 文章里,连着两次单独引用Church组的文章,而没有包括张锋组的。

张锋组的文章的引用是和另外两篇文章一起引用的。

其中原因,耐人寻味。

当然这只是我的个人猜测,通过现象看到的,说不定是人家忘了呢,犯了个小错误呢。

张锋组的文章风格明显不一样,这或许是因为人家本来就已经在用CRISPR-CAS9做这个哺乳动物细胞基因编辑了。

一开始他们试了很多条件,要加nuclear localization signal让Cas9在细胞核里表达,为此还专门有一个图显示这个。

(话说当年报道韩春雨时,他也特意提到自己看到NgAgo在细胞核里表达时自己有多开心,不知道是不是受张锋启发,以为定位到细胞核里就肯定可以编辑了,然后编出了这么一篇折腾大牛们的故事。

扯远了。

)还试验了细菌CRISPR里需要的RNAaseIII等等,这些在Church组的文章里就没有。

这些都成为了张锋组独立开始做哺乳动物细胞基因编辑的有利证据。

当然张锋组也借鉴了Doudna 和Charpentier的文章,比如用了那个sgRNA的设计,也发现了短的不好用,长的才好用。

Sometimes, size does matter.那么Doudna组到底有没有可能在2个月的时间做完哺乳动物细胞编辑,从而scoop其他人呢?完全有可能。

当然这些都是事后诸葛亮。

现在做基因编辑的载体工具数不胜数,有lentiviral vector, Adenoviral vector, AAV, cas9 mRNA plus crRNA:tracrRNA, cas9 RNP。

就是这个Cas9 RNP,全称是Cas9 ribonucleoprotein。

当时Doudna组已经有了所有的材料,只需要在Cas9上再加一个Nuclear Localization Signal,然后在细菌里面表达纯化蛋白,这都是她们的拿手好戏。

把新的Cas9 蛋白和她们手里的crRNA:tracrRNA在体外混合一下,然后转染到293FT细胞里面,就可以了。

她们已经测试了好几个GFP的gRNA,也完全可以建一个293FT GFP reporter细胞系,然后做RNP转染。

不出俩月,肯定可以做完。

只可惜不知道当时她们为什么没有想到这个,而是舍近求远的用质粒来做转染,而且还只选了一个CLTA的gRNA,效果不好。

不禁让人惋惜。

另外一个让人费解的是Doudna 当时为什么不多放几个人上去,而只让一个人做。

估计是当时没有意识到竞争这么激烈。

也可能是某人不愿意其他人做自己的课题,这又涉及到科研里面的合作共赢的处理了,不是每个人都能够做到合作共赢的,大部分人都是想吃独食的。

可在这个世界上,这样做的结果往往就是双输。

当然竞争的好处就是我们这些吃瓜群众可以早点用上这么好的东西。

想当初,张锋他们组可是开了一个Google Groups,张锋亲自上去答疑。

而且更新换代是如此频繁,往往是旧的技术刚用上没有几个月,新的就出来了。

还记得同实验室的一个哥们率先使用,还是用Church组的方法,用GFP reporter 来测试gRNA好不好用。

很快张锋组就发了一个NBT文章,建立了可以预测gRNA off-target 的网站。

还用double nickase的方法来进一步降低off-target,并且做出了pX450之类的质粒。

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