落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响分析
供者淋巴细胞输注治疗小鼠H22肝癌的实验研究(一)
供者淋巴细胞输注治疗小鼠H22肝癌的实验研究(一)作者：曾冬香，姜藻，毕延智，张琰〔摘要〕目的:观察供者淋巴细胞输注（DLI）对小鼠H22肝癌的治疗作用。
方法:荷瘤昆明小鼠分荷瘤对照组（A组）、5.氟脲嘧啶（5.FU）化疗组（B组）、DLI组（C组）及5.FU加DLI组（D组）4组。
比较各组小鼠生存期、抑瘤率及瘤体病理检查结果，检测NK细胞及IL.2的活性。
结果:B、C组生存时间长于A组（P0.01），D组长于C组（P0.01）;B、C、D各组抑瘤率依次为61.3%、34.7%、89.5%;C、D两组NK细胞及IL.2活性明显高于A、B组（P0.05）;病理观察见C、D组大量炎性细胞浸润。
结论:DLI对小鼠H22肝癌有治疗作用，是一种潜在可行的实体瘤细胞过继免疫治疗方法。
〔关键词〕肝癌;供者淋巴细胞输注;移植物抗肿瘤效应;免疫治疗;小鼠随着现代生物技术的发展，生物治疗已逐渐成为治疗肿瘤的重要手段之一。
目前LAK细胞、TIL细胞、TAK细胞等过继性细胞免疫疗法都是给患者回输其自身的淋巴细胞。
本研究通过向荷瘤小鼠体内输注正常的供者淋巴细胞，诱导特有的异体抗肿瘤反应来攻击肿瘤，探索一种新的实体瘤过继免疫治疗方法。
1材料与方法1.1动物BALB.C小鼠、KM小鼠，雌性，均为8～10周龄，体重18～22g，由东南大学医学院实验动物中心提供。
1.2试剂环磷酰胺（cyclophosphamide，CP）为江苏恒瑞医药股份有限公司产品;5.氟脲嘧啶（5.FU）为天津金耀氨基酸有限公司产品。
1.3实体型荷瘤鼠模型建立无菌操作取传代8d的H22小鼠腹水，台盼蓝染色，活瘤细胞超过90%，调细胞浓度为1×107ml-1，分别取0.2ml接种于KM小鼠右侧腋下皮下，接种后第3天可触及肿瘤结节。
1.4实验分组共分4组，每组10只（另备3只中途处死）。
A组（荷瘤对照组）:不作任何处理;B组（5.FU化疗组）:接种后第3天开始化疗，5.FU20mg・kg-1腹腔注射，连续用药7d;C组〔供者淋巴细胞输注（donorlymphocytein-fusion，DLI）组〕:接种前11d经脾细胞加CP加供体脾细胞输注的方法〔1〕诱导对BALB.C小鼠的特异性免疫耐受状态，接种后第3、10、17天尾静脉注射供鼠BALB.C脾脏淋巴细胞，细胞数分别为0.5×107、0.5×107及1×107只-1。
鲜芦根水提物对小鼠细胞免疫功能的影响
鲜芦根水提物对小鼠细胞免疫功能的影响张克;牛国顺;邓莉;李寅超【摘要】目的:研究鲜芦根水提物对小鼠细胞免疫功能的影响.方法:将健康昆明种小鼠随机分为溶剂对照组,鲜芦根水提物高剂量组(22.5 g/1kg)、中剂量组(7.5g/kg)、低剂量组(3.75 g/kg)4组,每组12只.灌胃,1d1次,连续14 d.采用绵羊红细胞诱导小鼠迟发型变态反应实验法,观察鲜芦根水提物对小鼠细胞免疫功能状态的影响;计算淋巴母细胞和过渡态细胞百分率,观察鲜芦根水提物对小鼠淋巴细胞转化反应的影响.结果:①与溶剂对照组对比,鲜芦根水提物高、中剂量组小鼠24 h足跖肿胀度均增高,其中高剂量组较之差别有统计学意义(P＜0.01).②与溶剂对照组对比,鲜芦根水提物3个剂量组淋巴母细胞百分率和过渡态细胞百分率均有不同程度的提高,其中鲜芦根水提物高、中剂量组淋巴母细胞百分率和高剂量组过渡态细胞百分率差别有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:鲜芦根水提物对细胞免疫功能有明显的促进作用.【期刊名称】《中医研究》【年(卷),期】2016(029)010【总页数】3页(P68-70)【关键词】鲜芦根水提取液/作用;细胞免疫功能;24 h足跖肿胀度;淋巴母细胞百分率;过渡态细胞百分率;动物;小鼠【作者】张克;牛国顺;邓莉;李寅超【作者单位】河南省中医药研究院附属医院,河南郑州450004;河南省中医药研究院附属医院,河南郑州450004;郑州大学药学院,河南郑州450001;郑州大学药学院,河南郑州450001【正文语种】中文【中图分类】R285.5鲜芦根为禾本科多年生草本植物芦苇Phragmites communis(L.) Trin的新鲜根茎[1]，甘寒质轻，入肺胃经，有清热养阴、除烦、止呕、利尿的作用，且有清热而不伤胃、养阴而不留邪、药性平和的特点。
鲜芦根成分芦根多糖有一定的免疫促进作用，其1 000 g/L水煎剂具有抑制乙型溶血性链球菌作用[2]，而有关鲜芦根水提物的免疫调节作用鲜有报道。
清热解毒中药黄芩诱导小鼠肝癌H22细胞HSP70免疫原性的实验研究
清热解毒中药黄芩诱导小鼠肝癌H22细胞HSP70免疫原性的实验研究成晓燕;张轶;卢洪梅【摘要】目的观察清热解毒中药黄芩诱导HSP70免疫原性对小鼠肝癌H22细的免疫效应。
方法将被中药黄芩处理过的肝癌H22细胞免疫小鼠分成黄芩未封闭组、黄芩封闭组和空白对照组,观察各组荷实体瘤小鼠瘤体质量、肿瘤组织形态学改变及外周血T淋巴细胞亚群的改变情况。
结果黄芩未封闭组瘤体质量有所减轻,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);黄芩未封闭组肿瘤组织坏死明显;黄芩未封闭组外周血CD3~+、CD4~+、CD8~+T细胞均明显升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。
结论清热解毒中药黄芩可诱导小鼠肝癌H22细胞高表达HSP70,在一定程度上能提高小鼠对同种移植瘤的主动免疫作用。
【期刊名称】《广东医科大学学报》【年(卷),期】2018(036)006【总页数】3页(P629-631)【关键词】清热解毒;黄芩;小鼠;肝癌H22;HSP70;诱导【作者】成晓燕;张轶;卢洪梅【作者单位】[1]广东医科大学第二临床医学院中医学教研室,广东东莞523808;[1]广东医科大学第二临床医学院中医学教研室,广东东莞523808;[1]广东医科大学第二临床医学院中医学教研室,广东东莞523808;【正文语种】中文【中图分类】R735.7黄芩属于清热解毒中药，近年研究表明黄芩具有广泛的抗肿瘤活性，对多种肿瘤细胞具有抑制和杀伤作用 [1-4]。
本课题组前期研究发现清热解毒中药可诱导肝癌H22细胞高表达热休克蛋白70(HSP70)[5]，本研究用清热解毒中药黄芩处理后的高表达HSP70的肝癌H22细胞免疫同种移植瘤小鼠，以进一步探讨黄芩的抗肿瘤作用是否为通过诱导肝癌H22 细胞HSP70的免疫原性而实现，结果报道如下。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 实验动物、细胞株和药物 SPF级昆明种小鼠，45只，雌性，周龄6～8周，体质量18～22 g，购于广东医科大学实验动物中心；腹水型肝癌H22细胞株由中山大学中山医学院提供；黄芩购买于本院的药剂科，经过本院中药学教研室鉴定为正品。
二种中药水提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响
二种中药水提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响摘要：目的探讨中药生地及菟丝子水提物对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞免疫及体液免疫的影响。
方法选取接种S180肿瘤7d的荷瘤小鼠，抽取乳白色腹水并用无菌生理盐水稀释成1×10个/L细胞悬液（活细胞比率>95%），在小鼠右前肢腋窝皮下注射0.2 mL肿瘤细胞悬液，制成实体瘤动物模型。
设空白对照组，肿瘤对照组，菟丝子低剂量组、高剂量组，生地低剂量组、高剂量组，每组10只，按0.02 mL/g给予灌胃12天后，将小鼠摘除眼球静脉取血1～2 mL，进行C3、C4、IgG、CD4、CD8检测并分析。
结果在C3（1∶5）OD值浓度中，与肿瘤对照组比较，菟丝子低剂量组P0.05；在C4（1∶10）OD值浓度中，与肿瘤对照组比较，菟丝子低、高剂量组P值均0.05，无明显差异。
在IgG（1∶5000）中，与肿瘤对照组比较，生地低、高剂量组P<0.01，在CD4（1∶5）中，与肿瘤对照组比较，生地高剂量P<0.05；在CD8（1∶1）中，与肿瘤对照组比较，菟丝子低剂量组P<0.05。
结论生地及菟丝子水提物可增强小鼠体液免疫及细胞免疫，以增强体液免疫为主，可提高荷瘤小鼠的免疫功能。
关键词：S180荷瘤小鼠；中药影响；细胞免疫；体液免疫中图分类号：R285.5文献标志码：A文章编号：1007-2349（2014）03-0056-02中医理论认为，肿瘤病的特点是“正虚邪实”。
《医宗必读》说：“积之成也，正气不足，而后邪气踞之。
”现代医学证实机体免疫力低下是肿瘤形成的主要原因之一。
[1]研究中药提高机体的功能状况，改善免疫功能而非直接去杀癌细胞。
调节机体免疫功能状态，使机体的抗肿瘤免疫功能得以加强.是中药抗肿瘤重要机制之一。
本实验研究生地及菟丝对S180荷瘤小鼠肿瘤生长对细胞免疫及体液免疫的影响。
1材料与方法1.1主要材料健康km小鼠，雌性（20±2）g。
水蛭素对荷肝癌H22小鼠的抑瘤作用
水蛭素对荷肝癌H22小鼠的抑瘤作用姚娓;张红;鲍发臻;刘勇;贾爱明【摘要】目的:观察水蛭素对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用.方法:小鼠右前腋窝下皮下种瘤造成实体瘤模型,将40只小鼠随机抽样分为4组,水蛭素高剂量和水蛭素低剂量组、氟尿嘧啶组及模型对照组,每组10只.治疗期间记录各组小鼠的体重变化并观察小鼠生存状态,用药14 d后取瘤称重,计算抑瘤率,并计算肝/体比、肾/体比、脾脏指数以及用药前后的体重变化等指标.结果:水蛭素高、低剂量组对小鼠H22肝癌细胞均有明显的抑制作用,抑瘤率分别为37.63％、23.71％,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01、P＜0.05),水蛭素高、低剂量组与氟尿嘧啶组比较,肝/体比、肾/体比、脾脏指数均有显著性差异,有统计学意义(P＜0.05),经治疗后水蛭素各组小鼠与模型对照组及治疗前比较体重变化不明显(P＞0.05).结论:水蛭素对小鼠H22肝癌细胞有明显的抑制作用,同时对小鼠重要器官可能具有一定的保护作用.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2011(011)012【总页数】3页(P1105-1107)【关键词】水蛭素;H22肝癌;氟尿嘧啶;抑瘤【作者】姚娓;张红;鲍发臻;刘勇;贾爱明【作者单位】大连医科大学附属第二医院中医科,大连116023;大连医科大学附属第二医院中医科,大连116023;大连医科大学附属第二医院中医科,大连116023;大连医科大学附属第一医院中医科,大连116011;大连医科大学附属第二医院中医科,大连116023【正文语种】中文【中图分类】R969水蛭(hirudin)为传统中药，有破血、逐淤、消癥、通经的功效，是治疗癥瘕痞块、血淤闭经的良药。
现代药理研究证实，水蛭有抗肿瘤作用，为肿瘤治疗中常用的药物。
水蛭抗肿瘤的主要活性成分是水蛭素[1]，既往对中药水蛭抗肿瘤作用的研究大多采用中药复方制剂，不少实验研究证实复方水蛭素对各种移植瘤的生长及转移均有不同程度的作用[2-4]。
中药落地生根对小鼠血液系统及免疫功能的调节作用
中药落地生根对小鼠血液系统及免疫功能的调节作用徐庆荣;胡营滨【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2006(010)015【摘要】目的:观察中药落地生根对小鼠血液系统及免疫功能的调节作用.方法:实验于2005年在滨州医学院免疫教研室完成.实验用落地生根水溶液由滨州医学院药理教研室制备,内含枸橼酸、苹果酸、琥珀酸、延胡索酸、乙醛酸、丙酮酸、草乙酸等14种氨基酸和槲皮素-3-双阿托伯糖甙及紫云英甙等.实验选用清洁级昆明种小鼠56只,随机分为高剂量落地生根组、低剂量落地生根组、地塞米松组和生理盐水组,每组14只.高剂量落地生根组采用800 mL/L落地生根水溶液(0.01 mL/g)灌胃;低剂量落地生根组用500 mL/L落地生根水溶液(0.01 mL/g)灌胃;地塞米松组给予5 mL/L地塞米松(0.01 mL/g)灌胃;生理盐水组给予等量的生理盐水灌胃.1次/d,灌胃15 d后观察落地生根对小鼠脾淋巴细胞增殖、白细胞介素2、骨髓细胞增殖反应以及血液系统的影响.结果:56只小鼠全部纳入结果分析.①高浓度的落地生根明显促进小鼠淋巴细胞增殖反应,与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01);低浓度的落地生根对小鼠淋巴细胞增殖反应无明显的影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异明显(P＜0.05).②高浓度的落地生根能促进细胞因子白细胞介素2的产生,与生理盐水组比较差异有显著性意义(P＜0.05);低浓度的落地生根对白细胞介素2的产生无明显的影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异不显著(P＞0.05).③落地生根对骨髓细胞增殖反应无明显影响;地塞米松组与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.01).④高浓度落地生根组血小板的浓度为(711.33±234.05)×109 L-1,生理盐水组为(684.20±539.53)×109 L-1,两组比较差异有显著性意义(P＜0.01),低浓度落地生根对血小板浓度无明显影响.结论:中药落地生根可以增强小鼠的免疫功能,并有促进血液凝固的作用.【总页数】3页(P138-140)【作者】徐庆荣;胡营滨【作者单位】滨州医学院药理教研室,山东省,滨州市,256603;滨州医学院附属医院内科,山东省,滨州市,256603【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.复方中药功能饼干对小鼠免疫功能调节作用的实验研究 [J], 江振友;杨志忠;邹林;严群超;施珊珊;岳磊;张静;肖元涛;袁汉思;袁伟成2.女贞子复方中药对老年雌性小鼠神经-内分泌-免疫功能调节作用的实验研究 [J], 欧阳;张永萍;徐剑;孔德明3.清热解毒中药对小鼠免疫功能的调节作用 [J], 高素君; 王冠军; 刘大同; 郭京丽; 姜一强; 易永林4.中药复方别敏胶囊对呼吸道变应性小鼠内分泌免疫功能的调节作用(英文) [J], 张素琴;沈自尹;胡国让;刘闰红;张新民5.养阴益气凉血合剂及方中各组中药对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用 [J], 王莒生;李萍;刘欣;梁代英;盛巡;王芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
西洋参水提物对小鼠免疫力的影响
200目筛网过滤，用Hank’s液洗涤3次，用完全1640培养液 配成3×106个/mL细胞悬液。将每份脾细胞悬液加入24孔培 养 板，1mL/孔，2孔/份 样 品， 一 孔 加75μLConA液（相 当 于 7.5μg/mL）,一孔作为对照，置CO2培养箱培养68h后，取出 培养板，每孔轻轻吸取0.7mL上清液，加入0.7mL不含小牛血 清的1640培养液及50μLMTT液（5mg/mL），继续培养4h。取 出培养板，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打使紫色结晶完全 溶解。将溶解液移入2mL比色杯，在570nm波长测定OD值， 以加ConA孔OD值减去未加ConA孔OD值代表淋巴细胞的增殖 能力，受试剂量组的光密度差值显著高于阴性对照组的光密 度差值，判为该项实验结果阳性。
一、材料与方法
（一）样品制备 西洋参饮片加水8倍量，提取3次，每次1.5h，收集提取 液， 滤 过， 浓 缩 至 相 对 密 度 为1.05～1.08（70℃）， 喷 雾 干 燥，得西洋参水提物粉末（每克粉末相当于生药量2.60g）。 （二）受试动物 SPF级 雄 性Ba1b/c小 鼠， 体 重18～22g［北 京 维 通 利 华 实 验 动 物 技 术 有 限 公 司， 许 可 证 号：SCXK（京）20160006］。动物饲料由成都达硕实验动物有限公司提供，饮水为 纯化水，整个实验期间动物自由摄食和饮水，动物房温度 20～26℃，相对湿度40%～70%。 （三）主要试剂与仪器 刀 豆 蛋 白A（ConA）、MTT、 绵 阳 红 细 胞（SRBC）、 YAC-1细胞、LDH基质液、T-1000电子天平、7100全自动生 化分析仪、二氧化碳培养箱、多功能酶标仪等。 （四）方法 1.实验分组及周期 实验动物共分为4个测定组，每个测定组均分别包括阴 性对照组和受试物三个剂量组，每组10只动物。根据人体 推荐西洋参水提物粉末剂量为1.2g（60kg.d）（相当于生药量 3.12g），动物给药剂量分别按人体推荐剂量的5倍、10倍、30 倍 设 计 低 剂 量 组（0.1g/kg.BW）、 中 剂 量 组（0.2g/kg.BW）、 高剂量组（0.6g/kg.BW）。所有测定组经口（灌胃）给予不同 剂量的样品，灌胃量均为20mL/kg.BW，每天一次，连续灌胃 30d；阴性对照组给予同等容积的纯化水。 2.脾淋巴细胞转化实验（MTT法）[2] 实验30d后，颈椎脱臼处死动物，无菌取脾脏，撕碎，
水蛭素对小鼠H22肝癌细胞Histone H1表达的影响
水蛭素对小鼠H22肝癌细胞Histone H1表达的影响贾爱明;张红;鲍发臻;王朝晖;刘耘;姚娓【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2011(011)011【摘要】目的:观察水蛭素对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨其作用机制.方法:接种H22肝癌细胞于小鼠右腋下,形成实体瘤模型.将40只小鼠随机抽样分为4组,盐水对照组(A组)、氟尿嘧啶(5-Fu)组(B组)、水蛭素高剂量组(C组)、水蛭素低剂量组(D组),每组10只.连续用药14 d,次日处死取瘤称重,计算抑瘤率,免疫组化技术检测Histone H1的表达.结果:B、C组对小鼠肝癌细胞的生长抑制率分别为52.4％、37.98％.Histone H1在B、C、D组中均呈阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论:水蛭素对肝癌细胞有抑制作用,其作用机制可能与影响Histone H1参与调控基因表达有关.【总页数】3页(P1008-1010)【作者】贾爱明;张红;鲍发臻;王朝晖;刘耘;姚娓【作者单位】大连医科大学附属第二医院中医科,大连 116023;大连医科大学附属第二医院中医科,大连 116023;大连医科大学中西医结合内科,大连 116044;大连医科大学附属第二医院病理实验室,大连 116023;大连医科大学附属第二医院中医科,大连 116023;大连医科大学附属第二医院中医科,大连 116023【正文语种】中文【中图分类】R932【相关文献】1.H22肝癌细胞与正常小鼠肝细胞胰岛素受体表达的对比 [J], 欧晓红;匡安仁;梁正路;王朝俊2.三奇注射液对小鼠H22肝癌移植瘤突变型P53和增殖细胞核抗原表达的影响[J], 刘赞3.小鼠H22肝癌细胞中高表达膜蛋白的初步分析 [J], 刘秋均;李洪;杨烨;张春燕4.CD69分子在肿瘤抗原体外活化H22肝癌腹水瘤小鼠脾淋巴细胞的表达 [J], 付立奎;刘宁宁;高立生5.芪薏益肝煎对小鼠H22肝癌细胞survivin及caspase-3表达的影响 [J], 郑波;张红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
中药仙鹤复方水提取物对S180肉瘤和H22肝癌细胞在小鼠体内的抗肿瘤作用研究
用。方法 昆明种 受试 小鼠 ，接 种 Ｓ １ ８ ０肉瘤和 Ｈ ２ ２肝 癌细胞后 随机分为空 白对照组、阳性 对照组及 中药仙鹤 复方水提
取物 高、中、低 ３个剂量组。观察 中药仙鹤 复方水提取物 对肿 瘤的抑制作用及动 物体质 量、免疫器官 重量 的影 响。结 果 中药仙鹤复方水提取物对鼠源移植 型 ￥ １ ８ ０肉瘤细胞和 Ｈ ２ ２肝癌 细胞在荷 瘤小鼠体 内的增 殖均有明显的抑制作 用； 且 对两种荷瘤 小鼠的免疫器官脾脏及胸腺均有显著性 的保护作 用影响。结论 中药仙鹤 复方水提 取物在动 物体 内具 有 较 好的抑瘤作用 ，且对荷 瘤小鼠免疫 器官有保护作 用，具备减毒的功效 。
ｖ ｉ ｄ ｕ ａ Ｕ ｙ ｒ ａ ｎ ｄ ｏ ｍｉ ｚ ｅ ｄ ｉ ｎ ｔ ｏ ｉ ｆ ｖ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ ｓ ｉ ｎ ｃ ｌ ｕ ｄ ｉ ｎ ｇ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ 、ｃ ｙ ｃ ｌ ｏ ｐ ｈ ｏ ｓ ｐ ｈ ａ ｍｉ ｄ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ 、ｈ ｉ ｓ ｈ—ｄ ｏ ｓ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ 、 ｍｉ ｄ ｄ ｌ ｅ—ｄ ｏ ｓ ｅ ｇ ｒ ｏ ｕ ｐ
【 关键词 】 中药仙鹤复方水提 取物 ； ￥ １ ８ ０肉瘤细胞株 ；Ｈ ２ ２肝癌 细胞株
【 中图分类号】 Ｒ ２ ８ ４ ． ２ 【 文献标识码】Ａ 【 文章编号】１ ６ ７ ４ — ３ ２ ９ ６（ ２ ０ １ ３ ）０ ８ — ０ ０ ０ ７ — ０ ２
Ｔｈ ｅ Ａｎ ｉ— ｔ — ｔ ｕ ｍｏ ｒ Ｅｆ ｆｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ Ｃｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｃｏ ｍｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｏ ｆ Ｘｉ ａ ｎ ｈ ｅ Ｏ ｎ Ｓ ａ ｒ ｃ ｏ ｍａ Ｓ １ ８ ０ Ｃｅ ｉ ｌ ｓ ａ ｎ ｄ Ｈｅ ｐ ａ ｔ ｏ ｃ ｅ ｌ ｌ ｕ ｌ ａ ｒ Ｃ ａ ｒ ｄｎ ｏ － ・
龙葵正丁醇萃取物对肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用及其免疫功能的影响
血 清药 理学等方法 观察 中药龙 葵 正 丁醇萃 取物 对 Ｈ 越荷瘤
小 鼠肿瘤 生长 、 胸腺 及脾脏重 量、 血清干扰 素 一 （ Ｉ Ｆ Ｎ一 ） 、 肿瘤坏死 因子 一０ Ｌ （ Ｔ Ｎ Ｆ —ｄ） 含 量等 的影响 ， 初步 探讨龙 葵 抗肿瘤有效成分 以及 作用机制 。
多次 ， 回收萃取试剂后 得 正丁醇 萃取物 ， 萃取 液置 于培 养皿
中， 于水 浴锅上蒸发浓 缩（ 水温６ ０ ￣ Ｃ） 过夜 ， 再 于干燥箱 内负
避 开中心液化坏 死区 ， 剖 取生长 良好 的新鲜 边缘 组织 ， 置无 菌组织研磨器 中按 ５ ０ ｍ ｇ瘤组 织 ： ０ ． １ ｍｌ 无 菌生理盐 水 的比 例稀释后匀浆 ， 经２ ０ ０目滤网过滤 ， 吹打研 磨成细胞悬 液 ， 显
中国中医药科技 ２ ０ １ ３年 ３月第 ２ Ｏ卷第 ２期 Ｍａ ｒ ． ２ ０ １ ３ Ｖ ｄ． ２ ０ Ｎ ｏ ． ２
・１ ４１・
龙 葵 正 丁醇 萃取 物 对 肝 癌 Ｈ ２ ２ 荷瘤 小 鼠
的 抑 瘤 作 用 及 其 免 疫 功 能 的 影 响
陈培丰 潘 磊 高聚伟 徐金印 庞 永峰
压真空干燥浓缩 ， 得龙 葵正 丁醇萃 取物 浸膏 Ｊ ， 用灭菌 生理
盐水稀释成所需 浓度 。５一氟尿 嘧 啶（ ５一Ｆ Ｕ） ： 江 苏南通 精 华制药有 限公 司 ， 批号： ０ ６ ０ ６ ０ ２ 。 １ ． ２ 实验动物 昆明种小 鼠 ， ６ ０只 ， 雄性， 体重 ｌ ８—２ ２ ｇ ， 由 上海斯莱 克实验动 物 有限 责 任公 司提供 ， 许 可证号 ：Ｓ Ｃ Ｘ Ｋ
厂； Ｘ Ｓ ２— ８ １光学显 微镜 ： 广西 梧 州 市光 学 仪器 厂 ； Ｅ Ｌ Ｘ ８ ０ ８
竹荪多糖的提取及对小鼠肝癌H22细胞生长影响的初探
竹荪多糖的提取及对小鼠肝癌H22细胞生长影响的初探发表时间：2017-07-27T15:42:10.320Z 来源：《医药前沿》2017年7月第19期作者：张豫罗鹏肖佳艳叶建方吴雪艳[导读] 探讨竹荪多糖提取条件和对小鼠肝癌H22细胞生长的影响。
（1贵州省疾病预防控制中心贵州贵阳 550004）（2贵州医科大学公共卫生学院毒理学教研室贵州贵阳 550004）【摘要】目的：探讨竹荪多糖提取条件和对小鼠肝癌H22细胞生长的影响。
方法：采用水提醇沉法提取竹荪多糖，并分析未脱和脱蛋白竹荪多糖的含量；采用四甲基偶氮唑盐（MTT)法检测不同剂量未脱、脱蛋白竹荪多糖对小鼠肝癌H22细胞生长24h存活率的影响。
结果：未脱蛋白竹荪多糖的提取率为3.93%、多糖含量为46.21%，脱蛋白竹荪多糖的提取率为2.33%，多糖含量为54.13%；体外实验显示：0.4、0.8mg/ml剂量组的未脱和脱蛋白竹荪多糖对小鼠肝癌H22细胞存活率的影响明显，差异有统计学意义（P<0.05）。
结论：脱蛋白竹荪多糖含量高于未脱蛋白多糖；不同剂量的未脱和脱蛋白竹荪多糖对小鼠肝癌H22细胞的生长均有抑制作用。
【关键词】竹荪；多糖；小鼠肝癌H22细胞；水提醇沉法；MTT法【中图分类号】R735.7 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）19-0349-03 前言竹荪(Dictyophora)是一种珍贵的食、药两用真菌，具有开发的潜能[1]。
20世纪90年代以来，我省某些地区掀起竹荪种植热潮[2]，以织金为代表，纳雍、大方、黔西等县利用自己探究的科学技术对竹荪进行人工栽培并取得很大的经济效益，带动着我省农业技术的发展[3-4]。
肿瘤是目前对人类健康威胁最大的疾病之一，目前仍未有较好的治疗方法[5]。
随着人们对多糖研究的深入，发现大部分多糖类药物有可能成为临床中重要的肿瘤治疗药物[6]。
研究表明竹荪所含多糖是具有高活性的大分子物质[7],在抗肿瘤、抗炎症、刺激免疫等方面都有一定的疗效[8]。
香加皮水提物对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的初步研究
香加皮水提物对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的初步研究李俊新;蒋玉红;单保恩【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2010(022)004【摘要】目的:研究中药香加皮水提取物(cortex periplocae extract,CPE)对小鼠免疫功能的调节作用.方法:无菌分离小鼠淋巴细胞,与不同浓度CPE(250、125、64、32、16、8μg/ml)共同培养一定时间后,采用MTT法测定其对刀豆素A(ConA)诱导的小鼠淋巴细胞转化能力的影响,采用LDH酶释放法测定对NK细胞杀伤活性的影响;采用对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)敏感的L929细胞,使用生物法测定CPE对单核细胞产生TNF-α的影响.各实验均设对照组.结果:CPE在8～64μg/ml的浓度范围内可不同程度的提高小鼠体外淋巴细胞转化率和NK细胞杀伤活性,以及促进单核细胞分泌TNF-α,与对照组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05).结论:一定剂量的CPE可以提高小鼠淋巴细胞的免疫功能,从而发挥抗肿瘤作用.【总页数】3页(P292-294)【作者】李俊新;蒋玉红;单保恩【作者单位】青岛市妇女儿童医疗保健中心检验科,青岛,266011;青岛市妇女儿童医疗保健中心检验科,青岛,266011;河北医科大学第四医院科研中心暨河北省肿瘤基因诊断、预防和治疗重点实验室,石家庄,050011【正文语种】中文【中图分类】R979.1【相关文献】1.茯砖茶水提物对大肠杆菌感染小鼠的免疫调节作用 [J], 刘平;李宗军;许爱清2.香加皮水提取物对斑马鱼幼鱼肝脏毒性的初步研究 [J], 代一航;乔艺涵;马志强;林瑞超;邹迪新;赵崇军;田敬欢;倪媛媛;李二文;杨冉冉;冯丹;刘雯雪;王昭懿3.玻璃苣水提物对荷瘤小鼠免疫调节作用的实验研究 [J], 刚宏林;于雅楠;马英南;刘相辉;唐先明4.香加皮水提物抑制诱导红白血病细胞K562分化的初步研究 [J], 李俊新;单保恩5.砂生槐种子水提物的S_(180)小鼠体内抗肿瘤及免疫调节作用 [J], 贺学强;郭君因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响分析
落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响分析摘要】目的：探讨落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响。
方法：建立H22荷瘤小鼠模型，随机分为空白组、阳性组（5-FU）、模型组、水提物低剂量组（4g/kg生药量）、中剂量组（8g/kg生药量）及高剂量组（16g/kg生药量）共6组，每组10只。
阳性组按20mg?kg-1腹腔注射5-FU，模型组、空白组灌服等体积生理盐水，连续给药15天。
进行碳廓清试验，计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数和肝脏指数。
结果：落地生根水提物中、高剂量组可明显抑制H22实体瘤生长（P＜0.05），抑瘤率分别为65.68%和74.56%。
中、高剂量组可显著增高碳廓清指数（P＜0.05）与脾脏指数（P＜0.05），仅中剂量组对胸腺指数有显著增高作用（P＜0.05），落地生根水提物对肝脏指数无影响。
结论：落地生根水提物对H22荷瘤小鼠的免疫系统有一定的保护作用，能调节巨噬细胞吞噬功能的作用，增强机体的免疫功能，提高抗肿瘤能力。
【关键词】落地生根水提物；H22；免疫功能；小鼠【中图分类号】R964 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2019）32-0206-03落地生根Bryophyllum pinnatum (L.f.) Oken为景天科(Crassulaceae)落地生根属(BryophllurnSalisb)植物，在广西、广东、云南、福建和台湾等地区广泛分布，别名为花蝴蝶、倒吊莲、土三七、叶生根、番鬼牡丹、叶爆芽、天灯笼、枪刀草、厚面皮、著生药等，全草入药，性酸、寒[1]。
除具有观赏价值外，还具有药用价值，可治创伤出血、疔疮、乳腺炎、跌打损伤吐血、热性胃痛、关节肿痛、急性中耳炎、皮肤溃疡等[2]。
在国外，落地生根广泛分布于非洲、美洲热带以及印度和澳大利亚，作为传统药物用于腹泻、呕吐、镇痛、抗炎、抗病原微生物、利什曼病及抗变态反应等[3]。
本实验就落地生根对H22肝癌小鼠免疫功能影响做研究，尝试对落地生根水提物抗肿瘤的作用进行初步探讨。
落地生根的化学成分及药理作用
法进行治疗。
《黄帝内经·灵枢·九针十二原》中说：“凡用针者，虚则实之，满则泻之，宛陈则除之，邪盛则虚之。
”意思是，虚证应用补法来充实，实证应用泻法来放泄，瘀滞者需祛瘀通络，邪气偏盛者需驱邪扶正。
李家康教授在继承中国传统针刺手法的基础上，根据自己的临床经验，创新性地提出了“肾虚瘀阻论”，确立了“补肾祛瘀”治疗大法。
李家康教授在临证时除了常采用以上“补肾十法”及“补肾祛瘀八法”外，还自创了“改良青龙摆尾”针法[5]、“雪里梅花一点红”针法、“草上飞”针法、“蜻蜓点水”针法等诸多新针法，大大提高了针刺治疗脑病、老年病及疑难杂症的临床疗效。
望本文所述内容对广大针灸学者有所裨益。
参考文献[1] 程燕,丁德光,李家康,等.浅谈补肾祛瘀法治疗中风恢复期[J].黑龙江中医药,2014,43(4):5-6.[2] 周仲瑜,卢莎.补肾祛瘀针刺法治疗腰肌劳损临床疗效评价[J].针灸临床杂志,2013,29(5):15-18.[3] 丁德光,李家康,焦杨,等.补肾祛瘀针刺法治疗中风病(恢复期)的多中心临床研究[J].中国中医急症,2014,23(10):1897-1899. [4] 滕金艳,丁德光,黄国付,等.补肾壮腰膏联合补肾祛瘀针法治疗腰椎间盘突出症急性发作的疗效观察[J].中华全科医学,2020,18(4):654-656,685.[5] 焦杨,辜锐鑫.改良青龙摆尾针法治疗腰椎间盘突出症的临床观察[J].湖北中医杂志,2011,33(1):19-20.落地生根的化学成分及药理作用杨志杰，梁宇红，樊星花（广西医科大学第四附属医院暨柳州市工人医院药学部，广西 柳州 545005）[摘要]落地生根是一种中药材，其化学成分丰富，具有广泛的药理作用。
笔者通过查阅近年来国内外研究落地生根的相关文献，对其化学成分及药理作用进行概述，以期为落地生根的进一步研究和利用提供参考和借鉴。
[关键词]落地生根；化学成分；药理作用[中图分类号]R917 [文献标识码]B [文章编号]2095-7629-（2021）01-0148-02落地生根〔学名为Bryophyllum pinnatum （Lam.）Oken）〕是景天科（Crassulaceae）落地生根属（Bryophllurn Salisb）植物，其植株高40～150 cm，茎有分枝。
黑蒜水提液对小鼠肝癌H22移植性实体瘤的生长干预
Fund assistance: Military Scientice and Technique Foundation(No.06G034)
传统中药大蒜（Allium Sativum Linn.）不仅具有良好的广
京茂健Invitrogen公司；小鼠白细胞介素-2（IL-2）ELISA检测试
谱 杀菌 功 能，且在 抗 肿 瘤、抗 氧化、提 高免 疫、预 防心血管 疾
Abstract: Objective: To investigate the effects of extractive from aged black garlic (EABG) on the solid tumor growth
and the cytokine of IL-2 in tumor-bearing mice. Methods: Antitumor activity of EABG in vivo was obwer. With the increase of concentration of EABG, number of tumor cells had the tendency to drop. At dosage of 200, 400,
800mg/kg, inhibitory rate(IR) of EABG is 26.9%, 41.1% and 46.1% for H22, respectively. Conclusion: ABG can increase the
方法
肿瘤的有效性及可能的机制，旨在为黑蒜作为抗肿瘤药物临床
1. 黑蒜无菌水提液制备 称取黑蒜酱10 0 g，加蒸馏水
防治恶性肿瘤提供科学依据。
至1 0 0 0 mL于80℃水浴2h后，不时搅拌，纱布过滤去掉滤渣
基于网络药理学的商陆水煎液治疗小鼠H22肝癌作用机制研究
下移植瘤小鼠肿瘤生长的影响。采用网络药理学分析商陆可能的抗肿瘤机制。〔结果〕与模型组相比，给药组体质量上
升相对平缓，自主活动增多;模型组体质量明显上升，自主活动逐渐减少。在肿瘤组织质量方面，给药组与模型组相比有
显著性差异（P < 0.05） o网络药理学分析结果筛选出20个商陆有效活性成分，涉及33条KEGG通路和27个GO生物
收稿日期：2019-04-17 基金项目：河南省自然科学基金项§（182300410310） 作者简介：肖志美（1992-），女，硕士研究生，研究方向：中药药理学。 E通信作者：杜钢军（1971-）,男，博士，教授，硕士生导师、研究方向：中药药理学。Tel： 15O378835O6；E-mail：dgjlhh@ o
摘 要:〔目的〕观察商陆水煎液对小鼠H22肝癌皮下移植瘤生长的抑制作用，并用网络药理学方法探究其抗肿瘤作用
机制。〔方法〕建立小鼠H22肝癌皮下移植肿瘤模型。接瘤后次日，给药组用人体等效日剂量的商陆水煎液1次/d连续
灌胃治疗17 d,模型组用等量生理盐水灌胃作对照。通过检测小鼠瘤重和瘤体积等指标，评价商陆水煎液对H22肝癌皮
Abstract: [Objective]To observe anti-tumor effect of Shanglu decoction on H22 subcutaneously transplanted tumor in mice, and explore its possible action mechanism with network pharmacology.[Methods]Firstly , a mouse model of H22 subcutaneously transplanted tumor was established, the next day tumor bearing mouse was treated with HED's Shanglu decoction via intragastric administration once a day for 17 days. The model group was given normal saline as control. Antitumor effect was evaluated by body weight, autonomic activities , tumor size and so on, and network pharmacology was used to analyze the related targets and pathways of Shanglu. (Results]Shanglu group compared with model group, Shanglu group's body weight was increased slowly, autonomic activities was increased; model group's body weight was increased fastly, autonomic activities was decreased. The weight of tumor in the model group was lighter than that in the model group ( P <0.05). Network pharmacology analysis showed that there are 20 active components in Shanglu, involving in 33 KEGG pathway and 27 GO bioprocess. [ Conclusion ] Shanglu decoction has an inhibitory effect on H22 subcutaneously transplanted tumor in mice, its mechanisms were associated with 20 active components involving in Pathways in cancer""Jak・STAT signaling pathway,,MPI3K-Akt signaling pathwayv 44 Proteoglycans in cancer""MAPK signaling pathway""MicroRNAs in cancer"and so on. Key words: Shanglu decoction; network pharmacology; liver cancer; mechanism
山慈菇多糖的提取及其对荷瘤小鼠(H22)体内和体外的作用机制的初步研究
除此之外,山慈菇多糖提高了小鼠脾淋巴细胞内的CD8+T淋巴细 胞和NK细胞的比例。同时,山慈菇多糖治疗组小鼠的脾淋巴细胞 比对照组小鼠的Foxp3表达减少。
利用免疫细胞化学技术,山慈菇多糖组的小鼠腹水淋巴细胞对比 对照组,Foxp3和Stat3表达随着山慈菇浓度的升高而减少。而且, 山慈菇多糖小鼠血清内的细胞因子IL-2,TNF-α,IFN-γ随着浓 度的增加而分泌增多,VEGF则分泌减少。
采用苯酚-硫酸法测得提取多糖的浓度,用电感耦合等离子体质 谱进行单糖分析,用凝胶渗透色谱法分析多糖的相对分子质量, 并用气相色谱对该多糖的二级结构进行预测。(2)用H22肝癌细 胞在Balb/c小鼠体内建立腹水模型,将不同浓度的山慈菇多糖用 腹腔注射法隔天给药给予治疗,并采用同样的方法用环磷酰胺做 阳性对照,生理盐水做阴性对照,七次治疗后观察小鼠的腹围,体 重和生存期。
在第18天后随机处死一半小鼠,提取脾淋巴细胞,采用淋巴细胞 转化实验测定T和B淋巴细胞的增殖指数;采用E-rose实验检测T 细胞的免疫功能状态;并用特异性抗体标记CD8+和NK细胞,用流 式细胞仪分析各组治疗后CD8+和NK细胞的比例;分选小鼠脾淋巴 细胞的CD4+CD25+,提取其m RNA,在mRNA水平上检测Foxp3基因的 表达。用免疫组化法在小鼠的腹水细胞中分析Foxp3和Stat3的 表达。
5、山慈菇多糖可能是通过降低Jak1-Stat3和激活Caspase-3、 Caspase-8蛋白表达而且提高Bax/Bcl-2的比例诱导H22细胞的凋 亡。
其重均相对分子质量为383.569kDa。山慈菇多糖的二级结构在 180-260nm处,主要是反平行和无规卷曲,然后是β-转角和平行 螺旋。
《狼毒大戟提取液对荷H22小鼠的抑瘤作用及抗氧化能力的影响》
《狼毒大戟提取液对荷H22小鼠的抑瘤作用及抗氧化能力的影响》一、引言近年来，癌症已成为全球范围内威胁人类健康的主要疾病之一。
在癌症治疗中，除了传统的手术、放疗和化疗外，寻找新的抗癌药物和治疗方法显得尤为重要。
狼毒大戟作为一种传统中药材，其具有显著的生物活性，被广泛用于多种疾病的治疗。
本研究旨在探讨狼毒大戟提取液对荷H22小鼠的抑瘤作用及抗氧化能力的影响，以期为狼毒大戟在癌症治疗中的应用提供理论依据。
二、材料与方法1. 材料（1）狼毒大戟：采购自正规药材市场，经过鉴定为正品。
（2）荷H22小鼠：实验动物，用于模拟人肝癌模型。
（3）实验试剂与仪器：包括提取液制备所需试剂、小鼠饲养及实验所需仪器等。
2. 方法（1）狼毒大戟提取液的制备：将狼毒大戟粉碎，加入适量溶剂进行提取，得到狼毒大戟提取液。
（2）动物分组与处理：将荷H22小鼠随机分为实验组和对照组，实验组小鼠分别灌胃不同剂量的狼毒大戟提取液，对照组小鼠灌胃等量溶剂。
（3）观察指标：观察并记录小鼠的生存状态、体重变化、肿瘤大小等指标，同时检测小鼠体内抗氧化酶活性及氧化应激指标。
三、实验结果1. 抑瘤作用实验组小鼠在灌胃狼毒大戟提取液后，肿瘤生长速度明显减缓，肿瘤体积较对照组显著减小。
高剂量组的抑瘤效果更为显著，表明狼毒大戟提取液具有一定的抑瘤作用。
2. 抗氧化能力实验组小鼠体内抗氧化酶活性较对照组有明显提高，表明狼毒大戟提取液具有增强机体抗氧化能力的作用。
同时，实验组小鼠体内氧化应激指标较对照组有所降低，进一步证实了狼毒大戟提取液的抗氧化效果。
四、讨论本研究结果表明，狼毒大戟提取液对荷H22小鼠具有显著的抑瘤作用和抗氧化能力。
这可能与狼毒大戟中的有效成分有关，如大戟二烯醇、大黄素等，这些成分具有抗肿瘤、抗氧化等生物活性。
此外，狼毒大戟提取液可能通过调节机体免疫功能、抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡等途径发挥抑瘤作用。
同时，其抗氧化作用可能通过提高机体抗氧化酶活性、降低氧化应激水平等途径实现。
斑蝥复方药酒提物对小鼠肝癌 H-22的治疗作用研究
斑蝥复方药酒提物对小鼠肝癌 H-22的治疗作用研究杨寰;强亚杰【期刊名称】《河南大学学报（医学版）》【年(卷),期】2013(000)004【摘要】Objective To observe the cantharidin vivo anti-tumor effect of the drug compound . Methods ① vivo :establish a mouse model of liver tumor-bearing animals by intragastric administration method , in situ detection of cancer , immune organ index , and serum Na , K , Cl ions , glucose and other activity ; evaluation of compound cantharidin antitumor drugs . ② In vitro : cultured colon cancer cells and mouse spleen cells by M TT method of drug toxicity in colorectal cancer cells and proliferation of mouse spleen cells . According to the experimental evaluation of itsrole .Results The in vivo doses in this study , compared with the model group , treatment group , tumor growth slowed down in varying degrees , inhibitory rate was 27 .7% , the measured tumor-bearing mice treated group had significant organ index difference . A certain concentration of cantharidin drug compound HCT-116 colon cancer cell toxic effects , and on lymphocyte proliferation to some extent . Conclusion cantharidin drugs on cancer cells HCT-116 of the IC50 was 0 .114 micrograms / ml , the IC50 of mouse spleen lymphocytes was 1 .958 micrograms /mlConclusion cantharidin drug compound has anti-tumor effect , and on the body to produce some toxicity , and metabolism of the body's electrolytes and to acertain extent .%目的：通过体内外实验观察斑蝥复方药的抗肿瘤作用。
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落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响分析
发表时间：2019-12-12T12:48:00.970Z 来源：《医药前沿》2019年32期作者：杨志杰樊星花梁宇红[导读] 目的：探讨落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响。
（广西医科大学第四附属医院暨柳州市工人医院药学部广西柳州 545005）【摘要】目的：探讨落地生根水提物对H22肝癌小鼠免疫功能的影响。
方法：建立H22荷瘤小鼠模型，随机分为空白组、阳性组（5-FU）、模型组、水提物低剂量组（4g/kg生药量）、中剂量组（8g/kg生药量）及高剂量组（16g/kg生药量）共6组，每组10只。
阳性组按20mg?kg-1腹腔注射5-FU，模型组、空白组灌服等体积生理盐水，连续给药15天。
进行碳廓清试验，计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数和肝脏指数。
结果：落地生根水提物中、高剂量组可明显抑制H22实体瘤生长（P＜0.05），抑瘤率分别为65.68%和74.56%。
中、高剂量组可显著增高碳廓清指数（P＜0.05）与脾脏指数（P＜0.05），仅中剂量组对胸腺指数有显著增高作用（P＜0.05），落地生根水提物对肝
脏指数无影响。
结论：落地生根水提物对H22荷瘤小鼠的免疫系统有一定的保护作用，能调节巨噬细胞吞噬功能的作用，增强机体的免疫功能，提高抗肿瘤能力。
【关键词】落地生根水提物；H22；免疫功能；小鼠【中图分类号】R964 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2019）32-0206-03 落地生根Bryophyllum pinnatum (L.f.) Oken为景天科(Crassulaceae)落地生根属(BryophllurnSalisb)植物，在广西、广东、云南、福建和台湾等地区广泛分布，别名为花蝴蝶、倒吊莲、土三七、叶生根、番鬼牡丹、叶爆芽、天灯笼、枪刀草、厚面皮、著生药等，全草入药，性酸、寒[1]。
除具有观赏价值外，还具有药用价值，可治创伤出血、疔疮、乳腺炎、跌打损伤吐血、热性胃痛、关节肿痛、急性中耳炎、皮肤溃疡等[2]。
在国外，落地生根广泛分布于非洲、美洲热带以及印度和澳大利亚，作为传统药物用于腹泻、呕吐、镇痛、抗炎、抗病原微生物、利什曼病及抗变态反应等[3]。
本实验就落地生根对H22肝癌小鼠免疫功能影响做研究，尝试对落地生根水提物抗肿瘤的作用进行初步探讨。
1.资料与方法
1.1 一般资料
1.1.1细胞株及动物小鼠H22肝癌细胞由广西医科大学药理学教研室提供，经本实验室传代保存。
昆明种小鼠60只，体质量18～22g，雌雄不拘，由广西医科大学实验动物中心提供。
试验动物使用许可证 SCXK2009-0002。
1.1.2药品与试剂落地生根采取于广西来宾市忻城县，经河池学院化学与生物工程学院邓晰朝副教授鉴定为鉴定景天科(Crassulaceae)落地生根属(BryophllurnSalisb)植物落地生根Bryophyllum pinnatum (L.f.) Oken。
氟尿嘧啶注射液（5-FU），天津金耀药业有限公司，批号1504261。
一得阁墨汁购于一得阁墨业有限责任公司。
1.2 仪器
多功能提取浓缩机组(上海顺仪实验设备有限公司)；分析天平(日本岛津公司)；DRAGON LAB移液器(20～200μL)( 大龙兴创实验仪器（北京）有限公司)；酶标仪（美国伯乐BIO-RAD公司）。
1.3 药材提取
取6100g落地生根干药材，加10倍量蒸馏水，回流提取3次，每次1小时，过滤，合并3次滤液，浓缩成浸膏，浸膏量为1246.8g，置于4℃冰箱，待用。
1.4 造模、分组及给药
取冻存的H22肝癌细胞，复苏为0.9%氯NaCL溶液混悬，小鼠腹腔注射，连续传两代。
无菌条件下取H22肝癌小鼠腹水，稀释成含量为1×107?mL-1的细胞悬液后于小鼠右侧腋窝皮下接种，小鼠接种肿瘤细胞悬液后称体重，随机分为空白组、阳性组（5-FU）、模型组、水提物低剂量组（4g?kg-1生药量）、中剂量组（8g?kg-1生药量）及高剂量组（16g?kg-1生药量）共6组，每组10只。
空白组为正常小组，阳性组按20mg?kg-1给予5-FU腹腔注射，模型组、空白组灌服等体积生理盐水。
各组均于接种后24小时开始给药，每天1次，连续15天。
1.5 小鼠碳廓清实验
末次给药24小时后,尾静脉注射以生理盐水稀释4倍的印度墨汁,每10g体质量注射0.1mL，墨汁注入后立即计时，于注入墨汁后第2（t1）、10min（t2），分别从内眦静脉丛取血20μL，加入到2mL 0.1% Na2CO3溶液中，摇匀。
以0.1% Na2CO3溶液作空白对照，用酶标仪在600nm波长处比色测定光密度值（OD）。
将小鼠处死，取肝、脾，称质量，计算吞噬指数（a)。
吞噬指数计算方法：K=（lgOD1-lgOD2)/(t2-t1).吞噬指数（a)=体质量×K1/3（肝质量+脾质量）。
1.6 瘤重、胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数的测定
分别称取小鼠体重，脱颈椎处死小鼠，剥离肿瘤组织，取小鼠脾脏、胸腺和肝脏，精密称定，计算抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数和肝脏指数：肿瘤抑制率（%）={1-（平均实验组瘤重/平均对照组瘤重）}×100%；胸腺指数=胸腺质量/体重；脾脏指数=脾脏质量/体重；肝脏指数=肝脏质量/体重。
1.7 统计学处理
采用SPSS22.0统计软件进行数据分析，所有数据均以-x±s表示，两组间差异比较采用t检验，P＜0.05表示差异具有统计学意义。
2.结果
2.1 抑瘤作用
研究结果显示，与模型组比较，落地生根水提物中、高剂量组可明显抑制小鼠H22实体瘤生长（P＜0.05)，抑瘤率分别为65.68%和74.56%，与5－氟尿嘧啶作用相当，见表1。
表1 落地生根水提物对小鼠瘤重及免疫脏器指数的影响。