厌氧菌培养过程
一种嗜黏蛋白阿克曼氏菌的厌氧培养方法与流程
一种嗜黏蛋白阿克曼氏菌的厌氧培养方法与
流程
嗜黏蛋白阿克曼氏菌是一种厌氧菌，其培养方法和流程相对复杂。
以下是一种常见的嗜黏
蛋白阿克曼氏菌的厌氧培养方法和流程：
1. 制备培养基：根据阿克曼氏菌的要求，调配厌氧培养基，如ATCC 1289培养基等。
2. 培养基灭菌：使用自动厌氧培养箱或高压灭菌器将培养基进行灭菌处理，以消除任何外源菌
的污染。
3. 菌种接种：将已培养好的阿克曼氏菌种子接种到灭菌的培养基中。
要确保接种时的无菌条件。
4. 厌氧条件：将接种后的培养基密封，并置于厌氧条件下培养。
可以使用氧气清除剂、气体封
闭袋等方式提供细菌所需的无氧环境。
5. 培养温度和时间：根据菌种的要求，将培养基置于适当的温度下进行培养，并设定培养的时间。
6. 观察菌落生长：在培养过程中，定期观察培养基中菌落的生长情况。
可以使用显微镜观察细
菌的形态。
7. 收获培养物：培养完毕后，收获培养物。
可以通过离心或过滤等方式分离菌体和培养液。
8. 菌体保存：将分离得到的阿克曼氏菌体保存到液氮中，以备后续实验和应用。
总的来说，嗜黏蛋白阿克曼氏菌的厌氧培养方法需要提供合适的培养基和无氧环境，并严格控
制培养的温度和时间。
在培养的过程中，注意观察菌落生长情况，并及时收获培养物进行保存。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法一、引言污水处理是保护环境和人类健康的重要措施之一。
在污水处理过程中，菌种的使用起着至关重要的作用。
本文将详细介绍污水处理中常用的菌种培养方法。
二、菌种的选择在污水处理中，常用的菌种包括厌氧菌、好氧菌和兼性厌氧菌。
厌氧菌可在缺氧条件下生长，好氧菌需要氧气进行代谢，而兼性厌氧菌则可在缺氧和有氧条件下生长。
根据不同的处理需求，选择合适的菌种进行培养。
三、菌种培养方法1. 厌氧菌培养方法（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、硫酸铵等溶解于蒸馏水中，加热煮沸后冷却，加入适量的硫酸镁、氯化钠等，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
（3）培养条件：将培养基置于恒温培养箱中，温度控制在35℃左右，保持缺氧状态。
（4）观察和收获：培养一段时间后，观察菌落的生长情况，根据需要收获菌种。
2. 好氧菌培养方法（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、氯化钠等溶解于蒸馏水中，加热煮沸后冷却，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
（3）培养条件：将培养基置于恒温培养箱中，温度控制在25℃左右，保持有氧状态。
（4）观察和收获：培养一段时间后，观察菌落的生长情况，根据需要收获菌种。
3. 兼性厌氧菌培养方法（1）制备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖、硫酸铵等溶解于蒸馏水中，加热煮沸后冷却，加入适量的硫酸镁、氯化钠等，调整pH值至7.0左右。
（2）接种培养基：将污水样品取适量加入培养基中，摇匀后封闭。
（3）培养条件：将培养基置于恒温培养箱中，温度控制在30℃左右，保持缺氧和有氧交替状态。
（4）观察和收获：培养一段时间后，观察菌落的生长情况，根据需要收获菌种。
四、菌种培养的注意事项1. 严格控制培养条件：包括温度、光照、氧气浓度等，以保证菌种的正常生长。
2. 选择合适的培养基：不同的菌种对培养基的要求不同，应根据菌种的特性选择适宜的培养基。
厌氧菌培养驯化
厌氧反应池B-107在正式投用前要进行厌氧菌的培养和驯化,具体方法步骤如下：1、将中活性污泥打入厌氧池中作为接种污泥;打入的污泥量以达到厌氧池正常操作水位的10%为宜;2、启动气浮水提升泵P-101向厌氧池注入污水,注入量以达到正常操作水位的40%左右,即污水量加活性污泥量达到厌氧池正常操作水位的50%;3、启动潜水搅拌器流以保持池内污水处于搅拌状态,不致使污泥沉在池底;然后即使池内厌氧菌自行生长繁殖;每2天启动一次气浮水提升泵P-101向厌氧池内注污水,每次注入5%液位10天后即达到正常操作液位;4、在厌氧菌培养阶段每天分析一次池内污水中的CODcr、氨氮和总磷;保持CODcr在300 mg/L 以上,氨氮在 mg/L以上,总磷在 mg/L以上;如果CODcr低于300 mg/L则立即启动气浮水提升泵P-101向池内注污水,如果氨氮低于 mg/L 则向池内投加尿素以补充氮源,如果总磷低于 mg/L则向池内投加磷酸三钠;投加的数量以达到上述指标为准;5、10天后如分析结果显示池中的CODcr和氨氮比进水降低20%以上,说明厌氧菌已经生成,则进入污泥培养驯化阶段;6、进入污泥驯化阶段时,启动气浮水提升泵P-101向池内连续进水,同时也连续出水;进水量控制在正常进水量的10%左右;每天提高一次进水量,每次提高正常进水量的10%;10天后即达到正常进水量;7、在污泥培养驯化阶段每天分析一次CODcr,和氨氮;如果出水中的CODcr和氨氮比进水中的CODcr和氨氮降低30%以上,说明厌氧菌已形成,可以转入正常操作状态,投入正常运行;如果出水中的CODcr和氨氮基本不降低,说明厌氧菌形成不好,则要减少进水量或暂时停止进水,进一步培养厌氧菌;厌氧菌的培养与驯化一般大约要25-40天;如水温高30-40℃则需要的时间就短,如水温低≤25℃则需要的时间就长,如水温低于15℃则很难培养出厌氧菌;推流曝气池污泥培养与驯化推流曝气池污泥培养与驯化：1 将污泥池内剩余活性污泥倒入推流曝气池作为接种污泥;倒入量以达到推流曝气池正常水位的10%左右为宜;2 厌氧反应池正常出水直接向推流曝气池B-108进水;进水量按正常设计总进水量的10%左右连续进水;同时开启罗茨鼓风机P-110向曝气池内送风;3 当推流曝气池内的水位达到设计水位100%时则停止进水,只向推流曝气池内鼓风,进行污泥的培养,时间3天左右;4 在污泥培养阶段每天分析一次推流曝气池中的CODcr、总氮、总磷、和溶解氧;保持CODcr在300mg/L以上,总氮在L以上,总磷在左右,溶解氧控制在L;如果CODcr低于300mg/L则由厌氧池向推流曝气池内注污水,如果总氮低于L则向曝气池中加入尿素,如果总磷低于L则向推流曝气池内加入磷酸三钠;在污泥培养阶段最好向推流曝气池内加入部分生活污水;5 三天以后则转入污泥培养驯化阶段;由厌氧池向推流曝气池内连续进水,进水量控制在正常总进水量的10%左右为宜;以后每天增加10%进水量,最好同时引入部分生活污水;6 在向推流曝气池连续进水后,同时开启污泥回流泵P-105向推流曝气池内打污泥回流,回流量控制在进水量的50%左右;7 在污泥培养驯化阶段每天分析一次CODcr、总氮、总磷、溶解氧及污泥浓度;当分析推流曝气池的出水CODcr比进水CODcr降低50%以上,污泥浓度达到2000-4000mg/L时,则视为曝气池的污泥培养驯化结束,即将进水量提到正常运行的总进水量,推流曝气池投入正常运行;以上指标为参考指标,实际控制指标需根据污水实际水质情况在操作实际过程中通过实践摸索后加以确定;BAF滤池的操作BAF滤池处在培养微生物污泥驯化阶段污水进水流量要控制在30T/H左右;同时,每天要向池中加磷酸盐磷酸三钠等50～100kg,控制池中污水中总磷含量在～左右;每天取样分析一次,同时分析总N含量,如总N含量低于,则需投加尿素,使总N含量控制在2～5ppm左右;约15天左右待BAF滤池B-111生物膜形成后即可将水量缓慢提到设计水量即200T/H,同时尿素、磷酸盐可以少加或不加;BAF滤池投入正常运行;判断生物膜是否形成可根据BAF滤池B-111的出水分析COD、NH3-N是否比进水降低了50％以上;当液位达正常操作液位后即开启鼓风阀门向BAF滤池供风,此时要观察曝气器运行情况有无示冒气泡的地方;同时调节进风开度调节风量,使BAF滤池内的污水溶解氧控制在2-5ppm,每天取样分析一次;如果鼓风系统故障或其他故障停止了向BAF滤池B-111的供风则应立即关闭鼓风管线阀门并立即开启净化风管线阀门,向池内供净化风;1.厌氧污泥主要来源于已有的厌氧工程,如汉斯啤酒厌氧发酵工程、农村沼气池、鱼塘、泥塘、护城河清淤污泥；好氧污泥主要来自城市污水处理厂,应拉取当日脱水的活性污泥作为好氧菌种;2.一般来讲,好氧正常启动可在10-20d内完成,递增比例为5-10%；而厌氧进水递增比例则要小的很多,一般应控制挥发酸VFA浓度不大于1000mg/L,且厌氧池中PH值应保持在范围内,不要产生太大的波动,在这种情况下水量才可慢慢递增;一般来讲,厌氧从启动到转入正常运行满负荷量进水需要3-6个月才能完成3.对N、P等营养物需求低,好氧工艺要求C：N:P=100:5:1,厌氧工艺为C:N:P=350-500:5:1.水解阶段——含有蛋白质水解、碳水化合物水解和脂类水解;b.发酵酸化阶段——包括氨基酸和糖类的厌氧氧化,以及较高级脂肪酸与醇类的厌氧氧化;c.产乙酸阶段——含有从中间产物中形成乙酸和氧气,以及氢气和二氧化碳形成乙酸;d.产甲烷阶段——包括从乙酸形成甲烷,以及从氧、二氧化碳形成甲烷;废水中有硫酸盐时,还会有硫酸盐还原过程5.厌氧反应的工艺控制条件：1温度：按三种不同嗜温厌氧菌嗜温5-20℃嗜温20-42℃嗜温42-75℃工程上分为低温厌氧15-20℃、中温厌氧30-35℃、高温厌氧50-55℃三种;温度对厌氧反应尤为重要,当温度低于最优下限温度时,每下降1℃,效率下降11%;在上述范围,温度在1-3℃的微小波动,对厌氧反应影响不明显,但温度变化过大急速变化,则会使污泥活力下降,产生酸积累等问题;2 PH：厌氧水解酸化工艺,对PH要求范围较松,即产酸菌的PH应控制4-7范围内；完全厌氧反应则应严格控制PH,即产甲烷反应控制范围最佳范围为低于或高于,甲烷化速降低;3氧化还原电位：水解阶段氧化还原电位为-100～+100mv,产甲烷阶段的最优氧化还原电位为-150～-400mv;因此,应控制进水带入的氧的含量,不能因以对厌氧反应器造成不利影响;4营养物：厌氧反应池营养物比例为C:N:P=350-500:5:1;5有毒有害物：抑制和影响厌氧反应的有害物有三种：a.无机物:有氨、无机硫化物、盐类、重金属等,特别硫酸盐和硫化物抑制作用最为严重；b.有机化合物:非极性有机化合物,含挥发性脂肪酸VFA、非极性酚化合物、单宁类化合物、芬香族氨基酸、焦糖化合物等五类;c.生物异型化合物,含氯化烃、甲醛、氰化物、洗涤剂、抗菌素等;6.好氧污泥所谓活性污泥培养,就是为活性污泥的微生物提供一定的生长繁殖条件,即营养物,溶解氧,适宜温度和酸碱度;1营养物：即水中碳、氮、磷之比应保持100∶5∶1;2溶解氧：就好氧微生物而言,环境溶解氧大于l,正常代谢活动已经足够;但因污泥以絮体形式存在于曝气池中,以直径500μm活性污泥絮粒而言,周围溶解氧浓度2mg/l时,絮粒中心已低于l,抑制了好氧菌生长,所以曝气池溶解氧浓度常需高于3－5mg/l,常按5－10mg/l控制;调试一般认为,曝气池出口处溶解氧控制在2mg/l较为适宜;3温度：任何一种细菌都有一个最适生长温度,随温度上升,细菌生长加速,但有一个最低和最高生长温度范围,一般为10－45oC,适宜温度为15－35oC,此范围内温度变化对运行影响不大;4酸碱度：一般PH为6－9;特殊时,进水最高可为PH 9－,超过上述规定值时,应加酸碱调节7.曝气池控制主要因素：1维持曝气池合适的溶解氧,一般控制1－4mg/l,正常状态下监测曝气池出水端DO 2mg/l为宜;2保持水中合适的营养比,CBODNP＝100513维持系统中污泥的合适数量,控制污泥回流比,依据不同运行方式,回流比在0－100％之间,一般不少于30－50％3|评论。
厌氧菌操作流程
厌氧菌培养操作规程第一部分 标本采集和运送有厌氧菌感染指征时，需进行微生物学诊断。
而标本的采集和运送是否合格，对厌氧菌检验结果影响很大。
要求标本绝对不能被正常菌群所污染。
采集时尽量避免接触空气。
临床在进行厌氧菌培养前还应与实验室联系，做好接种培养的准备，进行床边接种或采用输送培养基。
一、标本采集标本应从正常无菌部位或通过严格无菌技术采集，血液、胸腔液、腹腔液、心包液、关节液、胆汁、脑脊液及通过外科无菌手术抽出的脓液等，与常规方法相同。
用特殊技术或方法采取的标本，采集部位与方法如下：1、肺部 肺部分泌物可经气管在环甲膜平面以下抽取，或用纤维支气管镜。
带有保护取样刷不被正常菌群污染的套管。
将取样刷剪下。
可放入运送培养基或床边直接接种。
2、胸腔 直接胸腔穿刺。
3、尿道 耻骨联合上方经皮肤穿刺膀胱抽尿。
4、脓肿 封闭性脓肿用无菌空针抽取。
如已破溃，用无菌棉拭子擦去表面脓液。
取深部分泌物。
5、女性生殖道 消毒阴道从后穹隆穿刺，取脓液。
若取子宫分泌物则用无菌导管抽取，导管外套以一个保护膜套管，插入子宫后才戳穿保护膜套管，在子宫内取标本。
6、窦道或深部伤口 用空针连着导管，尽可能深入抽取。
伤口底部、边缘和窦道壁上刮下来的组织也是很好的标本，更能反映感染的细菌。
若标本量太少，可适当加少量无菌盐水，冲洗后再吸出。
7、血液标本 毛囊和皮脂腺深部的丙酸杆菌易造成污染。
用碘酊消毒后必须等一定时间，不要立即抽血。
其它注意事项：必须通过用于厌氧菌正常栖居地才能取到的标本，如痰、支气管镜采样（无特殊保护套）、咽拭子、排出的尿及阴道拭子不能做厌氧菌培养，粪便标本厌氧菌培养．只能做难辨梭菌及肉毒杆菌的培养。
在无条件床边采样时，尽快将空针中的气体排尽，用消毒空针抽取厌氧培养标本，将针头插入无菌像皮塞。
必须用棉拭子采集的标本．可立即做床旁接种或插入运送培养基中送细菌室培养二、标本运送1、标本送入厌氧运送装置后，应尽快送到实验室，最迟不超过6小时。
厌氧细菌的培养及应用方法
厌氧细菌的培养及应用方法简介厌氧细菌，是一类在无氧环境下生长和繁殖的微生物。
它们具有重要的应用价值，被广泛用于环境修复、发酵工业以及医学领域等各个方面。
本文将介绍厌氧细菌的培养方法以及其在不同领域的应用。
，是一类在无氧环境下生长和繁殖的微生物。
它们具有重要的应用价值，被广泛用于环境修复、发酵工业以及医学领域等各个方面。
本文将介绍厌氧细菌的培养方法以及其在不同领域的应用。
厌氧细菌的培养方法厌氧细菌的培养方法相较于其他微生物的培养略有不同，需要提供无氧环境，满足其生长和繁殖的需求。
下面介绍几种常用的厌氧细菌培养方法：1. 封闭式培养法：将厌氧细菌接种于装有适宜培养基的培养瓶中，然后用橡胶塞密封瓶口，以保证培养过程中无氧环境的维持。
封闭式培养法：将厌氧细菌接种于装有适宜培养基的培养瓶中，然后用橡胶塞密封瓶口，以保证培养过程中无氧环境的维持。
2. 氮气充气法：在培养瓶中先充入氮气，将气泡排除后加入培养基和厌氧细菌。
通过氮气的充气可以去除培养瓶内的氧气，创建无氧环境。
氮气充气法：在培养瓶中先充入氮气，将气泡排除后加入培养基和厌氧细菌。
通过氮气的充气可以去除培养瓶内的氧气，创建无氧环境。
3. 厌氧室培养法：专门的厌氧室内装备有无氧环境所需的设备和仪器，可提供可控的厌氧条件，适合大规模厌氧细菌的培养。
厌氧室培养法：专门的厌氧室内装备有无氧环境所需的设备和仪器，可提供可控的厌氧条件，适合大规模厌氧细菌的培养。
厌氧细菌的应用厌氧细菌在多个领域中有着广泛的应用，以下是其中几个典型领域：1. 环境修复：厌氧细菌可以通过降解有机废弃物、重金属离子还原等方式，帮助清除污染物，修复环境。
环境修复：厌氧细菌可以通过降解有机废弃物、重金属离子还原等方式，帮助清除污染物，修复环境。
2. 发酵工业：某些厌氧细菌具有产生特定有机物质的能力，可用于发酵工业中的生物合成过程，如乙醇、乳酸等物质的生产。
发酵工业：某些厌氧细菌具有产生特定有机物质的能力，可用于发酵工业中的生物合成过程，如乙醇、乳酸等物质的生产。
厌氧菌的分离、培养及鉴定
厌氧菌的分离、培养及鉴定1.1实验内容:厌氧菌的分离、培养及鉴定;1.2目的:1掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。
了解厌氧菌菌鉴定的一般方法。
2复习并巩固平时所学的微生物知识与技能。
3培养独立思考、设计和动手实验的能力。
二介绍:厌氧微生物在自然界分布广泛，种类繁多，其生理作用日益受到人们的重视。
专性厌氧菌，对氧气非常敏感，因此，他们的分离、培养及活菌计数的关键是提供无氧和低氧化还原电势的培养环境。
厌氧菌的培养:在培养厌氧菌时，最需要控制的是厌氧条件，在pH=7.0,O2的浓度与1atm 的氧平衡时，O2--O2-反应的电位是0.81V，因此，在-0.33V时，O2浓度是大气压中O2浓度的10-75。
每升饱和了空气的水中含有1.48×10-55个O2。
所以说，要保证厌氧菌培养时的低电位是很重要的。
厌氧菌的培养方法很多，如厌氧箱法、厌氧袋法、厌氧罐法。
这些方法都需要特定的除氧措施，操作步骤多，较繁琐。
本实验介绍的是一种简便的试管培养法--亨盖特厌氧滚管技术，亨盖特厌氧滚管技术是美国微生物学家亨盖特于1950年首次提出并应用于瘤胃厌氧微生物研究的一种厌氧培养技术因此他是世界上第一个分离纯化厌氧菌的人。
以后这项技术又经历了几十年的不断改进，从而使亨盖特厌氧技术日趋完善，并逐渐发展成为研究厌氧微生物的一套完整技术，而且多年来的实践已经证明它是研究严格、专性厌氧菌的一种极为有效的技术。
该技术的优点是:预还原培养基制好后，可随时取用进行试验;任何时间观察或检查试管内的菌种都不会干扰厌氧条件。
三实验材料与设备:3.1分离与培养:3.1.1菌种:待测样品;3.1.2培养基:改良的PRAS培养基(氮素自加)[配方组成--NH4CL1g,MgCl20.1g,K2HPO40.4g,KH2PO40.2g,甲酸钠5g,乙酸钠5g,甲醇3.5ml,Ph值为7.0,蒸馏水1000ml,1%的树脂刃天青(还原指示剂)1ml,121摄氏度灭菌20min.使用前每5ml培养基加入1%Na2S(还原剂)和5%NaHCO3及3000u/ml青霉素液(抑制剂)各0.1ml]3.1.3试剂:冰块Na2SNaHCO33.1.4器材:高纯氮气厌氧管厌氧手套箱注射器恒温培养箱铜柱除氧系统定量加样器厌氧罐超声波破碎仪酒精灯冰块水浴锅记号笔振荡器等3.2菌种的鉴定:3.2.1菌种:待测菌3.2.2培养基;糖发酵培养基、蛋白胨水培养基、淀粉培养基(液体);3.2.3试剂;乙醚吲哚试剂卢戈氏碘液;3.2.4器材:超净工作台恒温培养箱高压蒸汽灭菌锅接种环移液管载玻片显微镜等四、实验方法与步骤:4.1分离与培养4.1.1铜柱系统除氧铜柱是一个内部装有铜丝或铜屑的硬质玻璃管。
厌氧菌
厌氧菌在有氧的情况下不能生长。
要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。
通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。
如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。
常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。
塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。
放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。
先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。
如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。
它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。
箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。
欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。
箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。
该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。
金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物，消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。
我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。
厌氧菌操作流程
厌氧菌培养操作规程第一部分 标本采集和运送有厌氧菌感染指征时，需进行微生物学诊断。
而标本的采集和运送是否合格，对厌氧菌检验结果影响很大。
要求标本绝对不能被正常菌群所污染。
采集时尽量避免接触空气。
临床在进行厌氧菌培养前还应与实验室联系，做好接种培养的准备，进行床边接种或采用输送培养基。
一、标本采集标本应从正常无菌部位或通过严格无菌技术采集，血液、胸腔液、腹腔液、心包液、关节液、胆汁、脑脊液及通过外科无菌手术抽出的脓液等，与常规方法相同。
用特殊技术或方法采取的标本，采集部位与方法如下：1、肺部 肺部分泌物可经气管在环甲膜平面以下抽取，或用纤维支气管镜。
带有保护取样刷不被正常菌群污染的套管。
将取样刷剪下。
可放入运送培养基或床边直接接种。
2、胸腔 直接胸腔穿刺。
3、尿道 耻骨联合上方经皮肤穿刺膀胱抽尿。
4、脓肿 封闭性脓肿用无菌空针抽取。
如已破溃，用无菌棉拭子擦去表面脓液。
取深部分泌物。
5、女性生殖道 消毒阴道从后穹隆穿刺，取脓液。
若取子宫分泌物则用无菌导管抽取，导管外套以一个保护膜套管，插入子宫后才戳穿保护膜套管，在子宫内取标本。
6、窦道或深部伤口 用空针连着导管，尽可能深入抽取。
伤口底部、边缘和窦道壁上刮下来的组织也是很好的标本，更能反映感染的细菌。
若标本量太少，可适当加少量无菌盐水，冲洗后再吸出。
7、血液标本 毛囊和皮脂腺深部的丙酸杆菌易造成污染。
用碘酊消毒后必须等一定时间，不要立即抽血。
其它注意事项：必须通过用于厌氧菌正常栖居地才能取到的标本，如痰、支气管镜采样（无特殊保护套）、咽拭子、排出的尿及阴道拭子不能做厌氧菌培养，粪便标本厌氧菌培养．只能做难辨梭菌及肉毒杆菌的培养。
在无条件床边采样时，尽快将空针中的气体排尽，用消毒空针抽取厌氧培养标本，将针头插入无菌像皮塞。
必须用棉拭子采集的标本．可立即做床旁接种或插入运送培养基中送细菌室培养二、标本运送1、标本送入厌氧运送装置后，应尽快送到实验室，最迟不超过6小时。
污水处理培养菌种方法
污水处理培养菌种方法一、引言污水处理是保护环境和人类健康的重要工作。
在污水处理过程中，菌种的选择和培养是关键步骤之一。
本文将介绍污水处理中常用的菌种培养方法，以及相应的操作步骤和注意事项。
二、菌种选择在污水处理过程中，常用的菌种有好氧菌、厌氧菌和硝化菌等。
好氧菌主要用于有机物的降解和氧化，厌氧菌用于无氧条件下的有机物降解，而硝化菌则用于氨氮的氧化。
根据实际情况，选择合适的菌种进行培养。
三、菌种培养方法1. 好氧菌培养方法：a. 准备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
c. 培养条件：将培养瓶放入恒温培养箱中，温度保持在30-35摄氏度，培养时间为24-48小时。
d. 菌液收获：培养时间结束后，将培养瓶取出，用离心机离心，将上清液收集到离心管中，即可得到好氧菌液。
2. 厌氧菌培养方法：a. 准备培养基：将适量的蛋白胨、葡萄糖和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
c. 培养条件：将培养瓶密封，放入恒温培养箱中，温度保持在35-40摄氏度，培养时间为24-72小时。
d. 菌液收获：培养时间结束后，将培养瓶取出，用离心机离心，将上清液收集到离心管中，即可得到厌氧菌液。
3. 硝化菌培养方法：a. 准备培养基：将适量的硝酸盐、磷酸盐和盐溶解于蒸馏水中，并加热煮沸，然后倒入培养瓶中。
b. 接种菌种：取一定量的菌液，均匀地接种在培养基上。
c. 培养条件：将培养瓶放入恒温培养箱中，温度保持在25-30摄氏度，培养时间为48-72小时。
d. 菌液收获：培养时间结束后，将培养瓶取出，用离心机离心，将上清液收集到离心管中，即可得到硝化菌液。
四、注意事项1. 培养基的制备过程中要注意无菌操作，避免细菌污染。
2. 培养条件的控制要准确，包括温度、pH值和氧气含量等。
厌氧培养箱之厌氧菌的培养操作
厌氧培养箱之厌氧菌的培养操作厌氧菌在有氧的情况下不能生长。
要培养厌氧菌，必须创造一个无氧的环境。
通常用培养基中加入还原剂，或用物理、化学方法去除环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。
如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。
常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。
1．厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。
2．厌氧袋（Bio-bag）即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。
塑料袋透明而不透气，内装气体发生管（有硼Q化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿）、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。
放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。
先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。
如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育。
3．厌氧手套箱（Anaerobie glove box）即厌氧培养箱。
它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。
箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。
欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气（H2，CO2，N2）达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。
箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。
该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。
金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。
4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。
5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物（多是植物），消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。
我没见过。
6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。
厌氧菌需氧菌培养抽血流程
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厌氧菌需氧菌培养抽血流程（大纲）一、前言1.1厌氧菌与需氧菌概述1.2培养厌氧菌与需氧菌的重要性二、抽血准备2.1抽血器械准备2.2患者准备2.3抽血人员准备三、抽血流程3.1选择抽血部位3.2消毒抽血部位3.3抽取血液样本3.4样本处理与保存四、厌氧菌培养流程4.1厌氧培养器械准备4.2无氧环境创建4.3厌氧菌接种与培养4.4厌氧菌鉴定与药敏试验五、需氧菌培养流程5.1需氧培养器械准备5.2需氧菌接种与培养5.3需氧菌鉴定与药敏试验六、培养结果分析与应用6.1厌氧菌培养结果分析6.2需氧菌培养结果分析6.3培养结果在临床诊断与治疗中的应用七、注意事项与质量控制7.1抽血过程中的注意事项7.2培养过程中的注意事项7.3质量控制措施八、总结与展望8.1厌氧菌与需氧菌培养抽血流程的意义8.2存在的问题与改进方向8.3未来发展趋势与应用前景一、前言厌氧菌和需氧菌是两种常见的微生物，它们在自然界中广泛存在。
在医学领域，对于这两种菌的研究和培养具有重要意义。
本文将详细介绍在抽血流程中培养厌氧菌和需氧菌的步骤和重要性。
1.1 厌氧菌与需氧菌概述厌氧菌是一类在无氧条件下生长繁殖的微生物，它们在人体内发挥着重要的生理功能。
厌氧菌氮气培育实验报告
一、实验目的本实验旨在研究厌氧菌在氮气环境中的生长情况，通过对比不同条件下厌氧菌的生长特征，探究氮气对厌氧菌生长的影响，为厌氧菌的培育提供理论依据。
二、实验材料1. 厌氧菌样本：大肠杆菌、乳酸菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖肉汤培养基等。
3. 实验器材：厌氧培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、培养皿、无菌操作台等。
4. 氮气：纯度99.999%。
三、实验方法1. 样本处理：将厌氧菌样本进行梯度稀释，取适量菌液接种于牛肉膏蛋白胨培养基中。
2. 分组培养：将接种后的培养基分为两组，分别为对照组（普通空气环境）和实验组（氮气环境）。
3. 培养条件：将两组培养基放入厌氧培养箱中，对照组在普通空气环境下培养，实验组在氮气环境下培养。
4. 观察指标：定期观察两组培养基中的菌落生长情况，记录菌落数量、形态等特征。
5. 数据分析：对实验数据进行统计分析，比较两组培养条件下厌氧菌的生长差异。
四、实验结果1. 对照组培养过程中，厌氧菌在普通空气环境下生长良好，菌落数量较多，形态规则。
2. 实验组培养过程中，厌氧菌在氮气环境下生长缓慢，菌落数量明显少于对照组，且菌落形态不规则。
3. 经过统计分析，实验组与对照组在菌落数量和形态上存在显著差异（P<0.05）。
五、讨论与分析1. 氮气对厌氧菌生长的影响：本实验结果表明，氮气环境下厌氧菌生长缓慢，菌落数量和形态均受到影响。
这可能是因为氮气环境中缺氧，导致厌氧菌无法进行正常的代谢活动。
2. 厌氧菌生长条件：厌氧菌属于严格厌氧生物，对氧气非常敏感。
在氮气环境下，厌氧菌的生长受到抑制，因此在培育厌氧菌时，应尽量保持无氧环境。
3. 培育方法：针对厌氧菌的生长特点，可以采用以下方法进行培育：（1）使用厌氧培养箱，确保无氧环境；（2）采用氮气作为保护气体，降低氧气浓度；（3）选择合适的培养基，满足厌氧菌的营养需求。
六、结论本实验结果表明，氮气对厌氧菌的生长具有抑制作用，导致菌落数量和形态受到影响。
厌氧菌培养方法
厌氧菌培养方法
厌氧菌培养方法主要分为以下几个步骤：
1. 厌氧条件准备：在菌液中添加还原剂如硫酸亚铁等，将培养基溶液置于恒温器中进行去氧化，或使用厌氧培养箱或罐。
2. 厌氧菌接种：从菌液中取出细胞，加入含有还原剂的培养基中，注意避免接触到氧气。
3. 厌氧培养基的配制：选择适合厌氧菌生长的培养基，根据菌株的要求添加不同的营养物质，如碳源、氮源等。
4. 厌氧培养条件控制：根据不同的厌氧菌的要求，控制温度、金属离子浓度、pH值等条件，以促进细菌的生长和代谢。
5. 厌氧菌培养周期控制：根据不同厌氧菌的生长特性和代谢过程，控制培养周期，进行菌种的扩展和维护。
6. 厌氧菌分离：可以通过传代分离法或稀释法将不同种的厌氧菌分离开。
7. 厌氧菌纯化：通过反复传代和分离，获得单一种类的厌氧菌。
以上是一般的厌氧菌培养方法，具体方法可根据不同的菌株和实验要求进行调整。
厌氧菌固体培养实验报告
一、实验目的1. 熟悉厌氧菌的培养方法。
2. 掌握厌氧菌在固体培养基上的分离和纯化技术。
3. 观察并记录厌氧菌的生长特征。
二、实验原理厌氧菌是一类在无氧或低氧环境下生长繁殖的微生物。
由于厌氧菌的代谢过程对氧气非常敏感，因此在培养过程中需要采取严格的厌氧条件。
本实验通过在无氧环境中培养厌氧菌，观察其在固体培养基上的生长情况，以达到分离和纯化的目的。
三、实验材料1. 菌种：选择一种已知的厌氧菌作为实验材料。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基。
3. 无氧设备：厌氧箱、厌氧袋、厌氧手套、厌氧操作台等。
4. 工具：接种环、接种针、酒精灯、培养皿、显微镜等。
四、实验方法1. 培养基制备：按照牛肉膏蛋白胨固体培养基的配方，将各成分混合，加热溶解后，调整pH至7.2-7.6，高压灭菌后备用。
2. 无氧环境制备：将厌氧箱、厌氧袋、厌氧手套、厌氧操作台等设备准备好，并按照无氧操作规程进行操作。
3. 接种：将厌氧菌接种于无菌的牛肉膏蛋白胨固体培养基平板上，用接种环或接种针进行划线接种。
4. 培养过程：将接种后的平板放入厌氧箱中，调节温度至适宜范围（一般为37℃），培养一定时间（如24小时）。
5. 观察与记录：观察厌氧菌在固体培养基上的生长情况，记录其菌落形态、颜色、大小等特征。
6. 鉴定：采用显微镜观察厌氧菌的菌落形态，必要时进行生化鉴定。
五、实验结果与分析1. 培养基制备：成功制备了牛肉膏蛋白胨固体培养基，无杂菌污染。
2. 无氧环境制备：厌氧箱、厌氧袋、厌氧手套、厌氧操作台等设备均达到无氧要求。
3. 接种：厌氧菌成功接种于固体培养基平板上。
4. 培养过程：厌氧菌在固体培养基上生长良好，形成明显的菌落。
5. 观察与记录：菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐，颜色为白色。
6. 鉴定：通过显微镜观察，发现厌氧菌菌落形态与已知厌氧菌相似，生化鉴定结果也相符。
六、实验结论本实验成功培养了一种厌氧菌，并对其生长特征进行了观察和记录。
厌氧细菌培养方法的步骤
1. 准备培养基：选择适合厌氧细菌生长的培养基，如缺氧琼脂或者含有还原剂的液体培养基。
在实验室通气橱中进行操作，确保培养基不会受到氧气污染。
2. 设置好培养条件：调整好培养基的pH值和温度，使其适合目标细菌的生长。
另外，根据需要添加适量的营养物质和生长因子。
3. 处理样品：将待培养的厌氧细菌样品接种到培养基上。
在通气橱中用无菌技术操作，避免细菌受到氧气污染。
4. 封闭容器：将接种好的培养皿或者管子密封好，以防止氧气进入。
可以使用气密性较好的培养皿或者密封膜进行覆盖，确保细菌在无氧环境中生长。
5. 培养：将密封好的培养皿或者管子放入恒温培养箱或者恒温振荡培养箱中，以固定温度和适当的湿度进行培养。
根据目标厌氧细菌种类的需求，培养的时间可能会有所不同。
6. 观察和收获：在培养结束后，可以打开培养皿或者管子，观察厌氧细菌的生长情况。
根据需要，可以进行进一步的分离和纯化，或者收集细菌进行后续的实验操作。
厌氧菌的培养方法
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4
2.1 Gas-pak法
D
5
原理
气体发生袋：
柠檬酸和碳酸氢钠 ＋H2O
CO2
硼氢化钠 111＋11H2O
H2
触媒 ：
钯粒
H2O
厌氧罐中的O2
厌氧指示剂
D
6
厌氧指示剂
亚甲基兰 指示剂 卢卡斯固体厌氧指示剂 布鲁氏指示剂
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7
亚甲基兰 指示剂
6％葡萄糖水溶液
2
0.1N氢氧化钠水溶液
0.1
1
厌氧 无色 残存有氧气 蓝色
D
10
Gas-Pak罐的使用操作程序
平皿培养基装入平皿架中置厌氧罐内； 打开内盖居中金属网袋，装入触媒钯粒； 打开锡箔纸袋，取出厌氧指示剂片； 剪开气体发生袋一角，注入10毫升水，迅
速紧闭罐盖，置培养箱中培养。 约经5～10分钟后，放入厌氧指示剂片。
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2.2.1 简易厌氧罐
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28
4.2 冷冻保存：
20％脱脂牛奶0.5ml分注在带螺旋塞的玻 璃瓶中，经110℃、15分钟高压灭菌，冷却后， 先用毛细吸管取半固体高层培养基24～48h生 长茂盛部位的厌氧菌液0.5ml，加入玻璃瓶中， 直接置于－80℃冰库中保存。
厌氧菌较理想的保存方法是液氮保存法。 将108以上浓菌液置脱纤维羊血、脱纤维兔血 或羊血牛奶各半的分散剂中，先在干冰中预 冻，然后连容器一起放入液氮罐中。
厌氧菌的培养方法
祁红兵
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1
物理方法包括遮断空气法、煮沸法、真空法、空 气置换法、气体喷射法或转管法等
化学方法包括焦性没食子酸法、铁丝绒法、保险 粉法等
生物学方法包括与需氧菌共生好氧法、燕麦发芽 法等
污水处理厌氧菌培养方法
污水处理厌氧菌培养方法
污水处理厌氧菌培养方法一般包括以下几个步骤：
1. 选择合适的菌种：根据所需处理的污水类型选择适合的厌氧菌种。
常用的厌氧菌种包括厌氧颗粒污泥、硫醇菌、甲烷产生菌等。
2. 制备培养基：根据所选菌种的营养需求制备相应的培养基。
常用的培养基有VB培养基、M1培养基、LHQ培养基等。
3. 菌种预培养：将选定的厌氧菌种接种进培养基中，在适宜的温度和气氛条件下进行预培养。
预培养可用于增加菌种数量和适应培养条件。
4. 培养奠基：将预培养好的厌氧菌种转移到含有污水的培养基中。
培养基中的污水提供了菌种所需的底物和营养物质。
5. 培养条件控制：控制培养的温度、气氛、搅拌等条件，以确保菌种能够适应厌氧条件并进行正常的生长和代谢。
6. 培养时间控制：根据所需菌种的生长速度和培养目的，控制培养的时间。
一般来说，菌种的生长曲线呈现出一个指数增长期和一个平稳期，培养时间应在这两个阶段之间。
7. 菌种分离和纯化：经过培养一定时间后，菌种可能产生混合菌群，需要进行分离和纯化。
常用的方法有分离培养、单勾染等。
8. 菌种保存：将纯化后的菌种进行保存，可采用低温冷冻保存、液氮冻存等方法。
以上是一般污水处理厌氧菌培养的基本步骤，具体的方法和条件可根据实际需求和实验室条件进行调整和优化。
厌氧菌的培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉厌氧菌的微生物学特性。
2. 掌握厌氧菌的分离和纯化方法。
3. 学习使用厌氧培养箱进行微生物培养。
4. 了解厌氧菌在生物工程和医学研究中的应用。
二、实验原理厌氧菌是一类在无氧或低氧环境中生长繁殖的微生物。
它们不能进行有氧呼吸，其能量代谢主要通过无氧发酵的方式进行。
厌氧菌在自然界中广泛存在，与人类的健康和疾病密切相关。
本实验旨在通过厌氧菌的分离和培养，了解其生长特性，为后续研究提供基础。
三、实验材料1. 厌氧菌样品：土壤、水体、粪便等。
2. 培养基：厌氧肉汤培养基、血琼脂平板、液体石蜡。
3. 器械：厌氧培养箱、接种环、接种针、无菌试管、锥形瓶、移液器、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
四、实验方法1. 样品处理- 取一定量的厌氧菌样品，用无菌生理盐水进行稀释。
- 取适量稀释液，分别接种于厌氧肉汤培养基和血琼脂平板。
2. 厌氧环境制备- 将厌氧肉汤培养基和血琼脂平板放入厌氧培养箱中。
- 在厌氧培养箱中注入液体石蜡，覆盖培养基表面，隔绝空气。
3. 培养- 将厌氧肉汤培养基置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
- 观察菌落生长情况，记录菌落形态、颜色等特征。
4. 分离和纯化- 将生长良好的菌落挑取，接种于血琼脂平板。
- 再次放入厌氧培养箱中培养，观察菌落生长情况。
- 重复上述步骤，直至获得纯化的厌氧菌。
五、实验结果1. 菌落形态- 厌氧肉汤培养基中的菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐、颜色为白色。
- 血琼脂平板上的菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐、颜色为白色，周围有溶血现象。
2. 分离和纯化- 通过多次接种和纯化，成功获得纯化的厌氧菌。
六、实验讨论1. 厌氧菌在自然界中广泛存在，对生态环境和人类健康具有重要意义。
2. 本实验成功分离和纯化了厌氧菌，为后续研究提供了基础。
3. 在厌氧菌的培养过程中，厌氧环境至关重要。
本实验通过使用厌氧培养箱和液体石蜡，成功制备了厌氧环境，保证了厌氧菌的生长。
七、实验结论1. 厌氧菌是一类在无氧或低氧环境中生长繁殖的微生物，其能量代谢主要通过无氧发酵的方式进行。
厌氧菌需氧菌培养抽血流程
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只针对厌氧菌
1、选择性培养基的的选择。
可根据国标（食品安全国家标准，双歧杆菌检验等）及2017年国家食品安全标准（GB）微生物培养基用量核算表（可在青岛海博生物技术公司网站上找到这些信息），选择自己需要使用的培养基。
双歧杆菌分离计数我选择的是改良MRS培养基和MRS培养基。
2、菌落鉴定。
在选择性培养基上挑选类似目标菌的菌落先做生化鉴定，如果鉴定结果符合目标菌标准，继续做16SrDNA测序。
（生化鉴定试剂也可以在青岛海博生物技术公司找到）。
3、取样管取样，用厌氧装置运输至武汉。
（厌氧装置包括厌氧袋、厌氧产气包、氧气指示剂）。
4、菌群的分离及计数，取0.1g粪样用生理盐水或PBS缓冲液逐级稀释，以10-4-10-7涂布选择性培养基，三个重复，将涂布平板放进厌氧装置中放入培养箱培养即可，48h后（双歧杆菌）计数。