丹参药材脂溶性成分提取工艺的比较分析

取效率的影响，优化丹参药材脂溶性成分的最佳提取方法。实
验结果表明，以渗漉法和超声法为优，但由于渗漉法提取时间
过长，不利于工业生产，因此选择超声法提取丹参中脂溶性成
分具有更高的实际价值，宜于推广应用。
此外，笔者还比较分析了利用超声法提取丹参脂溶性成分
的影响因素，最终得出各因素优化工艺参数为：乙醇浓度90%，
【关 键词 】 丹 参 ；脂 溶 性 成 分 ；提 取 工 艺 ；超 声
【Abstract】By using high-performance liquid chromatography and ultraviolet spectrophotometry, With content of cryptotanshinone,dihydrotanshinone, Tanshinone I,tanshinone IIA and total tanshinone as indices,this paper compared and analyzed the method of reflux extraction,diacolation extraction,cold-soaking extraction and ultrasonic extraction to optimize the extraction efficiency of liposoluble constituents from Salvia Miltiorrniza.The ultrasonic extraction is significantly superior to the other methods,the optimized process parameters as follows:ethanol concentration 90%,Particle size 0.15-0.25mm,ratio of solid to liquid 1:20, extracting duration 120 minutes and extracting temperature 55℃.
化系统及皮肤的损害,偶有关节炎,川崎病,视乳头水肿,虹膜 炎等的报道[4-5].肺外并发症常随MP感染的好转而好转,但神 经系统,心血管系统及肾脏的损害则持续时间较长。近年来，难 治性或重症支原体肺炎病例逐年增多，许多患者遗留肺不张、 局限性支气管闭塞、广泛的闭塞性细支气管炎、肺纤维化等后
遗症，并有反复发作,而神经系统后遗症如偏瘫等亦有报道。 MP感染可改变红细胞膜表面的血型抗原,产生红细胞冷
左慧敏[8]等研究发现，其具有发热时间>10天，合并胸腔积 液和（或）肺外并发症，病变部位位于右上肺部，病变类型为大 片阴影，其5个因素为支原体肺炎患儿发生后遗症的相关危险 因素，可以预测肺部后遗症的发生。因此，对于具有以上特点的 支原体肺炎患儿早期运用糖皮质激素治疗，具有一定的临床意 义。
丹参为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥 根及根茎，具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功效[1]，主要含 有二萜醌类脂溶性及酚酸类水溶性成分。丹参脂溶性成分被认 为是其主要活性物质，主要有隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I 和丹参酮IIA，就其含量测定而言，大多数以丹参酮ⅡA、丹参 酮I作为定量测定的指标[2]，中国药典仅以丹参酮IIA作为标示 性化合物控制丹参药材及其成方制剂的质量控制，不能全面的 反应其品质。本实验以隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I、丹参酮 IIA及总丹参酮的提取率作为考察指标，研究回流法、渗漉法、 冷浸法、超声法等不同提取方法对其脂溶性成分提取效率的影 响，最终确定有效的提取工艺，为丹参相关制剂的生产提供借 鉴和依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent 1100型HPLC仪(G1311A四元泵，G1322A 脱气机，G1329A自动进样器，G1316A柱温箱，G1315BDAD检 测器，Chemstation色谱工作站)，超声仪（昆山市超声仪器有限 公司），RE-2000旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。 1.2 试药 丹参酮I、丹参酮IIA对照品购自中国生物药品检验 所，二氢丹参酮、隐丹参酮对照品购自长沙上河生物科技有限 公司。甲醇、乙腈为色谱纯(美国Merck公司)，丹参药材购自安 徽亳州中药材市场。 1.3 对照品溶液配制 取对照品二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮 I、丹参酮IIA适量，精密称定，加入甲醇制成对照品混合液，即得。 2 方法与结果
2.1.2 分析方法 根据文献报道，采用HPLC法［7］和紫外分光
光度法［8］分别测定丹参药材中隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮
I和丹参酮IIA的含量及总丹参酮含量。
2.2 结果 按照2.1项下的各种方法进行提取和测定，结果见 表1。
3 结论
本文以丹参药材4种脂溶性成分及总丹参酮为指标，采用
HPLC法和紫外分光光度法比较分析了不同提取方法对其提
表4 两组患儿后遗症发生率比较(例)
治疗组(24) 对照组(21)
肺不张
2 2
局限性支 气管扩张
1 0
肺部阴影 长期存在
1 2
其他
0 2
合计 (%/例) 4/16.6 6/28.6b
注：b：与对照组比较P<0.05
3 讨论 肺炎支原体(MP)是一类无细胞壁、呈多形性、可以通过除
菌滤器的微生物，也是迄今为止能在无生命培养基中生长繁殖 的最小的原核细胞微生物。是介于病毒和细菌之间的一种微生 物,含DNA和RNA,没有细胞壁.MP感染流行周期为4～7年, 流行时其发病增加3～5倍.MP感染可在任何年龄发生,但其下 呼吸道感染主要发生在学龄儿童和年轻人.尤其以5～20岁更 多见[2].MPP占各类肺炎总数的10%～30%,仅占MP感染的 3%～10%。MPP症状轻重不同，文献报道肺外并发症发生率为 36%～46.7%,多在病程7～14d出现,以年长儿居多[3].常见的 肺外并发症有神经系统,心血管系统,泌尿系统,血液系统,消
约5g，以95%乙醇16倍用量进行渗漉，其流速为1mL/min。收集
渗漉液，浓缩至干燥，用甲醇溶解于50 mL 量瓶中，摇匀并稀
释成适当质量浓度溶液后供测定使用[4]。
冷浸法：精密称取粒径为0.15-0.25mm的丹参药材粉末
约5g，以8倍量体积分数为95%乙醇冷浸提取2次，每次提取3h，
并滤过，收集续滤液，浓缩至变干，用甲醇溶解于50mL 量瓶
丹参酮 I 1.34 1.95 1.21 1.98
丹参酮 IIA 3.02 3.23 2.98 3.34
总丹参酮 6.71 7.79 6.38 7.95
万方数据
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《求医问药》下半月刊 Seek Medical And Ask The Medicine 2011 年第 9 卷 第 9 期
05）见表2。 2.2 两组患儿实验室检查比较 激素治疗组患儿CK-MB、 AST、ALT各值较对照组恢复快，差异有统计学意义（P<0. 05），两组患儿Po2、SO2值治疗前均在正常临界范围，激素治疗 组患儿第三天SO2、Po2值与对照组比较有统计学意义（P<0. 05），Pco2、BUN值在两组间并无明显差异（P>0.05）， 2.3 两组患儿后遗症发生率比较 激素治疗组患儿后遗症发 生率为16.6%，明显低于对照组28.6%，差异有统计学意义（P <0.05）。
2.1 提取方法及色谱分析条件
2.1.1 提取方法 回流法：精密称取粒径为0.15-0.25mm的丹参药材粉末
约5g,以55%乙醇5倍用量进行回流法提取两次，每次提取3小 时。并放至室温，滤过，合并滤液，定容至500ml，取样适量于
1000R/min离心5min后分析［3］。
渗漉法：精密称取粒径为0.15-0.25mm的丹参药材粉末
【Keywods】Salvia Miltiorrhiza,liposoluble constituents,extraction technology,ultrasonic extraction
【中图分类号】R 2 8 2 . 4
【文献标识码】B
【文章编号】1672-2523（2011 ）09- 0271-02
物料粒径0.15-0.25mm，固液比1:20，提取时间120min，提取
温度wk.baidu.com5℃。
（下转第274页）
方法 回流法 渗漉法 冷浸法 超声法
表1 不同提取方法提取丹参药材中脂溶性成分含量比较（mg·g-1,n=5）
隐丹参酮 1.27 1.47 1.13 1.49
二氢丹参酮 0.96 1.09 0.85 1.06
凝集素,另外由于MP与人体心,肺,肝,脑,肾及平滑肌等组织 存在部分共同抗原,当MP感染后可产生相应组织的自身抗体, 并形成免疫复合物,引起呼吸道及肺以外的其他靶器官病变,
出现该器官组织相应症状,或致淋巴细胞对有关的自身组织产 生免疫反应.国内研究表明[6],MPP患儿急性期和恢复期血清
IgG,IgM,IC,C1,C4,C3,B因子含量明显增高,重症者尤为明 显.MPP的多系统肺外并发症可能是因为抗原抗体形成免疫复 合物激活补体,产生中性粒细胞趋化因子,吸引大量白细胞侵
中，摇匀并稀释成适当质量浓度溶液后供测定使用[5]。
超声法：精密称取0.15-0.25mm粒径的丹参药材粉末约5g，
以20倍量体积分数为90%乙醇于55℃条件下提取3次，每次提取
40min，滤过后，收集续滤液，浓缩至变干，用甲醇溶解于50 mL 量
瓶中，摇匀并稀释成适当质量浓度溶液后供测定使用[6]。
入病变部位,释放溶酶体中的水解酶,引起增生和破坏性病变. 国内多项研究发现MPP患儿外周血急性期和恢复期CD4细胞
明显降低,CD8细胞明显升高,而致CD4 CD8明显下降[7],提 示MPP时存在细胞免疫功能紊乱。
大环内酯类药物是小儿MP肺炎的首选抗生素药，包括红
霉素、罗红霉素、克拉霉素和阿奇霉素等。新型的大环内酯类抗 生素在体外对支原体有很高的敏感性，克拉霉素M I C 为0 . 008mg/L，阿奇霉素0.0003～0.031mg/L，罗红霉素0.00625～ 0.0156mg/L，常规剂量足可达到此有效浓度。甲基强的松龙属 中效糖皮质激素，具有抗炎、抗过敏及调节免疫等作用。因此本 研究在常规应用阿奇霉素的基础上，再加用甲基强的松龙进行 调节免疫治疗。本研究中重症支原体肺炎肺外并发症发生率为 35～40%，与之前的报道相符合，神经系统、血液系统并发症亦 不少见，同时具有呼吸系统症状重，急性呼吸窘迫综合征发生 率较高等特点。结果提示，激素治疗组患儿发热时间、肺外症状 好转时间等均对照组提前，肝功、心肌损害等肺外症状恢复早 于对照组，而肺不张、局限性支气管扩张等后遗症亦有所减少， 提示激素治疗可以加速重症支气管肺炎病情恢复，从而改善预 后。考虑作用机制与激素以下作用相关（1）阻止炎症细胞趋化 作用和激活。（2）抑制细胞因子的生成。（3）减轻微血管的渗漏， 从而减轻气道水肿使呼吸道畅通。（4）促进气道平滑肌β2受体 功能重建。
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《求医问药》下半月刊 Seek Medical And Ask The Medicine 2011 年第 9 卷 第 9 期
丹参药材脂溶性成分提取工艺的比较分析
徐庆仪
（安徽省六安市中医院 安徽 六安 2 3 7 0 0 0 ）
【 摘 要 】 目 的 ：比 较 丹 参 提 取 工 艺 对 其 脂 溶 性 成 分 提 取 效 率 的 影 响 ，最 终 确 定 有 效 的 提 取 工 艺 ，为 丹 参 相 关 制 剂 的 生 产提供借鉴和依据。方法：运用高效液相色谱法和紫外分光光度法，以丹参中隐丹参酮、二氢丹参酮、丹参酮I 、丹参酮I I A 及总丹参酮含量为指标进行比较。分析回流法、渗漉法、冷浸法和超声法对丹参药材脂溶性成分的提取效率。结果：超声法 明显优于其他方法。此方更有利于丹参药材脂溶性成分的溶出，其优化工艺参数为：乙醇浓度9 0 % ，物料粒径0 . 15 - 0 . 2 5m m ， 固液比1 : 2 0 ，提取时间1 2 0 m i n ，提取温度5 5 ℃。结论：丹参脂溶性成分的提取工艺以渗漉法和超声法为优，但由于渗漉法提 取 时 间 过 长 ，不 利 于 工 业 生 产 ，因 此 选 择 超 声 法 提 取 丹 参 中 脂 溶 性 成 分 具 有 更 高 的 实 际 价 值 ，宜 于 推 广 应 用 。