LightScanner 高分辨溶解曲线分析系统参数
一种快速有效的基因分型斑马鱼的方法为了促进斑马鱼的高通量的
一种快速有效的基因分型斑马鱼的方法为了促进斑马鱼的高通量的基因分型，我们开发了一种新的技术——用高通量熔解分析（HRMA）区分野生、杂合、纯合突变。
这种耗时一个小时的技术不需要进行限制性内切酶酶切和琼脂糖凝胶电泳的操作。
此技术生成的熔解图的敏感性高，可以检测不明确的PCR产物。
我们可以对斑马鱼的三种类型的突变进行可靠的基因分型，包括apc hu745（apc mcr）和p53zy7（p531166T ），小的缺失突变（bap28y75）及逆转录病毒的插入突变（wdr43hi821a）。
这种技术可对单个斑马鱼胚胎及个体进行基因分型并适用于其它类型的生物体。
Developmental Dynamics 238:3168-3174，2009©2009 Wiley-Liss，Inc。
关键词：熔解曲线斑马鱼基因分型 SNP 点突变插入突变简介斑马鱼作为有机体遗传模型正在成熟。
考虑到比较容易维持大量的突变线，且大量的鱼位于每个突变线，大规模的基因分型需要有效的高通量的基因分型技术。
突变的多种类型导致斑马鱼突变，增加了基因分型的复杂性。
ENU诱变剂——诱导斑马鱼突变的主要物质，经常导致单个碱基的突变，小的缺失插入也会发生。
第二种比较普遍的方式是插入诱变，用逆转录病毒插入或转座因子插入破坏基因。
因此，有效的基因分型这些突变类型的方法是必须的。
提供一种更快、有效、令人满意的基因分型方法，有100%的精确度。
寻找高通量的技术/方法，去除掉比较浪费时间的步骤。
随着扩增基因组DNA 的PCR技术的出现，典型的基因分型技术包括Southern印迹法和放射性方法（RFLP和SSCP）已经逐渐被淘汰。
一些基于PCR 的方法用于偶然产生或消除限制性内切点的突变。
大多数方法，除了测序方法之外，需要用PCR产物跑琼脂糖凝胶电泳。
当数百个或成千上万个样品需要基因分型时，这项工作就变得浪费时间且费用较高。
对于产生或消除一个特殊的限制性位点的突变而言，以PCR为基础的限制性片段长度多态性（RFLP）是一种有用的技术。
高分辨率溶解曲线简介资料
高分辨率溶解曲线简介(2011-09-01 11:30:50)转载▼标签：杂谈高分辨率熔解曲线分析技术（ High Resolution Melting ），简称 HRM ，是近年来兴起的一种检测基因突变、进行基因分型和SNP检测的新工具，可以迅速的检测出核酸片段中单碱基的突变。
HRM 技术因其速度快，操作简便，高通量，灵敏性特异性高，对样品无污染等优点而被迅速的应用在生命科学、医学、农学、畜牧业等领域的研究工作中。
其中，主要的研究方向集中在： 1 、基因未知突变以及 SNP 的扫描； 2、已知突变及 SNP 的基因分型； 3、动植物、微生物等物种的物种鉴定以及品种鉴定； 4 、法医鉴定、亲子鉴定； 5 、HLA 的配型； 6 、甲基化的研究等。
一、HRM技术的基本原理：HRM 技术主要是基于核酸分子物理性质的不同。
不同核酸分子的片段长短、 GC 含量、 GC 分布等是不同的，因此任何双链 DNA 分子在加热变性时都会有自己熔解曲线的形状和位置。
HRM 技术的基本原理就是根据熔解曲线的不同来对样品来进行区分。
以二倍体细胞为例，当纯和子样品通过 PCR 扩增，经过变性复性后，仍然是纯合子，如图一 A 。
而杂合子 PCR 扩增完，经过变性复性后，样品中会形成部分的含有非沃森 - 克里克配对的双链分子存在。
图一： A ：纯合子样品 B ：杂合子样品如图一 B 所示，杂合子样品扩增后，经变性复性，会有非配对碱基的形成，而纯合子样品没有。
这样，杂合子样品相对纯合子样品来说，双链不够稳定，表现在解链温度上就会有微小的差别。
如果采用高分辨率的仪器进行检测，并用专门的软件进行分析，微小的差别就会被检测出来，从而成功的筛选出纯合子与杂合子。
下图是杂合子样品熔解曲线的的示意图：图二：杂合子样品的熔解曲线为四种不同双链的熔解曲线的叠加的结果。
以二倍体细胞为例，杂合子扩增后通过变性复性会形成二种同源双链和两种异源双链的混合物，在熔解过程中四种链会形成一条独特的溶解曲线，从而与纯合子的熔解曲线区分出来。
高分辨气质联用仪招标技术参数
高分辨气质联用仪招标技术参数一、总则高分辨气质联用仪是一种新型的分析仪器，它结合了气相色谱（GC）、液相色谱（LC）和质谱检测（MS）的功能，可以对复杂的混合物进行快速、高效的分析。
在化学、生物、环境等领域具有广泛的应用前景。
为了满足不同领域的需求，我们现在对高分辨气质联用仪进行招标，希望能够找到性能优异、价格合理的产品，为广大用户提供更好的分析工具。
二、技术要求1.分辨率：气相色谱和液相色谱的分辨率分别要求不低于5000和10000。
2.灵敏度：对于目标物质的检测灵敏度要求高，可以检测到ppb 级别的物质。
3.质谱检测范围：要求覆盖从50到1000 m/z的质谱检测范围。
4.色谱柱温控范围：气相色谱和液相色谱的色谱柱温控范围均要求在室温至400℃之间可调。
5.质谱解析力：要求不低于10000。
6.数据处理系统：配备先进的数据处理系统，能够对数据进行快速高效的处理和分析。
三、设备参数1.气相色谱部分（1）色谱柱：采用国际知名品牌，长度30m，直径0.25mm，膜厚0.25μm。
（2）色谱炉：能够在室温至400℃范围内稳定控制。
（3）检测器：具有高灵敏度、高分辨率和低噪声的质谱检测器。
（4）进样系统：自动进样，能够进行微量样品的进样。
2.液相色谱部分（1）采用双螺纹高压适配器，能够提供高压稳定的液相色谱系统。
（2）采用高灵敏度和高分辨率的质谱检测器。
（3）采用双波长紫外检测器，能够实现多组分定量检测。
3.质谱部分（1）质谱分辨率：要求不低于10000。
（2）检测范围：要求覆盖从50到1000 m/z的质谱检测范围。
（3）离子源：采用高效率和稳定性的离子源，能够提供高质量的质谱图谱。
四、其他要求1.设备应具有良好的稳定性和可靠性，能够实现长时间连续运行。
2.设备应具有良好的兼容性，能够与其他分析仪器和数据系统进行无缝连接。
3.设备应具有良好的用户界面和操作体验，能够方便用户进行操作和维护。
五、结束语以上是我们对高分辨气质联用仪招标的技术参数要求，希望能够吸引到优秀的产品和厂家。
HRM在水产领域中的应用共20页
•
大约需要30-60分钟
2005
LightScanner 96/384
•96/384 孔板 •~8 分钟/板
•~2-6 秒/样品 •温度均一性： 0.15oC •数据采集速度：大于100pts/秒 •升温速度： 0.1oC/秒
2010
LS32
• 32 样品转盘, 玻璃毛细管 •HRM 检测 • 60 分钟内完成定量 PCR 和 HRM 检测 • HRM检测升温速度可以在 0.05 ～ 0.90oC/秒之间调 节 •在升温速度小于≤0.3℃/秒时，温度均一性：±0.05oC • 数据采集速度：20pts/秒～400pts/秒（与升温速度有 关）
2. 品种鉴定
• HRM可以应用于微生物品种、物种快速 鉴定以及动植物品种鉴定。 McGlauflin M T.等利用高分辨率熔解曲线（HRM） 发现了11个新的鉴别虹鳟和切喉鳟的 SNPs。发现HRM能准确地识别DNA序 列的核苷酸变化。
McGlauflin M T., Smith M J., Wang J T., Young S F., Chen N., Lee Y C. High-resolution melting analysis for the discovery of novel single-nucleotide polymorphisms in rainbow and cutthroat trout for species identification. Transactions of the American Fisheries Society,2010,139(3):676-684.
拉曼光谱仪的工作参数介绍
拉曼光谱仪的工作参数介绍概述拉曼光谱仪是一种利用拉曼散射效应分析样品的仪器。
拉曼散射现象是指，当激光照射样品时，样品中的分子或晶体因振动而引起散射光，且散射光的频率比激光光源的频率稍微降低，这种现象被称为拉曼散射效应。
拉曼光谱可以用于物质的分析、组成分析、结构分析等。
拉曼光谱仪是一种非常重要的分析仪器，可以用于化学、材料、地质、生物等领域。
本文将对拉曼光谱仪的工作参数进行介绍。
光源拉曼光谱仪的光源通常是激光，激光的波长是固定的。
常见的激光波长有532nm、785nm、1064nm等。
不同波长的激光适用于不同类型的样品。
特别地，可见激光主要适用于有机物和有机高分子的分析。
而近红外激光则适用于无机化合物和矿物质的分析。
红光、绿光和蓝光的激光波长分别为650nm、532nm、488nm。
分光镜拉曼光谱仪利用分光镜分离散射光和激光，并将散射光投射到探测器上。
拉曼光谱分光镜一般有两种，低通滤光片和金属滤光片。
低通滤光片的作用是将激光衰减，以避免光谱的偏移和饱和。
金属滤光片通常用于在样品被激光照射之前消除自发荧光信号。
反射镜反射镜是拉曼光谱仪的重要组成部分，可将激光引导到样品上，使激光与样品产生相互作用，然后将样品的信号收集到探测器上。
反射镜分为两种：倾斜反射镜和平面反射镜。
平面反射镜是将激光与样品垂直以实现散射，而倾斜反射镜则在一定角度下将激光引向样品。
探测器探测器是测量拉曼光谱的关键组件。
常见的探测器有CCD探测器和光电倍增管探测器。
CCD探测器具有高分辨率、低背景噪声等优点，适用于高精度的测量。
而光电倍增管探测器则具有高速度、高灵敏度等优点，适用于大量样品快速测量。
其他参数除了上述参数外，拉曼光谱仪还有一些其他的参数需要注意：•分辨率：分辨率是指一个光谱测量中重心波数和半高峰宽度的示例差异。
分辨能力越好，就可以得到更加精确的光谱数据。
•精度：精度是指测量结果与真实值的偏差，精度越高，测量结果越可靠。
•灵敏度：灵敏度是指在低样品浓度下，还能够检测到样品中的信号强度。
利用Lightcanner进行高分辨率溶解曲线分析时一种转板器的制作及其使用方法
利用Lightcanner 进行高分辨率溶解曲线分析时一种转板器的制作及其使用方法声明：，本方法由Along 独立创制，如有雷同纯属巧合 导言出于节省试验成本需要对lightscanner 匹配的全裙边PCR 板进行反复利用时或者实验室缺乏匹配全裙边PCR 板PCR 仪的情况下，需要在PCR 扩增完后把普通PCR 板（或8/12连管）PCR 产物转移到全裙边板子上，如果用排枪（或单枪）吸取，如果是大规模筛选，个人觉得比较麻烦，而且会存在少量残留，如何快速高效转移呢？笔者找到了一个比较简便的方法，下面进行简单介绍。
配套材料要求普通PCR 板：管口要凸出，与板子齐平的不行。
匹配Lightscanner 的全裙边板：这种管口的可以这种管口的不行转板器制作及使用96孔微孔板的选择（微孔板也叫细胞培养板、酶标板等）选择特定类型的V底（U底也可接受）96孔微孔板（不是每种品牌都可以使用，不同品牌间在构造上略存差异，这些差异有可能导致不能改造成转板器），材料最好是PP(聚丙烯，就是普通PCR管的那种材质)，因为其比较柔软一些，易于打孔而不破裂（市面上的微孔板多是PS即聚苯乙烯材料的，本人没有试过，因其比较脆，恐不好打孔）。
本人验证Eppendorf的V底（U底也可接受）96孔微孔板（Eppendorf货号0030 601.300）与全裙边板非常匹配，只要微修打孔即可使用，下面就以此种微孔板为例介绍制作转板器的方法。
工具制作方法1、修支脚（目的是使管底直接搭在全裙边板上，而不是悬空）2、打孔（烫孔）用夹钳夹住尖底螺丝钉（越尖越好）在酒精灯上烧热后，从微孔板底部，对准管底中央尖端烫开一小孔，一次烧热可以烫三四个孔，所有孔烫完后用手抠掉那些粗糙的塑料结痂（不需要抠得多彻底）。
下图是修支脚及打孔之后的效果3、检验效果用小刀把图示部位的所有支撑横挡支脚全部去除，修到突出的平面齐平即可，不需要修到底部有可能由于孔不平滑使离心后液体有少部分残留，因此必须检查是否存在液体残留现象，按下面的使用方法，用少量纯水试验。
汉森溶解度参数
汉森溶解度参数
汉森溶解度参数是一种用于测量溶剂在一定条件下溶解物质的能力的参数。
它可以帮助我们评估溶剂的溶解性，并且可以在溶液系统中比较不同溶剂的溶解性。
汉森溶解度参数是由瑞士化学家廉·汉森创立的，它可以
用来衡量溶液中溶解物的溶解度，也可以用来衡量溶液的溶解度。
它是一种客观的参数，可以用来衡量溶解物的溶解度，从而使我们能够准确地评估溶解度，从而更好地控制溶液的性质。
汉森溶解度参数的计算公式为：溶解度参数=溶解物的溶
解量/溶剂的体积。
其中，溶解物的溶解量是指溶解物在某种
温度、压力和溶剂组成下，在单位体积溶剂中溶解的质量。
溶剂的体积就是指溶剂的容积。
汉森溶解度参数可以用来比较不同溶剂的溶解性，它可以帮助研究人员更好地控制溶液系统中的溶解物，有助于实现更高效的溶解性。
此外，汉森溶解度参数还可以用来比较不同温度、压力和溶剂组成下的溶解度，可以有效地控制溶液的溶解性，并且可以有效地改变溶液的物理性质，有利于改善溶液的性能，从而达到最佳的效果。
总之，汉森溶解度参数是一种重要的工具，它可以帮助我们更准确地评估溶解度，从而更好地控制溶液的性质。
此外，
它还可以用来比较不同温度、压力和溶剂组成下的溶解度，有助于改善溶液的性能，从而提高效率。
RocheLightCycler480
六．运行实验
实验程序和样本均设置完毕后，即可运行实验，具体操作：进入“New Experiment” 界面，点击左侧 按钮，如反应板已经放入仪器，仪器主机正面右侧的LED灯会由 桔黄色变为绿色，软件界面右下边的这时点击“Start Run”按钮，软件界面跳出一对 话框提示用户给该实验文件命名，以保存实验结果。一般建设用户以时间命名，以方 便日后查找实验结果，如20180816HBV-01，20180817XB-02等。命名后点击确认键， 仪器就开始运行了，在运行过程中可观察到温度和荧光信号的变化曲线。如进行多重 荧光PCR实验，可在荧光历史“Fluorescence History”界面内上的下拉菜单中切换不同 的检测通道，以分别观察其扩增情况。 在实验运行过程中，用户可以根据需要，点击“＋10 Cycles”按钮增加正在运行的 程序10个循环，也可以点击“End Program”按钮终止正在运行的子程序，直接进入 下一个子程序。
PART
2
软件操作
打开软件
仪器自检 样本设置
用户管理 建立实验程序 运行实验 报告生成 单点定标
数据分析
数据导出与导入
相对定量实验设计和分析
一．打开软件 打开电脑，Windows操作系统的用户名为LCservice，密码为LCservice（区分大小写）， 电脑操作系统启动完毕，检查电脑右下角是否有 图标。如果没有，点击桌面“Exor4 for XDMS_R”快捷方式文件。然后右键点击 图标，左键点击“Show”一栏，如最后一句话 显示“Exor 4 server is running”表示数据库加载成功。如果显示“Exor 4 failed to start”则表 示数据库没有加载上，关闭该窗口，右键点击 图标，选“Shutdown”一栏，退出数据库， 重新点击桌面“Exor4 for XDMS_T”文件，加载数据库。 然后点击桌面“LightCycler480II Software” 快捷方式文件，运行该软件。输入用户名 和密码。用户名默认为admin（管理者权限），密码为PCR123（区分大小写），如用户已经 建立新用户名，则可以按照新用户名登录。
熔解曲线检测参数
熔解曲线检测参数熔解曲线检测是一种高效、准确的检测方法，可以用于检测蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的特异性检测和定量分析。
在进行熔解曲线检测时，需要设置一些参数，以确保测试的准确性和可靠性。
下面将介绍一些常见的熔解曲线检测参数及其作用。
1. 温度梯度温度梯度是熔解曲线检测中最重要的参数之一。
温度梯度是指在样品中加热的最高温度与最低温度之间的差异。
通常情况下，温度梯度越宽，引物杂交的温度越宽，因此，在熔解曲线检测时，通常要根据待检测分子的性质和处理的样品数量确定温度梯度的大小。
过大的梯度会造成检测灵敏度下降，过小的梯度则容易造成检测精度下降。
因此，温度梯度的选择应该根据具体实验情况进行调整。
2. 稳定时间稳定时间是指在样品中加热后，在各个温度点上停留的时间。
在进行熔解曲线检测时，稳定时间的选择对检测结果也很关键。
如果稳定时间过短，会导致检测结果不准确，而稳定时间过长，则会浪费时间和资源。
因此，稳定时间的选择应该根据具体实验情况和样品的稳定性进行选择。
3. 数据采集速率数据采集速率是指在进行熔解曲线检测时，采集数据的速度。
这个参数对于检测结果的精度和准确性非常重要。
通常情况下，数据采集速率应该越快越好，因为这可以有效地减少温度间的延迟时间，从而更好地保持样品的温度均匀性。
然而，由于计算机系统的反应时间限制，数据采集速率也不能太快，否则会对数据分析和处理造成困难。
4. 熔解曲线分析软件熔解曲线分析软件是进行熔解曲线检测所必须的设备之一。
这个软件可以用于数据处理、分析和呈现，可以大大提高实验效率和准确性。
在选择熔解曲线分析软件时，应该考虑软件的稳定性、灵敏度、分析速度和易用性等因素，并根据实验需要选择。
综上所述，熔解曲线检测的参数设置是影响实验结果、精度和准确性的关键因素。
在进行实验时，应该根据实验需要和样品规模等情况，综合考虑各个参数的影响，并进行适当的调整和控制，以保证实验的稳定性和准确性。
高分辨溶解曲线突变检测
高分辨熔解曲线突变检测高分辨熔解曲线（High Resolution Melting）技术是近年来兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。
HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品的分析。
该方法与其他遗传分型技术相比具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、高通量检测的优点，是进行突变检测的迅速、廉价而有效的方法。
HRM原理HRM是在PCR基础上通过测定DNA双链熔解曲线变化来检测突变的方法，溶解曲线的变化取决于DNA序列、长度、GC含量，因此，可以通过饱和燃料监控熔解曲线的变化来反映核酸性质的差异，从而对样品进行分析。
在双链体的溶解曲线检测时需要添加合适的染料，饱和染料例如SYBR Green 在双链解链过程中会发生重排，无法真实反映DNA熔解情况。
不适用于需低温解链的样品而且不能检测异源双链体。
因此不能用于熔解曲线的检测。
而LC Green (Idaho)是一种与DNA有更强的结合位点，对PCR抑制作用很小的饱和染料，已成功的用于HRM检测中。
HRM操作简便，在PCR结束后添加合适的染料，通过监测升温过程中荧光染料与PCR扩增产物的结合情况来实现的，在Lightscanner仪器（Idaho）升温过程中，双链解开，荧光染料从解链的分子上释放，同时荧光强度降低，所以通过荧光强度和曲线的变化上就可以判断是否存在突变。
HRM的特点和应用HRM应用：•检测人类疾病相关基因中常染色体的显隐性和X-连锁•鉴定人类肿瘤的体细胞突变，肿瘤样品中筛选体细胞突变•基因突变扫描：单碱基的改变、插入或缺失•特定突变、多态性位点的筛选•外显子和短扩增子基因型扫描HRM特点：•灵敏度高：杂合子突变体的检测的灵敏度可以达到100%，原则上数据分析时温度升高后纯合子或半合子的突变时检测不到的，但实际上，许多纯合子突变是可以检测到的。
如基因突变正好与x连锁，可以在PCR之前加入已知野生型样本来检测半合子或纯合子的突变。
高分辨溶解曲线突变检测
高分辨熔解曲线突变检测高分辨熔解曲线（High Resolution Melting）技术是近年来兴起的一种全新的突变扫描和基因分型的遗传分析方法。
HRM不受突变碱基位点与类型局限，无需序列特异性探针，在PCR结束后直接运行高分辨熔解，即可完成对样品的分析。
该方法与其他遗传分型技术相比具有灵敏度高、特异性好、成本低廉、高通量检测的优点，是进行突变检测的迅速、廉价而有效的方法。
HRM原理HRM是在PCR基础上通过测定DNA双链熔解曲线变化来检测突变的方法，溶解曲线的变化取决于DNA序列、长度、GC含量，因此，可以通过饱和燃料监控熔解曲线的变化来反映核酸性质的差异，从而对样品进行分析。
在双链体的溶解曲线检测时需要添加合适的染料，饱和染料例如SYBR Green 在双链解链过程中会发生重排，无法真实反映DNA熔解情况。
不适用于需低温解链的样品而且不能检测异源双链体。
因此不能用于熔解曲线的检测。
而LC Green (Idaho)是一种与DNA有更强的结合位点，对PCR抑制作用很小的饱和染料，已成功的用于HRM检测中。
HRM操作简便，在PCR结束后添加合适的染料，通过监测升温过程中荧光染料与PCR扩增产物的结合情况来实现的，在Lightscanner仪器（Idaho）升温过程中，双链解开，荧光染料从解链的分子上释放，同时荧光强度降低，所以通过荧光强度和曲线的变化上就可以判断是否存在突变。
HRM的特点和应用HRM应用：∙检测人类疾病相关基因中常染色体的显隐性和X-连锁∙鉴定人类肿瘤的体细胞突变，肿瘤样品中筛选体细胞突变∙基因突变扫描：单碱基的改变、插入或缺失∙特定突变、多态性位点的筛选∙外显子和短扩增子基因型扫描HRM特点：∙灵敏度高：杂合子突变体的检测的灵敏度可以达到100%，原则上数据分析时温度升高后纯合子或半合子的突变时检测不到的，但实际上，许多纯合子突变是可以检测到的。
如基因突变正好与x连锁，可以在PCR之前加入已知野生型样本来检测半合子或纯合子的突变。
罗氏lightcycler96 溶解曲线
在实验室中，PCR（聚合酶链式反应）是常用的技术，通过这项技术我们可以在较短的时间内扩增DNA片段，从而进行基因分析、疾病诊断和病原体检测等。
而在PCR实验中，溶解曲线分析是一种重要的技术，它可以用于检测PCR扩增产物的特异性和纯度，对研究结果的准确性起着至关重要的作用。
1. 溶解曲线分析的原理溶解曲线分析是通过监测DNA片段在不同温度下的变性过程，来评估PCR扩增产物的特异性和纯度的一种技术。
在PCR扩增过程中，扩增产物的双链DNA在高温条件下会解旋成两条单链DNA，随着温度的升高，DNA的双链结构会逐渐断裂。
通过降温后再回升温度的过程，监测DNA的变性过程可以得到一条溶解曲线，在不同温度下DNA的变性程度不同，而不同DNA片段的变性温度也不同，这就是溶解曲线分析的原理。
2. 罗氏lightcycler96 溶解曲线技术罗氏的lightcycler96溶解曲线技术是一种常用的PCR分析仪器，它具有高精度、高灵敏度和高通量的特点，能够快速准确地进行溶解曲线分析。
通过这项技术，我们可以对PCR扩增产物进行快速、准确的特异性检测，为后续的实验和分析提供可靠的数据支持。
在使用罗氏lightcycler96进行溶解曲线分析时，我们可以通过设置不同的温度梯度和检测通道来获得更加精细和全面的数据，从而更好地评估PCR扩增产物的特异性和纯度。
3. 个人观点和理解在我看来，溶解曲线分析是PCR实验中不可或缺的一项技术，它可以为实验结果的准确性和可靠性提供重要支持。
而罗氏的lightcycler96溶解曲线技术作为一种高端的PCR分析仪器，具有快速、精准和全面的特点，能够为科研工作者提供更加可靠和有效的实验数据，有助于推动科学研究的进步和发展。
总结回顾：通过上述的介绍，我们了解了溶解曲线分析的原理和技术特点，以及罗氏lightcycler96溶解曲线技术在PCR实验中的重要作用。
溶解曲线分析能够为PCR扩增产物的特异性和纯度提供重要的评估，而罗氏的lightcycler96技术则为我们提供了一种快速、准确和可靠的分析工具。
大型仪器设备使用与维护讲座
13 2183AA>G homozygote 6989
13 2183AA>G carrier 12091
14a Y563N/W846X
2712
14b W1282X/2789+5G>A 11979
17b M1101K heterozygote 2545
17b M1101K homozygote 10752
10 deltaF508/+
16852
11 R560T/+
2534
11 G551D/+
7664
11 1717-1G>A/+
7777
11 R553X/+
9145
11 G542X/+
11967
11 S549N/+
13278
12 Y563N/W846X
2712
12 deltaF508/1898+1G>A NA 18800
15133
4 R117H/+
16898
5 1717-1G>A/E193X
1407
5 711+1G>T/+
8869
7 deltaF508/1078delT 1718
7 deltaF508/R347P
7842
9 deltaF508/A455E
1971
10 deltaF508/Q493X
2664
10 deltaF508 homozygote 16553
• 具有高分辨温度控制及数据采集本领的仪器 • LightScanner 专门针对High Resolution Melting专利方法而设计 的高分辨熔解曲线分析仪
高清晰超快速显微成像仪 技术参数
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LightScanner96高分辨溶解曲线系统技术参数解读
LightScanner 高分辨溶解曲线分析系统技术参数一、功能描述：1、*不带荧光定量的独立的高分辨溶解曲线分析仪2、非标记探针法（LunaProbe）进行位点基因分型（Genotyping）功能；小片段扩增+温度内标法（Small Amplicon）进行位点基因分型（Genotyping）功能3、针对PCR产物的未知基因突变筛查功能二、硬件配置：1、*标准8行x 12列的96孔板模式，高精度96孔板半导体电加热温控方式，而非空气热循环模式2、自动侦测、载入样品板装置3、122阵列光源4、CCD检测系统5、cGMP认证并严格按照cGMP标准生产，CE认证三、技术参数：1、需配备可PCR前加入的LC Green Plus高分辨溶解曲线分析荧光染料2、控温精度：±0.01℃，温度范围：室温-100 °C3、高分辨溶解曲线分析要求的缓慢升温方式：0.1℃/秒，降温速率：95°到60 °C (非线性)~ 180 秒（室温25 °C条件下）4、数据采集密度：100个数据/℃5、激发波长：470±20nm，发射波长：510 和600 nm6、*非标记探针法（LunaProbe）进行位点基因分型（Genotyping）功能，成本小于1.5元人民币/样本；小片段扩增+温度内标法（Small Amplicon）进行位点基因分型（Genotyping）功能，成本小于1.5元人民币/样本7、DNA Genotype特异性99.5%（片段大小小于400bp）8、反应体系5-100ul9、分析时间：6分钟内完成96孔板（96个样品）的高分辨溶解曲线分析四、数据控制系统及软件：1、*软件必须具有对PCR产物进行未知突变扫描和针对已知SNP为点进行非标记探针（LUNA Probe）进行基因型鉴定的功能。
2、*软件必须具有进行低端和高端内标PCR产物进行校正的功能，从而对小片段PCR扩增产物直接进行基因型鉴定（Genotyping）。
nanoscan3 参数
nanoscan3 参数标题：Nanoscan3参数详解引言：Nanoscan3是一种先进的纳米级扫描仪，广泛应用于纳米材料研究、纳米生物学和纳米医学等领域。
本文将详细介绍Nanoscan3的参数，包括扫描速度、分辨率、扫描范围、样品准备和数据分析等五个大点。
正文内容：1. 扫描速度：1.1 扫描速度的定义：扫描速度是指Nanoscan3在单位时间内能够扫描的样品面积。
1.2 影响扫描速度的因素：1.2.1 扫描模式：Nanoscan3提供多种扫描模式，如线扫描、点扫描和区域扫描等。
不同的扫描模式对应不同的扫描速度。
1.2.2 扫描参数设置：扫描速度还受到扫描参数的影响，如扫描步长、扫描时间和采样率等。
1.2.3 样品表面特性：样品表面的平整度和粗糙度也会对扫描速度产生影响。
2. 分辨率：2.1 分辨率的定义：分辨率是指Nanoscan3能够识别和显示的最小特征尺寸。
2.2 影响分辨率的因素：2.2.1 光学系统：Nanoscan3采用了高性能的光学系统，包括高分辨率的物镜和精确的聚焦机制，这些因素对分辨率有重要影响。
2.2.2 探针尖端尺寸：扫描探针的尖端尺寸也会影响分辨率，尖端尺寸越小，分辨率越高。
2.2.3 信号处理算法：Nanoscan3采用了先进的信号处理算法，能够提高图像的清晰度和分辨率。
3. 扫描范围：3.1 扫描范围的定义：扫描范围是指Nanoscan3能够覆盖的样品面积。
3.2 影响扫描范围的因素：3.2.1 扫描平台尺寸：Nanoscan3的扫描平台尺寸限制了扫描范围的大小。
3.2.2 扫描模式：不同的扫描模式对应不同的扫描范围，如线扫描模式适用于长条状样品，而区域扫描模式适用于较大面积的样品。
4. 样品准备：4.1 样品准备的重要性：良好的样品准备是获得准确扫描结果的关键。
4.2 样品表面处理：样品表面的净化、平整化和涂覆等处理措施可以提高扫描的质量和准确性。
4.3 样品固定：对于液体样品，需要采用适当的固定方法，以避免扫描过程中的样品移动。
光谱光谱分析仪测量常用参数的规范操作流程
光谱光谱分析仪测量常用参数的规范操作流程河南师范大学张豪杰光谱分析仪是光学研究以及光纤通信中常用的测试仪器，规范的使用光谱分析仪可以得到精确的测量结果。
本文以横河的AQ6370光谱分析仪为例，结合自己的测试经验，与大家分享下使用光谱分析仪进行一些常规参数的规范测量方法。
一、光谱分析仪简述：光谱分析仪是光通信波分复用检测中常使用到的测量仪器，当WDM系统刚出现时，多用它测试信号波长和光信噪比。
其主要特点是动态范围大，一般可达70dB；灵敏度好，可达-90dBm；分辨率带宽小，一般小于0.1nm；比较适合于测试光信噪比。
另外测量波长范围大，一般在600~1700nm.，但是测试波长精度时不如波长计准确。
在光谱的测量、各参考点通路信号光功率、各参考点光信噪比、光放大器各个波长的增益系数和增益平坦度的测试都可以使用光谱分析仪。
光谱分析仪现在也集成了WDM的分析软件，可以很方便地把WDM的各个波长的中心频率、功率、光信噪比等参数用菜单的方式显示出来。
二、常用参数测试光谱分析仪的屏幕显示测量条件、标记值、其它数据以及测量波形。
屏幕各部分的名称显示如下：图1：屏幕各部分的名称1、光谱谱宽的测量谱宽即光谱的带宽，使用光谱分析仪可以测量LD、发光二极管的谱宽。
在光谱的谱宽测量时，要特别注意光谱分析仪系统分辨率的选择，即原理上光谱分析仪的分辨率应当小于被测信号谱宽的1/10.，一般推荐设置为至少小于被测信号谱宽的1/5。
在实际的测量中，为了能够准确测量数据，一般选择分辨率带宽为0.1nm 以下。
分辨率带宽RES位于SETUP菜单中的第一项，直接输入所要设定的分辨率带宽的大小即可。
如下图2、3、4所示（图中只为区别光谱形状的不同），当选择的分辨率带宽不同时，从光谱分析仪观察到的光谱形状有很大的不同，并且所测量得到的谱宽大小的不同。
图2：分辨率带宽RES=0.5nm时的光谱形状图3：分辨率带宽RES=0.1nm时的光谱形状图4：分辨率带宽RES=0.02nm时的光谱形状在观察光谱谱宽的同时，也可以通过光谱分析仪读出光谱的中心频率、带宽、峰值功率和边模抑制比等参数。
罗氏lightcycler96 溶解曲线
罗氏lightcycler96 溶解曲线罗氏LightCycler96溶解曲线分析在分子生物学实验中，PCR（聚合酶链式反应）是一种常用的技术，用于扩增目标DNA片段。
然而，仅仅通过PCR产生的扩增产物并不能提供足够的信息来确定PCR是否成功以及扩增产物的准确性。
为了解决这个问题，研究人员开发了溶解曲线分析技术，通过观察PCR产物的溶解行为，可以获得关于DNA序列、多态性以及污染物存在的重要信息。
一、罗氏LightCycler96系统简介罗氏LightCycler96是一种实时荧光PCR系统，采用独特的热稳定DNA聚合酶和荧光探针技术，能够进行高效、准确的PCR实验。
该系统具有高灵敏度、高特异性和高速度的优点，可用于快速检测和定量分析目标DNA序列。
二、溶解曲线分析原理溶解曲线分析是基于PCR产物在升高温度条件下的溶解行为而进行的。
在PCR反应中，DNA链会逐渐解开，形成单链DNA。
当温度升高到DNA的解链温度（Tm）时，DNA链完全解开。
而不同DNA序列的Tm值是不同的，因此可以通过观察PCR产物的溶解曲线来确定其组成和纯度。
三、溶解曲线分析步骤1. 进行PCR反应。
根据所需扩增的DNA片段设计引物，并使用LightCycler96系统进行PCR反应。
反应体系中加入荧光探针，该探针与扩增产物结合后会发出荧光信号。
2. 温度升高。
在PCR反应结束后，将反应体系在逐渐升高的温度条件下进行熔解，通常温度从低到高按照0.1-1°C的速率升高。
3. 监测荧光强度。
在升高温度的过程中，使用光学系统连续监测PCR产物的荧光强度变化。
当温度达到Tm值时，PCR产物解链，荧光强度会发生剧烈变化。
4. 生成溶解曲线。
将监测到的荧光强度与温度绘制成图形，即得到PCR产物的溶解曲线。
5. 分析溶解曲线。
通过分析溶解曲线的形状、峰值以及Tm值，可以确定PCR产物的组成和纯度，进而判断PCR反应的成功与否。
四、溶解曲线分析的应用1. 确定PCR产物的准确性。
7500溶解曲线设定
7500溶解曲线设定
摘要：
1.溶解曲线简介
2.7500溶解曲线的设定
a.实验目的
b.实验材料
c.实验步骤
d.结果分析
3.溶解曲线在实际应用中的意义
正文：
溶解曲线是描述物质在溶液中溶解度随温度变化的一种曲线。
在化学、地质、环境等领域有着广泛的应用。
今天，我们将以7500溶解曲线为例，详细讲解如何设定一条溶解曲线。
首先，我们来了解一下溶解曲线的设定。
溶解曲线的设定主要是通过实验来完成的。
实验的目的是为了获取物质在不同温度下的溶解度数据，然后通过数据处理，绘制出溶解曲线。
实验材料主要包括待测物质和溶剂。
实验步骤主要包括称取样品、配制溶液、测量溶液的浓度以及记录数据等。
以7500溶解曲线为例，实验步骤如下：
第一步，准备实验材料。
我们需要准备一定质量的7500物质和适量的溶剂。
第二步，配制溶液。
将7500物质加入溶剂中，搅拌均匀，直到7500物
质完全溶解。
第三步，测量溶液的浓度。
使用浓度计测量溶液的浓度，记录下浓度数据。
第四步，改变温度。
将溶液温度升高或降低，重复第二步和第三步，直到获取足够多的数据。
第五步，数据处理。
将所获取的数据进行整理和处理，绘制出溶解曲线。
通过以上步骤，我们就可以得到7500溶解曲线。
溶解曲线可以直观地展示物质在不同温度下的溶解度变化，为科学研究和工程应用提供重要依据。
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LightScanner 高分辨溶解曲线分析系统技术参数
一、功能描述：
1、*不带荧光定量的独立的高分辨溶解曲线分析仪
2、非标记探针法（LunaProbe）进行位点基因分型（Genotyping）
功能；小片段扩增+温度内标法（Small Amplicon）进行位点基因分型（Genotyping）功能
3、针对PCR产物的未知基因突变筛查功能
二、硬件配置：
1、*标准8行x 12列的96孔板模式，高精度96孔板半导体电
加热温控方式，而非空气热循环模式
2、自动侦测、载入样品板装置
3、122阵列光源
4、CCD检测系统
5、cGMP认证并严格按照cGMP标准生产，CE认证
三、技术参数：
1、需配备可PCR前加入的LC Green Plus高分辨溶解曲线分析
荧光染料
2、控温精度：±0.01℃，温度范围：室温-100 °C
3、高分辨溶解曲线分析要求的缓慢升温方式：0.1℃/秒，降温
速率：95°到60 °C (非线性)~ 180 秒（室温25 °C条件下）
4、数据采集密度：100个数据/℃
5、激发波长：470±20nm，发射波长：510 和600 nm
6、*非标记探针法（LunaProbe）进行位点基因分型（Genotyping）
功能，成本小于1.5元人民币/样本；小片段扩增+温度内标法（Small Amplicon）进行位点基因分型（Genotyping）功能。
7、DNA Genotype特异性99.5%（片段大小小于400bp）
8、反应体系5-100ul
9、分析时间：6分钟内完成96孔板（96个样品）的高分辨溶
解曲线分析
四、数据控制系统及软件：
1、*软件必须具有对PCR产物进行未知突变扫描和针对已知
SNP为点进行非标记探针（LUNA Probe）进行基因型鉴定的功能。
2、*软件必须具有进行低端和高端内标PCR产物进行校正的功
能，从而对小片段PCR扩增产物直接进行基因型鉴定（Genotyping）。
3、戴尔台式电脑，奔腾2.0G CPU，1G内存，80G硬盘，1280x1024
显卡，19英寸液晶显示器，10/100M网卡，4 USB 接口，USB 鼠标键盘，DVD光驱(CD RW)，XP专业版操作系统，已安装LightScanner控制及数据处理软件，兼容实验室仪器管理系统软件LIMS.
4、准确进行突变位点检测和基因分型的高分辨熔点分析软件，包括仪器控制、数据采集、数据处理、输出等功能。