【培训课件-;临床血液学】_血液病MICM检验3
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临床血液学检验绪论ppt课件
5. Wright（1902）、Giemsa（1902）、Jenner（1899）、 Leishman（1901）和MacNeqal（1922）对Romanowsky混合物 染色剂做了改进
6. Romanowsky型混合物染色剂具有良好的染色效果，直到现在 其基本配方仍被广泛使用，这一混合染色剂由甲基蓝、伊红和 天青组成，依据染色后细胞的大小、形状及色彩深浅进行鉴别
始人之一、著名的血液学家、医学教育家。多年致力于临 床医学和血液学研究；主持建立中国第一个输血及血液学 研究所（天津输血及血液研究所）；重视医学教育，积极 参与恢复八年制的医学教育。主编有《邓家栋临床血液 学》、《内科学基础》、《诊断学基础》、《临床血液学》 及其他医学专著
15
王振义（1924.11.30- ），内科血液学专家，中国工程院 院士，法国科学院外籍院士，上海交通大学医学院附属 瑞金医院终身教授。他是国内血栓与止血专业的开创者 之一，其主编的《血栓与止血－－基础与临床》在引领 中国血液学教学、科研和临床工作方面具有极高价值。 在医学上的最主要贡献还有首次利用全反式维甲酸诱导 急性早幼粒细胞白血病细胞分化
20
三、血液系统疾病的分类及特点 （一）血液系统疾病的分类
21
原发性血液病：是指原发于血液和造血组织的，并以血液学异常为主 要表现的疾病，多有其独特的血液学发病机制和临床表现
红细胞疾病
原发性血液病
白细胞疾病
血液系统疾病 （血液病）
出血与血栓性疾病
继发性血液病 （继发性血液异常）
继发性血液病（继发性血液异常）：是其他器官或组织的病变，通过 某些机制累及血液和造血组织而出现血液异常，其转归常取决于原发 疾患。此外，外科手术、严重创伤及药物治疗等也可引起血液学异常
6. Romanowsky型混合物染色剂具有良好的染色效果，直到现在 其基本配方仍被广泛使用，这一混合染色剂由甲基蓝、伊红和 天青组成，依据染色后细胞的大小、形状及色彩深浅进行鉴别
始人之一、著名的血液学家、医学教育家。多年致力于临 床医学和血液学研究；主持建立中国第一个输血及血液学 研究所（天津输血及血液研究所）；重视医学教育，积极 参与恢复八年制的医学教育。主编有《邓家栋临床血液 学》、《内科学基础》、《诊断学基础》、《临床血液学》 及其他医学专著
15
王振义（1924.11.30- ），内科血液学专家，中国工程院 院士，法国科学院外籍院士，上海交通大学医学院附属 瑞金医院终身教授。他是国内血栓与止血专业的开创者 之一，其主编的《血栓与止血－－基础与临床》在引领 中国血液学教学、科研和临床工作方面具有极高价值。 在医学上的最主要贡献还有首次利用全反式维甲酸诱导 急性早幼粒细胞白血病细胞分化
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三、血液系统疾病的分类及特点 （一）血液系统疾病的分类
21
原发性血液病：是指原发于血液和造血组织的，并以血液学异常为主 要表现的疾病，多有其独特的血液学发病机制和临床表现
红细胞疾病
原发性血液病
白细胞疾病
血液系统疾病 （血液病）
出血与血栓性疾病
继发性血液病 （继发性血液异常）
继发性血液病（继发性血液异常）：是其他器官或组织的病变，通过 某些机制累及血液和造血组织而出现血液异常，其转归常取决于原发 疾患。此外，外科手术、严重创伤及药物治疗等也可引起血液学异常
MICM检测在恶性血液病中运用ppt课件
发现Ph；
发现+21
SKY CGH PCR技术 FLT3-ITD(1996) c-KIT突变（1993） ………….. FISH出现； 阐明某些染 色体异常的 分子学改变
新一代高 通量测序 技术；各 种遗传学 改变间的 相互作用
MICM检测在恶性血液病中 运用
背景介绍
血液病是原发于造血系统的疾病，或影响造血系统伴发 血液异常改变，以贫血、出血、发热为特征的疾病。 白细胞 疾病 常见血液病 造血系统 恶性肿瘤
贫血症
出血性疾 病
恶性血液病类型
检测方法
MICM
• FAB形态学诊断(Morphology)：包括血 液和骨髓形态学及组织化学染色。 • 免疫学检查(Immunology ) • 遗传学检查(Cytogenetics) • 分子生物学检查(Molecular)
• 1、B祖细胞型ALL：FAB标准的L1或 L2，一般TdT(+)HLA-DR(+)， CD19(+)，此型又分为2个亚型， CD10＋和CD10－，前者预后好，多数 病例CD24＋，CD34＋，CD20表达随 成熟度增加而增加。
• 2、前B细胞型ALL：一般为CD19＋， CD24，HLA－DR＋，胞浆CD22＋， CD10＋，TdT随CD20变化，CD34多 为阴性。
• 所以我们可以用于血液疾病的诊断如白血病、多发性骨髓瘤、淋
。运用于微小残留病灶的监测等。
常用的方法：流式细胞术和细胞免疫组织 化学染色法。
白血病分类中免疫分型的应用与 意义
常用的抗原：
• 1、白血病系列分化抗原 T淋巴细胞白血病：CD3、CD5、CD7。 B淋巴细胞白血病：CD10、CD19、CD22。 NK淋巴细胞白血病：CD16、CD56、CD57。 髓系白血病：CD13、CD14、CD33、MPO （髓过氧化物酶）。 红白血病：GlyA（血型糖蛋白A）。 巨核细胞白血病：CD41、CD42、CD61。
临床血液学和血液学检验医学PPT课件
5
实验诊断学（laboratory diagnostics)的任务是 将检验的结果，结合病史/家族史、症状/体征 以及影象检查/病理检查等，对病人作出正确的 诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后判断。 检验 病史/家族史，症状/体征 诊断/鉴别诊断
影象诊断/病理诊断
6
绪论
二、发展简史 1673年，Leeuwenhook发明显微镜，此后使血液 形态学有了革命性发展。 1855年，血细胞计数测定 1878~1895年，血红蛋白测定 1877~1912年，细胞分类技术 1953年，Coulter血细胞自动计数仪 上世纪80年代后，自动化仪器发展迅速
24
实验的系统评价（举例DIC）
诊断DIC的效能 Sen% Spe% Acc% Ppv% Npv% 95%CI
PLT 82.7 PT 75.6 APTT 68.5 Fg 38.0 3P 37.2 D-D 80.0 43.9 58.3 65.8 77.0 85.7 70.6 59.5 65.0 66.9 60.19 65.9 75.1 49.7 53.4 58.4 55.6 64.3 69.7 79.1 79.1 74.9 62.1 66.4 81.8 2.36,8.18 4.66,13.38 1.95,11.16 0.75,6.96 1.53,14.56 7.11,34.07
内源性凝血途径缺陷 无出血症状
共同凝血途径缺陷症
共同凝血途径缺陷症 因子XII、激肽释放酶原、高 分子量激肽原缺乏 （遗传性、获得性）
因子X、V、II、I 缺陷症
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(遗传性、获得性)
近年，上海瑞金医院用这2项筛选试验的优化组合；再 结合凝血因子促凝活性和抗原含量测定作表型诊断；然 后用RFLP/AS-PCR验证突变作基因诊断；再用真核细 胞培养，检测相关因子的抗原和活性、Western印迹、 免疫荧光染色、生物代谢标记及PCR等方法判断突变基 因异常蛋白的合成和功能。用这一优化组合的技术平台 对11种遗传性出血病，143个家系，155例患者和543名 家族成员作检验诊断，准确率达100%，无漏诊和误诊 现象。
【培训课件-;临床血液学】_其他白细胞检验(3) - 3
其他白细胞性疾病中的应用 （三）
广州医科大学第二临床学院学习
课时安排：（六个学时）
• 淋巴瘤 （两个学时） • 浆细胞性疾病（一学时）
讲授：多发性骨髓瘤，余自学 • 骨髓增殖性肿瘤（一学时）
讲授：原发性血小板增多症、骨纤 • 其他白细胞疾病（两学时）
讲授：白细胞减少症、类白血病反应、噬 血细胞综合症 、传单等
• 1. 分子生物学检查符合HLH • （例如存在PRF,UNC13D,STX11基因或SAP
基因突变）。
【诊断】
• 2. 符合以下8条标准中的5条： • （1）发热超过一周，最高体温38.5度 • （2）脾大 • （3）两系或三系血细胞减少 • （4）甘油三酯增高（大于3.0mmol/L)和
（或）纤维蛋白原降低（低于1.5g/L). • （5）血清铁蛋白增高（大于500ug/L)
小板、NAP）
4.骨髓象 5.ph1染色体 6.病理检查 7.治疗反应
四、传染性单核细胞增多症
(infectious mononucleosis,IM) P276
[概述] 是由EB病毒所引起的一种急 性或亚急性淋巴细胞良性增生
的传染病，又称 腺性热。好
发于青少年，男：女为3：2， 南方多发。
临床表现：多样化
类白血病的特点：
①血象类似白血病表现， 白细胞数显著增多，或有一定 数量的原始和幼稚细胞出现。 ②有明显诱因③在原发疾病好 转或解除后，类白反应也迅速 自然恢复④本病预后良好。
按周围血白细胞的多少 可分为：白细胞增多性和白细 胞不增多性。
按病情缓急分为急性和慢性。
按细胞类型可分为： 1.中性粒细胞型
血细胞现象，未见恶性肿瘤细胞。 • 3. 生化检查 甘油三酯增高，纤维蛋白原
广州医科大学第二临床学院学习
课时安排：（六个学时）
• 淋巴瘤 （两个学时） • 浆细胞性疾病（一学时）
讲授：多发性骨髓瘤，余自学 • 骨髓增殖性肿瘤（一学时）
讲授：原发性血小板增多症、骨纤 • 其他白细胞疾病（两学时）
讲授：白细胞减少症、类白血病反应、噬 血细胞综合症 、传单等
• 1. 分子生物学检查符合HLH • （例如存在PRF,UNC13D,STX11基因或SAP
基因突变）。
【诊断】
• 2. 符合以下8条标准中的5条： • （1）发热超过一周，最高体温38.5度 • （2）脾大 • （3）两系或三系血细胞减少 • （4）甘油三酯增高（大于3.0mmol/L)和
（或）纤维蛋白原降低（低于1.5g/L). • （5）血清铁蛋白增高（大于500ug/L)
小板、NAP）
4.骨髓象 5.ph1染色体 6.病理检查 7.治疗反应
四、传染性单核细胞增多症
(infectious mononucleosis,IM) P276
[概述] 是由EB病毒所引起的一种急 性或亚急性淋巴细胞良性增生
的传染病，又称 腺性热。好
发于青少年，男：女为3：2， 南方多发。
临床表现：多样化
类白血病的特点：
①血象类似白血病表现， 白细胞数显著增多，或有一定 数量的原始和幼稚细胞出现。 ②有明显诱因③在原发疾病好 转或解除后，类白反应也迅速 自然恢复④本病预后良好。
按周围血白细胞的多少 可分为：白细胞增多性和白细 胞不增多性。
按病情缓急分为急性和慢性。
按细胞类型可分为： 1.中性粒细胞型
血细胞现象，未见恶性肿瘤细胞。 • 3. 生化检查 甘油三酯增高，纤维蛋白原
【培训课件-;临床血液学】_急性髓系白血病
一、M1 急性髓系白血病，未分化型
【概述】 临床特点：
①起病急骤，进展迅速，病情凶险 ② 常伴有严重感染、发热和出血、贫血
口腔粘膜和咽喉常有炎症、溃疡和坏死 ③肝脾淋巴结肿大，但较急淋少见，且程 度轻 ④绿色瘤（chloroma）常见
绿色瘤常见
A B C
【检验】
1、血象 贫血显著， Hb＜60g/L WBC总数升高，（10-50）×109/L 血片中以原始粒细胞为主，可见畸形原粒 血小板中-重度减少，半数在50×109/L以下
四、免疫学检验：粒系抗体均可阳性 五、遗传学和分子生物学检验：此型不特异
诊断
• 符合急性白血病诊断标准 • 骨髓中原始粒细胞30%-89%（NEC）并伴形态学异
常 • 单核细胞＜20%，早幼粒以下细胞＞10% • 免疫表型
三、 M2b 急性髓细胞白血病部分成熟性
ª又称为亚急粒 ª亚急性过程，起病缓慢，以贫血为首发症状 ª出血发生率较低，以皮肤淤点和鼻出血为主 ª骨髓中以中性中幼粒为主 ª髓外浸润发生率高 ª治疗反应好，完全缓解率高 ª特异性遗传标志：t（8：21）染色体易位
骨髓象
三、细胞化学染色 POX、SBB，ACP染色：均阳性 AS-D-NCE阳性，NaF不抑制 α-NBE阴性（主要 存在于单核细胞），与急单鉴别
四、超微结构检验： 电镜对细颗粒型的诊断有价值 五、免疫学检验： CD13、CD33阳性 CD34及HLA-DR阴性 六、遗传学和分子生物学：
染色体t(15;17)形成PML/RARa融合基因，此 白血病可被全反式维甲酸诱导分化
M4Eos： 异常嗜酸细胞＞5% 常伴重现性16号染 色体异常
主要异常为幼稚嗜酸粒 细胞中的异常颗粒，细 胞除典型的嗜酸性颗粒 外，还有大的嗜碱性颗 粒
血液学检验 ppt课件
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
（四）红细胞检验的应用
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断； 2.贫血的辅助诊断与分类； 3.骨髓造血功能评价； 4.职业病筛查。 5.非血液系统疾病的辅助诊断。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断 1）.红细胞与血红蛋白增高性疾病 ①原发性红细胞增多症
贫血类型 正常细胞性
大细胞性 单纯小细胞性
疾病 急性失血，溶贫、 AA 巨幼贫、肝脏疾病
慢性感染、慢性肾病
小细胞低色素性 缺铁贫、珠蛋白生成 障碍性贫血
贫血类型 正常细胞均一性 正常细胞非均一 性 小细胞均一性
疾病 急性失血 再障、G6PD缺乏症
珠蛋白生成障碍性
小细胞非均一性 大细胞均一性 大细胞非均一性
造血干祖细胞异常所致贫血：
包括再生障碍性贫血，纯红细胞再生障碍性贫血，先天性红细胞生成异 常性贫血，造血系统恶性克隆性疾病。
造血微环境异常所致贫血： 骨髓基质、基质细胞和细胞因子
包括骨髓坏死、骨髓纤维化、骨髓硬化症、髓外肿瘤性疾病的骨髓转移 及各种骨髓炎，肝肾功能不全或垂体、甲状腺功能低下时产生EPO不足 或肿瘤性疾病产生过多的造血负调控因子造成的贫血。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
结合MCV和RDW分析贫血的类型
正常细胞均一性贫血： MCV RDW
急性失血性贫血
正常细胞性非均一性贫血 再生障碍性贫血 MCV RDW
小细胞非均一性贫血： MCV RDW
缺铁性贫血
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
小细胞均一性贫血：
MCV RDW
珠蛋白生成障碍性贫血
血液学检验
第一章 红细胞检验
刘子杰 云南省实验诊断研究所 昆明医科大学第一附属医院
（四）红细胞检验的应用
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断； 2.贫血的辅助诊断与分类； 3.骨髓造血功能评价； 4.职业病筛查。 5.非血液系统疾病的辅助诊断。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
1.恶性增殖性疾病的辅助诊断 1）.红细胞与血红蛋白增高性疾病 ①原发性红细胞增多症
贫血类型 正常细胞性
大细胞性 单纯小细胞性
疾病 急性失血，溶贫、 AA 巨幼贫、肝脏疾病
慢性感染、慢性肾病
小细胞低色素性 缺铁贫、珠蛋白生成 障碍性贫血
贫血类型 正常细胞均一性 正常细胞非均一 性 小细胞均一性
疾病 急性失血 再障、G6PD缺乏症
珠蛋白生成障碍性
小细胞非均一性 大细胞均一性 大细胞非均一性
造血干祖细胞异常所致贫血：
包括再生障碍性贫血，纯红细胞再生障碍性贫血，先天性红细胞生成异 常性贫血，造血系统恶性克隆性疾病。
造血微环境异常所致贫血： 骨髓基质、基质细胞和细胞因子
包括骨髓坏死、骨髓纤维化、骨髓硬化症、髓外肿瘤性疾病的骨髓转移 及各种骨髓炎，肝肾功能不全或垂体、甲状腺功能低下时产生EPO不足 或肿瘤性疾病产生过多的造血负调控因子造成的贫血。
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
结合MCV和RDW分析贫血的类型
正常细胞均一性贫血： MCV RDW
急性失血性贫血
正常细胞性非均一性贫血 再生障碍性贫血 MCV RDW
小细胞非均一性贫血： MCV RDW
缺铁性贫血
昆明医科大学第一附属医院医学检验科
小细胞均一性贫血：
MCV RDW
珠蛋白生成障碍性贫血
血液学检验
第一章 红细胞检验
刘子杰 云南省实验诊断研究所 昆明医科大学第一附属医院
临床血液学检验-PPT课件
其他
系统性红斑狼疮、某些自身免疫性疾病、过敏 性休克等
核左 杆状核与分叶核之间的正 常见于感染，尤其是化脓菌 常比值为1：13。如比值增 引起的急性感染，也可见于 移 大，即杆状核粒细胞增多、 急性中毒、急性溶血、急性 甚或出现杆状核以前更幼 失血等 稚阶段的粒细胞 核右 如分叶核粒细胞分叶过多， 主要见于巨幼细胞贫血和应 分叶在5叶以上的细胞超过 用抗代谢化学药物治疗后 移 3％
• 答案D。血小板计数的 参考值和临床意义详 见下表：
参考值 (100一300)x109/L 血小板 生成障碍：再生障碍性贫血、放射性损伤、急性白血 病、巨幼细胞贫血、骨髓纤维化晚期等 减少 <100 血小板破坏或消耗增多：原发性血小板减少性紫癜、 9 ×10 /L 恶性淋巴瘤、上呼吸道感染、风疹、新生儿血小板减 少症、输血后血小板减少症、先天性血小板减少症等 血小板分布异常：如脾脏肿大、血液被稀释(输大量库 存血或大量血浆) 血小板 原发性增多：骨髓增生性疾病，如慢性粒细胞白血病、 增多 真性红细胞增多症和原发性血小板增多症、骨髓纤维 >400× 化早期等 109/L 反应性增多：见于急性感染、急性溶血、某些癌症患 者，这种增多是轻度的，多在500 ×109/L以下
类白 是指机体对某些刺激因素 血病 所产生的类似白血病表现 反应 的血象反应。周围血个白 细胞数大多明显增高，并 可有数量不等的幼稚细胞 出现。当病因去除后，类 白血病反应也逐渐消失 见于：感染及恶性肿瘤最多 见，其次还有急性中毒、外 伤、休克、急性溶血或出血、 大面积积烧伤、过敏及电离 辐射
• 13．嗜酸性粒细胞增 多可见于以下哪一种 疾病： • A．急性失血 • B．化脓菌急性感染 • C．脾功能亢进 • D．类脂质沉积病 • E．支气管哮喘
临床血液学检验ppt课件
14
检验医师的责任
• 要有扎实的和全面的基础医学和临床医学知识 • 能正确掌握各项有关血液疾病诊断和反映病情的试
验 • 适应血液学的发展，建立有关新试验 • 能从事有关科学研究的实验工作 • 具有一定程度的血液病临床知识，对疾病能下诊断 • 具有与临床之间进（evidence-based medicine,EBM）：寻求、 应用证据的医学，亦称实证医学、求证医学。EBM的基 本要素是证据；核心是追踪当前最好的外在证据以回答 临床解决的问题。
12
➢ 血液制品的临床应用：全血→成分血 （RBC悬液、粒细胞、血小板、血浆、丙 种球蛋白、凝血因子等）
➢ 输血存在的问题：输血不良反应；输血传 播性疾病
➢ 自体血体外循环
13
• 血液学检验的任务：利用血细胞的检验技 术、超微结构技术、病理学技术、生物化 学技术、免疫学技术、遗传学技术、细胞 生物学技术、分子生物学技术以及其他多 种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾 病所致的血液学异常进行基础理论研究和 临床诊治的观察，从而推动和促进血液学 和临床血液学的发展和提高。
16
• 循证检验医学（EBLM）/循证血液检验医学（EBHLM）的 循证步骤：循证问题，提出要解决的问题；进行系统的文 献查阅，全面收集所有相关、可靠的大样本随机对照试验 （对照、随机分组、盲法）；应用meta分析对文献、资料 和数据进行严格的评价，评价其可靠性、真实性而得出全 面、真实的评价结果；进行调整，确定最佳方案进行临床 实践；在实践中发现新问题，对进行的临床实践做出后效 评价，发布新的结论与实践结果，指导临床实践。
• microRNA(miRNA)：一组19-24个核苷酸的非编码小 RNA，主要在转录和翻译水平调控mRNA，目前成为许多 肿瘤的诊断和预后判断的分子标志和治疗靶标
检验医师的责任
• 要有扎实的和全面的基础医学和临床医学知识 • 能正确掌握各项有关血液疾病诊断和反映病情的试
验 • 适应血液学的发展，建立有关新试验 • 能从事有关科学研究的实验工作 • 具有一定程度的血液病临床知识，对疾病能下诊断 • 具有与临床之间进（evidence-based medicine,EBM）：寻求、 应用证据的医学，亦称实证医学、求证医学。EBM的基 本要素是证据；核心是追踪当前最好的外在证据以回答 临床解决的问题。
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➢ 血液制品的临床应用：全血→成分血 （RBC悬液、粒细胞、血小板、血浆、丙 种球蛋白、凝血因子等）
➢ 输血存在的问题：输血不良反应；输血传 播性疾病
➢ 自体血体外循环
13
• 血液学检验的任务：利用血细胞的检验技 术、超微结构技术、病理学技术、生物化 学技术、免疫学技术、遗传学技术、细胞 生物学技术、分子生物学技术以及其他多 种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾 病所致的血液学异常进行基础理论研究和 临床诊治的观察，从而推动和促进血液学 和临床血液学的发展和提高。
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• 循证检验医学（EBLM）/循证血液检验医学（EBHLM）的 循证步骤：循证问题，提出要解决的问题；进行系统的文 献查阅，全面收集所有相关、可靠的大样本随机对照试验 （对照、随机分组、盲法）；应用meta分析对文献、资料 和数据进行严格的评价，评价其可靠性、真实性而得出全 面、真实的评价结果；进行调整，确定最佳方案进行临床 实践；在实践中发现新问题，对进行的临床实践做出后效 评价，发布新的结论与实践结果，指导临床实践。
• microRNA(miRNA)：一组19-24个核苷酸的非编码小 RNA，主要在转录和翻译水平调控mRNA，目前成为许多 肿瘤的诊断和预后判断的分子标志和治疗靶标
检验血液学PPT课件
以中晚幼粒细胞增多为主，而其中又以中幼粒细胞为主。 最突出的体征是肝脾肿大，就诊时往往已达脐或脐下，质硬、
无压痛。 t(9;22)(q34;q11) Ph染色体在断点处融合形成bcr/abl融合基因。Ph染色体存
在于CML的整个病程中，治疗缓解后，Ph染色体持续存在， 因此采用骨髓移植，消除Ph阳性克隆，才可能达到最终治愈。
M3a：粗颗粒型
M3b：细颗粒型
关于白血病
M4：急性粒单核细胞白血病，骨髓及周围血中有粒 系及单核细胞增生，骨髓中的原始细胞≧30%，单核 细胞为20%-80%，其余为粒细胞。
M4a：以原粒增生为主 M4b：以原幼单增生为主 M4c：以幼粒、单核细胞增生为主 M4E0：伴嗜酸细胞增多的急性粒单核细胞白血病，
M0：急性髓细胞白血病微分化型，原始细胞≥30%， 无T、B淋巴细胞系标记，至少表达一种髓系抗原免 疫细胞化学或电镜MPO阳性。
M1：急性髓细胞白血病未成熟型，骨髓中原始粒细 胞≥90%（NEC）——绿色瘤
关于白血病
M2：急性髓细胞白血病部分成熟型，骨髓中原始细 胞占30%—89%，早幼粒细胞及以下阶段粒细胞＞ 10%，单核细胞＜20%。
细菌性感染 再障
恶性淋巴瘤 急性淋巴细胞白血病
NAP减弱 慢性粒细胞白血病（慢 性期） 病毒性感染 阵发性睡眠性血红蛋白 尿（PNH）
急性粒细胞白血病
关于细胞化学染色检验
三、过氧化物酶染色（POX）
主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是人类中性粒细胞含量 最多的一种蛋白质。
分化差的原始粒细胞为阴性，分化好的原始粒细胞至中 性成熟粒细胞呈阳性，且随着细胞的成熟，阳性反应的程度 逐渐增强，衰老的粒细胞阳性程度减弱，甚至阴性。嗜酸粒 细胞阳性最强，嗜碱粒细胞阴性。
无压痛。 t(9;22)(q34;q11) Ph染色体在断点处融合形成bcr/abl融合基因。Ph染色体存
在于CML的整个病程中，治疗缓解后，Ph染色体持续存在， 因此采用骨髓移植，消除Ph阳性克隆，才可能达到最终治愈。
M3a：粗颗粒型
M3b：细颗粒型
关于白血病
M4：急性粒单核细胞白血病，骨髓及周围血中有粒 系及单核细胞增生，骨髓中的原始细胞≧30%，单核 细胞为20%-80%，其余为粒细胞。
M4a：以原粒增生为主 M4b：以原幼单增生为主 M4c：以幼粒、单核细胞增生为主 M4E0：伴嗜酸细胞增多的急性粒单核细胞白血病，
M0：急性髓细胞白血病微分化型，原始细胞≥30%， 无T、B淋巴细胞系标记，至少表达一种髓系抗原免 疫细胞化学或电镜MPO阳性。
M1：急性髓细胞白血病未成熟型，骨髓中原始粒细 胞≥90%（NEC）——绿色瘤
关于白血病
M2：急性髓细胞白血病部分成熟型，骨髓中原始细 胞占30%—89%，早幼粒细胞及以下阶段粒细胞＞ 10%，单核细胞＜20%。
细菌性感染 再障
恶性淋巴瘤 急性淋巴细胞白血病
NAP减弱 慢性粒细胞白血病（慢 性期） 病毒性感染 阵发性睡眠性血红蛋白 尿（PNH）
急性粒细胞白血病
关于细胞化学染色检验
三、过氧化物酶染色（POX）
主要为髓过氧化物酶(MPO),MPO是人类中性粒细胞含量 最多的一种蛋白质。
分化差的原始粒细胞为阴性，分化好的原始粒细胞至中 性成熟粒细胞呈阳性，且随着细胞的成熟，阳性反应的程度 逐渐增强，衰老的粒细胞阳性程度减弱，甚至阴性。嗜酸粒 细胞阳性最强，嗜碱粒细胞阴性。
第二章--临床血液学检测PPT课件
5）Ret增高（可排除再障）
6）RBC大小不等，中心浅染区扩大，血清铁
7.0μmol/L
7）血清胆红素正常，尿三胆阴性（可排除溶血）
8）E0.15
进一步检查： MCV、MCH、MCHC、骨髓细胞铁
染色、RDW、粪便虫卵
.
22
1、动态观察病情和疗效，如结核病、风 湿病等的病情和疗效观察。
2、良性肿瘤与恶性肿瘤、器质性疾病与 功能性疾病、细菌性感染与非细菌性感染等 鉴别的参考。
3、反映血浆中球蛋白增高。
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15
二、血沉测定的缺点在于其实验结果
受妊娠、贫血及高球蛋白血症等因
素影响。必要时（在实验室条件允 许的情况下）可同时作ASO、CRP （C反应蛋白）测定，以更好的协助 诊断或鉴别诊断。特别是CRP与 ESR临床意义基本相似，但无E1.生理性变化
（1）正常成年男性血沉变化不大，12岁以下 男童和60岁以上男性血沉可增快，临床上以 0~20mm / h末为正常;
（2）新生儿因纤维蛋白原含量低，血沉较慢;
（3）妇女月经期血沉略快，妊娠三个月以上 血沉渐加快，直至分娩后三周逐渐恢复正常,
可能与生理性贫血及纤维蛋白原含量增加等 有关;
2、作为贫血类疾病疗效判断、治疗性试 验、病情观察的指标。
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6
四、血小板的检测
血小板（platelet，Plt）计数 [参考值] 直接计数法
（100~300）×109/L
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7
[临床意义]
1.Plt↓ Plt<100×109/L称为血小板减少，可见于：
⑴Plt生成障碍：如再障、白血病等。
⑵Plt破坏或消耗增多，见于：
①免疫性破坏，如有Plt自身抗体（如ITP、恶性淋巴 瘤）、过敏性药物损伤（磺胺药、奎宁）、病毒感染 （上呼吸道炎症、风疹）、Plt同种抗体（新生儿Plt减 少症、输血后Plt减少症）；
血液MICM诊断PPT课件
附2张合格的骨髓涂片（晾干后再包装） 血块分开固定（收费按小标本病理收费） • 注意：取材部位是否有病灶
保存液使用福尔马林固定
2020/7/7
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13
取材的限制
• 骨髓增生不均匀 (与血象不符)
• 取材过少 • 取材表浅 • 组织挤压
2020/7/7
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骨髓活检与骨髓涂片细胞增生不一致
• 活检增生低下,涂片增生活跃 骨髓增生不均匀 取材较少,表浅
细胞学：外周血、骨髓涂片，淋巴组织穿刺 组织学：骨髓活检、淋巴组织活检
2020/7/7
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10
骨髓活检和骨髓/血涂片
骨髓/血涂片
• 骨髓涂片细胞细微结构清楚
骨髓活检
• 骨髓活检显示骨髓的组织结构和各
评估红系、粒系增生情况及幼稚
成分的分布及相互关系，对巨核细
细胞比例具有优势
胞的评估具有优势
• 骨髓纤维化、细胞致密可干抽 • 不存在干抽和骨髓稀释
2020/7/7
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融合基因筛查
• 适用患者
本筛查项目主要用于筛查ALL、AML、CML、 AMMOL、CMML、MDS等血液病病种可能出现的31 种融合基因或癌基因，及其融合基因的110余种剪切变 异情况。适合无法确定融合基因类别的初诊患者，便于 医生对血液病患者进行分子标志物的确定，并进行后续 微小残留病灶的监控。 本项目建议配合染色体核型分析一起检测，以免由于 染色体数目异常或携带少见融合基因而造成漏诊。 苏州大学附属第一医院对于初诊ALL,AML患者都建议 做此项目
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32
检测目的
用于JAK2 V617F阴性的ET和PMF患者的诊断。 临床考虑ET或PMF的患者可以组合检测
保存液使用福尔马林固定
2020/7/7
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取材的限制
• 骨髓增生不均匀 (与血象不符)
• 取材过少 • 取材表浅 • 组织挤压
2020/7/7
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骨髓活检与骨髓涂片细胞增生不一致
• 活检增生低下,涂片增生活跃 骨髓增生不均匀 取材较少,表浅
细胞学：外周血、骨髓涂片，淋巴组织穿刺 组织学：骨髓活检、淋巴组织活检
2020/7/7
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骨髓活检和骨髓/血涂片
骨髓/血涂片
• 骨髓涂片细胞细微结构清楚
骨髓活检
• 骨髓活检显示骨髓的组织结构和各
评估红系、粒系增生情况及幼稚
成分的分布及相互关系，对巨核细
细胞比例具有优势
胞的评估具有优势
• 骨髓纤维化、细胞致密可干抽 • 不存在干抽和骨髓稀释
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融合基因筛查
• 适用患者
本筛查项目主要用于筛查ALL、AML、CML、 AMMOL、CMML、MDS等血液病病种可能出现的31 种融合基因或癌基因，及其融合基因的110余种剪切变 异情况。适合无法确定融合基因类别的初诊患者，便于 医生对血液病患者进行分子标志物的确定，并进行后续 微小残留病灶的监控。 本项目建议配合染色体核型分析一起检测，以免由于 染色体数目异常或携带少见融合基因而造成漏诊。 苏州大学附属第一医院对于初诊ALL,AML患者都建议 做此项目
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检测目的
用于JAK2 V617F阴性的ET和PMF患者的诊断。 临床考虑ET或PMF的患者可以组合检测
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形态M
病理及免疫组织化学的优缺点
• 标本直接固定，不容易损失信息，恶性细胞比例更客观，对一些 抽不出或少见细胞，仍可诊断。如伴骨髓纤维化、MM、淋巴瘤、转 移癌、组织细胞、巨噬细胞、树突细胞、何杰金细胞等
• 可以直接观察到组织结构，容易确定恶性细胞的组织部位
• 诊断慢、受诊断者个人经验及知识水平影响大
MICM分型原则中各检测技术简介
形态学：外周血涂片、骨髓涂片±骨髓活检 免疫表型检测：多参数流式细胞仪 细胞遗传学检测
常规核型分析，分子核型分析 FISH 分子遗传学检测 融合基因检测（RT-PCR）：PML-RARA、AML1-ETO、CBFB-MYH11、MLL-
…、BCR-ABL…… 基因突变：FLT3-ITD、CEBPA、NPM1、TET2、IDH1、NOTCH1、IKZF1、
MICM分型原则中各检测技术简介
形态M
细胞形态及细胞化学分析的优缺点
优点： 直观：镜下直接观察细胞形态，对MDS的诊断、一些少见的、
大的恶性细胞的确定优于流式细胞分析恶性细胞的比例更准确： 简单快速，有显微镜即可完成报告
缺点： 人为因素影响大 难以鉴别细胞的成熟阶段，B、T等系列的恶性细胞 细胞较成熟时，难以鉴别良恶性 不能提供太多的预后信息
骨髓或外周血原始细胞比例≥20% 将一些有明确诊断及预后指导意义的细胞或分子遗传学
异常作为诊断和分型的重要标志 将患者诊断之前的疾病状态和治疗措施纳入考量
急性髓细胞白血病（AML）和相关肿瘤 WHO分型
伴再现性遗传学异常的AML 伴MDS相关改变的AML
继发于MDS或MDS/MPN 伴有MDS相关细胞遗传学异常 2或3系50%以上的细胞有发育异常
➢ 在此基础上增加免疫组化和/或FCM分析大大增加 了分型的准确率，可达90%以上；
➢ 染色体、FISH及基因分析，进一步提高分型的准 确率
MICM整合诊断的临床意义
• 全面正确诊断与分型 • 评估预后 • 确立检测MRD的标志，追踪MRD • 帮助建立分层、个性化的治疗 • 定期追踪帮助发现抗原丢失、克隆演变或突变 • 帮助确定病因或发病机制
FBXW7…… 拷贝数变化（CNV）:SNP-array 高通量测序技术……
白血病MICM诊断程序及技术
– 病史 – 形态学：
• 结构：活检 • 细胞学：涂片 • 骨髓血凝块 – 免疫分型： • 流式细胞或免疫组化 – 细胞遗传学：核型分析、FISH – 分子遗传学：融合基因（RT-PCR\Q-PCR)/基因 突变（测序）
R8：幼稚细胞群，正常骨髓中此群细胞数量极低或空缺
流式细胞免疫分型的作用
• 确定系来源 – 原理：不同系有特定的抗原表达 – 髓系/B系/T/NK系/组织细胞和树突状细胞
• 确定细胞分化阶段 – 不同发育阶段细胞，其抗原表达不同
血液病MICM检验
广医附一医院血液内科学习
背景介绍
血液病是原发于造血系统的疾病，或影响造血系统伴发血液异常改变， 以贫血、出血、发热为特征的疾病。
白细胞 疾病
造血系统 恶性肿瘤
常见血液病
贫血症
出血性疾 病
白血病的诊断分型：MICM分型发展由来
FAB分型 1976
MIC分型 1986
MICM分 型
白血病诊断的任务—不仅仅是FAB分类
• 是不是白血病？ • 急性？慢性？ • 系来源 • FAB分类 • 预后分层 • 治疗、疗效判断 • MRD
病史+形态 形态+免疫 形态+免疫+遗传+分子 形态+免疫+遗传+分子
为什么需要MICM综合诊断？
➢ 形态或病理或加细胞化学分析受观察者个体经验 及分辨力的限制，一致率仅50-70%；
治疗相关性AML 不另作分类的AML 髓细胞肉瘤 Down’s综合征相关髓系增生疾病 母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤
伴再现性遗传学异常的AML
AML with t(8;21)(q22;q22) AML with inv(16)(p13.1q22) or t(16;16) APL with t(15;17)(q22;q12) AML with t(9;11)(p22;q23) AML with t(6;9)(p23;q34) AML with inv(3)(q21q26.2) or t(3;3) AML -M7 with t(1;22)(p13;q13) ? AML with mutated NPM1 ? AML with mutated CEBPA
80年代末至90年代初，随着免疫学、细胞遗传学和分子生物学理论和 技术的发展，出现了MICM（形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生 物学）分型
WHO造血和淋巴组织肿瘤分类方案（2001， 2008）
FAB和WHO分类方案的主要区别
FAB：主要建立在形态学基础上 WHO (2001和2008)
2001
MICM分 型
2008
FAB分型及WHO分类
1827年， 法国的Alfred Velpeau 描述第一例白血病 1847 年，Virchow首次提出了“白血病”这个名称 1976年，法、美、英3国7位ຫໍສະໝຸດ 液学家以光镜下的形态为主，参照细胞
化学染色，制定了FAB分型标准，标志着现代白血病诊断与分型的开 端
• 对一些组织结构无破坏、细胞形态改变不大的细胞，难以鉴定良 恶性及成熟度
• 有些恶性细胞在液体中，难以获取组织标本，难以判断组织结构
流式I
流式细胞术
流式I
FCM检测的参数
• FSC: 细胞大小 • SSC:细胞内颗粒多少及细胞内构造的复杂性 • FL：3-10多种（荧光素耦联的单克隆抗体）
流式I
RUNX1-RUNX1T1 CBFB-MYH11 PML-RARA MLLT3-MLL DEK-NUP214 RPN1-EVI1 RBM15-MKL1
通常AML的诊断标准，原始细胞比例>20%，但如果t(8;21)、t(15;17)或 inv(16)阳性，则不论原始细胞比例为多少，AML诊断成立
MICM • FAB形态学诊断(Morphology) • 免疫学检查(Immunology ) • 细胞遗传学检查(Cytogenetics) • 分子遗传学检查(Molecular)