2019年微生物检验第八章非发酵阴杆
非发酵革兰阴性杆菌的检验 微生物实验
1、贝多芬的童年尽管如是悲惨，他对这个时代和消磨这时代的地方，永远保持着一种温柔而凄凉的回忆。
2、社会永远处在这两条路的中间：真理或爱。
它通常的解决，往往是把真理和爱两者一齐牺牲了。
3、脸上的肌肉突然隆起，血管膨胀、犷野的眼睛变得倍加可怕；嘴巴发抖；仿佛一个魔术家召来了妖魔而反被妖魔制服一般。
4、我的信仰使人厌恶或阻碍别人，这是可能的。
但要更改它却不在我能力范围以内，好似我不能改变我的**一样。
我除了我所相信的以外不能相信别的，尤其在这个我将回到神那边去的时候。
5、也许是他作品中最深刻的，仿佛用血泪写成的，结果是一文都不曾拿到。
把贝多芬煎熬完的是，日常的窘况，无穷尽的讼案：或是要人家履行津贴的诺言，或是为争取侄儿的监护权，因为他的兄弟卡尔于一八一五年死于肺病，遗下一个儿子。
6、我称为英雄的，并非以思想强力称雄的人，而只是靠心灵而伟大的人。
7、没有伟大的人格，就没有伟大的人，甚至也没有伟大的艺术家，伟大的行动者；所有的只是些空虚的偶像，匹配下贱的群众的；时间会把他们一齐摧毁。
成败又有什么相干？主要是成为伟大，而非显得伟大。
8、宽大的鼻子又短又方，竟是狮子的相貌。
一张细腻的嘴巴，但下唇常有比上唇前突的倾向。
牙床结实得厉害，似乎可以磕破核桃。
左边的下巴有一个深陷的小窝，使他的脸显得古怪地不对称。
9、艺术家对于他的作品的爱是艺术的心灵。
没有爱便没有艺术作品。
10、在这些**的痛苦之上，再加另外一种痛苦。
韦格勒说他从没见过贝多芬不抱着一股剧烈的热情。
这些爱情似乎永远是非常纯洁的。
11、他甚至在一八二六年时在自己头上打了一枪。
然而他并不死，倒是贝多芬几乎因之送命：他为这件事情所受的难堪，永远无法摆脱。
12、贝多芬的心灵里多少有些清教徒气息；粗野的谈吐与思想，他是厌恶的：他对于爱情的神圣抱着毫无假借的观念。
13、竭力为善，爱自由甚于一切，即使为了王座，也永勿欺妄真理。
14、有时候，人生的现象与痛苦是那么悲惨，对于我们的爱是一种打击，那时，为了拯救这爱，拯救这信念，我们不得不把它超临人世之上，以致它有和人世脱离一切关系的危险。
非发酵菌群的分类鉴定
• 该菌的生长特性、营养要求、及其它生物 学性状与铜绿假单胞菌极为相似，所不同 的是氧化酶阴性，这是与假单胞菌属相区 别的重要特性；此外，该菌一端具有3根以 上丛鞭毛，运动活泼，可与氧化酶阴性的 不动杆菌属和副百日咳鲍特氏菌相鉴别。
3、鼻疽（类鼻疽）伯克霍尔德菌
• 鼻疽伯克霍尔德菌（Burkholderia mallei） 和类鼻疽伯克霍尔德菌（ Burkholderia pseudomallei）是鼻疽与类鼻疽的病原菌， 属假单胞菌属rRNA同源群的第二群；2000 年被NCCLS/CLSI（National Committee
脑膜炎败血黄杆菌在血琼脂平板和营养琼脂平板上的菌落特征（37℃，18—24h）
• 黄杆菌属目前共分为8个种和4个未命名 的生物群。它们分别是：
• 脑膜炎败血黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄 杆菌、水田黄杆菌、嗜醇黄杆菌、嗜糖黄 杆菌、嗜温黄杆菌、薮内黄杆菌及黄杆菌 Ⅱb、Ⅱe、Ⅱh、Ⅱi群。其中脑膜炎败血 黄杆菌、芳香黄杆菌、短小黄杆菌和黄杆 菌Ⅱb群可引起人类疾病。
支气管腐败 鲍特氏菌
+ — + +
+ +
鲍特氏菌属
鞭毛染色
脂、巧克力色血琼脂及兔血琼脂上均不能生长。
副百日咳鲍特氏菌和支气管腐败鲍特氏菌营养 要求不高，在上述培养基上均能生长。
• 3、该菌属细菌不分解糖类。其它生化反应见 下表。
鉴别要点
鞭毛 动力 37℃
18—24℃ 尿素酶 硝酸盐还原 氧化酶
百日咳 鲍特氏菌
— — — — —
+
副百日咳 鲍特氏菌
—
— — + — —
铜绿假单胞菌镜下形态和在血平板上的菌落特征
铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上的菌落特征
微生物检验第八章非发酵阴杆幻灯片
培养特性
• 专性需氧菌。生长温度范围为20-42 ℃; 最适温 度为35 ℃ ，致病性菌可在42 ℃ 生长，但在4 ℃ 不生长，这可与荧光假单胞菌等进展鉴别。
• 本菌对营养无特殊要求，在普通培养基上生长 良好，在选择培养基和麦康凯琼脂、SS琼脂培 养基上也能生长。
•
• 在普通琼脂平板上经18-24 小时培养，可形成 圆形、边缘不整齐、扁平稍隆起、光滑温润且 常呈融合状态的菌落。琼脂被染成蓝绿色或黄 绿色。
3.微生物检验〔检验程序〕
〔1〕别离培养与鉴定： 标本可接种于血琼脂平板培养基和选择性
培养基。鉴定根据镜下特征、菌落形态、 生化反响等。
• 血平板上毛玻璃 样，金属光泽， 生姜味
• 可产生多种色素 ：
荧光素与绿脓素
〔2〕抗原检测：血清学分型、噬菌体分型。
〔3〕核酸检测：DNA内切酶分析、质粒指纹 图谱分析、 PCR指纹图谱分析、脉冲场凝胶 电泳分析〔PFGE 〕、基因芯片、PCR技术 、16SrDNA鉴定技术等。
2.斯氏假单胞菌DNA同源群 斯氏假单胞菌 曼多辛假单胞菌
3.产碱假单胞菌DNA同源群 产碱假单胞菌 假产碱假单胞菌
2.临床意义
• 分布广泛：水、土壤、空气 。 • 人类感染的非发酵菌中，假单胞菌属占70%
-80% ，铜绿假单胞菌占55% -65 % 。 • 常见的有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌
• 可选用：SXT、TZP、CIP、LEV、DO、CT、 MNO等。
• 亚胺培南敏感性好，但容易快速形成耐药。 • 替加环素〔老虎素〕
第三节 嗜麦芽窄食单胞菌
• 嗜麦芽窄食单胞菌是重要的条件致病菌。 • 呼吸道、泌尿道、伤口等部位感染，菌血症
及心内膜炎。 • 很常见：在不发酵菌引起的感染中，仅次于
2019年临床医学检验临床微生物历年真题精选(副高)
2019年临床医学检验临床微生物历年真题精选(副高) [单项选择题]1、下列试验中，不能测定病毒蛋白的方法是 ( )A.蛋白电泳B.免疫荧光技术C.酶免疫技术D.放射免疫技术E.Northern-blot技术参考答案：E[单项选择题]2、百日咳鲍特菌分离培养时宜选用的培养基是A.庆大培养基B.鲍-金培养基C.巧克力培养基D.BCYE培养基E.L-J培养基参考答案：B[多项选择题]3、以下关于流感病毒生物学特点的叙述中正确的是 ( )A.有包膜，单股负链RNA，不分节段B.包膜刺突含有血凝素和融合蛋白C.正粘病毒D.M蛋白决定病毒的亚型E.抗原漂移和转换引起流感流行参考答案：C,E[单项选择题]4、某肿瘤特异性抗原，不存在于任何正常细胞中，其最显著特征是呈现高度的个体独特性，那么最可能诱发此抗原的是A.细菌B.病毒C.基因突变D.细胞恶变E.化学物质参考答案：E参考解析：化学物质诱发的肿瘤，其肿瘤抗原的显著特征是高度个体化。
不同肿瘤，甚至是同一化学物质诱导的肿瘤，其表达的肿瘤抗原可不相同。
[单项选择题]5、下列几项中，错误的描述是( )A.病原菌只进行厌氧呼吸B.兼性厌氧菌和专性厌氧菌都能通过发酵获得能量C.以分子氧为受氢体称需氧呼吸D.发酵必须在无氧条件下进行E.以有机物为受氢体称为发酵参考答案：A参考解析：病原菌多为兼性厌氧菌。
[单项选择题]6、营养要求苛刻，需在含L-半胱氨酸的特殊培养基上方可生长且生长缓慢的是( )A.流感嗜血杆菌B.淋病奈瑟菌C.嗜肺军团菌D.结核分枝杆菌E.莫拉氏菌参考答案：C[单项选择题]7、病毒中和抗体的作用是A.阻止病毒释放B.阻止病毒脱壳C.阻止病毒的生物合成D.阻止病毒吸附宿主细胞E.直接杀死病毒参考答案：D参考解析：病毒中和抗体的主要作用是阻止病毒吸附宿主细胞。
[单项选择题]8、细菌芽胞特有的、并与其高度耐热性有关的成分是( )A.磷脂B.肽聚糖C.磷壁酸D.二氨基庚二酸E.吡啶二羧酸参考答案：E[单项选择题]9、钩端螺旋体的显微镜凝集试验，单份血清标本有诊断意义的滴度是 ( )A.1:100B.1:200C.1:300D.1:400E.1:500参考答案：C[单项选择题]10、根据白喉棒状杆菌在亚碲酸钾培养基上生长情况和生化反应特点，可将本菌分为的三型是A.危重型，重型，中间型B.危重型，中间型，轻型C.危重型，重型，轻型D.重型，中间型，轻型E.重型，过渡型，轻型参考答案：D[单项选择题]11、下面可用来作为筛选O157：H7的依据是A.发酵葡萄糖B.不发酵山梨醇C.触酶阳性D.氧化酶阴性E.硝酸盐还原参考答案：B[单项选择题]12、轮状病毒的G血清型分型依据是A.VP1B.VP2C.VP3D.VP4E.VP7参考答案：E[单项选择题]13、HIV主要侵犯的靶细胞是( )A.CD4+T细胞B.CD8+T细胞C.B细胞D.NK细胞E.巨噬细胞参考答案：A参考解析：HIV以靶细胞表面的CD4分子为主要受体，CD4分子主要表达于CD4+T淋巴细胞。
初级检验士考试(微生物学检验)练习题第八章培养基
第八章培养基一、A11、在培养基中加入某种化学成分或抗生素以抑制某些细菌的生长，而有助于需要的细菌生长，此培养基称为A、基础培养基B、营养培养基C、选择培养基D、鉴别培养基E、厌氧培养基2、巧克力培养基是A、一种鉴别培养基B、含有5%巧克力的培养基C、一种选择培养基D、含有血液的培养基E、一种特殊培养基3、一般不用作培养基抑制剂的是A、胆盐B、煌绿C、亚硫酸钠D、氯化钠E、染料4、制备固体培养基时所用凝固物质不包括A、琼脂B、明胶C、卵清蛋白D、血清E、淀粉5、细菌生长繁殖中所需营养物质，其中葡萄糖、淀粉、甘露醇等属于哪一类物质A、碳源B、氮源C、无机盐类D、维生素类E、生长因素类6、含有Ⅴ和Ⅹ因子，适于接种疑有嗜血杆菌、奈瑟菌等标本的培养基A、麦康凯平板B、巧克力血平板C、SS琼脂D、血液增菌培养基E、中国蓝平板7、可以鉴定非发酵菌的培养基是A、TCBS琼脂B、血平板C、S-S平板D、麦康凯平板E、碱性琼脂二、B1、A.鉴别培养基B.厌氧培养基C.基础培养基D.营养培养基E.选择培养基<1> 、能判断细菌对糖或蛋白质的分解能力的培养基A、B、C、D、E、<2> 、含有细菌所需的基本营养成分，可供大多数细菌生长的培养基A、B、C、D、E、2、A.基础培养基B.营养培养基C.鉴别培养基D.选择培养基E.特殊培养基<1> 、厌氧培养基A、B、C、D、E、<2> 、克氏双糖铁琼脂培养基A、B、C、D、E、<3> 、细菌L型培养基A、B、C、D、E、<4> 、血琼脂培养基属于A、B、C、D、E、答案部分一、A11、【正确答案】C【答案解析】选择培养基在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。
例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。
非发酵菌微生物学检验
非发酵G-杆菌(nonfermentative G- Bacilli)1. 非发酵菌是一群需氧、无芽孢、不利用糖或仅能氧化分解糖类是做为能量来源的G-杆菌。
（1）通常所讲的非发酵菌指在KIA中24小时内表面能够生长，在底部不生长的需氧G-杆菌。
（2）非发酵菌与其它苛养或非糖发酵的G-杆菌之间的界限只是传统意义上的，并不是根据明确的遗传或表型特点来划分。
（3）多为条件致病菌，近年来日益增多，尤其是医院感染。
2. 分类与命名：主要的非发酵G-杆菌属被分成6个科：（1）假单胞菌科：根据rRNA-DNA同源性分为5个rRNA群①rRNAⅠ群/假单胞菌属；②rRNAⅡ群/伯克霍尔德菌属；③rRNAⅢ群/丛毛单胞菌属、食酸菌属；④rRNAⅣ群/短波毛单胞菌属；⑤rRNAⅤ群/窄食单胞菌属；⑥其它：鞘氨醇单胞菌属、希瓦菌属等（2）产碱杆菌科：产碱杆菌属；（3）黄杆菌科：华丽杆菌属（4）莫拉菌科：不动杆菌属、莫拉菌属；（5）甲基球菌科；（6）根瘤菌科3. 非发酵菌的基本鉴定要求（1）缺少糖发酵的证据，通常是在KIA或TSI培养基中无酸产生，斜面和底部均呈红色。
（2）氧化酶+（不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、唐菖蒲伯克菌、浅黄华丽单胞菌、栖稻黄素单胞菌-），但并非所有氧化酶+的G-杆菌都是非发酵菌。
（3）麦康凯上生长很差或不生长。
（4）动力：多为+，但多为专性需氧，故半固体培养基中不明显，宜用直接动力观察或染色法。
4. 重要的鉴定试验（1）葡萄糖利用（O/F试验）：O/F培养基:蛋白胨和糖类的比例为1:5而不同于发酵菌的1:2。
（2）氧化酶试验：（3）动力：半固体培养基:应只穿刺培养基顶部4mm，在培养4-6小时后首次观察结果,24和48小时后再次观察结果。
更准确的方法是湿片法和鞭毛染色。
（4）色素形成：非发酵菌可形成多种色素，有助于菌种的鉴定。
（5）硝酸盐还原/产气：将硝酸盐还原成亚硝酸盐，进而释放氮的生化过程。
（6）吲哚试验：需用含色氨酸丰富的培养基，产吲哚黄杆菌、脑膜败血黄杆菌、食酸丛毛单胞菌等+。
革兰阴性需氧和兼性厌氧性杆菌鉴定—非发酵菌的共性(微生物检验课件)
+/-
非发酵菌－－检验程序
涂片 染色镜检
标本
分离培养 （血平板、麦康凯）
血标本 增菌
可疑菌落
涂片 动力观察 革兰染色 鞭毛染色
氧化酶
O/F 硝酸盐还原
KIA斜面底层不变色 其他生化反应
第三节 非发酵革兰阴性杆菌
❖ 是一大群不发酵葡萄糖或以氧化形式利用 糖、需氧或兼性厌氧、无芽孢的革兰阴性 杆菌。
非发酵菌主要种类
❖ 铜绿假单胞菌 ❖ 不动杆菌属 ❖ 产碱杆菌属 ❖ 莫拉菌属 ❖ 黄杆菌属 ❖ 嗜麦芽假单胞菌属 ❖ 荧光假单胞菌属等
非发酵菌主要特点
❖ 氧化酶：＋；不动杆菌属除外 ❖ O/F试验：O/－ ❖ 动力试验：多数有鞭毛，但半固体动力试验不明显，常采用
氧化酶
－
＋
＋
葡萄糖氧化/ 发酵（O/F）
鞭毛
F 周鞭毛
O／－
F
单、丛、周 单、丛
非发酵菌主要菌属的生化反应
菌属 氧化酶 葡萄糖 O/F
假单胞菌属 +
不动杆菌属 -
产碱杆菌属 +
莫拉菌属
+
黄杆菌属
+
O/O/-
O/F
动力 触媒 硝酸盐还原 麦康凯上生长
+
+
+/-
+
-
+
-
+
+
+
+/-
+
-
3;
-
+
-
镜检或鞭毛染色 （不动杆菌、黄杆菌属和莫拉菌属除外）
葡萄糖氧化发酵试验（O/F）
O/F培养基 （半固体高层）
微生物检验第八章非发酵阴杆课件
本课件介绍了微生物检验第八章的非发酵阴杆。了解非发酵阴杆的定义、形 态特征、生长条件以及分类，同时掌握大肠杆菌属、肠球菌属、沙门氏菌属 等病原菌的特征和相关知识。
非发酵阴杆的定义
非发酵阴杆是一类微生物，不产生气体或酸，不利用碳源发酵，但可以进行氧化代谢。它们在微生物检验中的 鉴定和分类非常重要。
2
分子生物学方法
通过PCR技术或其他分子生物学方法，可以检测和分离大肠杆菌的特定基因片 段。
3
其他方法
除了传统的试管培养和分子生物学方法，还可以使用环境采样和培养技术等方法 来分离大肠杆菌。
肠球菌属的分类及特征
• 肠球菌属也是一类非发酵阴杆菌，与大肠杆菌属有一些相似之处，但也有一些明显的区别。 • 肠球菌的细胞形态多样，可以是短杆状或曲杆状，也有少量菌株呈球状。 • 它们一般不产生气体，不利用碳源发酵，但可以进行氧化代谢。
非发酵阴杆的形态特征
• 细胞形态多样，可以是短杆状、长杆状、曲杆状等。 • 染色时不易被革兰染色，因此常使用其他染色方法进行鉴定。 • 有时会形成胶样胞外聚集物，如地衣芽胞杆菌。
非发酵阴杆的生长条件
1 温度
非发酵阴杆的生长温度一 般较为宽泛，可以在寒冷 或温暖的环境中繁殖。
2 营养物质
它们对营养物质的需求不 高，可以在简单的培养基 上生长。
沙门氏菌属的分类及特征
• 沙门氏菌属是一类重要的非发酵阴杆菌，其中的某些菌株可以引起沙门氏菌感染。 • 沙门氏菌呈短杆状，是一类革兰阴性菌。 • 一些沙门氏菌属菌株具有毒力，可引起胃肠道感染和严重的食物中毒。
非发酵阴杆常见病原菌
志贺氏菌
志贺氏菌是一类非发酵阴杆菌，是引起痢疾的主 要病原菌。
《非发酵菌及检验》课件
非发酵菌感染可引起机体免疫应 答异常，导致免疫损伤和感染扩 散。
临床表现
肺部感染
非发酵菌引起的肺部感染症状包括咳嗽、咳痰、呼吸 困难等。
泌尿系统感染
尿频、尿急、尿痛等泌尿系统感染症状也是非发酵菌 感染的常见表现。
其他感染
非发酵菌还可引起败血症、脑膜炎、心内膜炎等严重 感染，出现相应的临床表现。
诊断与治疗
阴性等。
非发酵菌对某些抗生素敏感或耐 药，因此需要根据药敏试验结果
进行治疗。
非发酵菌在自然界中广泛分布， 如土壤、水源、空气等，也常常 引起医院感染，如伤口感染、肺
炎等。
02 非发酵菌的检测方法
分离培养法
分离培养法是非发酵菌检测的传统方 法，通过选择性培养基将非发酵菌从 样本中分离出来，然后进行形态学和 生化鉴定。
。
非发酵菌感染常引起医院感染爆发事件 非发酵菌对常用消毒剂和抗生素具有较
，如泌尿道感染、呼吸机相关肺炎等。
高的耐药性，给治疗带来困难。
04 非发酵菌的致病性
致病机制
01
黏附作用
非发酵菌能够黏附在人体黏膜上 皮细胞上，进而侵入细胞间隙和 基质，引发感染。
毒素产生
02
03
免疫损伤
部分非发酵菌能够产生毒素，这 些毒素对人体细胞有毒害作用， 导致感染症状。
缺点是分离时间长，容易受到杂菌干 扰，且对某些非发酵菌的分离效果不 佳。
分离培养法的优点是操作简单，对设 备要求不高，适用于大多数非发酵菌 的分离。
免疫学检测法
免疫学检测法利用抗原-抗体反 应的原理，通过特异性抗体检 测非发酵菌的抗原。
免疫学检测法的优点是灵敏度 高、特异性强，适用于大量样 本的快速检测。
非发酵菌特征及鉴定思路课件
感染途径
非发酵菌主要通过呼吸道、皮肤或消化道侵入人体，引发局 部或全身感染。
致病机制
非发酵菌的致病性与其产生的毒素、酶和细胞表面结构有关 ，这些物质能破坏人体组织，引发炎症和免疫反应。
临床表现与诊断
临床表现
非发酵菌感染的临床表现多样，包括发热、咳嗽、呼吸困难、胸痛等，严重时可 导致败血症和多器官功能衰竭。
物抑制或杀灭。
抗菌药物选择与治疗策略
1 2 3
根据药敏试验结果选择抗菌药物
根据非发酵菌的药敏试验结果，选择敏感的抗菌 药物进行治疗，以提高治疗效果并降低耐药性的 产生。
联合用药
针对非发酵菌的耐药性，可以采用联合用药策略 ，通过不同抗菌药物的协同作用，增强抗菌效果 ，并延缓耐药性的产生。
更新抗菌药物
分离培养与纯化
分离培养
通过选择性培养基，将非发酵菌从样本中分离出来。
纯化
通过反复划线培养，获得纯培养物，保证后续实验的准确性。
生理生化特征分析
氧化酶试验
通过氧化酶试验，初步判断非发 酵菌是否为革兰氏阴性菌。
糖发酵试验
检测非发酵菌对糖的利用能力，有 助于分类鉴定。
吲哚试验
检测非发酵菌是否产生吲哚，用于 鉴别肠道细菌。
非发酵菌特征及鉴 定思路课件
目 录
• 非发酵菌概述 • 非发酵菌的鉴定方法 • 非发酵菌的鉴定思路 • 非发酵菌的致病性与感染 • 非发酵菌的耐药性与抗菌药物选
择 • 非发酵菌的生物安全与防护
01
非发酵菌概述
定义与分类
定义
非发酵菌是指不能以葡萄糖为碳 源，不进行发酵性代谢的细菌。
分类
非发酵菌属于革兰氏阴性杆菌， 主要包括假单胞菌属、不动杆菌 属、黄杆菌属等。
微生物学整理--非发酵格兰阴性杆菌
非发酵格兰阴性杆菌共同特点假单胞菌属铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）荧光假单胞菌不动杆菌属寡养单胞菌属形态特征1）无芽孢，格兰阴性杆菌2）多数有鞭毛（不动杆菌属除外），鞭毛类型为周/丛/单鞭毛，但半固体动力试验不明显，常采用镜检或鞭毛染色多数有鞭毛，类型为丛/单鞭毛（端鞭毛）；运动活泼G- 细杆菌，散在排列，有时呈球杆或线状，成对或短链状排列；单鞭毛，临床株多有菌毛G- 杆菌，单端丛鞭毛G- 杆菌菌体多为球杆状，常成双排列，似双球菌；（与淋球菌鉴别）无芽孢、无鞭毛，某些菌株有荚膜培养特征营养要求不高，多数为需氧菌1）专性需氧2）生长范围广：少数可在4度或42度生长3）营养要求不高，在麦康凯培养基上可以生长；部分菌株可产生荧光素或其他色素1）专性需氧2）最适生长温度35度，4度不长，42度可生长3）营养要求不高，普通培养基生长良好4）菌落特征：可形成多种不同形态的菌落，多扁平湿润，边缘锯齿状，常融合生长；产生荧光素和水溶性的绿脓素等不同颜色的色素；培养物有生姜气味；在BAP上β溶血；在MAC上形成不发酵乳糖菌落1）专性需氧，营养要求不高，普通平板、MAC平板可生长2）多数产生水溶性荧光素，在紫外线下呈绿色荧光3）最适温度25~30度，4度生长，35度、42度不生长，具有嗜冷性，可在冰箱储存血中繁殖1）专性需氧，最适温度35度2）营养要求不高，普通培养基能生长，少数菌株可产生色素；在BAP/巧克力平板CO2环境中生长良好，可在MAC培养基上生长，形成不发酵乳糖的菌落1）专性需氧2）最适温度35度，4度不生长，近半数菌42度生长3）营养要求不高，普通平板生长良好，菌落灰黄色、深褐色或无色；在BAP上有强的氨味，无溶血，MAC上可生长生化反应1)氧化酶多+（不动杆菌属除外），在KIA上K/K2)O/F试验:O/- 氧化酶+，硝酸盐还原+，O/F大多O型1）氧化酶+；O/F：O2）分解糖产酸不产气：葡、木+，乳、麦、蔗—3）硝酸盐还原+，产N2+4）枸橼酸盐+；精氨酸氧化酶+；O/F：O；卵磷脂酶+；明胶液化+“三阴”：氧化酶阴性、动力阴性、硝酸盐还原阴性。
革兰阴性需氧和兼性厌氧杆菌鉴定ppt课件
（二）临床意义
2.所致疾病： 肠道外感染（内源性感染） ▪ 1.化脓性感染——定位转移 腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、 败血症、新生儿脑膜炎等 ▪ 2.泌尿道感染——病原菌来自病人肠道（上行性） 占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、 肾盂肾炎等）
引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征
旅行
类志贺毒素
腹泻、出血 性肠炎
腹泻（无 WBC），腹 痛、血便、发 热、HUS
儿童、老人
未熟牛肉 牛奶
未明
急、慢性腹 水泻、呕吐 泻
所有年龄
耐药性越来越严重：产超广谱β-内酰胺酶 （ESBL)比例增高，对青霉素类和1～4代头孢 菌素及单环菌素耐药，仅对头霉素类、碳青霉 烯类、含酶抑制剂类抗生素敏感。
死亡
毒 血 症
中 毒 性 菌
痢
高热、休克中毒 性脑病、DIC
（二）致病性与免疫性
所致疾病——细菌性痢疾 传染源：病人、带菌者 传播途径：经口 致病机制 临床类型 急性菌痢 中毒性菌痢 慢性菌痢 带菌者
免疫力:不牢固，易再感染
在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分，床边 接种或立即送检，不能及时接种者可用卡-布运送培养基送 检，昏迷不能排便病人可用肛拭取样。
抗原结构: 菌体（O）抗原 鞭毛（H）抗原 表面（K、Vi）抗原
易出现各种变异：耐药性（重要）
第一节 肠杆菌科
葡萄糖发酵（+） 硝酸盐还原（+） 氧化酶（-） 触酶（+）痢疾志贺菌除外 结合血清学鉴定到属、种（型）
硝酸盐还原试验 阳性：红色 阴性：淡黄色
氧化酶试验
阳性：紫红色 阴性：无色
抵抗力 比其它肠杆菌弱，尤其对酸敏感
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(Eikenella)
? 土壤杆菌属
(Agrobacterium)
? 黄单胞菌属
(Xanthomonas)
? 丛毛单胞菌属
(Comamonas)
常见非发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验
假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属 莫拉菌属
氧化酶
+
O/F试验
O/-
+
性培养基。鉴定根据镜下特征、菌落形态、 生化反应等。
? 血平板上毛玻璃 样，金属光泽， 生姜味
? 可产生多种色素：
荧光素与绿脓素
（2）抗原检测：血清学分型、噬菌体分型。 （3）核酸检测：DNA内切酶分析、质粒指纹
图谱分析、 PCR 指纹图谱分析、脉冲场凝胶 电泳分析（PFGE ）、基因芯片、PCR 技术、 16SrDNA 鉴定技术等。
第十七章 非发酵革兰阴性杆菌
?
是指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利
用葡萄糖的需氧，无芽胞的革兰阴性杆菌。
? 特别提示：并非分类概念 只为认识方便
?
生物习性相似 已经形成习惯
革兰阴性杆菌
－
OX
+
葡萄糖O/F
O
F
不动杆菌属 窄食单胞菌属
肠杆菌科
不利用
洛非不动杆菌
葡萄糖O/F
O
F
假单胞菌属 无色杆菌属 金色杆菌属
3.微生物特性
? 革兰阴性、无芽胞、专性需氧 ? 有端鞭毛或丛鞭毛 ? 生长温度范围广，最适生长温度为 35℃ ? 产生各种水溶性色素： 绿脓素、脓红素、荧光素、
脓褐素 。 ? 对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药。
药敏试验药物选择
按CLSI(NCCLS) 推荐，分为 4组： A组: 头孢他啶，庆大霉素，美洛西林，替卡西林，哌拉西林。 B组: 头孢吡肟，头孢哌酮，氨曲南，亚胺培南，阿米卡星，
2.生物学特性
形态与染色
为无芽胞细长的革兰氏阴 性杆菌，菌体长短不一，短 的呈球杆状，长的为丝状。 成对排列或形成短链。无荚 膜，在菌体一端有1 根鞭毛， 运动活泼。革兰氏染色阴性， 无抗酸性。
培养特性
? 专性需氧菌。生长温度范围为20-42 ℃; 最适温 度为35 ℃ ，致病性菌可在42 ℃ 生长，但在4 ℃ 不生长，这可与荧光假单胞菌等进行鉴别。
妥布霉素，环丙沙星。
C 组: 头孢噻肟，头孢曲松，氯霉素 D组或U 组：羧苄西林，头孢唑肟，四环素，诺氟沙星，氧
氟沙星，磺胺甲基异恶唑。
二、铜绿假单胞菌
? 在自然界分布较为广泛，适应能力强。 ? 常引起感染：皮肤、呼吸道、泌尿道、烧
伤感染等。慢性肺部感染极为常见。 ? 菌血症、心内膜炎、肺囊性纤维变。 ? 眼部感染导致角膜穿孔而失明。
不利用
气单胞 邻单胞 弧菌属
产碱杆菌 布鲁菌属 产碱假单胞 无色杆菌
共有的几个特点
非发酵菌大多数为条件致病菌
主要引起抵抗力低下病人的机会感染， 如败血症、呼吸道感染、尿路感染、伤口感 染等。现已成为引起医院内感染的 主要病原 菌。
对抗生素有天然的抗药性
非发酵菌对抗生素常呈现多重耐药现象。如铜绿假 单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、黄杆菌 等对绝大多数抗生素耐药，铜绿假单胞菌对氨苄青霉 素耐药率达100% ，甚至对第三代头子孢菌素也呈现耐 药，而且耐药率在逐年增加。
3.产碱假单胞菌DNA同源群 产碱假单胞菌 假产碱假单胞菌
2.临床意义
? 分布广泛：水、土壤、空气 。 ? 人类感染的非发酵菌中，假单胞菌属占70%
-80% ，铜绿假单胞菌占55% -65 % 。 ? 常见的有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、
恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。 ? 这些细菌在医院内感染中亦常见。
? 本菌对营养无特殊要求，在普通培养基上生长 良好，在选择培养基和麦康凯琼脂、SS琼脂培 养基上也能生长。
? 在普通琼脂平板上经 18-24 小时培养，可形成 圆形、边缘不整齐 、扁平稍隆起、光滑温润且 常呈融合状态的菌落。琼脂被染成 蓝绿色或黄 绿色。
? 金属光泽、有特殊气味 之灰绿色、蓝绿色 的菌落，并形成 透明溶血环 。
+/-
-
+
O
O
O/-
-
+
+/-
-
-
动力
+/-
+/-
+/-
-
+
+
-
注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。
常见非发酵菌的鉴定双岐索引
－ OX
－
不动杆菌属
+
葡萄糖产酸 黄色素
－ 莫拉氏菌属 － + 黄杆菌属 +
非发酵菌 动力
+ OX
－
嗜麦芽窄食单胞菌
+ 端鞭毛
－ 产碱杆菌属
葡萄糖产酸 + 尿素
－ 无色杆菌属
+ 土壤杆菌属
+
假单胞菌属
第一节 假单胞菌属
? 假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定 rRNA同源群有关的种。
? 一群需氧、不发酵葡萄糖、无芽胞，有鞭 毛、氧化酶阳性的革兰阴性杆菌。
? 多为条件致病菌。
临床常见假单胞菌分群
rRNA1 1.荧光假单胞菌DNA同源群 铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌 恶臭假单胞菌 2.斯氏假单胞菌DNA同源群 斯氏假单胞菌 曼多辛假单胞菌
检验结果报告与分析
? 诊断要与临床表现、标本来源相结合。 ? 初代敏感的菌株在治疗 3~4天后可能发生耐药。因
生化特性
? 氧化酶阳性，能氧化分解葡萄糖、木糖产酸，不 产气，但产生红脓素或黑脓素的菌株，以及粘液 型菌落的菌株可能不分解糖类。
? 本菌能液化明胶，分解尿素，能利用枸橼酸盐， 不产生吲哚，能还原硝酸盐为亚硝盐酸，或产生 氮气。
3.微生物检验（检验程序）
（1）分离培养与鉴定： 标本可接种于血琼脂平板培养基和选择
不发酵革兰阴性杆菌分类
? 假单胞菌属
(Pseudomonas)
? 产碱杆菌属
(Alcaligenes)
? 不动杆菌属
(Acinetobacter)
? 莫拉菌属
(Moraxella)
? 无色杆菌属
(Achromobacter)
? 金氏杆菌属
(Kingella)
? 黄杆菌属
(Flavobacterium)
结构成分
铜绿假单胞菌的毒力因子
粘附素：粘附 多糖似荚膜物质
毒素 内毒素：LPS
毒力因子
外毒素：A 阻止真核细胞蛋白质合成
S 干扰吞噬杀菌作用
绿脓素：具有氧化还原活性，催化超氧化物和
过氧化氢产生有毒基团
酶类 弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶（Las-A） 降解弹性锌金属蛋白酶（Las-B）蛋白 磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂，损伤组织细胞