2019年微生物检验第八章非发酵阴杆

结构成分
铜绿假单胞菌的毒力因子
粘附素：粘附 多糖似荚膜物质
毒素 内毒素：LPS
毒力因子
外毒素：A 阻止真核细胞蛋白质合成
S 干扰吞噬杀菌作用
绿脓素：具有氧化还原活性，催化超氧化物和
过氧化氢产生有毒基团
酶类 弹性蛋白酶:丝氨酸蛋白酶（Las-A） 降解弹性锌金属蛋白酶（Las-B）蛋白 磷脂酶C:分解脂质和卵磷脂，损伤组织细胞
妥布霉素，环丙沙星。
C 组: 头孢噻肟，头孢曲松，氯霉素 D组或U 组：羧苄西林，头孢唑肟，四环素，诺氟沙星，氧
氟沙星，磺胺甲基异恶唑。
二、铜绿假单胞菌
? 在自然界分布较为广泛，适应能力强。 ? 常引起感染：皮肤、呼吸道、泌尿道、烧
伤感染等。慢性肺部感染极为常见。 ? 菌血症、心内膜炎、肺囊性纤维变。 ? 眼部感染导致角膜穿孔而失明。
2.生物学特性
形态与染色
为无芽胞细长的革兰氏阴 性杆菌，菌体长短不一，短 的呈球杆状，长的为丝状。 成对排列或形成短链。无荚 膜，在菌体一端有1 根鞭毛， 运动活泼。革兰氏染色阴性， 无抗酸性。
Hale Waihona Puke Baidu 培养特性
? 专性需氧菌。生长温度范围为20-42 ℃; 最适温 度为35 ℃ ，致病性菌可在42 ℃ 生长，但在4 ℃ 不生长，这可与荧光假单胞菌等进行鉴别。
性培养基。鉴定根据镜下特征、菌落形态、 生化反应等。
? 血平板上毛玻璃 样，金属光泽， 生姜味
? 可产生多种色素：
荧光素与绿脓素
（2）抗原检测：血清学分型、噬菌体分型。 （3）核酸检测：DNA内切酶分析、质粒指纹
图谱分析、 PCR 指纹图谱分析、脉冲场凝胶 电泳分析（PFGE ）、基因芯片、PCR 技术、 16SrDNA 鉴定技术等。
第十七章 非发酵革兰阴性杆菌
?
是指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利
用葡萄糖的需氧，无芽胞的革兰阴性杆菌。
? 特别提示：并非分类概念 只为认识方便
?
生物习性相似 已经形成习惯
革兰阴性杆菌
－
OX
+
葡萄糖O/F
O
F
不动杆菌属 窄食单胞菌属
肠杆菌科
不利用
洛非不动杆菌
葡萄糖O/F
O
F
假单胞菌属 无色杆菌属 金色杆菌属
+/-
-
+
O
O
O/-
-
+
+/-
-
-
动力
+/-
+/-
+/-
-
+
+
-
注：+：90%以上阳性；-10%以下的阳性；+/-：约70%为阳性；O：为氧化。
常见非发酵菌的鉴定双岐索引
－ OX
－
不动杆菌属
+
葡萄糖产酸 黄色素
－ 莫拉氏菌属 － + 黄杆菌属 +
非发酵菌 动力
+ OX
－
嗜麦芽窄食单胞菌
+ 端鞭毛
－ 产碱杆菌属
3.产碱假单胞菌DNA同源群 产碱假单胞菌 假产碱假单胞菌
2.临床意义
? 分布广泛：水、土壤、空气 。 ? 人类感染的非发酵菌中，假单胞菌属占70%
-80% ，铜绿假单胞菌占55% -65 % 。 ? 常见的有嗜麦芽窄食单胞菌、荧光假单胞菌、
恶臭假单胞菌、产碱假单胞菌等。 ? 这些细菌在医院内感染中亦常见。
? 艾肯菌属
(Eikenella)
? 土壤杆菌属
(Agrobacterium)
? 黄单胞菌属
(Xanthomonas)
? 丛毛单胞菌属
(Comamonas)
常见非发酵革兰阴性杆菌的初步分群鉴定
试验
假单胞菌属 无色杆菌属 黄杆菌属 不动杆菌属 产碱杆菌属 丛毛菌属 莫拉菌属
氧化酶
+
O/F试验
O/-
+
? 本菌对营养无特殊要求，在普通培养基上生长 良好，在选择培养基和麦康凯琼脂、SS琼脂培 养基上也能生长。
? 在普通琼脂平板上经 18-24 小时培养，可形成 圆形、边缘不整齐 、扁平稍隆起、光滑温润且 常呈融合状态的菌落。琼脂被染成 蓝绿色或黄 绿色。
? 在血琼脂平板上经 35 ℃ 培养18-24 小时，可形 成大而扁平、湿润、有 金属光泽、有特殊气味 之灰绿色、蓝绿色 的菌落，并形成 透明溶血环 。
不发酵革兰阴性杆菌分类
? 假单胞菌属
(Pseudomonas)
? 产碱杆菌属
(Alcaligenes)
? 不动杆菌属
(Acinetobacter)
? 莫拉菌属
(Moraxella)
? 无色杆菌属
(Achromobacter)
? 金氏杆菌属
(Kingella)
? 黄杆菌属
(Flavobacterium)
生化特性
? 氧化酶阳性，能氧化分解葡萄糖、木糖产酸，不 产气，但产生红脓素或黑脓素的菌株，以及粘液 型菌落的菌株可能不分解糖类。
? 本菌能液化明胶，分解尿素，能利用枸橼酸盐， 不产生吲哚，能还原硝酸盐为亚硝盐酸，或产生 氮气。
3.微生物检验（检验程序）
（1）分离培养与鉴定： 标本可接种于血琼脂平板培养基和选择
检验结果报告与分析
? 诊断要与临床表现、标本来源相结合。 ? 初代敏感的菌株在治疗 3~4天后可能发生耐药。因
3.微生物特性
? 革兰阴性、无芽胞、专性需氧 ? 有端鞭毛或丛鞭毛 ? 生长温度范围广，最适生长温度为 35℃ ? 产生各种水溶性色素： 绿脓素、脓红素、荧光素、
脓褐素 。 ? 对理化因素耐受性较强，对多种抗生素耐药。
药敏试验药物选择
按CLSI(NCCLS) 推荐，分为 4组： A组: 头孢他啶，庆大霉素，美洛西林，替卡西林，哌拉西林。 B组: 头孢吡肟，头孢哌酮，氨曲南，亚胺培南，阿米卡星，
葡萄糖产酸 + 尿素
－ 无色杆菌属
+ 土壤杆菌属
+
假单胞菌属
第一节 假单胞菌属
? 假单菌属按rRNA同源性分为5群及未确定 rRNA同源群有关的种。
? 一群需氧、不发酵葡萄糖、无芽胞，有鞭 毛、氧化酶阳性的革兰阴性杆菌。
? 多为条件致病菌。
临床常见假单胞菌分群
rRNA1 1.荧光假单胞菌DNA同源群 铜绿假单胞菌 荧光假单胞菌 恶臭假单胞菌 2.斯氏假单胞菌DNA同源群 斯氏假单胞菌 曼多辛假单胞菌
不利用
气单胞 邻单胞 弧菌属
产碱杆菌 布鲁菌属 产碱假单胞 无色杆菌
共有的几个特点
非发酵菌大多数为条件致病菌
主要引起抵抗力低下病人的机会感染， 如败血症、呼吸道感染、尿路感染、伤口感 染等。现已成为引起医院内感染的 主要病原 菌。
对抗生素有天然的抗药性
非发酵菌对抗生素常呈现多重耐药现象。如铜绿假 单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌、黄杆菌 等对绝大多数抗生素耐药，铜绿假单胞菌对氨苄青霉 素耐药率达100% ，甚至对第三代头子孢菌素也呈现耐 药，而且耐药率在逐年增加。